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化痰通络汤联合常规西药治疗脑梗死风痰瘀阻证患者的效果
1
作者 乔战科 孙会秀 +4 位作者 孙成铭 孙纪伟 吴平荣 江璐宇 王振坤 《中国民康医学》 2024年第7期101-103,107,共4页
目的:探讨化痰通络汤联合常规西药治疗脑梗死风痰瘀阻证患者的效果。方法:选取2022年7月至2023年7月该院收治的80例脑梗死患者进行前瞻性研究,根据随机数字表法将其分为对照组和观察组各40例。对照组采用常规西药治疗,观察组在其基础上... 目的:探讨化痰通络汤联合常规西药治疗脑梗死风痰瘀阻证患者的效果。方法:选取2022年7月至2023年7月该院收治的80例脑梗死患者进行前瞻性研究,根据随机数字表法将其分为对照组和观察组各40例。对照组采用常规西药治疗,观察组在其基础上联合化痰通络汤治疗。比较两组治疗前后神经功能[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)]评分、日常生活活动能力[Barthel指数(BI)]评分、中医证候积分、血液流变学指标水平及不良反应发生率。结果:治疗后,观察组NIHSS评分、中医证候积分、全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度及血小板黏附率均低于对照组,BI评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:化痰通络汤联合常规西药治疗脑梗死风痰瘀阻证患者可加快症状缓解,降低中医证候积分,改善血液流变学指标水平,提高神经功能和日常生活活动能力,效果优于单纯常规西药治疗。 展开更多
关键词 化痰通络汤 脑梗死 风痰瘀阻证 神经功能 中医证候积分 血液流变学
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钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究 被引量：3
2
作者 孙成铭 黄世峰 +7 位作者 罗红伟 刘钉宾 田文君 朱喜丹 冯文莉 涂植光 温健萍 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期301-306,共6页
目的研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株。瑞氏染色... 目的研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株。瑞氏染色观察细胞形态,台盼蓝拒染法和MTT法检测K562细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,电镜观察细胞凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53、cyclin B1和c-myc等的表达。结果筛选到稳定表达Per基因的稳定表达细胞株K562/Per2细胞,与空载体转染组及未处理对照组细胞相比,K562/Per2细胞体积缩小,但是分化不明显;台盼蓝拒染法和MTT实验发现Per2抑制细胞生长与增殖能力;流式细胞仪检测周期结果K562/Per2细胞中G2期细胞增多[转染组(36.1±5.5)%,空载组(12.5±2.9)%,未处理对照组(9.7±2.3)%,P<0.05],凋亡检测显示转染组细胞凋亡明显增加[14.8%P<0.05];电镜结果显示染色质浓集、断裂,核固缩和凋亡小体;RT-PCR及Western blot显示Per2明显上调p53基因的mRNA和蛋白表达,而抑制cyclin B1、c-myc基因mR-NA和蛋白的表达。结论钟基因Per2能抑制K562细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,但对分化无明显作用。其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的。 展开更多
关键词 钟基因 增殖 凋亡 细胞周期 节律调节
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CCAAT/增强子结合蛋白α对K562细胞分化和凋亡的影响及其机制 被引量：2
3
作者 孙成铭 黄世峰 +5 位作者 罗红伟 刘钉宾 田文君 朱喜丹 冯文莉 黄宗干 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期220-225,共6页
目的:研究CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein-alpha,C/EBPα)对K562细胞株分化和凋亡的影响及对相关基因的调控,为慢性粒细胞白血病的治疗提供新的治疗靶点。方法:将C/EBPα表达质粒pEGFP-C/EBPα及空载体对照质粒... 目的:研究CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein-alpha,C/EBPα)对K562细胞株分化和凋亡的影响及对相关基因的调控,为慢性粒细胞白血病的治疗提供新的治疗靶点。方法:将C/EBPα表达质粒pEGFP-C/EBPα及空载体对照质粒pEGFP分别经阳离子脂质体2000介导转染K562细胞,用G418筛选出C/EBPα稳定表达细胞株。Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化,FCM分析细胞表面分化抗原CD11b的表达、细胞周期及细胞凋亡,电子显微镜观察细胞凋亡,RT-PCR和Western印迹法检测细胞中相关基因Per2、cyclin B1和C-myc的表达。