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沉默PKM2对乳腺癌他莫昔芬耐药MCF-7细胞系侵袭及迁移的影响
1
作者 季飞虎 王念 +5 位作者 钟昌莉 蒋玉林 刘一锋 张志乾 靳倩妮 陈婷梅 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第12期1641-1645,共5页
目的探讨PKM2下调对乳腺癌他莫昔芬(TAM)耐药MCF-7细胞系侵袭、迁移的影响。方法以浓度梯度法诱导获得乳腺癌他莫昔芬耐药细胞系(MCF-7R);细胞增殖与凋亡试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力;Western blot检测细胞PKM2的表达;将表达针对PKM2... 目的探讨PKM2下调对乳腺癌他莫昔芬(TAM)耐药MCF-7细胞系侵袭、迁移的影响。方法以浓度梯度法诱导获得乳腺癌他莫昔芬耐药细胞系(MCF-7R);细胞增殖与凋亡试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力;Western blot检测细胞PKM2的表达;将表达针对PKM2的shRNA慢病毒干扰载体感染耐药细胞系,RT-q PCR、Western blot验证干扰效果,分别用Transwell侵袭实验、划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力。结果与MCF-7细胞相比,MCF-7R细胞对他莫昔芬的抵抗能力显著增强(P<0.01),PKM2的表达水平明显升高(P<0.01)。稳定干扰PKM2的耐药细胞中PKM2的mRNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P<0.01),PKM2干扰后可明显抑制MCF-7R细胞的侵袭、迁移能力(P<0.01)。结论 MCF-7R细胞中PKM2表达明显高于MCF-7细胞,沉默PKM2可以抑制MCF-7R细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 他莫昔芬 M2-型丙酮酸激酶 侵袭 迁移
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BAY11-7082通过抑制三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶磷酸化抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡 被引量：3
2
作者 黄云秀 苏敏 +4 位作者 魏兰 季飞虎 王念 钟昌莉 陈婷梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1458-1462,共5页
目的探讨核因子κB信号通路抑制剂BAY11-7082通过调控三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶(ACL)对MCF-7乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法选取对数生长期的MCF-7细胞,随机分为对照组和5μmol/L BAY11-7082处理组、10μmol/L LY294002处理组。采用Wes... 目的探讨核因子κB信号通路抑制剂BAY11-7082通过调控三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶(ACL)对MCF-7乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法选取对数生长期的MCF-7细胞,随机分为对照组和5μmol/L BAY11-7082处理组、10μmol/L LY294002处理组。采用Western blot法检测BAY11-7082和LY294002处理后MCF-7细胞中ACL、磷酸化的ACL(p-ACL)、磷酸化的Akt(p-Akt)、磷酸化的核因子κB(p-NF-κB)的蛋白水平。采用BAY11-7082和小干扰RNA敲低ACL(si ACL),CCK-8法检测MCF-7细胞的增殖、异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡。结果 BAY11-7082能抑制MCF-7细胞增殖,且呈剂量依赖性。Werstern blot结果显示BAY11-7082处理MCF-7细胞48 h后,p-NF-κB和p-ACL明显下降;LY294002处理组中,p-Akt和p-ACL明显下降。CCK-8实验和流式细胞术检测结果显示,BAY11-7082和si ACL分别处理MCF-7细胞48 h后,细胞增殖减少,细胞凋亡明显增加。结论 BAY11-7082能通过抑制ACL的磷酸化从而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 BAY11-7082 LY294002 ATP柠檬酸裂解酶 MCF-7细胞 增殖 凋亡
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脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞储存期代谢特性研究 被引量：2
3
作者 杨俊鸿 蒋玉林 +7 位作者 刘一锋 张志乾 钟昌莉 王念 季飞虎 靳倩妮 叶相森 陈婷梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期584-588,共5页
目的:探讨脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞在储存期的主要代谢途径转换,为脂肪血制备的悬浮红细胞储存提供参考。方法:选择脂肪血和正常全血各10 U,制备成去白细胞悬浮红细胞,在制备当天(d 0)、d 14、d 35分别取样,采用UPLC-MS/MS检测... 目的:探讨脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞在储存期的主要代谢途径转换,为脂肪血制备的悬浮红细胞储存提供参考。方法:选择脂肪血和正常全血各10 U,制备成去白细胞悬浮红细胞,在制备当天(d 0)、d 14、d 35分别取样,采用UPLC-MS/MS检测红细胞内的代谢物。采用Mann-Whitney U检验分析2组标本糖酵解途径和磷酸戊糖途径代谢物的差异,分析脂肪血制备的悬浮红细胞储存期的代谢途径变化。结果:d 0实验组红细胞内代谢物葡萄糖、腺嘌呤、丙酮酸、GSH、GSSG和烟碱酰胺水平均高于对照组(P<0.05)。d 14实验组红细胞中葡萄糖、丙酮酸和GSH水平低于对照组(P<0.05),腺嘌呤、烟碱酰胺和GSSG水平高于对照组。D 35实验组红细胞中葡萄糖水平低于对照组(P<0.05),腺嘌呤、烟碱酰胺水平高于对照组(P<0.05),两组之间的丙酮酸、GSSG和GSH水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与正常红细胞相比,脂肪血红细胞储存期内能量代谢减弱,磷酸戊糖途径增强。 展开更多
