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DNA纳米材料用于肿瘤治疗的研究进展
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作者 许伟喆 王芳 +1 位作者 孙照刚 褚洪迁 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2024年第1期135-141,共7页
传统的癌症治疗方法仍有很多局限性。随着科学技术的发展,纳米技术的出现为癌症治疗带来新希望。其中,脱氧核糖核酸(DNA)具有高度可编程性、生物相容性、精确的空间控制和协调金属离子的能力等优点,已成为用于生物成像、生物传感和治疗... 传统的癌症治疗方法仍有很多局限性。随着科学技术的发展,纳米技术的出现为癌症治疗带来新希望。其中,脱氧核糖核酸(DNA)具有高度可编程性、生物相容性、精确的空间控制和协调金属离子的能力等优点,已成为用于生物成像、生物传感和治疗的智能自组装纳米系统的强大工具。近年来,DNA功能化纳米材料快速发展,已经被广泛应用于生物医学研究领域,也为肿瘤治疗带来新希望。本文作者主要综述DNA功能化纳米材料应用于肿瘤治疗的研究进展。 展开更多
关键词 DNA纳米技术 药物递送 肿瘤治疗 综述
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基于上转换纳米颗粒的肿瘤光动力治疗研究进展
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作者 王芳 孙照刚 褚洪迁 《癌变.畸变.突变》 CAS 2024年第1期70-76,共7页
肿瘤是目前威胁人类健康的主要疾病之一,传统的肿瘤治疗方法主要有手术、化学疗法和放射疗法等,但是上述手段存在局限性,如创伤性大、风险高、化疗药物的选择性差、产生耐药性和毒副作用大等。光动力疗法(PDT)是用特定波长照射肿瘤部位... 肿瘤是目前威胁人类健康的主要疾病之一,传统的肿瘤治疗方法主要有手术、化学疗法和放射疗法等,但是上述手段存在局限性,如创伤性大、风险高、化疗药物的选择性差、产生耐药性和毒副作用大等。光动力疗法(PDT)是用特定波长照射肿瘤部位,活化选择性聚集在肿瘤部位的光敏剂,引发光化学反应破坏肿瘤细胞的过程。PDT因具有微创、靶向性强和不良反应少等优点,被广泛应用于抗肿瘤治疗。但是,传统的PDT治疗效果受到光敏剂的组织穿透能力弱、肿瘤微环境缺氧及免疫抑制等因素的限制。近几年来,上转换纳米颗粒(UCNPs)在生物医学领域的应用得到广泛关注。由于UCNPs具有毒性低、化学稳定性和光稳定性好等优点,具有将近红外光转换为紫外-可见光的特点,有望解决传统PDT存在的问题。本文主要概述了基于UCNPs的PDT在抗肿瘤领域的研究进展,并对其未来应用进行展望。 展开更多
关键词 光动力疗法 上转换纳米颗粒 肿瘤治疗 光敏剂
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细菌外泌体DNA的来源与生物学功能研究进展
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作者 刘丁一 孙宏 +1 位作者 盛钢 孙照刚 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2023年第7期693-698,共6页
细胞可通过细胞外囊泡,也称为外泌体(extracellular vesicles)将自身物质或代谢产物释放到细胞外。随着研究的深入,研究人员发现,细菌也可以产生包裹许多大分子物质(包括蛋白质、脂类、DNA和RNA等)的外泌体,并且细菌外泌体与细菌生存发... 细胞可通过细胞外囊泡,也称为外泌体(extracellular vesicles)将自身物质或代谢产物释放到细胞外。随着研究的深入,研究人员发现,细菌也可以产生包裹许多大分子物质(包括蛋白质、脂类、DNA和RNA等)的外泌体,并且细菌外泌体与细菌生存发育及细菌介导的种内和种间相互作用等多种生物学活动有着密切联系。研究人员还发现,革兰阴性菌与革兰阳性菌均可产生包含DNA的外泌体,细菌外泌体DNA可发挥介导水平基因的转移、协助生物膜形成及刺激免疫调节机制等生物学功能。本文针对细菌外泌体DNA的产生方式及其生物学功能进行阐述,使读者更为深入地了解细菌外泌体DNA,推动对细菌外泌体DNA的进一步研究和发展。 展开更多
关键词 外泌体 脱氧核糖核苷酸类 革兰氏阴性菌 革兰氏阳性菌 总结性报告(主题)
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结核分枝杆菌DNA介导模式识别受体激活天然免疫机制的研究进展
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作者 王文敬 孙宏 孙照刚 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2023年第4期426-433,共8页