结果:筛选得到稳定表达C/EBPα的细胞株pEGFP-C/EBPα-K562。与空载体转染组及对照组细胞相比,转染组K562细胞分化明显,同时粒系细胞表面分化抗原CD11b表达增加;细胞周期分析发现,转染组细胞中G2期细胞增多,与空载体组和对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),同时出现细胞凋亡峰。细胞凋亡检测结果显示,转染组细胞凋亡明显增加(21.1%),与空载体组(6.0%)和对照组(4.2%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);电子显微镜观察发现,转染组细胞中出现染色质浓集、断裂和核固缩等现象,并见凋亡小体;RT-PCR和Western印迹法检测发现,C/EBPα明显上调Per2 mRNA和蛋白表达,抑制cyclinB1、C-myc mRNA和蛋白的表达。结论:C/EBPα能促进K562细胞分化,并诱导细胞凋亡,其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控来实现的。 展开更多
关键词 白血病 实验性 CCAAT增强子结合蛋白 细胞周期 细胞凋亡 细胞 K562
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节律基因在慢性粒细胞白血病中表达水平及意义 被引量：1
4
作者 孙成铭 冯文莉 +4 位作者 寇新明 姜波 李少君 刘日明 赵琪 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第3期315-316,共2页
目的探讨节律基因在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,及其与bcr/abl融合基因的相关性,为临床治疗提供新的分子靶点。方法收集106例CML患者慢性期、加速期、急变期的骨髓标本和50例健康体检人员的外周血为对照,采用RT-PCR法检测per1、... 目的探讨节律基因在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,及其与bcr/abl融合基因的相关性,为临床治疗提供新的分子靶点。方法收集106例CML患者慢性期、加速期、急变期的骨髓标本和50例健康体检人员的外周血为对照,采用RT-PCR法检测per1、per2、bcr/abl基因表达情况。结果 per1、per2、bcr/abl基因在慢性期、加速期和急变期存在不同水平的变化,并且per1、per2表达水平与bcr/abl基因存在负相关。结论节律基因作为肿瘤抑制因子在CML中是低表达的,在信号转导通路中是否与bcr/abl基因相互作用还需深入研究。 展开更多
关键词 白血病 髓系 慢性 BCR-ABL阳性 白血病 髓样 加速期 BCR/ABL融合基因 节律基因
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昼夜节律基因PER家族与肿瘤研究 被引量：2
5
作者 孙成铭 冯文莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第6期666-667,共2页
昼夜节律（24h）存在于所有的原核和真核生物中,在哺乳动物中,这一系统的中央起搏点位于下丘脑前部的视交叉上（suprachiasmatic nucleus,SCN）[1]。目前,昼夜节律的产生机制已成为生命科学研究的一个热点和前沿性问题。许多研究表明，... 昼夜节律（24h）存在于所有的原核和真核生物中,在哺乳动物中,这一系统的中央起搏点位于下丘脑前部的视交叉上（suprachiasmatic nucleus,SCN）[1]。目前,昼夜节律的产生机制已成为生命科学研究的一个热点和前沿性问题。许多研究表明，昼夜节律与失眠症、内分泌代谢性疾病、肿瘤等都具有一定的相关性[2-6]。近年来，节律失调与肿瘤的关系越来越受到关注，现综述如下。 展开更多
关键词 基因 肿瘤 DNA损伤 磷酸化
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C/EBPα-Per2信号通路对K562细胞相关基因的调控机制 被引量：1
6
作者 孙成铭 栾材富 +7 位作者 邵会媛 高玉洁 李少君 马新衡 刘日明 李杰 张守信 刘鹏 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第7期801-802,807,共3页
目的探索Per2在CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)参与调控的慢性粒细胞白血病(CML)发生、发展中的作用。方法通过脂质体介导将真核表达载体pGenesil-3-SiPer2和空载体pGenesil-3-HK转染到pEGFP-C/EBPα-K562细胞,利用新霉素筛选稳定干扰P... 目的探索Per2在CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)参与调控的慢性粒细胞白血病(CML)发生、发展中的作用。方法通过脂质体介导将真核表达载体pGenesil-3-SiPer2和空载体pGenesil-3-HK转染到pEGFP-C/EBPα-K562细胞,利用新霉素筛选稳定干扰Per2的pEGFP-C/EBPα-K562单克隆细胞株。利用RT-PCR和Western blot分别检测转染组、空载组、对照组细胞p53、c-myc、cyclinB1的mRNA及蛋白表达水平的改变。结果成功构建稳定干扰Per2表达的pEGFP-C/EBPα-K562细胞株。与对照组和空载组细胞相比,转染组pGenesil-3-SiPer2-K562细胞的p53mRNA及蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),而cyclinB1和c-myc基因的mRNA及蛋白表达水平则显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Per2基因在C/EBPα参与调控的CML发生发展中起重要作用,该通路的发现对于研究CML的发生及调控机制具有重要意义。 展开更多
