我国速生丰产用材林基地建设发展规划构想 被引量：6

1

作者 宋士奎 《中华纸业》 CAS 北大核心 2001年第12期10-13,共4页

论述了林业产业基地建设工程的特点,速生丰产用材林基地建设规划的构想和实施中存在的问题,提出了大力发展速生丰产用材林的政策建议。

关键词 林业 造纸 速生丰产用材料 基地建设 发展规划

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与时俱进 加快推进速丰林工程建设 被引量：2

2

作者 宋士奎 《国际造纸》 2002年第6期5-9,共5页

关键词 速丰林工程建设 林业 经验交流会 纸浆原料林 中国 工程特点

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落实林纸一体化规划 促进林业建设发展

3

作者 宋士奎 《中华纸业》 CAS 北大核心 2004年第7期10-11,共2页

介绍了我国速生丰产用材林基地建设工程概况,阐述了发展林纸一体化的意义和林业部门对实施林纸一体化工程采取的措施。

关键词 速生丰产用材林基地建设 林业建设 林纸一体化 发展规划 中国 造纸工业

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落实林纸一体化规划 促进林业建设发展

4

作者 宋士奎 《造纸信息》 2004年第6期10-11,共2页

关键词 林业 林纸一体化建设 中国 速生丰产用材林基地建设 集约化管理

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分枝杆菌HGMS2中类固醇C20-羟基脱氢酶的鉴定

5

作者 明卓 胡青 +1 位作者 宋士奎 苏正定 《工业微生物》 CAS 2023年第4期170-178,共9页

分枝杆菌常被用作甾体药物中间体生产菌种,然而当前人们对其具体的甾醇降解机制仍然不是很清楚。为了获得C20-羟基甾药中间体,文章直接以RS为底物进行了转化,并通过对转化产物进行TLC、HPLC、LS-MS和核磁分析,初步确定分枝杆菌中存在类... 分枝杆菌常被用作甾体药物中间体生产菌种,然而当前人们对其具体的甾醇降解机制仍然不是很清楚。为了获得C20-羟基甾药中间体,文章直接以RS为底物进行了转化,并通过对转化产物进行TLC、HPLC、LS-MS和核磁分析,初步确定分枝杆菌中存在类固醇C20-羟基脱氢酶(1DHC)参与的代谢途径。同时,基于生物信息学和结构生物学,通过序列和结构比对分析,最终从分枝杆菌中鉴定出了一个与类固醇C20-羟基脱氢酶同源性很高的基因。将该基因在大肠杆菌中异源表达,并对其功能活性进行分析,证明该基因所编码的酶和类固醇C20-羟基脱氢酶具有相同的功能活性。文章首次从分枝杆菌中鉴定出一种类固醇C20-羟基脱氢酶,使研究者对分枝杆菌甾醇代谢机制有了更深入的理解,同时也为新型甾药中间体的制备以及分枝杆菌的改造奠定了理论基础。 展开更多

关键词 分枝杆菌 类固醇C20β-羟基脱氢酶 产物分析 17α-羟基-孕甾-4-烯-3 20-二酮

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小学英语混合教学模式的实证研究 被引量：4

6

作者 张海艳 宋士奎 何强 《贵州师范学院学报》 2019年第4期79-84,共6页

在教育信息化从1.0到2.0的背景下,以信息技术与课堂、线上与线下的良性整合为基础的混合式教学得到了广泛的应用,为提高学生的学习质量提供了一定的理论基础和实践价值。以建构主义理论为指导,采用混合教学法,对小学英语课堂活动进行了... 在教育信息化从1.0到2.0的背景下,以信息技术与课堂、线上与线下的良性整合为基础的混合式教学得到了广泛的应用,为提高学生的学习质量提供了一定的理论基础和实践价值。以建构主义理论为指导,采用混合教学法,对小学英语课堂活动进行了长达一学期的实证研究。研究发现,运用混合教学模式来提高小学生英语学习质量是有效的;虚拟学习空间和互联网技术为小学英语混合教学提供了技术支持;同时也验证了在小学英语学科实施混合教学存在的弊端,应全面认识与辩证看待混合教学模式的利弊。 展开更多

关键词 教育信息化 混合教学 混合学习 建构主义

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新媒体时代家庭教育存在的问题及对策 被引量：5

7

作者 张海艳 宋士奎 段梦杰 《宁波教育学院学报》 2019年第3期84-87,107,共5页

家庭是我们每个人的第一课堂,父母是我们牙牙学语的第一任老师,家庭教育对于每个人的成长至关重要。新媒体时代给家庭教育的发展带来了机遇,但是在新媒体时代的冲击下,我国家庭教育仍存在教育观念落后、社会支持体系缺失、家长教育质量... 家庭是我们每个人的第一课堂,父母是我们牙牙学语的第一任老师,家庭教育对于每个人的成长至关重要。新媒体时代给家庭教育的发展带来了机遇,但是在新媒体时代的冲击下,我国家庭教育仍存在教育观念落后、社会支持体系缺失、家长教育质量低等问题。基于新媒体时代家庭教育存在的问题,可从创新教育理念和实践、完善社会支持体系、提高家庭教育质量入手,以期创造更加完善的家庭教育环境。 展开更多

