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胰岛素样生长因子结合蛋白2对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制研究
1
作者 王晓晨 迟坤 +9 位作者 杜军霞 宋晨雯 丁潇楠 冀雨薇 张可颖 张益帆 韩秋霞 傅博 洪权 朱晗玉 《解放军医学院学报》 CAS 2024年第6期610-617,共8页
背景糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点。目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制... 背景糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点。目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制。方法体外培养的人足细胞随机分为正常血糖(normal glucose,NG)组(5 mmol/L)以及高血糖(high glucose,HG)24 h组、HG 48 h组、HG 72 h组(30 mmol/L)。采用RT-qPCR法检测IGFBP2、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达水平,Western blot检测IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白表达水平,以此确定后续实验HG处理的最佳时间点。将IGFBP2小干扰RNA转染进入足细胞并分为NG组、阴性对照干预组(NG-NC-siRNA)、IGFBP2敲低siRNA干预组(NG-IGFBP2-siRNA1、NG-IGFBP2-siRNA2、NG-IGFBP2-siRNA3),RT-qPCR检测IGFBP2 mRNA表达水平,选择敲低效率最高的IGFBP2-siRNA用于后续实验。根据实验内容将足细胞随机分为:(1)NG组和HG组;(2)NG组和NG+125 ng/mL rhIGFBP2组;(3)HG组和HG-IGFBP2-siRNA组。(1)(2)(3)均通过RT-qPCR检测TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,共聚焦显微镜检测线粒体超氧化物和活性氧荧光强度,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随HG处理时间增加,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1 mRNA水平随时间升高,Western blot结果显示IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白水平随时间升高。与NG组比较,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1均在HG 72 h时mRNA水平最高(P<0.05),Western blot结果显示IGFBP2在HG 72 h时和Cleaved Caspase 3在HG 48 h时蛋白水平最高(P<0.05),据此选72 h为后续实验诱导时间点。RT-qPCR检测结果显示,与NG组相比,阴性对照干预组mRNA表达无统计学差异(P>0.05),NG-IGFBP2-siRNA2组IGFBP2 mRNA表达水平最低(P<0.05),敲除效率最高,因此选择IGFBP2-siRNA2进行后续实验。与NG组相比较,HG组线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均增强(P<0.05)。与NG组相比较,NG+125 ng/mL rhIGFBP2组的TNF-α和ICAM-1 mRNA水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均升高(P<0.05)。与HG组相比较,HG-IGFBP2-siRNA组的TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论敲除IGFBP2后通过减弱高血糖处理下的线粒体功能紊乱和氧化应激降低人足细胞凋亡,因此抑制IGFBP2的表达有望成为糖尿病肾病的潜在治疗策略。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白2 线粒体损伤 氧化应激 细胞凋亡 糖尿病肾病
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幼小衔接 劳动同行 被引量：1
2
作者 宋晨雯 《教育家》 2021年第42期71-71,共1页
当前,"如何做好幼小衔接"成为教育管理部门、学校和家长关注的热点话题。幼小衔接是要一味照搬他人的经验还是走出自己的"步伐"?幼小衔接内容侧重知识的延伸还是素质的培养?让我们走近教育实践,探索科学的"衔... 当前,"如何做好幼小衔接"成为教育管理部门、学校和家长关注的热点话题。幼小衔接是要一味照搬他人的经验还是走出自己的"步伐"?幼小衔接内容侧重知识的延伸还是素质的培养?让我们走近教育实践,探索科学的"衔接"思路。幼儿劳动教育是幼儿德育内容之一,劳动教育旨在树立幼儿正确的劳动观念,培养幼儿积极的劳动态度,使他们初步形成良好的劳动习惯,了解基本的劳动知识与技能。上海市普陀区豪园幼儿园将劳动教育自然融入幼儿生活,开展符合幼儿实际需要的劳动活动。 展开更多
关键词 幼小衔接 上海市普陀区 劳动习惯 劳动观念 幼儿生活 幼儿德育 劳动态度 培养幼儿
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不一样的＂生日歌＂
3
作者 宋晨雯 《动漫界（幼教365）》 2015年第38期16-16,共1页
一起跟着做观看两遍升国旗的视频,宝宝仔细观察奏国歌、升国旗时人们的动作和表情,家长要引导宝宝发现,在奏国歌、升国旗时每个人的身体都要站直,行注目礼,庄重而严肃.之后,宝宝在家长的陪同下,模拟升旗仪式,把自己当作小小升旗手,能自... 一起跟着做观看两遍升国旗的视频,宝宝仔细观察奏国歌、升国旗时人们的动作和表情,家长要引导宝宝发现,在奏国歌、升国旗时每个人的身体都要站直,行注目礼,庄重而严肃.之后,宝宝在家长的陪同下,模拟升旗仪式,把自己当作小小升旗手,能自动站好,表情认真. 展开更多
关键词 生日 升旗仪式 国旗 宝宝 国歌 表情 家长
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