关键词 CCAAT增强子结合蛋白α 慢性粒细胞白血病
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增强子结合蛋白CEBP家族与慢性粒细胞白血病的关系研究
7
作者 孙成铭 姚声涛 朱元方 《贵州医药》 CAS 2008年第8期754-755,共2页
关键词 慢性粒细胞白血病 转录因子家族 增强子结合蛋白 C/EBPΑ 亮氨酸拉链 C/EBPΒ C/EBPε 蛋白质因子
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FoxO转录因子家族与白血病
8
作者 孙成铭 冯文莉 《临床血液学杂志》 CAS 2010年第4期446-448,共3页
关键词 FoxO转录因子 磷酸化 白血病 信号通路
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纳米材料对人体细胞体外生长的影响研究
9
作者 孙成铭 李少君 +1 位作者 方云霞 强新 《中华医学写作杂志》 2004年第17期1448-1451,共4页
目的：研究稀土纳米材料和银系纳米材料对体外培养细胞的生物相容性。方法：采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT assay)、活细胞计数法观察纳米材料对细胞增殖的影响。结果：①银系纳米材料各浓度对细胞的存活率差别无统计学意义(P>0.05)... 目的：研究稀土纳米材料和银系纳米材料对体外培养细胞的生物相容性。方法：采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT assay)、活细胞计数法观察纳米材料对细胞增殖的影响。结果：①银系纳米材料各浓度对细胞的存活率差别无统计学意义(P>0.05)；稀土纳米材料在浓度0．016～0．5mg／ml范围内，各浓度与细胞的存活率均呈负相关(P<0．05)。②随银系纳米材料与细胞接触的时间延长，实验组的活细胞数与对照组差别无统计意义；随稀土纳米材料与细胞接触的时间延长，实验组的细胞活性与对照组细胞活性相比有显著性的降低(P<0．01)。结论：稀土纳米材料与体外培养的细胞有较差的生物相容性；而银系纳米材料有良好的细胞生物相容性，是一种有良好应用前景的纳米材料。 展开更多
关键词 银系纳米材料 稀土纳米材料 生物相容性 细胞培养
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非小细胞肺癌EGFR基因突变的表现及其与肿瘤标记物的相关性 被引量：17
10
作者 王娜 郑清 +5 位作者 孙成铭 刘杰 张贵丽 刘雪娜 刘日明 栾材富 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第19期3053-3056,共4页
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因突变位点状态,分析其与血清肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21-1、TSGF间的关系。方法:回顾性分析240例NSCLC患者组织标本中EGFR不同位点基因突变状态,分析基因突变率与患者性别、年龄、吸烟史和组织分... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因突变位点状态,分析其与血清肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21-1、TSGF间的关系。方法:回顾性分析240例NSCLC患者组织标本中EGFR不同位点基因突变状态,分析基因突变率与患者性别、年龄、吸烟史和组织分型间的关系及NSCLC患者19、21突变位点与肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21-1、TSGF的相关性。结果:240例标本突变135例,18号外显子突变2例(1.5%);19号外显子突变47例(34.8%);20号外显子突变7例(5.2%);21号外显子突变71例(52.6%);双突变8例(5.9%)。EGFR突变主要发生在19、21号外显子上,其中19号外显子突变与组织分型有关(P<0.05),与年龄、性别、吸烟史无关(P>0.05);21号外显子突变与组织分型、吸烟史、性别有关(P<0.05),与年龄无关(P>0.05)。EGFR突变组肿瘤标志物NSE、CEA、CYFRA21-1、TSGF的表达水平与未突变组之间差异无统计学意义(P>0.05),19、21号外显子突变的肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21-1、TSGF之间的差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:NSCLC的EGFR突变中19、21号外显子突变率显著高于其他类型,这对于指导临床合理应用EGFR-TKIs药物治疗有重要的意义。而肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21-1、TSGF在突变组与未突变组之间、19和21号外显子突变之间的差异均无统计学意义。因此,血清肿瘤标记物可能不足以作为评估EGFR突变的指标。 展开更多