结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)是引起机体发生结核感染的重大病原体。天然免疫在宿主抵抗MTB入侵过程中发挥了重要作用,机体细胞内的多种模式识别受体(pattern recognition receptors,PRR)参与了针对MTB的识别。PRR作... 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)是引起机体发生结核感染的重大病原体。天然免疫在宿主抵抗MTB入侵过程中发挥了重要作用,机体细胞内的多种模式识别受体(pattern recognition receptors,PRR)参与了针对MTB的识别。PRR作为天然免疫的“启动器”,在识别MTB后经过信号通路的转导激活天然免疫的产生。可被PRR识别的MTB组分种类繁多,包括:DNA、脂多糖、蛋白质等。本文重点关注可被PRR识别的MTB DNA,从其来源、可被识别的PRR种类,以及PRR以MTB DNA为病原相关分子模式介导相关分子信号通路激活天然免疫的机制3个方面综述了MTB DNA经由PRR激活天然免疫的过程,并着重探讨了Toll样受体9、环鸟苷酸-腺苷酸合成酶和黑色素瘤缺乏因子2样受体等PRR激活天然免疫机制的研究进展。最后,讨论了MTB DNA的应用前景,以期为开发MTB DNA相关疫苗和结核病的诊断拓展思路。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 DNA 受体 模式识别 免疫
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新一代微测序基因芯片的设计及其耐药性检测效果的初步研究 被引量:6
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作者 孙照刚 张洪静 +7 位作者 李自慧 孙琦 吕琳娜 潘丽萍 Sandy Gilbert 张宗德 许绍发 James Xia 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第6期609-615,共7页
目的设计和评价微测序基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法于北京结核病临床数据和样本资源库选取MTB实验室标准菌株(H37Rv)和109株MTB临床分离株,采用绝对浓度法进行表型药物敏感性试验(简称“表型药敏试验”)和基因测序... 目的设计和评价微测序基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法于北京结核病临床数据和样本资源库选取MTB实验室标准菌株(H37Rv)和109株MTB临床分离株,采用绝对浓度法进行表型药物敏感性试验(简称“表型药敏试验”)和基因测序法检测MTB耐药相关基因突变(包括inhA、katG、rpsL、gyrA、rrs、eis、rpoB和embB基因)。以荧光标记探针为基本检测原理设计制备微测序基因芯片,检测109株MTB临床分离株耐药基因突变,分析微测序基因芯片的检测效能。结果通过表型药敏试验及基因测序检测,明确了109株MTB临床分离株耐药相关基因(inhA、katG、rpsL、gyrA、rrs、eis、rpoB和embB基因)突变位点及突变形式。微测序耐药检测基因芯片初期设计包含了katG、inhA、rpoB、gyrA、embB、rpsL、rrs和eis基因的目前已报道的所有突变位点的全部已知突变形式,共计220条探针,并确认出67条优秀探针。采用包含67条探针的微测序耐药检测基因芯片对109株MTB临床分离株进行检测。结果发现,与测序结果相比,除检测embB基因突变的2条探针外,其余65条探针检测碱基突变形式的符合率均超过95%,其中42条探针检测的符合率达到100.00%。以测序结果为参照标准,基因芯片检测对embB基因、gyrA基因、inhA基因、katG基因、rpoB基因、rpsL基因、eis基因和rrs基因突变检测的敏感度分别为64.21%(61/95)、80.00%(8/10)、95.83%(23/24)、98.55%(68/69)、92.63%(88/95)、93.85%(61/65)、75.00%(3/4)和94.44%(17/18);特异度分别为92.86%(13/14)、100.00%(99/99)、97.65%(83/85)、87.50%(35/40)、85.71%(12/14)、63.64%(28/44)、100.00%(105/105)和98.90%(90/91);Kappa值分别为0.29、0.88、0.92、0.88、0.68、0.60、0.85、0.93。结论本研究研发设计了一套包含67条探针微测序耐药基因检测芯片,经过初步验证后证明其检测MTB耐药相关基因突变的效能较好,对embB基因的耐药检测探针还需进一步优化,使之更好的满足临床需求。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 结核 抗多种药物性 微生物敏感性试验 基因 突变 芯片分析技术 技术评估 生物医学
