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抗大鼠Nogo分子单克隆抗体的制备与初步鉴定 被引量：6
1
作者 宋朝君 程希平 +5 位作者 刘雪松 朱勇 张萍 许晓光 刘莹 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期567-569,共3页
目的:制备抗大鼠Nogo分子单克隆抗体(mAb),为研究Nogo分子的组织分布和功能提供实验手段。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术制备小鼠源性抗大鼠Nogo mAb。用免疫荧光组织化学技术,对Nogo分子在大鼠中枢神经系统(CNS)的分布进行鉴定。结果:获... 目的:制备抗大鼠Nogo分子单克隆抗体(mAb),为研究Nogo分子的组织分布和功能提供实验手段。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术制备小鼠源性抗大鼠Nogo mAb。用免疫荧光组织化学技术,对Nogo分子在大鼠中枢神经系统(CNS)的分布进行鉴定。结果:获得3株分泌抗Nogo mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA测定腹水效价达10-6,两株mAb为IgGl(K)亚类,另一株为IgG2b(K),在免疫荧光组织化学技术应用中获得较满意效果。结论:获得3株能特异性识别天然Nogo分子的mAb,为进一步研究Nogo分子的结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 NOGO 单克隆抗体 组织分布
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以肿瘤抗原BAP31为靶点的基因疫苗构建及其诱导小鼠免疫反应的研究 被引量：3
2
作者 宋朝君 孙元杰 +5 位作者 魏玉英 张赟 欧阳清 陈琨 金伯泉 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期547-549,552,共4页
目的:构建重组表达载体P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法:利用分子克隆技术,构建重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31,同时构建P-BAP31/EGFP和P-L-BAP31/EGFP重组质粒,并将其以脂质体瞬时转染HeLa细... 目的:构建重组表达载体P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法:利用分子克隆技术,构建重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31,同时构建P-BAP31/EGFP和P-L-BAP31/EGFP重组质粒,并将其以脂质体瞬时转染HeLa细胞,通过荧光显微镜观察目的蛋白的表达;将重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31免疫C57BL/6小鼠,采用间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价;通过酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测免疫脾细胞在受到BAP31抗原刺激后产生IFN-γ和IL-4细胞因子的频率;通过乳酸脱氢酶(LDH释放)试验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的应答。结果:酶切及测序结果表明,成功构建了针对BAP31肿瘤抗原的P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗。通过荧光显微镜观察重组质粒转染的HeLa细胞,可见EGFP报告基因表达的绿色荧光。ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价发现,带LAMP组明显高于不带LAMP组(P<0.05),且两者均高于空质粒(P-LAMP)及正常对照(N)组(P<0.01)。ELISPOT检测脾细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的频率,带LAMP组与其他组相比显著提高(P<0.01)。LDH释放试验显示,带LAMP组的特异性CTL活性高于不带LAMP组,且均高于对照组(P<0.01)。结论:构建了针对肿瘤抗原BAP31的全长基因疫苗,以其免疫C57BL/6小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫反应,其中,P-L-BAP31基因疫苗各项免疫反应均优于P-BAP31。 展开更多
