烟草甲基亚硝胺吡啶基丁酮诱发HPV-18永生化人类支气管上皮细胞恶性转化 被引量：5

1

作者 孙红琰 龚诒芬 +3 位作者 王全立 陈君石 杨陟华 杜芝燕 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期95-96,共2页

观察了烟草特异亚硝胺ＮＮＫ诱发ＨＰＶ－１８永生化人类支气管上皮细胞（ＢＥＰ２Ｄ）恶性转化过程中细胞生物学特征的变化。５００ｍｇ／ＬＮＮＫ处理ＢＥＰ２Ｄ细胞一天后，细胞在体外可连续传代，第５代细胞显示抗血清生长；第１５... 观察了烟草特异亚硝胺ＮＮＫ诱发ＨＰＶ－１８永生化人类支气管上皮细胞（ＢＥＰ２Ｄ）恶性转化过程中细胞生物学特征的变化。５００ｍｇ／ＬＮＮＫ处理ＢＥＰ２Ｄ细胞一天后，细胞在体外可连续传代，第５代细胞显示抗血清生长；第１５代细胞在半固体琼脂中的集落形成率（０．０３８％））为对照细胞（０．００３３％）的１１倍；第２５代细胞在裸鼠体内成瘤，组织学证实为高分化鳞状细胞癌。以上结果表明ＮＮＫ致ＢＥＰ２Ｄ细胞恶性转化是一种多阶段的发展过程。该培养体系为深入研究人类支气管上皮细胞多阶段癌变的细胞和分子机制提供了一种理想的生物材料。 展开更多

关键词 烟草 NNK 支气管上皮细胞 癌变 肺癌

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母体慢性氟暴露对仔鼠免疫功能的影响 被引量：3

2

作者 孙红琰 乔赐彬 +1 位作者 孟宪才 刘爱军 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 1994年第5期271-273,共3页

通过亲代雌鼠慢性染毒，系统研究了氟对Ｆ１代仔鼠免疫机能的影响。结果表明，氟可明显抑制仔鼠足垫肿胀反应、脾ＩｇＭ抗体形成细胞活性以及胸腺细胞ＤＮＡ和蛋白质的合成，并降低末梢血中Ｔ淋巴细胞百分率。本研究为寻找母体慢性氟暴... 通过亲代雌鼠慢性染毒，系统研究了氟对Ｆ１代仔鼠免疫机能的影响。结果表明，氟可明显抑制仔鼠足垫肿胀反应、脾ＩｇＭ抗体形成细胞活性以及胸腺细胞ＤＮＡ和蛋白质的合成，并降低末梢血中Ｔ淋巴细胞百分率。本研究为寻找母体慢性氟暴露对后代危害的早期敏感指标提供了理论依据。 展开更多

关键词 氟 仔鼠 免疫功能 DNA 蛋白质

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烟草致癌物诱发人支气管上皮恶性转化细胞中p16基因的变化 被引量：1

3

作者 孙红琰 龚诒芬 +3 位作者 王全立 陈君石 杜芝燕 杨陟华 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期135-136,共2页

采用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测ＮＮＫ诱发ＢＥＰ２Ｄ恶性转化细胞中ｐ１６基因变化。与对照组比较，转化细胞中ｐ１６基因的Ｅ１．β外显子带型出现变异，而第１～３外显子均未见泳动变位，提示Ｅ１．β外显子突变和／或缺失所致细... 采用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测ＮＮＫ诱发ＢＥＰ２Ｄ恶性转化细胞中ｐ１６基因变化。与对照组比较，转化细胞中ｐ１６基因的Ｅ１．β外显子带型出现变异，而第１～３外显子均未见泳动变位，提示Ｅ１．β外显子突变和／或缺失所致细胞周期失调是ＮＮＫ诱发人类支气管上皮细胞癌变的可能原因之一。 展开更多

关键词 支气管上皮细胞 癌变 P16基因 烟草致癌物 NNK

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烟草特异亚硝胺NNK诱发人胎肺细胞癌变启动模型的建立 被引量：3