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适用于结核分枝杆菌微测序耐药基因芯片的多重PCR体系的优化与评价 被引量:3
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作者 孙照刚 李自慧 +4 位作者 张洪静 孙琦 潘丽萍 张宗德 许绍发 《临床肺科杂志》 2020年第2期163-166,共4页
目的优化结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系并评估其优缺点。方法利用改进的方法提取结核分枝杆菌基因组DNA,优化适合扩增rpoB,katG,mabA/inhA,pncA,embB,gyrA,rpsL,rrs和eis耐药基因片段的多重PCR体系,经测序确定所扩增出的基... 目的优化结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系并评估其优缺点。方法利用改进的方法提取结核分枝杆菌基因组DNA,优化适合扩增rpoB,katG,mabA/inhA,pncA,embB,gyrA,rpsL,rrs和eis耐药基因片段的多重PCR体系,经测序确定所扩增出的基因片段,计算PCR操作过程所用的时间和材料成本等,分析多重PCR反应体系存在的优缺点。结果经过优化煺火温度、引物浓度以及添加NH 4^+和二甲基亚砜可以较好的扩增出5重和4重PCR产物,达到两管同时扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因的目的。利用该条件可以扩增出全部培养出的135株菌株DNA样本和80.56%的痰菌DNA样本,并且可以缩短PCR操作时间、降低试剂耗材成本,减少操作失误。结论优化的两管多重PCR法在同时扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因,具有明显的优势,具有良好的实用价值。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 耐药 基因 多重PCR
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传染性喉气管炎病毒疫苗的研究进展 被引量:2
7
作者 孙照刚 李建民 +1 位作者 徐玉辉 张曼夫 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第2期41-44,共4页
作者综述了传染性喉气管炎病毒(ILTV)常规疫苗和基因工程疫苗的研究现状,指出常规疫苗存在一定程度的缺陷,很难适应当前养禽业发展的需要。由于基因工程疫苗具有显著的优点,因此发展基因工程疫苗是未来ILTV疫苗的发展方向。
关键词 传染性喉气管炎病毒 常规疫苗 基因工程疫苗 研究现状
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畜禽结核病及其危害 被引量:2
8
作者 孙照刚 徐玉辉 李传友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第7期175-177,共3页
结核病是目前常见的人畜共患传染病,主要引起以结核为主要特征的病变。该病的病原体主要是人型、牛型和禽型3种形态相似的分枝杆菌,但是三者对不同畜禽的易感性不同,引起的疾病特征也不尽相同。由于该病人畜共患并且给畜禽养殖业带来严... 结核病是目前常见的人畜共患传染病,主要引起以结核为主要特征的病变。该病的病原体主要是人型、牛型和禽型3种形态相似的分枝杆菌,但是三者对不同畜禽的易感性不同,引起的疾病特征也不尽相同。由于该病人畜共患并且给畜禽养殖业带来严重损失,需要引起人们的高度重视。 展开更多
关键词 结核病 分枝杆菌 危害
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波德代与无角陶赛特公羊繁殖性能的比较 被引量:1
9
作者 孙照刚 赵有璋 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2004年第9期54-56,共3页
本文以从新西兰引入无角陶赛特公羊和波德代公羊为研究对象 ,通过比较它们之间的繁殖性能指标 (射精量、原精密度、原精活率、冻精解冻活率、畸形率、性反应时间和精清睾酮含量 )的月变化和季节变化异同 ,从而使我们更加清楚的认识这两... 本文以从新西兰引入无角陶赛特公羊和波德代公羊为研究对象 ,通过比较它们之间的繁殖性能指标 (射精量、原精密度、原精活率、冻精解冻活率、畸形率、性反应时间和精清睾酮含量 )的月变化和季节变化异同 ,从而使我们更加清楚的认识这两品种 ;①两品种除原精密度的季节变化规律相反外 ,其它方面的变化规律基本相似 ;②波德代羊在射精量和原精密度方面显著高于无角陶赛特 ,其它方面差异不显著 ;从上述几方面看 ,波德代羊的繁殖性能较无角陶赛特羊好一些 ;③两品种在射精量、原精密度、原精活率、冻精解冻活率、畸形率、性反应时间和精清睾酮含量方面都较为优良 ,能够最大限度满足需要。 展开更多
