微小RNA-23靶向线粒体分裂蛋白1调控炎症反应和氧化应激保护脓毒症肾小管上皮细胞损伤

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作者 张利 葛亮 +3 位作者 马小力 马菁菁 张阳 孙林春 《临床肾脏病杂志》 2024年第3期216-228,共13页

目的探讨微小RNA-23(microRNA-23,miR-23)和线粒体分裂蛋白1(fission protein 1,FIS1)在脓毒症肾小管上皮细胞中的作用关系以及miR-23靶向FIS1对细胞炎症反应和氧化应激的调控。方法体外培养人肾小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2),用... 目的探讨微小RNA-23(microRNA-23,miR-23)和线粒体分裂蛋白1(fission protein 1,FIS1)在脓毒症肾小管上皮细胞中的作用关系以及miR-23靶向FIS1对细胞炎症反应和氧化应激的调控。方法体外培养人肾小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2),用脂多糖(lipopolysaccha-ride,LPS)诱导建立脓毒症模型;利用双荧光素酶报告基因验证miR-23和FIS1的相互作用。将HK-2细胞采用随机数字表法随机分组,用miR-23的模拟物/抑制物和FIS1的真核表达载体/小干扰RNA单独或联合处理,细胞计数试剂检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒检测细胞MDA水平,酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)1β、IL-6和IL-10水平。结果LPS诱导的HK-2细胞miR-23 mRNA表达量为对照组的(0.60±0.12)倍(P<0.05),FIS1 mRNA表达量为对照组的(2.16±0.21)倍(P<0.05),FISI蛋白表达水平是对照组的(2.69±0.28)倍(P<0.05)。miR-23可以与FIS1的3'-UTR区形成互补结合,负向调控FIS1。miR-23 mimic组的TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.021±0.003)、(0.0310±0.007)和(0.017±0.006)ng/ml,FIS1 siRNA组的TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.015±0.004)、(0.043±0.007)和(0.020±0.008)ng/ml,均低于空白对照组(P<0.05),两组的IL-10分别为(0.325±0.011)和(0.376±0.018)ng/ml,高于空白对照组(P<0.05)。miR-23 inhibitor组的TNF-α和IL-6分别为(0.117±0.015)和(0.096±0.007)ng/ml,pcD-NA3.1-FIS1组TNF-α和IL-6分别为(0.168±0.024)和(0.147±0.030)ng/ml,均高于空白对照组(P均<0.05),miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组的IL-10分别为(0.149±0.012)和(0.121±0.024)ng/ml,均低于空白对照组(P<0.05)。miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.060±0.010)、(0.084±0.009)和(0.048±0.008)ng/ml,均高于miR-23 mimic组的(0.021±0.003)、(0.0310±0.007)和(0.017±0.006)ng/ml(P<0.05),IL-10为(0.149±0.025)ng/ml,低于miR-23 mimic组的(0.325±0.011)ng/ml(P<0.05)。miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.049±0.007)、(0.056±0.008)和(0.037±0.006)ng/ml,均低于miR-23 inhibitor组的(0.117±0.015)、(0.085±0.015)和(0.096±0.007)ng/ml(P<0.05),IL-10为(0.325±0.027)ng/ml,高于miR-23 inhibitor组的(0.149±0.012)ng/ml(P<0.05)。MiR-23 mimic组和FIS1 siRNA组ROS分别为(1328±84)和(1300±70),均低于空白对照组(P<0.05),miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组ROS分别为(1825±80)和(1930±105),均高于空白对照组(P<0.05)。miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组ROS为(1538±96),高于miR-23 mimic组的(1328±84)(P<0.05);miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组ROS为(1490±70),低于miR-23 inhibitor组的(1825±80)(P<0.05)。MiR-23 mimic组和FIS1 siRNA组MDA分别为(17.34±2.18)μmol/L和(12.05±2.47)μmol/L,均低于空白对照组(P<0.05);miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组MDA分别为(52.20±7.48)μmol/L和(46.25±6.50)μmol/L,均高于空白对照组(P<0.05);miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组MDA为(35.44±3.03)μmol/L,高于miR-23 mimic组的(17.34±2.18)μmol/L(P<0.05);miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组MDA为(40.26±4.87)μmol/L,低于miR-23 inhibitor组的(52.20±7.48)μmol/L(P<0.05)。miR-23 mimic组和FIS1 siRNA组细胞增殖率分别为(183±14)%和(171±11)%,均高于空白对照组(P<0.05),两组凋亡率分别为(7.89±1.21)%和(11.22±2.98)%,均低于空白对照组(P<0.05);miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组细胞增殖率分别为(134±10)%和(127±9)%,均低于空白对照组(P<0.05),凋亡率分别为(23.22±2.54)%和(28.15±3.12)%,均高于空白对照组(P<0.05);miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组细胞增殖率为(148±12)%,低于miR-23 mimic组的(183±14)%(P<0.05),凋亡率为(17.02±2.29)%,高于miR-23 mimic组的(7.89±1.21)%(P<0.05);miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组细胞增殖率为(160±8)%,高于miR-23 inhibitor组的(134±10)%(P<0.05),凋亡率为(14.27±2.00)%,低于miR-23 inhibitor组的(23.22±2.54)%(P<0.05)。结论LPS诱导的肾小管上皮细胞miR-23和FIS1异常表达与细胞的炎症反应和氧化应激过程有关。miR-23通过靶向负调控FIS1,减轻HK-2细胞的炎症反应和氧化应激水平,对脓毒症肾小管上皮细胞损伤起保护作用。 展开更多

