血栓显像剂^(99m)Tc-SZ-51药盒的制备及对犬肺栓塞模型的显像研究 被引量：4

1

作者 季顺东 方纬 +4 位作者 王锋 刘秀杰 史蓉芳 吴锦昌 阮长耿 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期947-951,共5页

研究99mTc标记抗人P -选择素 (P -Selectin)单克隆抗体SZ - 5 1血栓显像药盒的制备方法 ,并观察其在检测肺栓塞及鉴别新鲜和陈旧肺栓塞中的作用。用 2 -亚氨基噻吩盐酸盐 (2 -IT)修饰SZ - 5 1。用99mTc-GH转换络合标记法标记IT -SZ - 5 ... 研究99mTc标记抗人P -选择素 (P -Selectin)单克隆抗体SZ - 5 1血栓显像药盒的制备方法 ,并观察其在检测肺栓塞及鉴别新鲜和陈旧肺栓塞中的作用。用 2 -亚氨基噻吩盐酸盐 (2 -IT)修饰SZ - 5 1。用99mTc-GH转换络合标记法标记IT -SZ - 5 1。分别用快速薄层层析法、酶联免疫吸附法 (ELISA)测定标记物的标记率及生物活性。单抗SZ - 5 1以最佳标记条件制备体内血栓显像药盒 ,对 8只犬肺栓塞模型进行了放射免疫显像。结果表明 ,单抗SZ - 5 1用最佳 2 -IT比例修饰后 ,快速薄层层析法测得标记率为 90 %— 95 %,ELISA表明抗体保留了免疫活性。注入显像剂99mTcSZ - 5 11h后血栓部位开始显影并 3h内逐渐清晰。注射后 3h ,在体显像及离体显像两者的放射性比值分别为 5 .3± 0 .5和 7.0± 1.2 ,形成 1天的新鲜血栓的放射性摄取明显高于形成一周的血栓 ,离体组织测定两者比值达 2 .6 5。 展开更多

关键词 血栓显像剂 ^99mTc-SZ-51 单克隆抗体 肺栓塞 放射免疫显像 动物实验 锝99 放射性核素 放射性药盒 治疗 诊断

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^(99)Tc^m标记人源化抗人血小板膜糖蛋白Ⅲa单克隆抗体SZ21F(ab)_2血栓栓塞显像 被引量：4

2

作者 季顺东 方纬 +4 位作者 范磊 董宁征 刘秀杰 阮长耿 何作祥 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期173-176,共4页

目的用动物血栓栓塞模型显像评估^(99)Tc^m 标记人源化抗人血小板膜糖蛋白(GP)Ⅲa单克隆抗体(简称单抗)F(ab)_2片段 SZ21F(ab)_2的应用价值。方法通过体外抑制二磷酸腺苷(ADP)诱导的犬血小板聚集实验,评估 SZ21F(ab)_2与血小板结合的亲... 目的用动物血栓栓塞模型显像评估^(99)Tc^m 标记人源化抗人血小板膜糖蛋白(GP)Ⅲa单克隆抗体(简称单抗)F(ab)_2片段 SZ21F(ab)_2的应用价值。方法通过体外抑制二磷酸腺苷(ADP)诱导的犬血小板聚集实验,评估 SZ21F(ab)_2与血小板结合的亲和性和特异性。以2-亚氨基噻吩盐酸盐(IT)法修饰 SZ21F(ab)_2分子的亚氨基,以^(99)Tc^m-葡庚糖酸钠(GH)转换络合法进行标记。分别用快速薄层层析(ITLC)法和 ELISA 测定标记物的放化纯及生物活性。对3条肺动脉血栓和8条(包括上述3条)后肢深静脉血栓栓塞比格犬模型进行显像研究。结果 SZ21F(ab)_2抑制 ADP 诱导的犬富含血小板血浆(PRP)聚集实验的半数有效剂量(IC_(50))为(2.49±1.88)μg/ml。ITLC 法测得标记物的放化纯为90%～95%,ELISA 测定结果表明标记后抗体保留了免疫活性。注射显像剂后1 h,肺动脉血栓部位和后肢深静脉血栓部位均出现放射性浓聚。注射后3 h,在体显像肺动脉血栓和后肢深静脉血栓栓塞模型的放射性靶/本底(T/B)比值分别为3.03±1.18和3.51±0.62。肺动脉血栓部位和后肢深静脉血栓部位的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)分别为0.083%ID/g 和0.076%ID/g。体外检测结果表明:肺动脉血栓与正常肺组织的单位质量放射性比值平均为12.8,后肢深静脉血栓与血液的单位质量放射性比值平均为5.2,与肌肉的比值平均为127.0。结论 ^(99)Tc^m-SZ21F(ab)_2与人血小板具有较高的亲和力,有潜在的血栓显像应用前景。 展开更多