关键词 脂肪血 红细胞 脂防血红细胞 代谢途径
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刍议从事班主任实践工作的几点策略——从忙碌中求实效
4
作者 季飞虎 陈福荣 《神州》 2011年第12X期264-264,共1页
班级工作千头万绪，琐碎复杂，因而决定了做班主任的非忙碌不可。光忙碌就能把班级搞好吗？这也未必——不少班主任尽管比学生到得要早去得要迟，辛辛苦苦地管理一班学生，事无巨细都亲自过问，不敢疏忽．力气没少花，汗水没少流，结果... 班级工作千头万绪，琐碎复杂，因而决定了做班主任的非忙碌不可。光忙碌就能把班级搞好吗？这也未必——不少班主任尽管比学生到得要早去得要迟，辛辛苦苦地管理一班学生，事无巨细都亲自过问，不敢疏忽．力气没少花，汗水没少流，结果每天都累得腰酸背痛晕头转向的， 展开更多
关键词 班主任 实践工作 求实 班级工作 腰酸背痛 学生
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重庆市新型冠状病毒肺炎防控效果分析
5
作者 季飞虎 黄立媛 薛建江 《现代医药卫生》 2020年第S01期204-206,共3页
目的对重庆市新型冠状病毒肺炎的防治效果进行分析,为今后重大传染病的防控提供参考意见。方法从重庆市卫生健康委员会官网获取2020年1月22日至2020年3月2日的疫情数据,利用GraphPad Prism 5绘制曲线图,进行流行病学描述性分析。结果202... 目的对重庆市新型冠状病毒肺炎的防治效果进行分析,为今后重大传染病的防控提供参考意见。方法从重庆市卫生健康委员会官网获取2020年1月22日至2020年3月2日的疫情数据,利用GraphPad Prism 5绘制曲线图,进行流行病学描述性分析。结果2020年1月22日至2020年3月2日,因重庆市的防控措施恰当,新型冠状病毒感染得到有效控制。结论重庆市新型冠状病毒肺炎的发病趋缓,至2020年2月24日实现零增长,但仍要防控输入型病例的出现。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 重庆市 防控效果
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PKM2基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响 被引量：6
6
作者 魏兰 苏敏 +4 位作者 黄云秀 钟昌莉 王念 季飞虎 陈婷梅 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期968-975,共8页
目的 :探讨M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)下调对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响。方法 :采用免疫荧光技术检测MCF-7细胞中PKM2蛋白的表达。通过脂质体法将构建有PKM2-sh RNA的重组质粒转入MCF-7细胞;分别采用实时荧光定... 目的 :探讨M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)下调对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响。方法 :采用免疫荧光技术检测MCF-7细胞中PKM2蛋白的表达。通过脂质体法将构建有PKM2-sh RNA的重组质粒转入MCF-7细胞;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测PKM2 m RNA和蛋白的表达水平;CCK-8法、FCM法和Transwell侵袭实验分别检测PKM 2基因沉默后对MCF-7细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测对增殖相关蛋白c-myc和cyclin D1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果:乳腺癌MCF-7细胞的细胞质及细胞核中均有PKM2的表达;PKM2-sh RNA质粒转染MCF-7细胞48 h后,可明显下调MCF-7细胞中PKM2 m RNA及蛋白的表达水平(P值均<0.01),并且明显抑制MCF-7细胞的增殖及侵袭能力,促进其凋亡(P值均<0.05)。沉默PKM2基因的表达,可下调c-myc、cyclin D1和Bcl-2蛋白的表达水平(P值均<0.05),而上调Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论 :转染PKM2-sh RNA特异性干扰PKM2基因的表达后,能通过下调c-myc和cyclin D1的表达抑制细胞的增殖,通过下调Bcl-2的表达以及上调Bax的表达促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 M2型丙酮酸激酶 RNA干扰 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡
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瘦素通过上调IL-18表达促进人乳腺癌MCF-7细胞迁移及侵袭 被引量：4
7
作者 魏兰 苏敏 +4 位作者 黄云秀 钟昌莉 王念 季飞虎 陈婷梅 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期827-833,共7页