关键词 BAP31分子 LAMP分子 基因疫苗 ELISPOT
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TRAIL及其受体在正常心脏组织的免疫组织化学定位 被引量：4
3
作者 宋朝君 刘雪松 +5 位作者 陈丽华 朱勇 许晓光 朱参胜 庄然 金伯泉 《心脏杂志》 CAS 2003年第6期490-492,共3页
目的 :观察正常人心脏组织中 TRAIL 及其受体 DR4、DR5、Dc R1和 Dc R2的表达分布情况 ,为进一步明确这些分子在心肌损伤中的作用机制提供形态学依据。方法 :用抗 TRAIL及其受体的单克隆抗体 (m Ab) ,应用免疫组织化学染色技术 ,检测正... 目的 :观察正常人心脏组织中 TRAIL 及其受体 DR4、DR5、Dc R1和 Dc R2的表达分布情况 ,为进一步明确这些分子在心肌损伤中的作用机制提供形态学依据。方法 :用抗 TRAIL及其受体的单克隆抗体 (m Ab) ,应用免疫组织化学染色技术 ,检测正常人心脏组织中 TRAIL及其受体 DR4、DR5、Dc R1和 Dc R2的表达。结果 :TRAIL及其受体 DR4、DR5、Dc R1和 Dc R2在正常人心脏组织中均有表达 ,表达产物主要分布于胞浆内 ,胞膜上也有表达。结论 展开更多
关键词 TRAIL DR4 DR5 DCR1 DcR2 免疫组织化学 心脏 心肌损伤 单克隆抗体 细胞凋亡
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抗丝氨酸磷酸化序列特异性单克隆抗体的制备
4
作者 宋朝君 许晓光 +3 位作者 庄然 王鑫 田莹 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期F0003-F0003,共1页
关键词 蛋白质磷酸化 信号转导 单克隆抗体
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基于数字电路的交通灯控制器的设计与仿真 被引量：3
5
作者 宋朝君 《电子技术与软件工程》 2013年第20期96-97,共2页
把数字电路的设计与EDA仿真软件相互结合,设计一个十字路口交通灯控制器。该控制器能够实现对十字路口交通信号灯控制。利用EDA这种高效的设计平台,能够方便地设计电路,并通过对电路仿真来验证电路是否达到设计要求。与传统的设计方法相... 把数字电路的设计与EDA仿真软件相互结合,设计一个十字路口交通灯控制器。该控制器能够实现对十字路口交通信号灯控制。利用EDA这种高效的设计平台,能够方便地设计电路,并通过对电路仿真来验证电路是否达到设计要求。与传统的设计方法相比,它具有灵活性强、低成本、高效率的优越性。 展开更多
关键词 EDA 数字电路 电路仿真
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基于ZigBee协议的多跳无线传感器网络设计 被引量：1
6
作者 宋朝君 《计算机光盘软件与应用》 2013年第13期282-283,共2页
本文介绍了一种以ZigBee协议为核心的多跳无线传感器网络设计,传感器节点处理器采用ATMEL公司的ATmega128L芯片,无线通信采用Chipcon公司的CC2420射频芯片,传感器采用数字湿度温度传感器SHT10,对不同功能的节点采用不同的程序设计,成功... 本文介绍了一种以ZigBee协议为核心的多跳无线传感器网络设计,传感器节点处理器采用ATMEL公司的ATmega128L芯片,无线通信采用Chipcon公司的CC2420射频芯片,传感器采用数字湿度温度传感器SHT10,对不同功能的节点采用不同的程序设计,成功实现数据在无线传感器网络节点间的多跳路由。 展开更多
关键词 无线传感器网络 ZIGBEE协议 多跳 协调器 路由器 终端设备
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多功能8路数字抢答器的设计与仿真实现 被引量：1