关键词 血栓栓塞 血小板膜糖蛋白类 抗体 单克隆 锝 放射性核素显像

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^(99)Tc^m-抗纤维蛋白单克隆抗体对兔动静脉血栓的放免显像 被引量：3

3

作者 季顺东 张玮 +5 位作者 刘晓健 阮长耿 张荣军 万卫星 金坚 王博诚 《同位素》 CAS 1999年第3期155-158,共4页

以亚氨基噻吩盐酸盐（２ Ｉ Ｔ）法修饰抗纤维蛋白的单克隆抗体（ Ｍｃ Ａｂ） Ｓ Ｚ６３，采用９９ Ｔｃｍ标记葡庚糖酸钠（ Ｇ Ｈ）配体交换法标记。制备实验性兔股动脉和股静脉血栓模型后，经耳缘静脉注入９９ Ｔｃｍ  Ｓ Ｚ... 以亚氨基噻吩盐酸盐（２ Ｉ Ｔ）法修饰抗纤维蛋白的单克隆抗体（ Ｍｃ Ａｂ） Ｓ Ｚ６３，采用９９ Ｔｃｍ标记葡庚糖酸钠（ Ｇ Ｈ）配体交换法标记。制备实验性兔股动脉和股静脉血栓模型后，经耳缘静脉注入９９ Ｔｃｍ  Ｓ Ｚ６３ 进行 Ｓ Ｐ Ｅ Ｃ Ｔ 显像。９９ Ｔｃｍ 标记非特异性鼠 Ｉｇ Ｇ 作为阴性对照。显像结果表明，兔陈旧血栓显像清晰，其最佳显像时间为注射９９ Ｔｃｍ  Ｓ Ｚ６３ 后２～４ ｈ；９９ Ｔｃｍ 标记非特异性 Ｉｇ Ｇ，未见血栓显像。因此９９ Ｔｃｍ  Ｓ Ｚ６３ 具有活体内血栓定位导向能力，显像时间短，用于血栓性疾病的放免显像有一定的可行性。 展开更多

关键词 单克隆抗体 SZ-63 血栓 放射免疫显像 锝99标记

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用2-IT修饰单抗SZ-51制备^(99)Tc^m-IT-SZ-51血栓显像药盒 被引量：3

4

作者 季顺东 张玮 +3 位作者 刘晓健 张荣军 金坚 阮长耿 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期314-316,共3页

目的　研究99Tcm 标记抗P 选择素单克隆抗体SZ 5 1血栓显像药盒的制备方法。方法用 2 亚氨基噻吩盐酸盐 (2 IT)修饰SZ 5 1。用99Tcm 葡庚糖酸钠转换络合标记法标记IT SZ 5 1,测定标记物的放化纯度及生物活性 ,以最佳标记条件制备体内... 目的　研究99Tcm 标记抗P 选择素单克隆抗体SZ 5 1血栓显像药盒的制备方法。方法用 2 亚氨基噻吩盐酸盐 (2 IT)修饰SZ 5 1。用99Tcm 葡庚糖酸钠转换络合标记法标记IT SZ 5 1,测定标记物的放化纯度及生物活性 ,以最佳标记条件制备体内血栓显像药盒。结果　以最佳比例修饰SZ 5 1,每分子抗体游离巯基数为 13个 ,纸层析法测得标记率大于 90 % ,酶联免疫吸附测定结果表明标记物保留了抗体的免疫活性。制成的药盒 4℃条件下可保存 3个月。 展开更多

关键词 单克隆抗体 血栓形成 放射免疫显像 锝

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新型凋亡显像剂^(99m)Tc-FM-2的制备及生物分布 被引量：2

5

作者 季顺东 方纬 +4 位作者 周俊东 何作祥 刘秀杰 阮长耿 赵明 《核技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期679-682,共4页

用2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰FM-2。用99mTc-GH转换络合标记法标记IT-FM-2,放化纯可达95%,且室温下可稳定8h以上。小鼠体内分布研究表明99mTc-FM2在体内主要通过肝、肾清除。正常心肌组织摄取率高、清除快。

关键词 FM-2 凋亡 ^(99m)Tc 生物分布

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^(99)Tc^m-抗血栓成分单克隆抗体对动物血栓的放免显像研究 被引量：5