4

作者 孙红琰 龚诒芬 +2 位作者 王全立 杜芝燕 杨陟华 《中国公共卫生学报》 1998年第5期282-284,共3页

观察烟草特异亚硝胺ＮＮＫ在诱发人胎肺组织（ＨＦＬＴ）癌变中的启动作用。结果显示：（１）在０～５００μｇ／ｍｌ范围内，ＨＬＦＴ中８ＯＨｄＧ含量随ＮＮＫ剂量的增加而增高；（２）５００μｇ／ｍｌＮＮＫ处理组ＨＬＦＴＤＮ... 观察烟草特异亚硝胺ＮＮＫ在诱发人胎肺组织（ＨＦＬＴ）癌变中的启动作用。结果显示：（１）在０～５００μｇ／ｍｌ范围内，ＨＬＦＴ中８ＯＨｄＧ含量随ＮＮＫ剂量的增加而增高；（２）５００μｇ／ｍｌＮＮＫ处理组ＨＬＦＴＤＮＡ与Ｎｅｕ基因共转染后所得Ｇ４１８抗性细胞可在裸鼠体内形成纤维肉瘤，且细胞形态呈多角形，提示ＮＮＫ所致ＨＬＦＴＤＮＡ损伤使其获得了转化Ｒａｔ１细胞的潜能。说明ＮＮＫ在诱导ＨＬＦＴ癌变中发挥启动作用。 展开更多

关键词 烟草特异亚硝胺 肺癌启动模型 人胎 肺细胞癌变

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随机单链DNA文库SELEX筛选寡核苷酸适配子方法的建立 被引量：17

5

作者 詹林盛 邵宁生 +2 位作者 彭剑淳 孙红琰 王全立 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期151-155,共5页

指数富集配基的系统进化 (SELEX)技术是一种新的组合化学技术 .体外构建了一个长度为 81nt、含有35个随机序列的单链DNA (ssDNA)文库 ,优化了ssDNA文库扩增为双链DNA (dsDNA)文库的PCR反应条件 .通过对比不对称PCR和生物素 -链亲和素磁... 指数富集配基的系统进化 (SELEX)技术是一种新的组合化学技术 .体外构建了一个长度为 81nt、含有35个随机序列的单链DNA (ssDNA)文库 ,优化了ssDNA文库扩增为双链DNA (dsDNA)文库的PCR反应条件 .通过对比不对称PCR和生物素 -链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果 ,确定了以生物素 -链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA .由于脱氧核糖核酸的疏水性导致ssDNA文库与硝酸纤维素滤膜的结合背景过高 ,因此选择以微孔板为介质 ,分离与靶蛋白结合的适配子 .经过 9轮循环筛选 ,随机ssDNA文库与丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白 (C蛋白 )的结合率从 0 . 5 %上升到 32 . 5 % . 展开更多

关键词 随机单链DNA文库 SELEX技术 筛选 寡核苷酸适配子 丙型肝炎病毒核心蛋白

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HCVNS3基因片段酵母展示文库的构建和鉴定 被引量：8

6

作者 贾帅争 孙红琰 +4 位作者 刘晓达 杜芝燕 杜勇 王全立 章扬培 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-60,共5页

