背景:近年来,由嘌呤代谢紊乱引起的高尿酸血症的发病率不断增加,可诱导炎症反应并导致肾损伤。目的:探讨溶质载体家族2成员12(solute carrier family 2 member 12,SLC2A12)在高尿酸相关肾损伤中的作用和机制。方法:将肾小管细胞(HK2细胞...背景:近年来,由嘌呤代谢紊乱引起的高尿酸血症的发病率不断增加,可诱导炎症反应并导致肾损伤。目的:探讨溶质载体家族2成员12(solute carrier family 2 member 12,SLC2A12)在高尿酸相关肾损伤中的作用和机制。方法:将肾小管细胞(HK2细胞)分为5组:HK2组、HK2+尿酸组、HK2+尿酸+NC组、HK2+尿酸+siSLC2A12组、HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组。用尿酸处理HK2细胞后转染siRNA SLC2A12,再通过MK-2206处理抑制AKT表达。采用CCK-8检测细胞增殖能力,TUNEL检测细胞凋亡情况,qRT-PCR和Western blot检测纤维化因子以及AKT/FOXO3a途径相关因子的表达,酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中炎性细胞因子水平。结果与结论:①与HK2组比较,HK2+尿酸组细胞增殖能力降低,细胞凋亡增多,HK2+尿酸+siSLC2A12组细胞增殖能力进一步降低,凋亡细胞进一步增多;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组细胞增殖能力升高,凋亡细胞减少;②与HK2组比较,HK2+尿酸组细胞中结缔组织生长因子、α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β表达升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组3种因子表达进一步升高;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组3种因子表达有所下降;③与HK2组比较,HK2+尿酸组p-AKT、FOXO3a、p-FOXO3a表达升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组p-AKT表达进一步升高,而FOXO3a、p-FOXO3a表达下降;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组p-AKT表达下降,FOXO3a、p-FOXO3a表达升高;④与HK2组比较,HK2+尿酸组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α分泌水平升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平进一步升高;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平下降;⑤结果表明,SLC2A12可能通过激活FOXO3a途径抵抗尿酸诱导的肾小管纤维化及炎症反应,从而保护高尿酸血症诱导的肾脏损伤。展开更多
文摘背景:近年来,由嘌呤代谢紊乱引起的高尿酸血症的发病率不断增加,可诱导炎症反应并导致肾损伤。目的:探讨溶质载体家族2成员12(solute carrier family 2 member 12,SLC2A12)在高尿酸相关肾损伤中的作用和机制。方法:将肾小管细胞(HK2细胞)分为5组:HK2组、HK2+尿酸组、HK2+尿酸+NC组、HK2+尿酸+siSLC2A12组、HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组。用尿酸处理HK2细胞后转染siRNA SLC2A12,再通过MK-2206处理抑制AKT表达。采用CCK-8检测细胞增殖能力,TUNEL检测细胞凋亡情况,qRT-PCR和Western blot检测纤维化因子以及AKT/FOXO3a途径相关因子的表达,酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中炎性细胞因子水平。结果与结论:①与HK2组比较,HK2+尿酸组细胞增殖能力降低,细胞凋亡增多,HK2+尿酸+siSLC2A12组细胞增殖能力进一步降低,凋亡细胞进一步增多;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组细胞增殖能力升高,凋亡细胞减少;②与HK2组比较,HK2+尿酸组细胞中结缔组织生长因子、α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β表达升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组3种因子表达进一步升高;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组3种因子表达有所下降;③与HK2组比较,HK2+尿酸组p-AKT、FOXO3a、p-FOXO3a表达升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组p-AKT表达进一步升高,而FOXO3a、p-FOXO3a表达下降;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组p-AKT表达下降,FOXO3a、p-FOXO3a表达升高;④与HK2组比较,HK2+尿酸组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α分泌水平升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平进一步升高;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平下降;⑤结果表明,SLC2A12可能通过激活FOXO3a途径抵抗尿酸诱导的肾小管纤维化及炎症反应,从而保护高尿酸血症诱导的肾脏损伤。