关键词 畜牧学 繁殖性能 比较 波德代羊 无角陶赛特羊
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一种独特的疱疹病毒—鸡传染性喉气管炎病毒 被引量:1
10
作者 孙照刚 徐玉辉 张曼夫 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第9期54-56,共3页
作者对鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)从以下4个方面进行了综述:①ILTV宿主的高度特异性;②病毒感染细胞的特殊途径;③病毒基因组内的基因容量和排列;④ILTV与其它疱疹病毒同源序列比较而推测出它们之间的进化关系。上述几方面的论述都表明... 作者对鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)从以下4个方面进行了综述:①ILTV宿主的高度特异性;②病毒感染细胞的特殊途径;③病毒基因组内的基因容量和排列;④ILTV与其它疱疹病毒同源序列比较而推测出它们之间的进化关系。上述几方面的论述都表明ILTV具有区别于一般疱疹病毒的独特的特点。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 疱疹病毒
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重视结核分枝杆菌抗原检测技术研发 被引量:1
11
作者 孙照刚 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2022年第2期120-124,共5页
结核病疫情防控面临的新形势需要考虑新的快速、便捷的早期筛查或诊断技术。简便、快速和廉价的免疫学诊断技术是结核病研究人员重点关注并且坚持不懈的努力方向。目前结核分枝杆菌抗原靶标包括单一抗原的检测和多种抗原同时检测,涉及... 结核病疫情防控面临的新形势需要考虑新的快速、便捷的早期筛查或诊断技术。简便、快速和廉价的免疫学诊断技术是结核病研究人员重点关注并且坚持不懈的努力方向。目前结核分枝杆菌抗原靶标包括单一抗原的检测和多种抗原同时检测,涉及的检测技术包括免疫学技术、质谱技术及纳米技术。随着技术的进步,结核分枝杆菌抗原在检测技术和研究思路上都取得了较大的进展,但仍存在一些问题。结核分枝杆菌抗原研发的方向应注重多种特异性抗原同时检测。随着新型纳米材料和传感方法的发展,特异性强、免疫原性好的抗原得到不断发现和深入研究,这将有助于结核分枝杆菌抗原检测得到新的完善和发展。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗原 诊断技术和方法 总结性报告(主题)
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潜伏感染者实施预防性治疗面临的几个科学问题 被引量:1
12
作者 孙照刚 《临床肺科杂志》 2015年第10期1747-1749,共3页
世界卫生组织在2014年底提出了有关结核潜伏感染管理的指南性文件,其中预防性治疗引人关注,具有重要的现实意义。随着现代生物学技术的快速发展,结核分枝杆菌的潜伏感染得到更深入的认识。最近的研究表明:确定潜伏感染者的检测技术具有... 世界卫生组织在2014年底提出了有关结核潜伏感染管理的指南性文件,其中预防性治疗引人关注,具有重要的现实意义。随着现代生物学技术的快速发展,结核分枝杆菌的潜伏感染得到更深入的认识。最近的研究表明:确定潜伏感染者的检测技术具有一定的局限性,而存在于干细胞内的潜伏感染结核分枝杆菌不容易被清除,并且体内潜伏感染结核分枝杆菌与活动性结核分枝杆菌存在相同的突变率,加之我们对抗结核药物之间的关系还缺乏深入了解,一种药物的耐药性可能导致其它药物的最低抑菌浓度(MIC)值升高。上述这些发现提示我们潜伏感染结核分枝杆菌的预防性治疗仍然存在一些基础科学问题有待进一步研究。 展开更多
关键词 预防性治疗 潜伏感染 基础科学 感染者 结核分枝杆菌 抗结核药物 世界卫生组织 最低抑菌浓度
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抗结核药物间生物学关系的再思考 被引量:1
13
作者 孙照刚 《临床肺科杂志》 2015年第12期2135-2138,共4页