HCV NS3特异的 CD4+T细胞反应与 HCV感染的良性转归相关 .为了筛选其 CD4+T细胞表位 ,构建了 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .首先 DNase 不完全酶切 HCV NS3基因产生长度为 1 0 0～ 30 0 bp的随机片段 ,然后在它们两端加上含限制性内切... HCV NS3特异的 CD4+T细胞反应与 HCV感染的良性转归相关 .为了筛选其 CD4+T细胞表位 ,构建了 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .首先 DNase 不完全酶切 HCV NS3基因产生长度为 1 0 0～ 30 0 bp的随机片段 ,然后在它们两端加上含限制性内切酶 Bam H 作用位点的接头 ,再以接头序列作引物进行 PCR扩增 .最后扩增产物用 Bam H 酶切后与 Bam H 线性化的穿梭载体 p YD1连接 ,转化大肠杆菌 (E.coli) DH5α,共得到 2× 1 0 6个转化子 .转化菌落的 PCR扩增结果表明 ,约 50 %转化子含插入片段 .随机选择 5个插入片段测序 ,然后与 DNA序列数据库中的序列比较 .结果显示它们分别与 HCV NS3序列有 96%～ 99%的同源性 .用从转化菌落中提取的质粒转化酵母 (S.cerevisiae)菌株 EBY1 0 0 ,得到含 2× 1 0 5个插入片段的 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .半乳糖诱导的酵母细胞通过和 FITC标记的抗体结合 ,用 FACS可以在 2 0 %的细胞表面检测到融合蛋白的表达 . 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白3 酵母展示 基因片段随机文库

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NNK诱发人支气管上皮细胞恶性转化及氧化损伤机理研究 被引量：16

7

作者 杨陟华 朱茂祥 +2 位作者 龚诒芬 徐勇 孙红琰 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1999年第4期184-188,共5页

本文研究ＮＮＫ诱发人支气管上皮细胞（ＢＥＰ２Ｄ）恶性转化及其氧化损伤机理。结果表明，５００μｇ／ｍｌ的ＮＮＫ作用后的第５代细胞具有抗血清生长能力，第１５代细胞具有锚着独立生长特性，第２５代细胞具有裸鼠体内成瘤性，提示... 本文研究ＮＮＫ诱发人支气管上皮细胞（ＢＥＰ２Ｄ）恶性转化及其氧化损伤机理。结果表明，５００μｇ／ｍｌ的ＮＮＫ作用后的第５代细胞具有抗血清生长能力，第１５代细胞具有锚着独立生长特性，第２５代细胞具有裸鼠体内成瘤性，提示ＮＮＫ诱发ＢＥＰ２Ｄ细胞发生了恶性转化。ＮＮＫ作用后，ＢＥＰ２Ｄ细胞产生的过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）、超氧阴离子（Ｏ÷２）和羟自由基（·ＯＨ），以及８－羟基脱氧鸟嘌呤（ＯＨ８ｄＧ）含量均显著增高，提示ＮＮＫ致ＢＥＰ２Ｄ细胞恶性转化过程中涉及到氧化损伤的机理。 展开更多

关键词 NNK BEP2D细胞 恶性转化 DNA加合物 肺癌

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三氧化二砷对NB4及Jurkat细胞系端粒酶活性的抑制效应 被引量：9

8

作者 王韫芳 孙红琰 +1 位作者 李昕权 王全立 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期359-362,共4页

为了探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对白血病细胞系NB4及Jurkat细胞端粒酶活性的调节作用和机制 ,采用MTT、基因组DNA电泳、蛋白 /DNA双参数流式细胞术 ,端粒重复扩增 (TRAP) SYBRGreenⅠ染色及RT PCR等方法研究了As2 O3 对两种细胞的增殖... 为了探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对白血病细胞系NB4及Jurkat细胞端粒酶活性的调节作用和机制 ,采用MTT、基因组DNA电泳、蛋白 /DNA双参数流式细胞术 ,端粒重复扩增 (TRAP) SYBRGreenⅠ染色及RT PCR等方法研究了As2 O3 对两种细胞的增殖及端粒酶活性的影响。研究发现 ,随着As2 O3 作用时间的延长 ,NB4及Jurkat细胞增殖明显受到抑制 ,DNA电泳出现“梯状”条带 ;流式细胞术检出亚G1峰 ,细胞周期阻滞于G1和G2 /M期 ,端粒酶活性显著降低 ,部分细胞周期及凋亡相关的调控蛋白的表达发生变化。结论 :As2 O3 在抑制NB4及Jurkat细胞增殖和诱导其凋亡过程中导致端粒酶的活性下调 ,细胞周期及凋亡相关蛋白的表达改变可能参与了部分作用机制。 展开更多