7
作者 宋朝君 《计算机光盘软件与应用》 2013年第19期57-58,共2页
本文详细阐述了一种集抢答、定时、报警,数码显示、能够自锁的多功能8路数字抢答器的设计思路,并采用EDA技术进行了电路设计与仿真,仿真结果证明该电路设计合理,具有比较可靠的工作方式和更强的适用性,达到了预期的设计目的和要求,在实... 本文详细阐述了一种集抢答、定时、报警,数码显示、能够自锁的多功能8路数字抢答器的设计思路,并采用EDA技术进行了电路设计与仿真,仿真结果证明该电路设计合理,具有比较可靠的工作方式和更强的适用性,达到了预期的设计目的和要求,在实际生活中具有很强的实用性。 展开更多
关键词 抢答器 编码 锁存器 译码 555秒脉冲产生电路 计数器
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主动PBL方法在八年制《医学免疫学》教学中的应用与思考 被引量：18
8
作者 张赟 杨琨 +7 位作者 陈丽华 宋朝君 方亮 李琦 庄然 金伯泉 温伟红 杨安钢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期947-948,共2页
八年制医学生的培养目标是培养临床医学博士。医学免疫学是与临床联系较为紧密的基础课之一,在教学中如何加强学生处理临床问题的逻辑思维能力和提高探讨临床表象之下深层次科学问题的科研思维水平,一直是免疫学教学的主要关注之一。PBL... 八年制医学生的培养目标是培养临床医学博士。医学免疫学是与临床联系较为紧密的基础课之一,在教学中如何加强学生处理临床问题的逻辑思维能力和提高探讨临床表象之下深层次科学问题的科研思维水平,一直是免疫学教学的主要关注之一。PBL（Problem based learning,PBL）教学方法由美国的神经病学教授Barrows于1969年首创,是以问题为导向的教学方法,是以学生为中心的教育方式, 展开更多
关键词 《医学免疫学》 免疫学教学 PBL 临床问题 应用 逻辑思维能力 以问题为导向 以学生为中心
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采用互动式教学进行《医学免疫学》课堂授课的体会 被引量：13
9
作者 温伟红 王涛 +5 位作者 庄然 宋朝君 马樱 金伯泉 杨琨 杨安钢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1225-1227,共3页
医学免疫学是基础医学的重要组成部分,是我国高等医学院校的专业必修课。作为生命科学的前沿学科,医学免疫学的理论和技术发展日新月异,并不断向临床医学和预防医学等多学科渗透,已逐步成为沟通基础医学和临床医学的重要桥梁学科。尽管... 医学免疫学是基础医学的重要组成部分,是我国高等医学院校的专业必修课。作为生命科学的前沿学科,医学免疫学的理论和技术发展日新月异,并不断向临床医学和预防医学等多学科渗透,已逐步成为沟通基础医学和临床医学的重要桥梁学科。尽管具有重要的学科地位,但医学免疫学具有理论性强,内容抽象、枯燥等特点,大部分学生认为它是一门让人头疼的学科,大量的免疫学概念,免疫分子、免疫细胞之间的相互作用,以及它们与临床疾病之间的关系，使学生们感到非常难以理解和记忆。 展开更多
关键词 医学免疫学 互动式教学 课堂授课 学科地位 医学院校 免疫细胞 免疫分子 生命科学 教学效果 学习过程
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Nogo-A在成年大鼠脑内神经元的分布 被引量：17
10
作者 程希平 刘惠玲 +4 位作者 宋朝君 金伯泉 焦西英 游思维 鞠躬 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期465-470,共6页
目的研究Nogo_A阳性神经元在正常成年大鼠脑内的分布。方法免疫组织化学方法(ABC法)。结果Nogo_A在正常大鼠脑内的神经元和纤维有广泛的表达,出现在许多核团,主要在1.前脑的大脑皮质、嗅觉系统、海马、隔区、基底神经节、丘脑、下丘脑... 目的研究Nogo_A阳性神经元在正常成年大鼠脑内的分布。方法免疫组织化学方法(ABC法)。结果Nogo_A在正常大鼠脑内的神经元和纤维有广泛的表达,出现在许多核团,主要在1.前脑的大脑皮质、嗅觉系统、海马、隔区、基底神经节、丘脑、下丘脑和视前区等部位;2.脑干的视听觉、体躯感觉、内脏觉核团、运动核团以及网状结构等;3.小脑Purkinje细胞和深核。阳性反应物主要见于神经元的胞浆和突起内,在脑室系统的嗅球室管膜、侧脑室和第三脑室部分室管膜细胞及其突起内也有表达。结论Nogo-A在脑内神经元的广泛存在提示其在正常状态下的脑功能中可能起重要作用。 展开更多