6

作者 季顺东 刘晓健 +3 位作者 张荣军 万卫星 金坚 阮长耿 《苏州医学院学报》 2000年第1期4-7,共4页

目的　评价９９Ｔｃｍ 标记抗血栓成分（ 血小板和纤维蛋白）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ） ＳＺ－ ５１ 和ＳＺ－ ６３，对实验性动物（ 兔、狗）股动脉和股静脉血栓模型显像的作用。方法　以亚氨基噻吩盐酸盐（２ － ＩＴ） 修饰，９９Ｔ... 目的　评价９９Ｔｃｍ 标记抗血栓成分（ 血小板和纤维蛋白）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ） ＳＺ－ ５１ 和ＳＺ－ ６３，对实验性动物（ 兔、狗）股动脉和股静脉血栓模型显像的作用。方法　以亚氨基噻吩盐酸盐（２ － ＩＴ） 修饰，９９Ｔｃｍ 标记葡庚糖酸钠（ＧＨ） 配体交换法标记ＳＺ－ ５１ 和ＳＺ－ ６３。狗、兔股动脉和股静脉血栓模型制备完毕后，耳缘静脉注入９９　Ｔｃｍ － ＳＺ－ ５１或９９Ｔｃｍ － ＳＺ－ ６３ 进行ＳＰＥＣＴ 显像。９９Ｔｃｍ 标记非特异性鼠ＩｇＧ 作为阴性对照。结果　９９Ｔｃｍ － ＳＺ－５１ 和９９Ｔｃｍ － ＳＺ－５１／６３ 对狗新鲜血栓均显示清晰，其最佳显像时间分别为注射后２ ～４ｈ 和０．５ ～２ｈ，而陈旧血栓未见显像。９９Ｔｃｍ － ＳＺ－ ６３ 兔陈旧血栓显示清晰，其最佳显像时间为注射后２ ～４ｈ。结论　９９Ｔｃｍ － ＳＺ－ ５１ 和９９Ｔｃｍ － ＳＺ－ ６３ 具有活体内血栓定位导向能力，显像时间短，用于血栓性疾病的放免显像有一定的可行性。 展开更多

关键词 单克隆抗体 放射免疫显像 血栓形成 ^99TC^M

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肺栓塞诊断进展 被引量：7

7

作者 季顺东 《国外医学（呼吸系统分册）》 2003年第4期212-214,共3页

肺栓塞在我国是较常见的临床疾病 ,但许多患者没有得到正确的诊断 ,影响了治疗和预后。最近几年 ,深静脉血栓 (DVT)和肺栓塞无论在病因学、流行病学还是在诊断学和治疗学方面 ,都有较大进展。本文综述了近年来肺栓塞诊断进展 ,探讨了临... 肺栓塞在我国是较常见的临床疾病 ,但许多患者没有得到正确的诊断 ,影响了治疗和预后。最近几年 ,深静脉血栓 (DVT)和肺栓塞无论在病因学、流行病学还是在诊断学和治疗学方面 ,都有较大进展。本文综述了近年来肺栓塞诊断进展 ,探讨了临床评估、D 二聚体检测、通气 /灌注显像、肺血管造影、螺旋CT等对肺栓塞的诊断价值 ,并对正在研究的放射性核素血栓显像剂进行了综述。 展开更多

关键词 肺栓塞 诊断 肺通气/灌注显像 肺血管造影 D-二聚体 螺旋CT血管造影 放射性核素血栓显像

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血小板聚集功能的新检测方法和仪器的性能评价及临床应用 被引量：24

8

作者 张有涛 赵益明 +6 位作者 季顺东 赵赟霄 蒋敏 金晓华 史进方 顾国浩 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期674-677,共4页

本研究旨在评价对血小板聚集功能检测的新方法及仪器的性能,并建立其参考区间,探讨其临床应用价值。按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的仪器性能验证标准和美国《临床实验室改进修... 本研究旨在评价对血小板聚集功能检测的新方法及仪器的性能,并建立其参考区间,探讨其临床应用价值。按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的仪器性能验证标准和美国《临床实验室改进修正法案-88》(Clinical Laboratory Improvement Amendment 88,CLIA’88法案)制定的评价标准,对PL-11血小板分析仪进行了分析性能评估。用PL-11血小板分析仪测试健康志愿者柠檬酸钠静脉抗凝血的聚集功能,并对测定结果进行统计分析,建立PL-11血小板分析仪本实验室的参考区间。同时收集本院神经内科急性脑梗死(ACI)患者服用氯吡格雷7 d前后血小板最大聚集率(MAR)的变化来探讨PL-11血小板分析仪的临床诊断意义。结果表明,各参数皆符合CLIA'88法案的要求。测得PLR-06、PLR-07、PLR-09、PLR-10血小板诱聚剂诱导的247名健康正常人血小板MAR分别为58.8±10.1(﹪)、61.2±11.8(﹪)、51±10.2(﹪)、53.1±9.2(﹪)。ACI患者MAR在服用氯吡格雷后明显降低。结论:PL-11血小板分析仪检测结果准确可靠,是一种较理想的适用于血栓病早期预警和诊断的新型血小板聚集功能检测仪,值得推广应用。 展开更多

关键词 血小板聚集 血小板分析仪 检测方法

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^(99)Tc^m-FM2心肌细胞凋亡显像的实验研究 被引量：15

9

作者 方纬 王峰 +3 位作者 季顺东 刘秀杰 王自正 何作祥 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期137-140,共4页