关键词 三氧化二砷 NB4细胞系 Jurkat细胞系 端粒酶 细胞周期

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蜂胶-银离子复合纳米乳剂的研制及其杀菌活性评价 被引量：9

9

作者 王嘉军 刘敏霞 +4 位作者 王全立 周勇 高明 甘慧 孙红琰 《中国消毒学杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期289-292,共4页

复合纳米消毒乳剂是以蜂胶和银离子为主要抗菌成分，为了解其理化性能、杀菌效果及安全性，采用悬液定量杀菌试验和动物实验及仪器分析方法进行了实验室研究。结果，该复合纳米消毒乳剂含蜂胶20g／L，总黄酮含量为5．61g／L，银离子含量... 复合纳米消毒乳剂是以蜂胶和银离子为主要抗菌成分，为了解其理化性能、杀菌效果及安全性，采用悬液定量杀菌试验和动物实验及仪器分析方法进行了实验室研究。结果，该复合纳米消毒乳剂含蜂胶20g／L，总黄酮含量为5．61g／L，银离子含量为50μg/L。透射电镜观察可见复合乳剂中颗粒直径在30～100nm，分布均匀。以含体积分数6．25％的复合纳米消毒乳剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌作用1min，杀灭率达到100％；以含体积分数12．5％该消毒乳液对白色念珠菌作用5min，杀灭率亦达100％。该纳米消毒乳液小鼠急性经口毒性LD50〉5000mg／kg，属实际无毒；该乳剂原液对家兔皮肤、眼结膜和阴道粘膜刺激指数均为0，属于无刺激性。结论，复合纳米消毒乳剂具有良好的杀灭细菌繁殖体和酵母菌的作用，动物试验结果属于无毒类物质、对皮肤粘膜无刺激。 展开更多

关键词 蜂胶 总黄酮 纳米 乳剂 毒性 杀菌作用 细菌繁殖体 酵母菌

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血源性病原体的检测与血液及血液制品的安全性 被引量：8

10

作者 王全立 刘晓达 +2 位作者 孙红琰 丁晓萍 杜芝燕 《临床输血与检验》 CAS 1999年第3期52-58,共7页

血液及其制品的生物污染问题一直是医学界的研究热点．更由于81年发现血友病患者因注射凝血因子Ⅷ和Ⅸ浓缩制剂感染艾滋病病毒(HIV)而备受关注。生物污染的微生物类包括原虫(疟疾)、螺旋体(梅毒)、细菌和病毒．其中又以肝炎病毒(HBV、H... 血液及其制品的生物污染问题一直是医学界的研究热点．更由于81年发现血友病患者因注射凝血因子Ⅷ和Ⅸ浓缩制剂感染艾滋病病毒(HIV)而备受关注。生物污染的微生物类包括原虫(疟疾)、螺旋体(梅毒)、细菌和病毒．其中又以肝炎病毒(HBV、HCV)和HIV的危害最大。我国的输血后肝炎发病率较高．如乙肝为0．1％． 展开更多

关键词 HIV 性病 血液制品 病原体 血源性 输血后肝炎 疟疾 生物污染 研究热点 微生物

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噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选 被引量：8

11

作者 赵云峰 王海涛 +5 位作者 王全立 杜芝燕 杨景庚 孙红琰 马立人 殷震 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期20-24,共5页