关键词 新媒体时代 家庭教育 家长

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混合教学对幼儿学习动机的影响研究

8

作者 张海艳 宋士奎 张树苗 《黑龙江教育学院学报》 2019年第7期82-85,共4页

混合教学是将传统化教学和网络化教学有效融合在一起,充分发挥二者优势的一种教学模式。首先分析幼儿混合教学模式的意义和价值,其次论述幼儿混合教学的特点,最后针对幼儿教学中存在的一些问题提出建议和对策,以期实现幼儿教学水平的提高。

关键词 混合教学 幼儿学习动机 有效融合 兴趣

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酶法制备熊去氧胆酸的研究进展

9

作者 宋士奎 张路 +1 位作者 蔡东越 比拉力·艾散 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期100-109,共10页

熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)是用于治疗多种肝胆疾病的临床优选药物,对某些癌症及其他疾病也有辅助治疗的作用。然而,UDCA的化学合成普遍存在路线繁琐、反应条件苛刻、对环境不友好,产率低等缺陷,严重限制了其工业化生产与... 熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)是用于治疗多种肝胆疾病的临床优选药物,对某些癌症及其他疾病也有辅助治疗的作用。然而,UDCA的化学合成普遍存在路线繁琐、反应条件苛刻、对环境不友好,产率低等缺陷,严重限制了其工业化生产与应用。因此,具有合成路线短、产率高、反应条件温和、成本低等优势的绿色生物合成技术逐渐成为UDCA合成的主要研究方向。生物转化法合成UDCA通常是以石胆酸(lithocholic acid,LCA)、鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)或胆酸(cholic acid,CA)为底物,利用全细胞转化法或酶法合成UDCA,该生物合成的本质主要是利用酶的特异性将底物转化为UDCA。因此,具有特异性辅酶依赖性、高酶活性、高稳定性和高浓度底物耐受性的7α/β-羟基类固醇脱氢酶(7α/β-HSDH)和P450单加氧酶的设计开发成为研究热点。综述UDCA的酶法制备技术,探讨现有酶法合成的优缺点,展望未来发展方向,以期实现UDCA的绿色、高效、安全、可持续的生物制造。 展开更多

关键词 熊去氧胆酸 生物合成 全细胞转化 酶催化 辅因子再生

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3-甾酮-Δ^(1)-脱氢酶突变体文库高通量筛选方法的建立

10

作者 董新林 胡青 +3 位作者 何建新 吕德强 宋士奎 苏正定 《生物技术》 CAS 2024年第2期158-164,共7页

[目的]建立一种快速、高通量筛选3-甾酮-Δ^(1)-脱氢酶(KstD)突变体库的方法。[方法]基于已发表KstD蛋白晶体结构,设计饱和突变引物,构建突变体文库,优化蛋白表达条件,利用冻融法结合溶菌酶法获得粗酶液;基于分光光度法原理,优化检测反... [目的]建立一种快速、高通量筛选3-甾酮-Δ^(1)-脱氢酶(KstD)突变体库的方法。[方法]基于已发表KstD蛋白晶体结构,设计饱和突变引物,构建突变体文库,优化蛋白表达条件,利用冻融法结合溶菌酶法获得粗酶液;基于分光光度法原理,优化检测反应体系,利用酶标仪检测吸光度的变化来反映酶活力。[结果]利用饱和突变引物成功构建突变体文库,表达KstD最佳条件为:IPTG终浓度0.3 mmol/L,20℃诱导20 h;缓冲液中溶菌酶浓度为0.5 mg/mL时上清目的蛋白含量最高。优化后的酶活检测条件为:Tris-HCl缓冲液50 mmol/L、pH 8.0、0.4 mmol/L DCPIP、1.5 mmol/L PMS、0.7 mmol/L雄烯二酮(4AD)和适量的酶液组成,温度30℃、酶反应时间5 min,于600 nm波长下测定。[结论]成功建立了一种5 min检测96个3-甾酮-Δ^(1)-脱氢酶(KstD)突变体的高通量筛选方法,重复性变异系数在3%以下。 展开更多