目的探讨(99)~Tc^m 标记突触结合蛋白Ⅰ的 C2A 片段-谷胱甘肽转移酶复合物(FM2)在心肌细胞凋亡显像中的应用价值。方法通过基因工程合成 FM2,以2-亚氨基噻吩盐酸盐(IT)修饰,经葡庚糖酸钠(GH)转换标记制备(99)~Tc^m-FM2。(99)~Tc^m-FM2... 目的探讨(99)~Tc^m 标记突触结合蛋白Ⅰ的 C2A 片段-谷胱甘肽转移酶复合物(FM2)在心肌细胞凋亡显像中的应用价值。方法通过基因工程合成 FM2,以2-亚氨基噻吩盐酸盐(IT)修饰,经葡庚糖酸钠(GH)转换标记制备(99)~Tc^m-FM2。(99)~Tc^m-FM2经纯化后,纸层析法测定放化纯。破碎红细胞膜磷脂结合实验检测(99)~Tc^m-FM2在 Ca^(2+)介导下与凋亡细胞表面磷脂结合的能力。以6头小型猪制备心肌凋亡模型,通过心导管将球囊送入并充气阻塞冠状动脉主要分支远端(左前降支、左回旋支或右冠状动脉),20～30 min 后,撤除球囊,造成缺血再灌注损伤,引发急性心肌梗死。注射(99)~Tc^m-FM2后3 h,进行 CT 定位和 SPECT 显像,计算心肌异常高放射性区/本底(T/B)比值。处死动物,体外测定凋亡心肌与正常心肌的单位质量放射性比值。用流式细胞分析和电镜检查验证显像结果。结果 (99)~Tc^m-FM2稳定,放化纯>95%。FM2经(99)~Tc^m 标记后仍保持 Ca^(2+)介导的与膜磷脂特异结合的能力。活体显像:(99)~Tc^m-FM2注射后3 h,凋亡心肌清晰显影,T/B 比值为3.36±0.74。体外测定:缺血再灌注损伤心肌与正常心肌的单位质量放射性比值为11.68±4.02。流式细胞分析和电镜检查均证实心肌高放射性区凋亡心肌组织形成。结论 (99)~Tc^m-FM2在活体内与凋亡心肌组织特异结合,对无创性检测心肌细胞凋亡有潜在应用价值。 展开更多

关键词 心肌梗塞 细胞凋亡 放射性核素显像 突触蛋白类 谷胱甘肽转移酶类

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人vWF-A1区蛋白的表达及其对血小板聚集的抑制作用 被引量：9

10

作者 祝怀平 王迎春 +5 位作者 白霞 季顺东 张威 邵波静 朱明清 阮长耿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期47-50,共4页

目的 :进一步研究血栓形成的机制 ,开发抗血栓药物。方法 :应用基因重组技术在大肠杆菌中表达人vWF -A1区蛋白 ,经过纯化、复性 ,获得重组蛋白 (rvWF -A1) ,同时用流式细胞术检测rvWF -A1与血小板膜糖蛋白血小板膜糖蛋白 (glycoprotein ... 目的 :进一步研究血栓形成的机制 ,开发抗血栓药物。方法 :应用基因重组技术在大肠杆菌中表达人vWF -A1区蛋白 ,经过纯化、复性 ,获得重组蛋白 (rvWF -A1) ,同时用流式细胞术检测rvWF -A1与血小板膜糖蛋白血小板膜糖蛋白 (glycoprotein ,GP)Ib的结合能力 ,应用血小板聚集仪测定rvWF -A1对瑞斯托霉素 (ristocetin)诱导的血小板聚集抑制作用。结果 :重组表达载体pQE -3 1-vWF -A1在大肠杆菌M15中得到高效表达 ,表达的重组蛋白量占菌体总蛋白的 3 0 % ,Ni -NTAagrose柱纯化后 ,其纯度为 95% ,经复性的rvWF -A1蛋白具有良好的生物学活性。它可与血小板模糖蛋白血小板膜糖蛋白GPIb结合 ,阳性率为 78 6% ;它可以抑制ristocetin诱导的血小板聚集 ,抑制率为 84 7%。结论 :在原核细胞中可以成功地高效表达人vWF -A1区蛋白 。 展开更多

关键词 血栓形成 人vWF-A1区蛋白 基因重组 抗血栓药物 血小板聚集 抑制作用 血管性血友病因子

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PAI-1和TAFIa对机体内源性纤溶的调控作用 被引量：5

11

作者 董宁征 吴成亮 +2 位作者 季顺东 江淼 阮长耿 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期749-750,F005,共3页