关键词 脓毒症 肾小管上皮 炎症 氧化应激 微小RNA

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Caspase-3抑制剂所致氧化应激状态下肾小管上皮细胞差异表达基因的筛选及功能验证

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作者 骆长亮 张秋红 孙林春 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第1期17-26,共10页

目的:研究caspase-3抑制剂引起的氧化应激状态下肾小管上皮细胞基因表达特点,筛选潜在的候选基因,为揭示caspase-3调控活性氧(reactive oxygen species,ROS)损伤肾小管上皮细胞的机制奠定基础。方法:将人肾小管上皮细胞HK-2用H2O2(300μ... 目的:研究caspase-3抑制剂引起的氧化应激状态下肾小管上皮细胞基因表达特点,筛选潜在的候选基因,为揭示caspase-3调控活性氧(reactive oxygen species,ROS)损伤肾小管上皮细胞的机制奠定基础。方法:将人肾小管上皮细胞HK-2用H2O2(300μmol/L)处理6 h后,随机分为对照组和caspase-3抑制剂组(Ac-DEVD-CHO,15μmol/L),运用Illumina Hiseq 2500测序平台完成基因测序,筛选差异基因并进行相关富集分析,用定量PCR对筛选到的前10位差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)进行验证。将H2O2(300μmol/L)处理6 h后的HK-2细胞随机分为对照组、caspase-3抑制剂组(Ac-DEVDCHO,15μmol/L)、CTNNB1组[pcDNA3.1(+)-CTNNB1]、caspase-3抑制剂+CTNNB1组[Ac-DEVD-CHO,15μmol/L+pcDNA3.1(+)-CTNNB1]以及caspase-3抑制剂+CTNNB1 NC组[Ac-DEVD-CHO,15μmol/L+pcDNA3.1(+)-CTNNB1 NC],MTT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡和ROS水平,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果:芯片共筛选出185个DEG,经定量PCR验证,显著性差异排名前10的基因中FIS1、EZR、COL7A1、RPL5、MAP4、CEBPB和CTNNB1 mRNA在caspase-3抑制剂组细胞中低表达(P均<0.05),SNRPB mRNA高表达(P<0.05)。Caspase-3抑制剂组增殖率高于对照组(P<0.05),CTNNB1组增殖率低于对照组(P<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组增殖率低于caspase-3抑制剂组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。Caspase-3抑制剂组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平低于对照组(P均<0.05),CTNNB1组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平高于对照组(P均<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平均较caspase-3抑制剂组高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。caspase-3抑制剂组ROS较对照组降低(P<0.05),CTNNB1组ROS较对照组升高(P<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组ROS较caspase-3抑制剂组高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。结论:Caspase-3抑制剂引起的肾小管上皮基因异常表达与氧化应激状态下的肾损伤有关;氧化应激对肾小管上皮细胞的损伤具有caspase-3依赖性,抑制caspase-3对肾损伤有保护作用,CTNNB1参与了这一过程。 展开更多

关键词 肾损伤 氧化应激 线粒体 生物信息学 Β-连环蛋白

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儿童支气管肺炎患者病程各阶段细胞免疫和体液免疫的改变及临床意义 被引量：13

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作者 孙林春 张利 +1 位作者 张兰芳 胡正 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第6期695-696,702,共3页