关键词 非小细胞型肺癌 EGFR 基因突变 靶向治疗 肿瘤标记物
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阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死患者血清SOD、MDA和oX-LDL的影响 被引量：6
11
作者 陆继收 陈增刚 +1 位作者 孙成铭 王发祥 《实用医学杂志》 CAS 2008年第5期733-735,共3页
目的:观察阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死患者血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和血脂的影响,探讨阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死治疗的保护作用。方法:实验分为患者股骨头缺血性坏死血脂正常组(V组)、股... 目的:观察阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死患者血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和血脂的影响,探讨阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死治疗的保护作用。方法:实验分为患者股骨头缺血性坏死血脂正常组(V组)、股骨头缺血性坏死高血脂组(VH组)、股骨头缺血性坏死血脂正常阿托伐他汀治疗组(VT组)、股骨头缺血性坏死高血脂阿托伐他汀治疗组(VHT组)。双抗体夹心ELISA法测定ox-LDL,生物化学法测定SOD、MDA、血脂。结果:VHT组经过阿托伐他汀治疗后MDA浓度明显降低,SOD浓度明显增高,VT、VHT组ox-LDL浓度明显降低。结论:阿托伐他汀能够降低股骨头缺血性坏死患者血清MDA、ox-LDL浓度,增高SOD浓度,阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死可以通过抑制自由基反应、氧化应激效应发挥治疗保护作用。 展开更多
关键词 股骨头坏死 庚酸类 超氧化物歧化酶 丙二醛脂蛋白类 LDL
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CYP2C19:氯吡格雷代谢的关键酶? 被引量：8
12
作者 龚磊 孙成铭 杨军 《心血管病学进展》 CAS 2017年第2期222-225,共4页
氯吡格雷是临床抗血小板治疗的常用药,目前多数观点认为氯吡格雷需经CYP2C19催化生成活性产物,CYP2C19基因多态性与氯吡格雷的代谢水平、血小板反应性以及主要不良心血管事件的发生密切相关;但与之矛盾的是,近几年有观点认为催化氯吡格... 氯吡格雷是临床抗血小板治疗的常用药,目前多数观点认为氯吡格雷需经CYP2C19催化生成活性产物,CYP2C19基因多态性与氯吡格雷的代谢水平、血小板反应性以及主要不良心血管事件的发生密切相关;但与之矛盾的是,近几年有观点认为催化氯吡格雷代谢的关键酶并不是CYP2C19而是CYP3A4/5,CYP2C19可能只负责催化少部分的氯吡格雷。现就这两个不同的观点做一综述。 展开更多
关键词 氯吡格雷 CYP2C19 CYP3A4/5 质子泵抑制剂
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螺杆菌属细菌与肝胆疾病研究进展 被引量：5
13
作者 栾材富 孙成铭 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第4期78-79,共2页
关键词 幽门螺杆菌 肝性脑病 酒精肝 慢性肝病 原发性肝癌
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SOX4在肿瘤中的研究进展 被引量：10
14
作者 董菲 孙成铭 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第9期1473-1476,共4页
SOX4属于SOX转录因子家族,对胚胎发育过程中心脏的形成、T/B淋巴细胞的发育和分化、胰腺的发育、骨骼的发育等具有重要的作用。近年来,越来越多的研究表明SOX4在人类许多肿瘤中表达升高并且与肿瘤的发展密切相关。在不同类型肿瘤或肿瘤... SOX4属于SOX转录因子家族,对胚胎发育过程中心脏的形成、T/B淋巴细胞的发育和分化、胰腺的发育、骨骼的发育等具有重要的作用。近年来,越来越多的研究表明SOX4在人类许多肿瘤中表达升高并且与肿瘤的发展密切相关。在不同类型肿瘤或肿瘤的不同阶段,SOX4通过参与肿瘤细胞的增殖、凋亡或分化的过程从而具有双重的作用:促癌作用和抑癌作用。产生这种差异的具体机制尚不清楚,因此深入研究SOX4基因与肿瘤的关系对肿瘤的治疗和预后判断具有重要意义。 展开更多
关键词 SOX4 基因 转录因子 肿瘤
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结核感染T淋巴细胞斑点实验临床检测分析 被引量：2