目的　研究血浆中纤溶酶活化剂抑制物 1(PAI 1)和活化的凝血酶活化的纤溶抑制因子 (TAFIa)增加对机体内源性纤溶的影响。方法　以12 5I 纤维蛋白原进行示踪 ,建立大鼠肺纤维蛋白沉积模型 ;用凝血酶及血栓调节蛋白 (TM)活化TAFI,并用SDS... 目的　研究血浆中纤溶酶活化剂抑制物 1(PAI 1)和活化的凝血酶活化的纤溶抑制因子 (TAFIa)增加对机体内源性纤溶的影响。方法　以12 5I 纤维蛋白原进行示踪 ,建立大鼠肺纤维蛋白沉积模型 ;用凝血酶及血栓调节蛋白 (TM)活化TAFI,并用SDS/PAGE和TAFI活性测定试剂盒进行检测 ;然后用该模型研究PAI 1和TAFIa对大鼠内源性纤溶的作用。结果　 (1)Batroxobin能导致纤维蛋白在大鼠肺组织沉积 ,表现为 5min肺组织放射性记数显著升高 ,而 30min由于内源性纤溶系统激活 ,肺组织放射性记数降低 ;(2 )TAFI经凝血酶 /TM活化后 ,电泳检测到约 36KD的TAFIa条带 ;(3)予TAFIa和PAI 1后 ,抑制了 30min肺同位素量的降低。结论　直接证实血浆中PAI 1和TAFIa增加可抑制纤溶 ,抑制内源性TAFIa和PAI 1可能是防治血栓性疾病的一种新途径。 展开更多

关键词 PAI-1 纤溶 内源性 体内 肺组织 凝血酶 大鼠 并用 活化 降低

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氧化高密度脂蛋白通过MAPKs信号转导途径诱导ECV304细胞表达组织因子 被引量：6

12

作者 卜梓斌 姜志胜 +10 位作者 马珍妮 董宁征 赵战芝 季顺东 沈飞 江淼 王静 谢丽倩 冯雪娟 陈晶晶 阮长耿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期636-641,共6页

目的:探讨氧化高密度脂蛋白(oxHDL)对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞表达组织因子(TF)的影响及其机制。方法:实验分为阴性对照组、阳性对照组(加组胺)、HDL、oxHDL 4组,ECV304细胞经不同浓度oxHDL、HDL(10-120 mg/L)和组胺(1×10-9-1... 目的:探讨氧化高密度脂蛋白(oxHDL)对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞表达组织因子(TF)的影响及其机制。方法:实验分为阴性对照组、阳性对照组(加组胺)、HDL、oxHDL 4组,ECV304细胞经不同浓度oxHDL、HDL(10-120 mg/L)和组胺(1×10-9-1×10-4mol/L)处理不同时间(2-8 h)后,采用实时定量PCR(RQ-PCR)和Western bloting方法检测TF表达。同时,分别应用SP600125[c-Jun氨基端激酶(JNK)特异性抑制剂]、SB203580[p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂]、PD98059[细胞外信号调节激酶(ERK1/2)特异性抑制剂],观察其对oxHDL和组胺诱导的ECV304细胞表达TF的影响。结果:正常ECV304细胞未检测到TF,经组胺处理1 h后TF mRNA表达明显增加,在1×10-5mol/L时最高,约为1×10-9mol/L时的4.8倍。oxHDL以时间和浓度依赖性方式诱导ECV304细胞TF mRNA表达,在oxHDL20 mg/L时最高,为10 mg/L时的1.8倍,在第6 h时TF mRNA表达水平为第2 h的5.3倍(P<0.05),并在20 mg/L时显著刺激ECV304细胞TF蛋白表达,为40 mg/L时的1.5倍,而HDL没有此效应。MAPKs(JNK、p38 MAPK、ERK1/2)抑制剂可部分解除oxHDL诱导ECV304细胞TF表达的效应,TF分别下调表达至原来的19.0%、5.0%和13.0%(P<0.05)。结论:oxHDL能以浓度和时间依赖性方式诱导ECV304细胞产生TF,其机制可能通过JNK、p38 MAPK和ERK1/2所介导。 展开更多

关键词 组织因子 脂蛋白类 HDL p38 MAPK通路 ERK 1/2通路 JNK通路

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肺动脉血栓放射免疫显像实验研究 被引量：6

13

作者 方纬 季顺东 +4 位作者 刘秀杰 阮长耿 王峰 史蓉芳 王琦 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期188-190,I004,共4页