目的检测145例儿童支气管肺炎患者细胞免疫和体液免疫功能在病程各阶段中的改变,探讨其临床意义。方法采用流式细胞术对145例支气管肺炎患儿和50例健康儿童的外周血CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞进行检测。用免疫散射浊度法对145例支气... 目的检测145例儿童支气管肺炎患者细胞免疫和体液免疫功能在病程各阶段中的改变,探讨其临床意义。方法采用流式细胞术对145例支气管肺炎患儿和50例健康儿童的外周血CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞进行检测。用免疫散射浊度法对145例支气管肺炎患儿和50例健康儿童的血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)进行检测。结果支气管肺炎患儿发病时外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞的相对计数和CD4+/CD8+比值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清IgG和IgA均比对照组降低(P<0.05)。接受3d对症治疗后患儿外周血CD3+、CD3+CD4+细胞的相对计数和CD4+/CD8+比值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清中IgG和IgA比对照组降低(P<0.05)。无临床症状,遵医嘱结束治疗后患儿外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞的相对计数和CD4+/CD8+比值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);血清中IgG、IgA和IgM与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论支气管肺炎患儿同时存在细胞免疫和体液免疫功能紊乱,免疫功能处于抑制状态,合理有效的治疗有助于恢复正常的免疫功能。对患儿免疫功能检测可帮助判断病情,指导治疗和评估预后。 展开更多

关键词 支气管肺炎 淋巴细胞亚群 免疫球蛋白类

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手足口病患儿外周血T淋巴细胞活化状态 被引量：9

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作者 孙林春 张利 张兰芳 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第21期3251-3254,共4页

目的研究手足口病患儿T淋巴细胞的活化状态及变化规律,探讨其临床意义。方法选择150例手足口病患儿为研究对象,按是否出现中枢神经系统并发症分为轻症组(115例)和重症组(35例);同时选择100例体检儿童为对照组。用流式细胞仪检测患儿和... 目的研究手足口病患儿T淋巴细胞的活化状态及变化规律,探讨其临床意义。方法选择150例手足口病患儿为研究对象,按是否出现中枢神经系统并发症分为轻症组(115例)和重症组(35例);同时选择100例体检儿童为对照组。用流式细胞仪检测患儿和正常儿童的外周血HLA-DR^+CD4^+、HLA-DR^+CD8^+、CD38^+CD4^+和CD38^+CD8^+T淋巴细胞活化亚群的表达情况;用FQ-PCR检测轻症组和重症组患儿的血浆病毒载量。结果患儿CD4^+、CD8^+T细胞绝对计数低于对照组,其中CD4^+T细胞随病情进展进行性降低。患儿外周血HLA-DR^+CD4^+、HLA-DR^+CD8^+、CD38^+CD4^+和CD38^+CD8^+T淋巴细胞活化亚群均较对照组显著升高(P<0.01),其中HLA-DR^+CD4^+、CD38^+CD8^+T细胞升高最显著且随病情进展逐渐升高。重症组患儿血浆病毒载量显著高于轻症组(P<0.01),T细胞各活化亚群的表达量与病毒载量呈正相关,其中CD38^+CD8^+亚群表达与病毒载量相关系数最大,为0.618。结论肠道病毒感染所致手足口病患儿的T淋巴细胞发生异常免疫活化,活化程度与疾病进展相关。检测T淋巴细胞活化状态,能够判断患儿的免疫激活情况、病毒在体内的复制活跃程度,对于病情的诊疗和预后判断具有十分重要的临床价值。 展开更多

关键词 手足口病 肠道病毒 淋巴细胞 活化

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Caspase依赖的氧化应激对脓毒症肾小管上皮细胞损伤的作用及机制 被引量：4

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作者 孙林春 刘建璟 张利 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期23-29,70,共8页

目的:观察不同活性氧(reactive oxygen species,ROS)及氧化应激水平对脓毒症肾小管上皮细胞增殖、凋亡、周期等生物学效应的影响,探索氧化应激水平和线粒体-Caspase途径能否作为脓毒症肾小管上皮损伤的治疗靶点。方法:用终浓度为10μg/m... 目的:观察不同活性氧(reactive oxygen species,ROS)及氧化应激水平对脓毒症肾小管上皮细胞增殖、凋亡、周期等生物学效应的影响,探索氧化应激水平和线粒体-Caspase途径能否作为脓毒症肾小管上皮损伤的治疗靶点。方法:用终浓度为10μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理人肾小管上皮HK-2细胞12 h建立脓毒症细胞模型,将细胞模型随机分为H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2),300μmol/L)、Caspase抑制剂组(Ac-DEVD-CHO,15μmol/L)、Caspase抑制剂+H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2),300μmol/L+Ac-DEVDCHO,15μmol/L)和阴性对照组(不处理);另以正常培养的HK-2细胞为空白对照组。Western blot检测Cleaved-Caspase 3和Cleaved-多聚ADP核糖多聚酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞ROS水平、细胞凋亡和细胞周期。结果:阴性对照组细胞ROS水平、凋亡率、凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较空白对照组升高(P均<0.05),增殖率较空白对照组降低(P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞ROS水平、凋亡率、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较阴性对照组升高(P均<0.05),而增殖率较阴性对照组降低(P<0.05)。Caspase抑制剂+H_(2)O_(2)组细胞ROS水平、凋亡率、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较H_(2)O_(2)组降低(P均<0.05),但均高于阴性对照组(P均<0.05));增殖率较H_(2)O_(2)组升高(P<0.05),但仍低于阴性对照组(P<0.05)。结论:脓毒症细胞模型中存在异常升高的氧化应激反应。ROS能通过线粒体-Caspase凋亡途径抑制脓毒症肾小管上皮细胞增殖,促进细胞凋亡和引起细胞周期G1期阻滞。抑制Caspase对ROS引起的脓毒症肾小管上皮细胞损伤有一定保护作用。 展开更多