构建人源噬菌体抗体文库如下：ＨＩＶ感染者脾细胞中提取ｍＲＮＡ，经反转录再以人ＩｇＧ重链Ｆｄ两端及轻链“通用”引物分别扩增Ｆａｂ基因片段，依次插入到噬菌粒载体ｐＣｏｍｂ３中，电转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，经辅助噬菌体... 构建人源噬菌体抗体文库如下：ＨＩＶ感染者脾细胞中提取ｍＲＮＡ，经反转录再以人ＩｇＧ重链Ｆｄ两端及轻链“通用”引物分别扩增Ｆａｂ基因片段，依次插入到噬菌粒载体ｐＣｏｍｂ３中，电转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，经辅助噬菌体救助，重组噬菌体得以溶源裂解，Ｆａｂ表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的Ｎ端．此噬菌体抗体库的容量为５×１０５．筛选抗ＨＩＶ－１同时又具有能被抗独特型抗体“ＩＦ７”所识别的独特型的阳性抗体：以重组包膜糖蛋白ｇｐ１６０及ｇｐ４１多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选，使抗ｇｐ１６０的特异性抗体得到１００倍的富集．然后通过直接ＥＬＩＳＡ和竞争性ＥＬＩＳＡ实验筛选出两株结合性较好的特异性抗ｇｐ１６０抗体－３Ｂ株与１Ｄ株．直接ＥＬＩＳＡ实验表明这两株克隆均能被“１Ｆ７”所识别，为抗独特型多肽的筛选奠定了基础． 展开更多

关键词 噬菌体 HIV 独特型抗体 抗体文库

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脱氧核酶研究进展 被引量：4

12

作者 詹林盛 王全立 孙红琰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期42-45,共4页

使用体外分子进化技术 ,从一个人工合成的随机多核苷酸单链DNA库中筛选出具有酶活性的DNA分子 ,称为脱氧核酶 .目前已经筛选出具有RNA切割作用、DNA切割作用、金属螯合作用和过氧化物酶活性、DNA激酶活性以及DNA连接酶活性等多种催化功... 使用体外分子进化技术 ,从一个人工合成的随机多核苷酸单链DNA库中筛选出具有酶活性的DNA分子 ,称为脱氧核酶 .目前已经筛选出具有RNA切割作用、DNA切割作用、金属螯合作用和过氧化物酶活性、DNA激酶活性以及DNA连接酶活性等多种催化功能的脱氧核酶 .特别是脱氧核酶 10～ 2 3,无论在体外应用于RNA限制性内切酶 ,还是在生物系统内作为RNA水平上的基因失活剂 ,都具有很好的应用前景 . 展开更多

关键词 脱氧核酶 体外筛选 催化活性 脱氧核酶10-23 研究进展

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HCV抗原表位预测 被引量：2

13

作者 贾帅争 孙红琰 王全立 《生物技术通讯》 CAS 2001年第1期15-17,共3页

应用网络生物信息资源查找丙型肝炎病毒基因组全序列 ,用软件Lasergene中的EditSeq将来自中国河北株mRNA序列翻译为氨基酸序列 ,尔后用程序Protean进行氨基酸序列分析 ,对HCV各区段的B细胞抗原指数进行预测。同时又在两个网站对中国汉... 应用网络生物信息资源查找丙型肝炎病毒基因组全序列 ,用软件Lasergene中的EditSeq将来自中国河北株mRNA序列翻译为氨基酸序列 ,尔后用程序Protean进行氨基酸序列分析 ,对HCV各区段的B细胞抗原指数进行预测。同时又在两个网站对中国汉族人中频率较高的HLA基因型进行CD8和CD4T细胞表位预测。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 抗原表位 预测 疫苗 HCV

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丙型肝炎病毒检测技术的研究进展 被引量：3

14

作者 王怡 孙红琰 王全立 《国外医学（输血及血液学分册）》 2001年第5期422-425,共4页

丙型肝炎病毒(HCV)的实验室检测技术主要包括抗体、核酸以及抗原检测。随着对感染过程的研究和临床诊断的需求,这些技术也日趋成熟。新的检测技术灵敏度和特异性更高,并且基因型的影响逐渐被克服。新兴的核酸配体技术将使传统的HCV检测... 丙型肝炎病毒(HCV)的实验室检测技术主要包括抗体、核酸以及抗原检测。随着对感染过程的研究和临床诊断的需求,这些技术也日趋成熟。新的检测技术灵敏度和特异性更高,并且基因型的影响逐渐被克服。新兴的核酸配体技术将使传统的HCV检测方法发生巨大的改变。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 检测 核酸配体 酶免疫 多聚体肽 嵌合抗原 重组免疫印迹试验