关键词 3-甾酮-Δ^(1)-脱氢酶 定点饱和突变 高通量筛选 半理性设计 雄烯二酮 酶标仪 酶法脱氢 突变体文库

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生物转化蛋黄胆固醇生产4-雄烯二酮

11

作者 唐钰颖 宋士奎 +1 位作者 董芳 苏正定 《生物技术》 CAS 2024年第2期188-192,203,共6页

[目的]探索一种以鸡蛋蛋黄为原料,利用HGMS6菌株生物转化生产4-雄烯二酮(AD)的工艺,实现转化率60.78%。[方法]基于现有提取、转化技术,通过单因素和正交实验调整蛋黄胆固醇提取条件和分枝杆菌发酵条件,利用薄层析法和高效液相色谱法分... [目的]探索一种以鸡蛋蛋黄为原料,利用HGMS6菌株生物转化生产4-雄烯二酮(AD)的工艺,实现转化率60.78%。[方法]基于现有提取、转化技术,通过单因素和正交实验调整蛋黄胆固醇提取条件和分枝杆菌发酵条件,利用薄层析法和高效液相色谱法分析数据,提高AD的产率。[结果]明确最佳蛋黄胆固醇提取条件为:β-CD∶胆固醇=5∶1,水∶β-CD=15∶1,反应温度为55℃。提取率为98.12%。较吐温-80,添加环糊精时,得到的胆固醇转化率(60.18%)更高。 展开更多

关键词 蛋黄 胆固醇 微生物转化 甾体药物中间体 4-雄烯二酮 分枝杆菌

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以分枝杆菌为底盘细胞生物合成甾药中间体的研究进展 被引量：1

12

作者 宋士奎 何建新 +1 位作者 黄永棋 苏正定 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1056-1069,共14页

甾体药物(steroid drugs)是一类具有重要生理和药理作用的药物。目前,甾药行业主要通过分枝杆菌(Mycobacteria)转化制备系列重要甾药中间体,再经过必要的化学修饰或酶法修饰获得高端甾体药物。较之前的“薯蓣皂素-双烯醇酮”体系具有原... 甾体药物(steroid drugs)是一类具有重要生理和药理作用的药物。目前,甾药行业主要通过分枝杆菌(Mycobacteria)转化制备系列重要甾药中间体,再经过必要的化学修饰或酶法修饰获得高端甾体药物。较之前的“薯蓣皂素-双烯醇酮”体系具有原料廉价且来源丰富、生产成本低且反应路线短、收率高且环境友好等优点。基于基因组学和代谢组学进一步揭示分枝杆菌甾醇降解途径中关键酶系及其催化机理,使分枝杆菌作为底盘细胞成为可能。本文对不同物种类固醇转化酶的发现、分枝杆菌自源基因和异源基因过表达的改造以及分枝杆菌作为底盘细胞的优化和修饰等方面的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 分枝杆菌 底盘细胞 生物转化 甾体药物

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分枝杆菌HGMS2甾醇降解中新C-23代谢产物的鉴定及其代谢途径分析 被引量：1

13

作者 何建新 董新林 +2 位作者 黄永棋 宋士奎 苏正定 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4550-4562,共13页

新金分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)通过敲除羟酰基辅酶A脱氢酶(hydroxyacyl-CoA dehydrogenase,Hsd4A)或酰基辅酶A硫解酶(acyl-CoAthiolase,FadA5)基因来生产22-羟基-23,24-双降甾-4-烯-3-酮(22-hydroxy-23,24-bisnorchol-4-en-3-on... 新金分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)通过敲除羟酰基辅酶A脱氢酶(hydroxyacyl-CoA dehydrogenase,Hsd4A)或酰基辅酶A硫解酶(acyl-CoAthiolase,FadA5)基因来生产22-羟基-23,24-双降甾-4-烯-3-酮(22-hydroxy-23,24-bisnorchol-4-en-3-one,BA)甾体类药物中间体来受到广泛关注。本实验室前期发现,敲除fadA5基因后,发酵产物中出现了一种新的代谢产物。本研究通过对该物质的结构鉴定、fadA5基因的蛋白同源序列比对、M.neoaurumHGMS2的系统发育树分析和基因敲除等手段探究该物质的代谢途径。结果表明该物质为C23类代谢中间体,即24-norchol-4-ene-3,22-dione(将其命名为3-OPD)。该物质是通过硫酯酶(thioesterase,TE)催化3,22-dioxo-25,26-bisnorchol-4-ene-24-oylCoA(22-O-BNC-CoA)生成侧链为β-酮酸结构的物质后通过生物体的自动脱羧反应生成的。这些结果对开发新的甾类中间体有重要价值。 展开更多

关键词 甾体药物 fadA5 基因敲除 新金分枝杆菌 C-23代谢中间体

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GLP-1R激动剂及正变构调节剂研究进展

14

作者 王芮 杨紫鑫 +2 位作者 宋士奎 柯志强 苏正定 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2023年第21期2453-2458,共6页

胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)是治疗2型糖尿病的重要靶标,作为一种G蛋白偶联受体可通过胰高血糖素样肽-1介导胰岛素分泌。该文对胰高血糖素样肽-1和GLP-1R的结构与功能进行综述,并对肽类GLP-1R激动... 胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)是治疗2型糖尿病的重要靶标,作为一种G蛋白偶联受体可通过胰高血糖素样肽-1介导胰岛素分泌。该文对胰高血糖素样肽-1和GLP-1R的结构与功能进行综述,并对肽类GLP-1R激动剂、非肽类小分子GLP-1R激动剂和GLP-1R正变构调节剂的设计开发进行讨论,旨在为进一步探寻2型糖尿病的治疗方案提供思路。 展开更多

关键词 胰高血糖素样肽-1 胰高血糖素样肽-1受体 肽类GLP-1R激动剂 小分子GLP-1R激动剂 GLP-1R正变构调节剂

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应用pCMV3-MdmX-RFP表达载体建立H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系

15

作者 周婷 李丹 +3 位作者 王芮 宋士奎 柯志强 苏正定 《生物技术》 CAS 2023年第6期683-688,696,共7页

[目的]探索应用pCMV3-MdmX-RFP表达载体构建H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系。[方法]用KpnⅠ和NotⅠ双酶切后连接,构建pCMV3-MdmX-RFP表达载体并测序。重组质粒转染H1299p53R^(2)13X细胞,用100μg/mL的潮霉素B筛选2 w。将筛选出的... [目的]探索应用pCMV3-MdmX-RFP表达载体构建H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系。[方法]用KpnⅠ和NotⅠ双酶切后连接,构建pCMV3-MdmX-RFP表达载体并测序。重组质粒转染H1299p53R^(2)13X细胞,用100μg/mL的潮霉素B筛选2 w。将筛选出的细胞无限稀释后分到96孔板中,每孔一个单细胞,并扩增成单细胞群,选出荧光较强的3个细胞克隆(C1、C2和B4)采用Western Blotting和基因组PCR验证。将建立的稳定细胞系命名为H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)细胞系,用荧光显微镜观察稳转细胞系的第10代细胞,并用Western Blotting检测MdmX-RFP蛋白的表达情况。G418处理H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)细胞后,Western Blotting检测全长p53(full-length p53,FL-p53)和截断的p53(Truncated p53,TR-p53)蛋白表达水平。[结果]测序结果显示,重组质粒pCMV3-MdmX-RFP与数据库中的基因序列相同。稳定细胞系中MdmX-RFP蛋白的高表达,在第10代仍然如此。与对照组相比,用G418处理H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)细胞后,FL-p53蛋白水平升高1.6±0.12倍(P<0.05),TR-p53蛋白水平升高3±0.17倍(P<0.01)。[结论]构建的H1299^(p53R^(2)13X/MdmX)稳转细胞系过表达效率高,可直接用于后续实验。 展开更多

关键词 H1299 P53 MDMX G418 潮霉素B 稳转细胞系

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新月弯孢霉转录组分析及甾体C_(11)β-羟化酶基因鉴定

16

作者 明卓 宋士奎 苏正定 《生物技术》 CAS 2023年第5期537-543,共7页

[目的]分析新月弯孢霉转录组,对甾体C_(11)β-羟基化酶基因进行鉴定。[方法]结合生物信息学和蛋白结构学对转录组分析,利用AlphaFold2进行蛋白结构模拟,与已知人源醛固酮合酶hCYP11B 2进行结构比对。[结果]在转录组中,共获得24943条Unig... [目的]分析新月弯孢霉转录组,对甾体C_(11)β-羟基化酶基因进行鉴定。[方法]结合生物信息学和蛋白结构学对转录组分析,利用AlphaFold2进行蛋白结构模拟,与已知人源醛固酮合酶hCYP11B 2进行结构比对。[结果]在转录组中,共获得24943条Unigenes,平均长度1915 bp。18792条(75.34%)可以匹配到蛋白数据库获得注释信息。Unigenes在各数据库中注释的基因数分别为:在COG数据库中有5615条(22.51%),在GO数据库中有4424条(17.74%),在KEGG数据库中有6322条(25.35%),在Swiss-Prot数据库中有11348条(45.50%)。通过初筛获得39个基因。经过AlphaFold2的结构模拟,与人的甾体醛固酮合酶(hCYP11B2)结构比对进行复筛,共26条甾体C_(11)β-羟基化酶相关基因被鉴定出来。[结论]该新月弯孢霉菌株具有甾体C_(11)β-羟基化的能力,通过对其转录组进行分析,共鉴定出26条甾体C_(11)β-羟基化酶相关基因。 展开更多

关键词 新月弯孢霉 甾体C_(11)β-羟基化酶 转录组 结构比对 生物信息学分析

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