关键词 脓毒症 肾损伤 氧化应激 线粒体 凋亡

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传染性单核细胞增多症患儿外周血象特点 被引量：1

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作者 孙林春 张兰芳 胡正 《内蒙古中医药》 2013年第8期106-107,共2页

目的:分析传染性单核细胞增多症患者外周血血象特点,探讨其在临床诊疗中的意义。方法:用五分类血液分析仪对43例传染性单核细胞增多症患者和20例健康儿童外周血进行分析,制作血涂片镜下观察异型淋巴细胞比例。结果:患者外周血白细胞总... 目的:分析传染性单核细胞增多症患者外周血血象特点,探讨其在临床诊疗中的意义。方法:用五分类血液分析仪对43例传染性单核细胞增多症患者和20例健康儿童外周血进行分析,制作血涂片镜下观察异型淋巴细胞比例。结果:患者外周血白细胞总数显著增多,主要是淋巴细胞增多;容易发生贫血,但红细胞数与血红蛋白量常不一致,血红蛋白多低于参考值但红细胞多正常或仅轻微减低;血涂片中可见很高比例的异型淋巴细胞,以不规则型为主。结论:传染性单核细胞增多症患者外周血象有显著特点,有助于该病的临床诊疗,但也存在复杂多变性,需要注意鉴别诊断,以减少临床误诊漏诊。 展开更多

关键词 传染性单核细胞增多症 患儿 外周血象

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核糖体蛋白S29与人肝癌细胞Bel-7402耐5-氟尿嘧啶的关系

7

作者 孙林春 张利 张兰芳 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第3期343-345,共3页

目的探讨核糖体蛋白S29(RPS29)与人肝癌细胞Bel-7402耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的关系。方法采用大剂量冲击法和逐渐增加剂量法构建人肝癌Bel-7402/5-FU耐药细胞系;用荧光定量PCR和Western blot检测RPS29基因和蛋白在敏感和耐药细胞中的表达;用... 目的探讨核糖体蛋白S29(RPS29)与人肝癌细胞Bel-7402耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的关系。方法采用大剂量冲击法和逐渐增加剂量法构建人肝癌Bel-7402/5-FU耐药细胞系;用荧光定量PCR和Western blot检测RPS29基因和蛋白在敏感和耐药细胞中的表达;用siRNA干涉耐药细胞的RPS29,CCK-8法检测细胞存活率变化。用肝癌Hep G2/5-FU耐药细胞株验证阻断RPS29表达与5-FU耐药的关系。结果 Bel-7402/5-FU耐药细胞对5-FU的IC50为62μmol/L,耐药指数为22.7。RPS29基因和蛋白在耐药细胞中高表达,分别为敏感细胞的(2.21±0.19)倍和(1.79±0.28)倍(P<0.01)。干涉RPS29后,耐药细胞在一系列浓度梯度的5-FU作用下存活率分别比对照组下降(15.1±6.5)%、(24.3±4.2)%、(19.2±5.1)%、(16.3±6.8)%(P<0.05)。干涉RPS29表达后,肝癌Hep G2/5-FU耐药细胞株在一系列浓度梯度的5-FU作用下存活率分别比对照组下降(8.4±1.2)%、(13.0±2.3)%、(17.1±3.1)%和(12.2±1.5)%(P<0.05)。结论 RPS29基因和蛋白均在Bel-7402/5-FU耐药细胞高表达;低表达RPS29可提高Bel-7402/5-FU耐药细胞对5-FU的敏感性。低表达RPS29可提高Hep G2/5-FU耐药细胞对5-FU的敏感性。RPS29与肝癌细胞对5-FU的耐药性有关。 展开更多

关键词 核糖体蛋白S29 BEL-7402 肿瘤 耐药 5-氟尿嘧啶

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BMP9通过P38 MAPK信号通路对成骨细胞自噬和凋亡的作用研究

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作者 张阳 马菁菁 +2 位作者 喻哲昊 刘雪妮 孙林春 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第4期339-345,共7页