抗结核药物间存在相互作用。世界卫生组织( WHO)在制定合理的抗结核治疗方案时已经充分考虑到这些因素,并且经过世界各国的广泛实践,其可靠性得到充分认识。当然这些因素也包括抗结核药物与治疗HIV和糖尿病等合并疾病的治疗药物之间... 抗结核药物间存在相互作用。世界卫生组织( WHO)在制定合理的抗结核治疗方案时已经充分考虑到这些因素,并且经过世界各国的广泛实践,其可靠性得到充分认识。当然这些因素也包括抗结核药物与治疗HIV和糖尿病等合并疾病的治疗药物之间的相互作用,这些在WHO抗结核治疗指南中也做了描述[1,2],在此不再赘述。本文重点强调在制定缩短疗程方案和抗结核新药治疗方案等方面时应当考虑组学( OMICs)技术、遗传学以及分子生物学的科学发现,主要从抗结核药物之间关系的科学发现入手,探讨他们对抗结核药物选择的影响,以供结核病工作者参考。 展开更多
关键词 抗结核药物 生物学关系 世界卫生组织 治疗方案 相互作用 分子生物学 治疗药物 合并疾病
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用变性高压液相色谱技术检测耐氧氟沙星的结核分枝杆菌临床株 被引量:1
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作者 孙照刚 张健源 +6 位作者 张旭霞 李妍 邱云青 田苗 刘毅 聂理会 李传友 《结核病与胸部肿瘤》 2007年第1期30-35,共6页
目的利用变性高压液相色谱(DHPLC)技术快速检测结核分枝杆菌gyrA基因的突变,从而对结核分枝杆菌是否耐受氟喹诺酮类药物做出初步判断。方法提取试验菌株基因组DNA,扩增gyrA基因的氟喹诺酮药物耐受决定区(QRDR)核酸片段;分别与H3... 目的利用变性高压液相色谱(DHPLC)技术快速检测结核分枝杆菌gyrA基因的突变,从而对结核分枝杆菌是否耐受氟喹诺酮类药物做出初步判断。方法提取试验菌株基因组DNA,扩增gyrA基因的氟喹诺酮药物耐受决定区(QRDR)核酸片段;分别与H37Rv标准株(或者含有单纯Ser284突变的临床分离株作为标准)的相应PCR产物混合、杂交后,利用WAVE核苷酸片段分析系统对各杂交产物进行DHPLC检测;序列测定结果与相应的DHPLC检测结果进行比较以验证DHPLC检测的准确性。采用2mg/L的药物浓度进行氧氟沙星(OFLX)药物敏感性试验,确定101株结核分枝杆菌临床分离株对OFLX的敏感性,通过比较药物敏感性和DHPLC检测结果,建立两者之间的对应关系。结果利用DHPLC检测QRDR突变与序列测定具有同样的检出率(100%),两者都能够很好地检测QRDR突变。采用单纯含有Ser284突变的临床分离株代替H37Rv作为标准进行DHPLC检测,可以检测出除Ser284突变点外所有的点突变形式。在101株结核分枝杆菌临床分离株中,有49株对2mg/L OFLX敏感;52株耐受。52株耐药菌株中,有27株能够通过序列测定和DHPLC法得到准确判定。采用含有单纯Ser284突变的临床分离株作为标准进行DHPLC检测菌株的耐药性,检测结果更准确。结论DHPLC法是快速检测出结核分枝杆菌gyrA基因碱基突变的好方法,但是碱基突变与结核分枝杆菌是否耐受氟喹诺酮类药物存复杂的关系,因此该方法应用于临床检测尚需进一步验证。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 GYRA基因 突变
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实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达 被引量:1
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作者 孙照刚 张旭霞 +6 位作者 张健源 柴利泉 李妍 田苗 李卫民 邱云青 李传友 《结核病与胸部肿瘤》 2006年第4期243-247,共5页
目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象。利用实时定量PCR的方法.检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变... 目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象。利用实时定量PCR的方法.检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后。whiB7基因的表达水平变化不明显外.其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐约株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因。推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核/抗药性 whiB7基因
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波德代公羊繁殖性能的季节变化 被引量:1