目的　通过动物实验探讨肺动脉血栓放射免疫显像在肺栓塞诊断及血栓性质鉴别中的价值。方法　选取杂种犬 7只 ,制成肺动脉血栓栓塞模型。静脉注射99Tcm 标记的活化血小板单克隆抗体SZ 5 1,进行活体γ显像。完整取出心肺后行离体心肺显... 目的　通过动物实验探讨肺动脉血栓放射免疫显像在肺栓塞诊断及血栓性质鉴别中的价值。方法　选取杂种犬 7只 ,制成肺动脉血栓栓塞模型。静脉注射99Tcm 标记的活化血小板单克隆抗体SZ 5 1,进行活体γ显像。完整取出心肺后行离体心肺显像。分别观察血栓部位及周围组织的放射性分布 ,计算栓塞部位与周围组织的放射性比值。随后取出血栓及周围部分组织 ,称重后测定单位质量的放射性计数及单位质量血栓与周围组织的放射性比值。结果　注入显像剂后 1h ,血栓部位开始显影并逐渐清晰。新鲜血栓放射性摄取明显高于周围肺组织 ,注入显像剂后 3h ,活体显像和完整心肺离体显像新鲜血栓与周围肺组织的放射性比值分别为 2 .8± 0 .6和 3.5± 1.2。形成 1d的新鲜血栓的放射性摄取明显高于形成 1周左右的血栓 ,单位质量新鲜血栓与周围组织的放射性比值达 17.5± 1.3,是形成 1周左右血栓的 2 .6倍。结论　99Tcm SZ 5 1肺动脉血栓放射免疫显像对诊断急性肺栓塞的形成及鉴别新鲜与陈旧血栓具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 肺动脉血栓 放射免疫显像 实验研究 单克隆抗体 诊断

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血栓动物模型的^(99)Tc^m-重组水蛭素显像研究 被引量：7

14

作者 万卫星 张荣军 +5 位作者 谭成 蔡刚明 范益军 季顺东 韩玉珉 金坚 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期201-203,共3页

目的　探讨以凝血酶为靶，重组水蛭素（ｒＨ）为配基进行血栓显像的潜在价值。方法　氯胺Ｔ法制备１２５ＩｒＨ，采用体外放射配体结合法分析ｒＨ对凝血酶纤维蛋白复合物的亲和、定量关系和时间反应动力学。亚氨基噻吩盐酸盐修饰... 目的　探讨以凝血酶为靶，重组水蛭素（ｒＨ）为配基进行血栓显像的潜在价值。方法　氯胺Ｔ法制备１２５ＩｒＨ，采用体外放射配体结合法分析ｒＨ对凝血酶纤维蛋白复合物的亲和、定量关系和时间反应动力学。亚氨基噻吩盐酸盐修饰法制备９９ＴｃｍｒＨ，进行小鼠体内分布测定及犬动、静脉血栓模型显像。结果　ｒＨ 不能直接与纤维蛋白原结合，当凝血酶与纤维蛋白形成复合物后才能与其形成三元复合物，且这种结合呈高亲和、特异和可逆性。９９ＴｃｍｒＨ 在小鼠心、脑、肝、脾、肺摄取低，肾摄取高，１５ ｍｉｎ 达（６４－７２４±５－０４２） ％ＩＤ／ｏｒｇａｎ，血清除迅速。犬股动脉血栓于４５ ｍｉｎ 可清晰显影，靶／ 本底（Ｔ／Ｂ） 比值为１－４７。静脉血栓于注药后３０ ｍｉｎ 就出现浓聚，并随时间延长血栓显影更清晰，１ ｈ Ｔ／Ｂ比值为１－５３。结论　９９ＴｃｍｒＨ 有望成为１ 展开更多

关键词 血栓栓塞 放射性核素显像 重组水蛭素

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^99Tc^m标记突触结合蛋白I-C2A片段无创性检测急性静脉血栓 被引量：3

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作者 方纬 季顺东 +3 位作者 王峰 王峰 阮长耿 王自正 《核技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期133-136,共4页

突触结合蛋白I-C2A片段(SytI-C2A)具有与活化血小板膜表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异结合的能力。本研究通过动物实验初步探讨99Tcm标记突触结合蛋白I-C2A片段(99Tcm-SytI-C2A)作为显像剂用于进行急性静脉血栓显像的可行性。选择比格犬5只... 突触结合蛋白I-C2A片段(SytI-C2A)具有与活化血小板膜表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异结合的能力。本研究通过动物实验初步探讨99Tcm标记突触结合蛋白I-C2A片段(99Tcm-SytI-C2A)作为显像剂用于进行急性静脉血栓显像的可行性。选择比格犬5只,通过导管将双股螺旋金属丝送入一侧后肢股静脉,制成急性股静脉血栓模型;然后静脉注射99Tcm-SytI-C2A185MBq,注射后1h、2h和3h分别进行显像,用勾画"感兴趣"区的方法计算血栓部位与对侧后肢的对称部位以及血栓/本底的放射性比值。取出血栓、后肢肌肉和血液等标本,体外测定%ID·g-1值。结果表明,注射后1h、2h和3h,血栓部位与对侧后肢对称部位的放射性比值分别为3.01±0.30、3.22±0.21和3.37±0.57;与同侧下肢放射性本底的比值分别为3.10±0.39、3.32±0.31和3.50±0.45。体外检测结果显示出股静脉血栓的单位质量放射性摄取量是血液的2.40±0.35倍,是后肢肌肉的68.90±45.30倍。99Tcm-SytI-C2A能用于无创性地早期检测静脉血栓,有望成为较理想的新型血栓显像剂。 展开更多