目的研究BMP9对P38 MAPK信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法体外培养小鼠MC3T3-E1成骨细胞系,用雷帕霉素(rapamycin)诱导细胞发生自噬,Western印迹检测BMP9、P38、p-P38的蛋白表达。再将细胞随机分组后进行相应处... 目的研究BMP9对P38 MAPK信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法体外培养小鼠MC3T3-E1成骨细胞系,用雷帕霉素(rapamycin)诱导细胞发生自噬,Western印迹检测BMP9、P38、p-P38的蛋白表达。再将细胞随机分组后进行相应处理,分别为pcDNA3.1-BMP9组(pcDNA3.1-BMP9)、BMP9 siRNA组(BMP9 siRNA)、P38激活组(茴香霉素,10μmol/L)、P38抑制组(SB-202190,10μmol/L)、pcDNA3.1-BMP9+P38抑制组(pcDNA3.1-BMP9+SB-202190,10μmol/L)、BMP9 siRNA+P38激活组(BMP9 siRNA+茴香霉素,10μmol/L)以及对照组。Western印迹检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1和P62的表达,CCK-8和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况。结果雷帕霉素处理后的MC3T3-E1细胞中LC3-Ⅱ、Beclin-1、BMP9和p-P38蛋白升高(P<0.05),P62蛋白降低(P<0.05)。pcDNA3.1-BMP9组、P38激活组LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白升高(P<0.05),P62蛋白降低(P<0.05);BMP9 siRNA组、P38抑制组LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白降低(P<0.05),P62蛋白升高(P<0.05)。pcDNA3.1-BMP9+P38抑制组和BMP9 siRNA+P38激活组LC3-Ⅱ、Beclin-1和P62蛋白水平与对照组均无差异(P均>0.05)。pcDNA3.1-BMP9组细胞增殖率升高、凋亡率降低(P均<0.05);BMP9 siRNA细胞增殖率降低,凋亡率升高(P均<0.05)。P38激活组细胞增殖率升高,凋亡率降低(P均<0.05);P38抑制组细胞增殖率降低,凋亡率升高(P均<0.05)。pcDNA3.1-BMP9+P38抑制组和BMP9 siRNA+P38激活组细胞增殖率、凋亡率与对照组均无差异(P均>0.05)。结论BMP9能激活P38 MAPK通路,诱导成骨细胞自噬,减少细胞凋亡。 展开更多

关键词 成骨细胞 骨形成蛋白 P38 MAPK通路 自噬 凋亡

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一个分级存储的信息生命周期管理系统设计与实现 被引量：5

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作者 付先平 孙林春 +3 位作者 熊伟伟 刘志宽 方扬 汪东升 《小型微型计算机系统》 CSCD 北大核心 2009年第6期1231-1236,共6页

信息生命周期管理是一种可持续发展的存储策略，以其独特的优势在存储成本和高效信息管理之间取得平衡．本文设计并实现SAN、NAS存储网络下基于分级存储（HSM）的清华信息生命周期管理系统（THILM）．提出一种新的文件重解析实现技术，... 信息生命周期管理是一种可持续发展的存储策略，以其独特的优势在存储成本和高效信息管理之间取得平衡．本文设计并实现SAN、NAS存储网络下基于分级存储（HSM）的清华信息生命周期管理系统（THILM）．提出一种新的文件重解析实现技术，实现ILM系统中HSM应用服务器端和系统应用层对动态存储数据的透明访问和多级存储数据的统一管理．讨论通过对应用元数据管理的优化和策略缓存（Policy Cache）技术的改进实现高效的管理策略的执行．通过系统性能测试表明本文提出的文件重解析实现技术带来的额外负载几乎可以忽略，策略缓存技术使系统的策略执行性能提高了一个数量级．另外针对原策略缓存初始化性能低下的问题，采用策略元数据池（PMC）进行优化，采用PMC后THILM策略缓存的初始化时间降低了16～20倍． 展开更多

关键词 信息生命周期 分级存储 文件重解析 策略缓存

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南京某医院成人耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出情况及耐药基因分析 被引量：12

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作者 张利 孙林春 《检验医学》 CAS 2019年第3期215-220,共6页