15
作者 张成林 刘杰 +1 位作者 张守信 孙成铭 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第22期2749-2750,共2页
目的探讨结核感染T淋巴细胞斑点实验(T-SPOT.TB)在临床检测结核病中的应用价值。方法利用T-SPOT.TB方法检测结核疑似患者,进行科室分布分析,同时与抗酸杆菌涂片、结核抗体实验、结核分枝杆菌DNA检测进行对比。结果 317例结核疑似患者中... 目的探讨结核感染T淋巴细胞斑点实验(T-SPOT.TB)在临床检测结核病中的应用价值。方法利用T-SPOT.TB方法检测结核疑似患者,进行科室分布分析,同时与抗酸杆菌涂片、结核抗体实验、结核分枝杆菌DNA检测进行对比。结果 317例结核疑似患者中,76例T-SPOT.TB阳性,阳性率24.0%。潜伏性结核筛查科室阳性率为9.1%～25%;肺结核及肺外结核检测诊断中,阳性率为20.7%～66.7%。与其它实验室检测方法对比,T-SPOT.TB方法具有明显优势。结论 T-SPOT.TB是灵敏和特异的快速检测结核分枝杆菌感染的方法,在结核疑似患者筛查与诊断中具有较大临床应用价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 T淋巴细胞 实验室技术和方法
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节律基因per2在慢性粒细胞白血病中的表达及与bcr/abl的相关性 被引量：3
16
作者 李杰 杨帆 +3 位作者 封建凯 孙成铭 黄万里 张霞 《中国实验诊断学》 2015年第9期1481-1483,共3页
目的探讨节律基因per2在慢性粒细胞白血病中的表达及其与白血病融合基因bcr/abl的关系。方法收集30例慢性粒细胞白血病病人和9例健康对照的骨髓标本,RT-PCR检测per2和bcr/abl融合基因的表达,并分析两者之间表达的关系;不同浓度甲磺酸伊... 目的探讨节律基因per2在慢性粒细胞白血病中的表达及其与白血病融合基因bcr/abl的关系。方法收集30例慢性粒细胞白血病病人和9例健康对照的骨髓标本,RT-PCR检测per2和bcr/abl融合基因的表达,并分析两者之间表达的关系;不同浓度甲磺酸伊马替尼作用K562细胞不同时间后,通过RT-PCR检测bcr/abl和per2水平变化。结果研究发现per2在慢性粒细胞白血病中表达降低,并且与bcr/abl的表达呈负相关。用甲磺酸伊马替尼处理K562发现,随着bcr/abl的表达降低,per2的表达升高。结论 per2在慢性粒细胞白血病中表达下降,并且和bcr/abl的表达呈负相关,提示per2在慢性粒细胞白血病的发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 K562细胞 PER2 BCR/ABL
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节律基因Per2对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1
17
作者 李少君 孙成铭 +2 位作者 栾材富 牟肖东 王臣玉 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第5期75-76,共2页
目的探讨节律基因Per2对胶质瘤细胞的影响及其作用机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染CHG-5细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株;分别用MTT法、流式细胞仪、RT-PCR技术,检测CHG-... 目的探讨节律基因Per2对胶质瘤细胞的影响及其作用机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染CHG-5细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株;分别用MTT法、流式细胞仪、RT-PCR技术,检测CHG-5细胞增殖、细胞周期和凋亡,以及该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53和c-myc表达。结果筛选到稳定表达Per2基因的细胞株CHG-5/Per2细胞,Per2有抑制肿瘤细胞增殖能力;与对照组(pcDNA 3.1-CHG-5)和未处理组(CHG-5)比较,转染组CHG-5/Per2细胞在G1期阻滞,细胞凋亡明显增加(P均<0.05);Per2可明显上调p53基因表达,抑制c-myc基因表达。结论节律基因Per2可促进胶质瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖,是胶质瘤中的肿瘤抑制因子。 展开更多
关键词 胶质瘤 节律基因 CHG-5细胞 凋亡 增殖
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FOXO3a转录因子对白血病HL60细胞增殖和凋亡的影响研究 被引量：1
18
作者 陈佳琳 张丽平 +3 位作者 孙成铭 姚声涛 朱元方 赵宇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期290-293,共4页