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作者 孙照刚 赵有璋 《甘肃畜牧兽医》 2003年第5期2-4,共3页
以从新西兰首次引入的波德代成年公羊为研究对象 ,对其繁殖性能进行了为期一年的试验研究。结果表明 ,波德代羊射精量 (mL)在 11月份最高 (1 81) ,5月份最低 (1 2 9) ;秋季低 (1 4 1) ,冬季高 (1 6 1)。原精活率最低值和最高值分别出现... 以从新西兰首次引入的波德代成年公羊为研究对象 ,对其繁殖性能进行了为期一年的试验研究。结果表明 ,波德代羊射精量 (mL)在 11月份最高 (1 81) ,5月份最低 (1 2 9) ;秋季低 (1 4 1) ,冬季高 (1 6 1)。原精活率最低值和最高值分别出现在 5月份 (0 70 )和 1月份 (0 79) ,夏季较低 (0 70 ) ,冬季较高 (0 77) ;最低、最高原精密度 (亿个 /mL)分别在 5月份 (2 7 2 0 )和 3月份 (42 6 0 ) ;冬季密度高 (40 37) ,夏季密度低 (35 5 7)。畸形率在 10月份最低 (8 94 % ) ,5月份最高 (18 0 5 % ) ;春季高(14 99% ) ,秋季低 (10 4 6 % )。冻精解冻活率最高值都在 9月份 ,最低值在 5月份。春季制作的冻精解冻活率低 ,秋季制作的冻精解冻活率则较高 ;性反应时间最高值都出现在春季。精清中睾酮含量(pg/mL)最高、最低值分别在 8月份 (2 2 17 7)和 10月份 (331 2 ) ;夏季低 (45 1 6 ) ,冬季高 (15 10 3)。 展开更多
关键词 波德代公羊 繁殖性能 季节变化 射精量 原精活率 原精密度 畸形率 冻精解冻活率 性反应时间 睾酮含量
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畜禽结核病及其危害 被引量:1
17
作者 孙照刚 李传友 《结核病与胸部肿瘤》 2009年第1期54-58,共5页
结核病是由分枝杆菌引起的人、畜共患的一种慢性传染病。其特征是病畜逐渐消瘦,在各种器官形成无血管的干酪样变性的结节,称为结核。分枝杆菌除感染人类外,尚能引起50多种哺乳动物和25种禽类发病。其中对畜禽感染力较强的是结核分枝... 结核病是由分枝杆菌引起的人、畜共患的一种慢性传染病。其特征是病畜逐渐消瘦,在各种器官形成无血管的干酪样变性的结节,称为结核。分枝杆菌除感染人类外,尚能引起50多种哺乳动物和25种禽类发病。其中对畜禽感染力较强的是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)和禽分枝杆菌(Mycobacterium avium)。所有家畜均能感染,牛最容易发生,羊、猪和禽类较少。上休3娄分枝杆菌同样帆黩染人. 展开更多
关键词 结核病 畜禽 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 危害 感染人类 慢性传染病 器官形成
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耐氧氟沙星的结核分枝杆菌临床分离株的gyrA基因点突变特点
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作者 孙照刚 张健源 李传友 《中国防痨杂志》 CAS 2006年第S1期87-87,共1页
目的研究结核分枝杆菌临床分离株的gyrA基因点突变位点和突变频率,了解目前结核分枝杆菌临床分离株耐喹诺酮类药物的基本特点。方法以我室保藏H<sub>37</sub>Rv(ATCC272294),H37Ra (ATCC251 77)菌株以及由我所参比实验... 目的研究结核分枝杆菌临床分离株的gyrA基因点突变位点和突变频率,了解目前结核分枝杆菌临床分离株耐喹诺酮类药物的基本特点。方法以我室保藏H<sub>37</sub>Rv(ATCC272294),H37Ra (ATCC251 77)菌株以及由我所参比实验室提供的具有在改良罗氏培养基上获取的。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因点突变 氧氟沙星 分离株 氨基酸 测定结果 临床 突变菌株 位点 耐药菌株
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新一代微测序基因芯片的设计及其耐药性检测效果的初步研究
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作者 孙照刚 张洪静 +7 位作者 李自慧 孙琦 吕琳娜 潘丽萍 Sandy Gilbert 张宗德 许绍发 James Xia 《结核病与胸部肿瘤》 2019年第4期255-261,共7页