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砷化合物抗肿瘤作用分子机制的研究进展 被引量：1

15

作者 王韫芳 李昕权 孙红琰 《国外医学（输血及血液学分册）》 2001年第2期134-137,共4页

继中国学者发现As_2O_3通过诱导细胞凋亡及部分分化治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)后,大量研究表明,砷化合物通过开放线粒体通透性转运孔道,破坏线粒体跨膜电位,改变胞质钙离子(Ca^(2+))浓度及氧化还原电位,活化caspase家族,与巯基氧化... 继中国学者发现As_2O_3通过诱导细胞凋亡及部分分化治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)后,大量研究表明,砷化合物通过开放线粒体通透性转运孔道,破坏线粒体跨膜电位,改变胞质钙离子(Ca^(2+))浓度及氧化还原电位,活化caspase家族,与巯基氧化或交联及下调Bcl-2活性等选择性诱导某些肿瘤细胞凋亡,为临床使用砷化合物治疗血液系统恶性疾病及实体肿瘤提供了新的理论。 展开更多

关键词 砷化合物 抗肿瘤作用 分子机制 细胞凋亡 肿瘤 治疗

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NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区的表达及纯化

16

作者 李晖 崔玉 +4 位作者 周勇 彭剑淳 孙红琰 詹林盛 王全立 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期943-945,960,共4页

目的表达并纯化NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区。方法以pUC57-KIR3DL1为模板,PCR扩增KIR3DL1胞外区序列,与pGEM-T载体进行A-T克隆;测序正确后,采用定向克隆的方法将KIR3DL11胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建了pET28a-D... 目的表达并纯化NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区。方法以pUC57-KIR3DL1为模板,PCR扩增KIR3DL1胞外区序列,与pGEM-T载体进行A-T克隆;测序正确后,采用定向克隆的方法将KIR3DL11胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建了pET28a-DsbA/KIR3DL1重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DL1融合蛋白表达,溶解于8mol/L尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Superdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和Westernblot鉴定目的蛋白的表达及纯化。结果表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度95%以上的DsbA-KIR3DS1融合蛋白。结论KIR3DL1胞外区的成功表达及纯化为进一步研究KIR3DL1与相应配体之间的相互作用奠定了基础。 展开更多

关键词 NK细胞免疫球蛋白样受体 原核表达 蛋白纯化

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抗HIV-1 gp160独特型阳性抗体的序列分析及表达

17

作者 赵云峰 王全立 +5 位作者 杜芝燕 孙红琰 杨景庚 王海涛 马立人 殷震 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期377-381,共5页

为了确定从噬菌体抗体文库中筛选出的抗体的属性和方便目的基因的表达及其产物的纯化，对两株具有“１Ｆ７”独特型的抗ＨＩＶ－１ｇｐ１６０抗体基因进行了序列分析并构建了可溶性表达载体．发现３Ｂ株含有完整的Ｆａｂ段，１Ｄ株只有... 为了确定从噬菌体抗体文库中筛选出的抗体的属性和方便目的基因的表达及其产物的纯化，对两株具有“１Ｆ７”独特型的抗ＨＩＶ－１ｇｐ１６０抗体基因进行了序列分析并构建了可溶性表达载体．发现３Ｂ株含有完整的Ｆａｂ段，１Ｄ株只有重链Ｆｄ段．序列测定表明两株克隆的Ｆｄ段基因完全相同，其可变区ＶＨ属于ＶＨⅠ亚群，而３Ｂ株的“轻链”序列与已知的人的κ和λ轻链无同源性．用从另外的Ｆａｂ抗体文库中筛选出来的３株抗乙肝表面抗原抗体的轻链与３Ｂ的重链重组，并选择一个ＨＩＶ－１ｇｐ１６０特异性较好的重组抗体株，命名为３Ｂｓ．构建了１Ｄ株与３Ｂｓ株的可溶性表达载体，免疫印迹实验证实了具有“１Ｆ７”独特型的抗ｇｐ１６０独特型阳性抗体的表达． 展开更多