目的了解江苏省中西医结合医院2011—2017年成人耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株的检出情况及其耐药基因,为临床合理用药提供参考依据。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐方法鉴定MRSA。采用纸片扩散法对MRSA菌株... 目的了解江苏省中西医结合医院2011—2017年成人耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株的检出情况及其耐药基因,为临床合理用药提供参考依据。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐方法鉴定MRSA。采用纸片扩散法对MRSA菌株进行药物敏感性试验。采用聚合酶链反应(PCR)检测β-内酰胺类耐药基因mecA,氨基糖苷修饰酶基因aac(6′)/aph(2″)、aph(3)-Ⅲ,大环内酯类23s rRNA甲基化酶基因ermA/C,四环素类核糖体保护蛋白基因tetM/K,喹诺酮类耐药基因qnrA/B和耐消毒剂基因qacA/B。结果 MRSA的总检出率为31.95%,主要分离自痰液和创口分泌物样本;检出率居前3位的科室依次为呼吸科、外科和重症监护病房。未检出对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药的MRSA菌株;仅有0.49%的MRSA对奎奴普汀耐药,对复方磺胺甲噁唑、利福平、环丙沙星、四环素、庆大霉素、克林霉素、红霉素的耐药率分别为11.18%、11.57%、21.47%、63.63%、44.31%、59.41%、62.35%。多重耐药基因mecA阳性率为100%,aac(6′)/aph(2″)、aph(3)-Ⅲ、ermA/C、tetM/K、qnrA/B、qacA/B基因检出率分别为36.67%、27.94%、68.43%、57.35%、23.63%和52.45%。结论 2011—2017年江苏省中西医结合医院成人MRSA多重耐药基因检出率高。MRSA对多种抗菌药物都不同程度耐药,临床应以药物敏感性试验结果为合理用药的最主要依据。 展开更多

关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 多重耐药 基因

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乳酸脱氢酶与蚊虫对溴氰菊酯抗性相关性的研究 被引量：1

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作者 张利 叶钰亭 +3 位作者 孙林春 洪善超 沈波 朱昌亮 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2012年第5期389-393,共5页

目的研究乳酸脱氢酶(LDH)与蚊溴氰菊酯抗性之间的关系。方法应用RT-PCR及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术扩增白纹伊蚊LDH全长基因;用实时荧光定量PCR检测敏感和抗性蚊C6/36细胞中LDH基因的表达水平;用乳... 目的研究乳酸脱氢酶(LDH)与蚊溴氰菊酯抗性之间的关系。方法应用RT-PCR及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术扩增白纹伊蚊LDH全长基因;用实时荧光定量PCR检测敏感和抗性蚊C6/36细胞中LDH基因的表达水平;用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒检测敏感和抗性蚊细胞中LDH酶活性。结果 LDH基因全长共1831 bp,其中ORF为996 bp,共编码331个氨基酸。该基因与埃及伊蚊、黑腹果蝇、小家鼠和人的乳酸脱氢酶的同源性分别为89%、72%、66%和65%。实时荧光定量PCR结果表明,LDH基因在抗性蚊细胞中高表达,为敏感蚊细胞的1.87倍(P<0.05)。LDH酶活性检测结果显示,LDH在敏感蚊细胞中的酶活性范围为1～95 U/gprot,均值为40 U/gprot;在抗性蚊细胞中的酶活性范围为20～150 U/gprot,均值为75 U/gprot(n=15,P<0.01)。结论抗性蚊细胞中的LDH表达量和酶活性均高于敏感蚊细胞,提示LDH可能与蚊溴氰菊酯抗性相关。 展开更多

关键词 蚊C6/36细胞 乳酸脱氢酶 酶活性 溴氰菊酯抗性

原文传递

不同分型糖尿病HbA1c与FPG、血脂的相关性研究 被引量：1

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作者 张利 孙林春 +1 位作者 张家明 赵孝生 《中外医疗》 2010年第21期58-58,共1页

目的探讨不同分型糖尿病患者HbA1c与FPG、血脂的相关性。方法收集本院糖尿病患者血液样本,检测HbA1c,FPG和血脂并对结果进行分析。结果 2种分型糖尿病患者HbA1c和FPG值均高于正常对照;1型糖尿病患者HbA1c与FPG呈正相关,与血脂各项指标... 目的探讨不同分型糖尿病患者HbA1c与FPG、血脂的相关性。方法收集本院糖尿病患者血液样本,检测HbA1c,FPG和血脂并对结果进行分析。结果 2种分型糖尿病患者HbA1c和FPG值均高于正常对照;1型糖尿病患者HbA1c与FPG呈正相关,与血脂各项指标无明显相关性;2型糖尿病患者HbA1c分别与FPG、TC、TG、LDL和VLDL呈正相关,与HDL呈负相关。 展开更多

关键词 糖尿病 HBA1C FPG 血脂

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食品微生物检验内容及检测技术研究 被引量：2

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作者 孙林春 《食品安全导刊》 2015年第12X期137-137,共1页

随着科技的进步与人们生活水平的逐渐提升,食品安全问题与质量检测越来越受到社会各界的高度关注与重视,食品微生物污染问题也逐渐成为社会舆论的焦点。食品微生物是指与食品相关的微生物,包括引起食物发霉变质、生产各种酒、饮料、味... 随着科技的进步与人们生活水平的逐渐提升,食品安全问题与质量检测越来越受到社会各界的高度关注与重视,食品微生物污染问题也逐渐成为社会舆论的焦点。食品微生物是指与食品相关的微生物,包括引起食物发霉变质、生产各种酒、饮料、味精、面包等发酵食品和引起人们食物中毒的三大类微生物。从上述分类当中我们可以看出,大多数食品微生物对人类是有害的,而如何分辨食品微生物的好与坏,对有益部分进行充分利用,就需要借助先进技术对食品微生物进行检验与检测。 展开更多