目的:研究转录因子FOXO3a对急性粒细胞白血病HL60细胞株增殖、凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将FOXO3a表达质粒pcDNA3.1-FOXO3a及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染HL60细胞,用G418筛选出FOXO3a稳定表达细胞株。台盼... 目的:研究转录因子FOXO3a对急性粒细胞白血病HL60细胞株增殖、凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将FOXO3a表达质粒pcDNA3.1-FOXO3a及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染HL60细胞,用G418筛选出FOXO3a稳定表达细胞株。台盼蓝拒染法和MTT法检测HL60细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测基因Bim和bcl-2的表达。结果:筛选到稳定表达FOXO3a基因的细胞株HL60/FOXO3a细胞,与空载体转染组(HL60/empty)及未处理对照组(HL60/untreated)细胞相比,转染组FOXO3a明显抑制HL60细胞生长与增殖,导致G1期阻滞,细胞凋亡明显增加。RT-PCR及Western blot显示FOXO3a明显上调Bim基因的mRNA和蛋白表达,而抑制bcl-2基因mRNA和蛋白的表达。结论:FOXO3a转录因子能抑制HL60细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,其机制可能是通过对凋亡相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的。 展开更多
关键词 转录因子 增殖 凋亡 细胞周期 白血病
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新生小鼠心肌细胞的纯化培养与鉴定 被引量：2
19
作者 张守信 刘晓妍 +3 位作者 华秀峰 鲁艳芬 寇新民 孙成铭 《中国医药指南》 2012年第26期20-23,共4页
目的建立新生小鼠心肌细胞（CM）的分离纯化、培养及鉴定的方法。方法采用酶消化法分离消化心室组织,差速贴壁法和化学方法纯化CM;培养7d后,利用免疫荧光技术和RT-PCR技术检测部分CM特异基因在蛋白和mRNA水平的表达;改进透射电镜的常规... 目的建立新生小鼠心肌细胞（CM）的分离纯化、培养及鉴定的方法。方法采用酶消化法分离消化心室组织,差速贴壁法和化学方法纯化CM;培养7d后,利用免疫荧光技术和RT-PCR技术检测部分CM特异基因在蛋白和mRNA水平的表达;改进透射电镜的常规操作方法,观察CM超微结构。结果采用0.08%胰蛋白酶和0.04%胶原酶Ⅱ消化心室组织后,细胞成活率为98%,贴壁培养第3d出现同簇细胞的同步跳动;抗心肌肌钙蛋白（cTnT）免疫荧光染色阳性率为99.07%;以骨髓间充干细胞为阴性对照,RT-PCR结果显示CMα和β两型心肌肌球蛋白重链、cTnT基因表达呈阳性;经3%~4%琼脂预包埋法处理可以对少量细胞进行超薄切片的制作,CM具有正常的超微结构。结论建立了新生小鼠CM分离纯化培养和鉴定方法。 展开更多
关键词 心肌细胞 纯化 培养 骨髓间充质干细胞 鉴定
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hnRNP K shRNA对K562细胞效应的初步研究 被引量：1
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作者 黄莲芬 冯文莉 +1 位作者 罗宏伟 孙成铭 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第9期1071-1075,1147,共6页
目的:探索RNA结合蛋白K(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,hnRNP K)shRNA逆转录病毒对K562细胞的效应。方法:HindⅢ/EcorⅠ双酶切和测序鉴定pSUPER retro hnRNP K shRNA逆转录病毒载体,用包装得到的逆转录病毒感染K562细胞,G... 目的:探索RNA结合蛋白K(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,hnRNP K)shRNA逆转录病毒对K562细胞的效应。方法:HindⅢ/EcorⅠ双酶切和测序鉴定pSUPER retro hnRNP K shRNA逆转录病毒载体,用包装得到的逆转录病毒感染K562细胞,G418稳定筛选后,分别用流式细胞仪,MTT实验,瑞氏染色,RT-PCR分析细胞周期和细胞凋亡,细胞增殖,细胞形态学,hnRNP K和真核细胞翻译起始因子4E(Eukaryotic translation initiation factor-4E,eIF4E)mRNA表达变化。结果:克隆载体序列正确。与空载对照组K562细胞相比,hnRNP K干扰组G2/M期细胞比例明显增多(P<0.05),而细胞凋亡则没有显著变化(P>0.05),细胞增殖能力降低,双核和多核细胞明显增多(P<0.05),hnRNP K和eIF4E mRNA表达较空载对照组分别降低了55.22%和55.27%。结论:hnRNP K基因沉默能使K562细胞周期阻滞于G2/M期,对细胞凋亡没有显著影响,降低细胞增殖能力,下调eIF4E mRNA表达,使双核和多核细胞增多,提示该基因可能与细胞分裂有关。 展开更多
关键词 RNA结合蛋白K SHRNA 逆转录病毒载体 真核细胞翻译起始因子4E
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