关键词 噬菌体抗体文库 序列分析 表达

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母体氟暴露对仔代胸腺酶组化与超微结构的影响

18

作者 陈培忠 孙红琰 +3 位作者 秦玉平 乔赐彬 孟宪才 高红旭 《中国地方病防治》 1999年第6期324-326,共3页

本文观察了小鼠母体氟暴露对仔代胸腺酶组织化学与超微结构的影响,结果显示:(1)酶组化观察中发现高剂量组仔鼠胸腺AKP、ACP、Ca^(2+)-ATP酶活性显著降低;(2)高剂量染氟组仔鼠胸腺电镜下可见上皮细胞、胸腺细胞核染色质固缩成块状且分布... 本文观察了小鼠母体氟暴露对仔代胸腺酶组织化学与超微结构的影响,结果显示:(1)酶组化观察中发现高剂量组仔鼠胸腺AKP、ACP、Ca^(2+)-ATP酶活性显著降低;(2)高剂量染氟组仔鼠胸腺电镜下可见上皮细胞、胸腺细胞核染色质固缩成块状且分布不均;线粒体嵴断裂或消失;上皮细胞与胸腺细胞之间连接松弛,间隙增大等。表明氟化物可损伤胸腺细胞,胸腺上皮细胞,直接或间接影响胸腺细胞的发育,进而导致后代的免疫功能降低。 展开更多

关键词 氟 胸腺 酶组织化学 超微结构 仔鼠 氟中毒

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配体指数级系统进化技术及其在实验诊断中的应用

19

作者 詹林盛 王全立 孙红琰 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 2001年第4期181-182,共2页

SELEX技术是一种新的组合化学技术 ,利用该技术从随机寡核苷酸文库中筛选出与靶分子结合的寡核苷酸配基 ,具有极高的亲和力和特异性 ,在临床诊断中比蛋白类抗体有更明显的优越性 ,显示出广阔的应用前景。

关键词 SELEX技术 寡核苷酸配基 实验室诊断

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氟对小鼠胸腺及上皮细胞形态与功能的影响 被引量：8

20

作者 陈培忠 孙红琰 +6 位作者 云中杰 高红旭 马爱华 王玉涛 孙国栋 孟宪才 乔赐彬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期21-24,共4页

目的研究氟化物对胸腺上皮细胞的毒性作用及对胸腺细胞发育的影响,探讨其作用机制。方法采用小鼠胸腺上皮细胞原代体外培养及与胸腺细胞混合培养技术,观察不同剂量氟化钠(NaF)对小鼠胸腺上皮细胞形态与功能的损伤情况及胸腺细胞在NaF处... 目的研究氟化物对胸腺上皮细胞的毒性作用及对胸腺细胞发育的影响,探讨其作用机制。方法采用小鼠胸腺上皮细胞原代体外培养及与胸腺细胞混合培养技术,观察不同剂量氟化钠(NaF)对小鼠胸腺上皮细胞形态与功能的损伤情况及胸腺细胞在NaF处理的小鼠胸腺上皮细胞环境中的生长发育状况。结果染氟组可见小鼠胸腺上皮细胞胞体变圆,折光性增强,胞浆内有空泡形成,小鼠胸腺上皮细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性增强,胸腺上皮细胞合成DNA和蛋白质的能力降低,白细胞介素1(IL-1)分泌量减少,并呈一定的剂量反应关系。不同剂量NaF处理的小鼠胸腺上皮细胞与新鲜的胸腺细胞混合培养,随着染氟剂量的增加,胸腺细胞摄取3H-Tdr和3H-Leu的能力降低,活细胞数目逐渐减少。结论高氟能够直接损伤小鼠胸腺上皮细胞、破坏胸腺微环境,进而导致胸腺细胞发育障碍,影响免疫功能。 展开更多

关键词 氟化物 胸腺 上皮细胞 体外研究

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