目的设计和评价微测序基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法于北京结核病临床数据和样本资源库选取MTB实验室标准菌株(H37Rv)和109株MTB临床分离株,采用绝对浓度法进行表型药物敏感性试验(简称“表型药敏试验”)和基因测序... 目的设计和评价微测序基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法于北京结核病临床数据和样本资源库选取MTB实验室标准菌株(H37Rv)和109株MTB临床分离株,采用绝对浓度法进行表型药物敏感性试验(简称“表型药敏试验”)和基因测序法检测MTB耐药相关基因突变(包括inhA、katG、rpsL、gyrA、rrs、eis、rpoB和embB基因)。以荧光标记探针为基本检测原理设计制备微测序基因芯片,检测109株MTB临床分离株耐药基因突变,分析微测序基因芯片的检测效能。结果通过表型药敏试验及基因测序检测,明确了109株MTB临床分离株耐药相关基因(inhA、katG、rpsL、gyrA.rrs、eis、rpoB和embB基因)突变位点及突变形式。微测序耐药检测基因芯片初期设计包含了katG、inhA、rpoB、gyrA、embB、rpsL、rrs和eis基因的目前已报道的所有突变位点的全部已知突变形式,共计220条探针,并确认出67条优秀探针。采用包含67条探针的微测序耐药检测基因芯片对109株MTB临床分离株进行检测。结果发现,与测序结果相比,除检测embB基因突变的2条探针外,其余65条探针检测碱基突变形式的符合率均超过95%,其中42条探针检测的符合率达到100.00%。以测序结果为参照标准,基因芯片检测对embB基因、gyrA基因、inhA基因、katG基因、rpoB基因、rpsL基因、eis基因和rrs基因突变检测的敏感度分别为64.21%(61/95)、80.00%(8/10)、95.83%(23/24)、98.55%(68/69)、92.63%(88/95)、93.85%(61/65)、75.00%(3/4)和94.44%(17/18);特异度分别为92.86%(13/14)、100.00%(99/99)、97.65%(83/85)、87.50%(35/40)、85.71%(12/14)、63.64%(28/44).100.00%(105/105)和98.90%(90/91);Kappa值分别为0.29、0.88、0.92、0.88、0.68、0.60、0.85、0.93。结论本研究研发设计了一套包含67条探针微测序耐药基因检测芯片,经过初步验证后证明其检测MTB耐药相关基因突变的效能较好,对embB基因的耐药检测探针还需进一步优化,使之更好的满足临床需求。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 结核 抗多种药物性 微生物敏感性试验 基因 突变 芯片分析技术 技术评估 生物医学
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适用于结核分枝杆菌微测序耐药基因芯片的多重PCR体系的优化与评价
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作者 孙照刚 李自慧 +4 位作者 张洪静 孙琦 潘丽萍 张宗德 许绍发 《结核病与胸部肿瘤》 2020年第1期7-10,共4页
目的优化结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系并评估其优缺点。方法利用改进的方法提取结核分枝杆菌基因组DNA,优化适合扩增rpoB,katG,mab4/inhA,pncA,embB,gyrA,rpsL,rrs和eis耐药基因片段的多重PCR体系,经测序确定所扩增出的基... 目的优化结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系并评估其优缺点。方法利用改进的方法提取结核分枝杆菌基因组DNA,优化适合扩增rpoB,katG,mab4/inhA,pncA,embB,gyrA,rpsL,rrs和eis耐药基因片段的多重PCR体系,经测序确定所扩增出的基因片段,计算PCR操作过程所用的时间和材料成本等,分析多重PCR反应体系存在的优缺点。结果经过优化煺火温度、引物浓度以及添加NH*和二甲基亚砜可以较好的扩增出5重和4重PCR产物,达到两管同时扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因的目的。利用该条件可以扩增出全部培养出的135株菌株DNA样本和80.56%的痰菌DNA样本,并且可以缩短PCR操作时间、降低试剂耗材成本,减少操作失误。结论优化的两管多重PCR法在同时扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因,具有明显的优势,具有良好的实用价值。 展开更多
关键词 结核病 分枝杆菌 结核 耐药 基因 多重PCR
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