关键词 食品微生物 检测技术研究 社会舆论 污染问题 微生物检测 免疫酶技术 荧光抗体 抗体检测 发酵食品 免疫磁珠分离

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表观健康儿童人类白细胞分化抗原B27参考区间的建立

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作者 张利 葛亮 +2 位作者 张兰芳 马小力 孙林春 《检验医学》 CAS 2020年第7期695-698,共4页

目的建立健康儿童人白细胞抗原B27(HLA-B27)的参考区间,为幼年特发型关节炎(JIA)附着点炎症相关型(ERA)的诊断和鉴别诊断提供实验室依据。方法选取460例无自觉脊柱、外周关节、关节周围组织炎症或其他病变的儿童作为参考区间建立人群,... 目的建立健康儿童人白细胞抗原B27(HLA-B27)的参考区间,为幼年特发型关节炎(JIA)附着点炎症相关型(ERA)的诊断和鉴别诊断提供实验室依据。方法选取460例无自觉脊柱、外周关节、关节周围组织炎症或其他病变的儿童作为参考区间建立人群,另选取200名表观健康儿童和50例ERA患儿作为参考区间验证人群。检测所有对象的外周血HLA-B27,建立参考区间,并进行验证。结果 460例儿童HLA-B27平均荧光强度检测结果呈偏态分布(Z=1.615,P=0.011),采用中位数(M)[百分位数(P2.5-P97.5)]表示,结果为100(78-121)。不同年龄和性别儿童HLA-B27平均荧光强度差异均无统计学意义(P>0.05)。采用百分位数法建立单侧97.5%的参考区间,HLA-B27参考区间为<121。一致性比较结果显示,建立的新参考区间与厂商提供的HLA-B27参考区间(0-147)之间一致性较差(kappa=0.013,P<0.001)。根据新参考区间,200名表观健康儿童HLA-B27的异常率为5%,50例ERA患儿的HLA-B27阳性率为78%;根据厂商提供的参考区间,200名表观健康儿童HLA-B27的异常率为3%,50例ERA患儿的HLA-B27阳性率为26%;二者异常率差异无统计学意义(χ^2=1.41,P>0.05),阳性率差异有统计学意义(χ^2=49.18,P<0.001)。结论建立了南京地区儿童外周血HLA-B27的参考区间,依据该参考区间诊断ERA的特异性与厂商提供的参考区间无差异,但提高了诊断敏感性,降低了漏诊率。 展开更多

关键词 人白细胞抗原B27 儿童 参考区间 流式细胞术

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加强职业教育 促进经济发展

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作者 孙林春 李学 《天津人大》 2009年第5期26-27,共2页

近期，静海县人大常委会会同县政府6个职能部门组成联合调研组。历时5个且：对职业教育法实施情况进行了调研。期间，共发放问卷600份，调查企业3904家，召开座谈会10余次。组织代表视察2次，常委会专题审议了县政府关于职业教育法实施... 近期，静海县人大常委会会同县政府6个职能部门组成联合调研组。历时5个且：对职业教育法实施情况进行了调研。期间，共发放问卷600份，调查企业3904家，召开座谈会10余次。组织代表视察2次，常委会专题审议了县政府关于职业教育法实施情况的报告。调研和监督活动使代表们对职业教育发展情况有了全面的了解，指出了法律实施中存在的突出问题，达成了进一步加强职业教育的共识，代表意见建议的落实必将会促进全县职业教育的健康发展。 展开更多

关键词 职业教育法 经济发展 人大常委会 调研组 职能部门 发展情况 法律实施 代表意见

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学习贯彻监督法的几点体会

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作者 孙林春 李学 《天津人大》 2007年第7期24-25,共2页

监督法的颁布实施，是新形势下坚持和完善人民代表大会制度，加强和规范人大监督工作的重要举措，对于各级人大常委会依法行使监督权，健全监督机制，加强和改进监督工作，增强监督实效，促进依法行政和公正司法，更好地发挥人民代表大... 监督法的颁布实施，是新形势下坚持和完善人民代表大会制度，加强和规范人大监督工作的重要举措，对于各级人大常委会依法行使监督权，健全监督机制，加强和改进监督工作，增强监督实效，促进依法行政和公正司法，更好地发挥人民代表大会制度的特点和优势，推进民主法制建设，建设社会主义法治国家具有重大的现实意义和深远的历史意义。 展开更多