关键词 血栓形成 核素显像 突触结合蛋白 血小板

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人vW因子A3区基因在大肠杆菌中表达及其生物学活性的研究 被引量：3

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作者 祝怀平 王迎春 +3 位作者 季顺东 白霞 江淼 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期199-203,共5页

血管性血友病因子 (vWF)是介导血小板粘附到细胞外基质的桥梁 ,在血栓形成过程中发挥重要作用 ,可通过阻断vWF与细胞外基质的结合而阻断血小板的粘附。本研究目的是研究一种抗血栓形成的新疗法。应用RT PCR方法从人脐带内皮细胞中克隆vW... 血管性血友病因子 (vWF)是介导血小板粘附到细胞外基质的桥梁 ,在血栓形成过程中发挥重要作用 ,可通过阻断vWF与细胞外基质的结合而阻断血小板的粘附。本研究目的是研究一种抗血栓形成的新疗法。应用RT PCR方法从人脐带内皮细胞中克隆vWFA3区基因并在大肠杆菌中表达 ;应用胶原结合试验及竞争抑制实验分析rvWF A3蛋白的生物学活性。结果表明 :表达的重组蛋白量占菌体总蛋白的 4 6 % ,包涵体经过变性、纯化和复性 ,获得重组蛋白 (rvWF A3) ;rvWF A3具有很好的胶原结合活性 ,且能竞争性抑制野生型vWF与胶原结合。结论 :大肠杆菌中高效表达的rvWF A3具有良好的生物学功能 ,可作为阻断剂用于干预vWF介导的血小板黏附过程 。 展开更多

关键词 VWF rvWF-A3 胶原 血栓 血小板

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多肿瘤标志物蛋白芯片检测在老年人健康体检中的应用价值及其临床意义 被引量：10

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作者 李清茹 季顺东 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期535-540,共6页

目的：探讨多肿瘤标志物蛋白芯片技术（C12芯片法）在老年人健康体检中的应用,并量化分析不同年龄和性别体检者肿瘤标志物检测值和阳性率的差别,阐明其临床意义。方法：选择健康体检者9 654人,按年龄分为对照组（40-59岁）、老年组（60... 目的：探讨多肿瘤标志物蛋白芯片技术（C12芯片法）在老年人健康体检中的应用,并量化分析不同年龄和性别体检者肿瘤标志物检测值和阳性率的差别,阐明其临床意义。方法：选择健康体检者9 654人,按年龄分为对照组（40-59岁）、老年组（60-79岁）和高龄组（80岁及以上）。采用多肿瘤标志物芯片检测系统检测各组体检者甲胎蛋白（AFP）、糖链抗原15-3（CA15-3）、糖链抗原19-9（CA19-9）、糖链抗原125（CA125）、糖链抗原242（CA242）、癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、铁蛋白（ferritin）、β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）、人生长激素（HGH）、前列腺特异性抗原（PSA）和游离PSA（f-PSA）共12项肿瘤标志物水平,以超出正常范围为阳性结果,分析3组体检者样本的肿瘤标志物检测值和阳性率。结果：1体检者9 654人中共检出阳性结果665人,阳性检出率为6.89%,其中32人经内窥镜、病理学和影像学检查确诊为早期或中期肿瘤,肿瘤检出率为0.33%。2男女体检者肿瘤标志物阳性率不同,男性前5位依次为f-PSA、PSA、CEA、CA19-9和NSE;女性前5位依次为CA19-9、CA125、CEA、NSE和CA242。3 CA19-9、CA242、CEA、NSE、PSA和f-PSA阳性率分布呈随年龄增长而升高的趋势（P〈0.01）。4各组体检者AFP、CA125、CA19-9、CA242、CEA、HGH、NSE和PSA检测值随着年龄增长而升高,高龄体检者上述指标高于老年组和对照组（P〈0.01）,老年组上述指标高于对照组（P〈0.01）。结论：C12芯片中CA19-9、CEA、NSE、PSA和f-PSA等肿瘤标志物在老年人、尤其是高龄老年人的健康筛查中阳性率高,有助于发现早期肿瘤。 展开更多

关键词 蛋白芯片 多肿瘤标志物 高龄老年人 健康体检

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人von Willebrand因子A1区基因的克隆和表达 被引量：2

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作者 祝怀平 王迎春 +2 位作者 季顺东 白霞 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期540-543,共4页