目的 :探讨瘦素(leptin)对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的分子作用机制。方法 :用leptin(200 ng/m L)处理乳腺癌MCF-7细胞后,采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测MCF-7细胞的迁移及侵袭能力,采用实时荧光定量... 目的 :探讨瘦素(leptin)对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的分子作用机制。方法 :用leptin(200 ng/m L)处理乳腺癌MCF-7细胞后,采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测MCF-7细胞的迁移及侵袭能力,采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法和ELISA法检测白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)的表达水平。用leptin(200 ng/m L)和IL-18结合蛋白(IL-18 binding protein,IL-18bp)(10 ng/m L)同时处理乳腺癌MCF-7细胞后,再采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测MCF-7细胞迁移及侵袭能力的变化。结果 :Leptin可促进乳腺癌MCF-7细胞的迁移及侵袭(P值均<0.05),上调MCF-7细胞中IL-18 m RNA及蛋白的表达水平(P值均<0.05),促进IL-18分泌(P<0.05)。IL-18bp与细胞分泌的IL-18结合后,leptin促进乳腺癌MCF-7细胞迁移及侵袭的能力被明显抑制(P值均<0.05)。结论 :Leptin可促进乳腺癌MCF-7细胞的迁移及侵袭,其机制可能与促进IL-18表达上调相关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 瘦素 白细胞介素18 细胞迁移分析 基因表达调控 肿瘤
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合肥市3县中华按蚊对溴氰菊酯抗性现状的研究 被引量：4
8
作者 武松 马尔健 +9 位作者 陆群 仰凤桃 陈道俊 王波 翟金霞 余俊峰 常娜 季飞虎 洪结凤 叶苗青 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2012年第3期216-217,共2页
目的探明合肥市中华按蚊对溴氰菊酯的抗性现状。方法选择合肥市肥东、肥西和长丰县,每县各选取1个自然村,于2011年7-8月采用牛诱和猪诱法捕获饱血中华按蚊,采用WHO推荐的成蚊接触筒法对按蚊进行敏感性测试。结果肥东、肥西和长丰县中华... 目的探明合肥市中华按蚊对溴氰菊酯的抗性现状。方法选择合肥市肥东、肥西和长丰县,每县各选取1个自然村,于2011年7-8月采用牛诱和猪诱法捕获饱血中华按蚊,采用WHO推荐的成蚊接触筒法对按蚊进行敏感性测试。结果肥东、肥西和长丰县中华按蚊经0.05%溴氰菊酯测试后,击倒率分别为0、1.96%和4.72%;校正死亡率分别为4.90%、12.23%和20.05%。结论合肥市3县中华按蚊对溴氰菊酯已经产生明显抗性。 展开更多
关键词 中华按蚊 溴氰菊酯 抗药性
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果糖-1,6-二磷酸酶1过表达抑制他莫昔芬耐药的乳腺癌细胞迁移并促进细胞凋亡 被引量：1
9
作者 刘一锋 王念 +9 位作者 季飞虎 钟昌莉 蒋玉林 张志乾 杨俊鸿 魏兰 苏敏 黄云秀 靳倩妮 陈婷梅 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1075-1082,共8页
目的 :探讨过表达果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP 1)基因对他莫昔芬耐药性人乳腺癌MCF-7R细胞迁移和凋亡的影响。方法 :首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人乳腺癌亲本敏感细胞MCF-7和他莫昔芬耐药细胞... 目的 :探讨过表达果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP 1)基因对他莫昔芬耐药性人乳腺癌MCF-7R细胞迁移和凋亡的影响。方法 :首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人乳腺癌亲本敏感细胞MCF-7和他莫昔芬耐药细胞MCF-7R中FBP1 mRNA和蛋白的表达水平。然后,采用脂质体转染法将FBP1过表达重组质粒转染至耐药细胞MCF-7R中,再应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测FBP1 mRNA和蛋白的表达水平,以验证FBP1基因过表达效果。接着,倒置光学显微镜下观察FBP1过表达后MCF-7R细胞的形态学变化;FCM法和细胞划痕愈合实验分别检测细胞凋亡及迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax以及上皮-间质转化标志物E-cadherin和vimentin的表达变化。结果 :对他莫昔芬耐药的人乳腺癌细胞MCF-7R中FBP1 mRNA和蛋白的表达水平均比其亲本细胞MCF-7明显降低(P值均<0.01)。FBP1过表达重组质粒转染后,MCF-7R细胞中FBP1 mRNA及蛋白的表达水平均明显上调(P值均<0.01),MCF-7R细胞形态由间质细胞样向上皮细胞样转变,细胞凋亡率明显升高(P<0.01),迁移能力则明显降低(P<0.01)。FBP1过表达的MCF-7R细胞中Bcl-2和vimentin蛋白的表达水平明显下降(P值均<0.01),Bax和E-cadherin蛋白的表达水平则明显升高(P值均<0.01)。结论 :FBP1基因过表达可明显抑制人乳腺癌他莫昔芬耐药细胞MCF-7R的迁移和上皮-间质转化,并通过下调Bcl-2表达和上调Bax表达来促进肿瘤耐药细胞的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 果糖-二磷酸酶 细胞迁移分析 上皮-间质转化 细胞凋亡
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