关键词 监督法 人民代表大会制度 人大监督工作 学习 民主法制建设 人大常委会 监督机制 公正司法

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紧抓关键环节 发挥工委作用

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作者 孙林春 李学 《天津人大》 2008年第6期28-29,共2页

近年来，区、县级人大常委会相继成立了工作委员会，为常委会监督工作注入了新的生机和活力。通过几年来的实践，笔者就如何充分发挥工委在监督工作中的作用。谈些粗浅的体会。

关键词 工委 县级人大常委会 监督工作 工作委员会

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关于提高视察质量的体会与思考

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作者 孙林春 李学 《天津人大》 2003年第4期32-33,共2页

视察是各级人大常委会一种有效的监督形式,但在实际工作中,难免会出现程式化或随意性的倾向.笔者根据在县级人大常委会机关工作的切身体验,对如何提高视察质量,谈些粗浅的体会.

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晚期糖基化终末产物通过Wnt/β-catenin信号通路调控足细胞自噬和迁移 被引量：7

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作者 张利 刘建璟 孙林春 《临床肾脏病杂志》 2018年第12期778-783,共6页

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导Wnt/β-catenin信号通路活化对足细胞自噬和迁移的影响。方法将小鼠永生化肾足细胞系分为牛血清白蛋白组(100mg/L BSA)、糖基化终末产物组(100 mg/L BSA-AGEs)和糖基化终末产物+DKK-1组(100mg/L BS... 目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导Wnt/β-catenin信号通路活化对足细胞自噬和迁移的影响。方法将小鼠永生化肾足细胞系分为牛血清白蛋白组(100mg/L BSA)、糖基化终末产物组(100 mg/L BSA-AGEs)和糖基化终末产物+DKK-1组(100mg/L BSA-AGEs+100 DKK-1 mg/L),以未加干涉的正常足细胞为对照组。Western blot检测足细胞β-catenin蛋白、自噬膜蛋白微管相关蛋白轻链3-II(LC3-Ⅱ)以及自噬底物p62蛋白表达水平,免疫荧光观察足细胞自噬情况,ELISA检测细胞上清液中Nephrin蛋白含量,划痕试验检测足细胞迁移能力。用AGEs和AGEs+RAGE(糖基化终末产物受体)中和抗体处理足细胞系,Western blot检测足细胞β-catenin蛋白的表达。结果与对照组相比,AGEs组p-β-catenin、p62表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ表达降低(P<0.05)。AGEs+DKK-1组p-β-catenin、p62蛋白表达较AGEs组降低,LC3-Ⅱ表达升高(P<0.05),但与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。BSA组各指标与对照组均无显著性差异(P>0.05)。免疫荧光检测发现AGEs组足细胞中LC3荧光强度较对照组明显减弱,AGEs+DKK-1组较AGEs组LC3荧光强度增强,BSA组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。AGEs组细胞培养上清中Nephrin含量较对照组明显降低(P<0.05),AGEs+DKK-1组较AGEs组升高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05),BSA组与对照组差异无显著性(P>0.05)。与对照组相比,AGEs组足细胞迁移能力降低(P<0.05),AGEs+DKK-1组、BSA组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。AGEs+RAGE中和抗体处理的足细胞β-catenin蛋白水平较AGEs组显著降低(P<0.05)。结论 AGEs通过RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制足细胞自噬和迁移能力,可能是糖尿病患者足细胞损伤机制之一,在糖尿病肾病的发生和进展中发挥重要调控作用。 展开更多

关键词 糖基化终末产物 足细胞 Wnt信号通路 自噬 迁移

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合唱教学中的基本功训练 被引量：4

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作者 孙林春 《连云港师范高等专科学校学报》 2001年第4期92-94,共3页

本文从四个方面对 <<合唱教学中基本功训练 >>进行解析 :1.视唱能力的培养。着重训练学生的识谱能力 ,培养学生的节奏感、音准和音乐感。 2 .培养正确的呼吸和发声方法 ,掌握歌唱的技能技巧。 3 .加强正确的咬字、吐字的训... 本文从四个方面对 <<合唱教学中基本功训练 >>进行解析 :1.视唱能力的培养。着重训练学生的识谱能力 ,培养学生的节奏感、音准和音乐感。 2 .培养正确的呼吸和发声方法 ,掌握歌唱的技能技巧。 3 .加强正确的咬字、吐字的训练。通过正确的咬字、吐字与唱歌发声有机结合起来 ,以达到“字正腔圆”的目的 ,从而生动形象地表达歌曲的思想感情。 4 .加强和声训练 ,要求学生做到能聆听自己的声音 ,也能兼听他人的声音和效果 ,调整自己的音准、音色和音量 。 展开更多

关键词 视唱能力 视听能力 和声训练 中小学 音乐教学 合唱教学 基本功训练

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