为了深入研究血栓形成的机制以及开发新的抗血栓药物 ,将人vonWillebrand(vWF)因子A1区cDNA在大肠杆菌中表达 ,以获得高效表达的具有生物学活性的重组A1区蛋白 ,应用PCR方法从含有人全长vWFcDNA质粒中扩增A1区基因片段 ,并将其克隆至pUC... 为了深入研究血栓形成的机制以及开发新的抗血栓药物 ,将人vonWillebrand(vWF)因子A1区cDNA在大肠杆菌中表达 ,以获得高效表达的具有生物学活性的重组A1区蛋白 ,应用PCR方法从含有人全长vWFcDNA质粒中扩增A1区基因片段 ,并将其克隆至pUCm T载体中 ,经DNA序列分析后 ,将其重组于有 6×HisTag的融合蛋白表达载体pQE 31中 ,并在大肠杆菌M1 5中诱导表达。采用Ni NTA柱进行纯化 ,用Western印迹鉴定。结果表明 ,PCR扩增得到 854bp的A1区基因片段 ,序列测定结果与文献报道一致。IPTG诱导 5小时后表达的vWF因子A1蛋白占菌体总蛋白的 30 %左右 ,经Ni NTA纯化后其纯度在 95 %以上。Western印迹检测显示A1蛋白具有很好的抗原性和特异性。结论 :成功地在大肠杆菌中高效表达了人vWFA1区蛋白 。 展开更多

关键词 基因克隆 基因表达 序列分析 血友病 A1区 VONWILLEBRAND因子

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^(99)Tc^m-抗人粒细胞单克隆抗体对兔炎症的放射免疫显像 被引量：2

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作者 杨斌 何杨 +4 位作者 张玮 朱莹莹 季顺东 赵益明 阮长耿 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期228-230,I003,共4页

目的　评价99Tcm 抗人粒细胞单克隆抗体 (McAb)SZ 10 2在实验性炎症家兔放射免疫显像中的价值。方法　以 2 亚氨基噻吩盐酸盐 (2 IT)修饰SZ 10 2 ,99Tcm 葡庚糖酸钠 (GH)配体交换法标记SZ 10 2。兔左下肢炎症模型经耳缘静脉注入99Tcm ... 目的　评价99Tcm 抗人粒细胞单克隆抗体 (McAb)SZ 10 2在实验性炎症家兔放射免疫显像中的价值。方法　以 2 亚氨基噻吩盐酸盐 (2 IT)修饰SZ 10 2 ,99Tcm 葡庚糖酸钠 (GH)配体交换法标记SZ 10 2。兔左下肢炎症模型经耳缘静脉注入99Tcm SZ 10 2 ,行SPECT显像 ,99Tcm 标记非特异性鼠IgG作阴性对照。显像完毕处死动物 ,测定99Tcm SZ 10 2离体炎症肌肉 血液和对侧正常肌肉 血液放射性比值。结果　99Tcm SZ 10 2对家兔炎症部位显影清晰 ,其最佳显像时间为注射后 2～ 4h,而99Tcm标记非特异性鼠IgG对家兔炎症部位未能显影。血液半清除时间 :99Tcm SZ 10 2T1 2α为 (0 .10± 0 .0 4 )h ,T1 2 β为 (3.19± 0 .4 1)h。99Tcm SZ 10 2显像离体炎症肌肉 血液和对侧正常肌肉 血液放射性比值分别为 0 .2 2± 0 .0 2和 0 .0 2± 0 .0 1。结论　99Tcm SZ 10 2具有活体内炎症定位导向能力 ,显像时间短 。 展开更多

关键词 ^99Tc^m-抗人粒细胞单克隆抗体 放射免疫显像 深部隐匿性炎症 肿瘤感染病灶 动物实验 诊断

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一种新型单克隆抗体导向血栓显像剂的基因工程制备 被引量：2

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作者 夏晓波 季顺东 +3 位作者 顾津明 万海英 李佩霞 阮长耿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期349-353,共5页

目的为简化抗血小板P 选择素鼠/人嵌合单克隆抗体SZ 51/Hu的99mTc标记过程 ,并提高其99mTc标记效率 ,利用金属硫蛋白(MT)可与金属稳定结合的特点 ,通过基因工程的手段制备融合蛋白SZ 51/Hu MT。方法构建了SZ 51/Hu与MT的重组表达载体 ,... 目的为简化抗血小板P 选择素鼠/人嵌合单克隆抗体SZ 51/Hu的99mTc标记过程 ,并提高其99mTc标记效率 ,利用金属硫蛋白(MT)可与金属稳定结合的特点 ,通过基因工程的手段制备融合蛋白SZ 51/Hu MT。方法构建了SZ 51/Hu与MT的重组表达载体 ,并在小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中进行了目的融合蛋白的表达。结果该融合蛋白在Sp2/0细胞中的表达量为3mg/L。对融合蛋白的各项性质分析表明 ,该融合蛋白的相对分子质量(Mr)为180000 ,且具有双向结合的特异性 :即一方面保持了SZ 51与活化血小板P 选择素的特异结合能力 ;另一方面又具有MT高效结合金属的特性。99mTc标记研究表明 ,该分子不需预处理即可被99m Tc直接标记 ,标记率可达79 %。结论获得具有双向结合特异性的融合蛋白SZ 51/Hu MT ,为研制新型血栓导向显像剂开辟了新途径。 展开更多

关键词 单克隆抗体 金属硫蛋白 血栓显像剂 基因重组

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