关键词 NOGO-A 大脑 脑室 神经元 免疫细胞化学 大鼠
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应用红细胞花环形成试验筛选肿瘤膜抗原单克隆抗体 被引量：33
11
作者 黄海燕 朱勇 +5 位作者 庄然 许晓光 刘雪松 宋朝君 曹云新 金伯泉 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第14期1343-1344,共2页
关键词 红细胞花环形成试验 抗体 单克隆 抗原 肿瘤
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基于ZigBee协议的无线传感网路及应用
12
作者 宋朝君 赵东风 《计算机光盘软件与应用》 2010年第10期54-55,共2页
无线传感网络因其巨大的应用前景,已经引起了学术界的高度关注,成为科学界研究的热点问题之一。本文先对无线传感网路进行基本概述,接着介绍了ZigBee协议,最后以家用自动化的实例描述了基于ZigBee协议的无线传感网路及应用。
关键词 无线传感网络 Zi班ee协议
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在肾脏疾病中检测血清Cystatin C的意义 被引量：19
13
作者 张雅君 王汉民 +1 位作者 陈威 宋朝君 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第10期47-49,共3页
目的 :探讨肾脏疾病中检测血清胱蛋白酶抑制剂以C(CystatinC)浓度评估肾小球滤过率 (GFR)的价值。方法 :应用酶联免疫吸附法 (ELISA) ,测定经临床及实验室检查证实有肾脏损害患者的血清CystatinC浓度 ,同时测定血肌酐 (Scr) ,尿素氮 (B... 目的 :探讨肾脏疾病中检测血清胱蛋白酶抑制剂以C(CystatinC)浓度评估肾小球滤过率 (GFR)的价值。方法 :应用酶联免疫吸附法 (ELISA) ,测定经临床及实验室检查证实有肾脏损害患者的血清CystatinC浓度 ,同时测定血肌酐 (Scr) ,尿素氮 (BUN)和血 β2 -微球蛋白 (β2 -GM) ,采用Cockcroft -Cault公式计算肌酐清除率 (Cockcroft) ,并用同位素99mTc -DTPA测定肾小球滤过率 ,血清CystatinC浓度分别与其它指标进行相关性分析。结果 :血清CystatinC浓度与β2 -GM (r=0 .69,P <0 .0 1) ;Scr(r=0 .63 5 ,P <0 .0 1) ;BUN(r=0 .5 49,P <0 .0 1呈正相关 ,与Cockcroft(r=- 0 .743 ,P <0 .0 1) ;99Tc -DTPA测定肾小球滤过率 (r =- 0 .791,P <0 .0 1呈负相关。结论 :临床上应用检测血清CystatinC浓度来评估肾功能是一种特异性高、准确性好、快速简单的方法。 展开更多
关键词 小球滤过率 CYSTATIN C 血肌酐
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抗人TNF单克隆抗体对TNF诱导的NF-κB核转位的抑制作用 被引量：6
14
作者 朱参胜 欧阳为明 +3 位作者 刘雪松 梁晓聪 宋朝君 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期585-587,共3页
目的 :鉴定 3株抗人TNF单克隆抗体 (mAb)D2、E6和F6对TNF诱导的NF κB核转位的抑制作用。方法 :将不同浓度的 3株mAb及无关mAb分别与TNF溶液孵育后 ,加入到ECV30 4细胞培养液中。孵育 1h后收获细胞 ,从中提取核蛋白并测定其含量 ,用电... 目的 :鉴定 3株抗人TNF单克隆抗体 (mAb)D2、E6和F6对TNF诱导的NF κB核转位的抑制作用。方法 :将不同浓度的 3株mAb及无关mAb分别与TNF溶液孵育后 ,加入到ECV30 4细胞培养液中。孵育 1h后收获细胞 ,从中提取核蛋白并测定其含量 ,用电泳迁移率变动分析 (EMSA)检测核提取液中NF κB的核转位。结果 :3株抗TNFmAb均可抑制TNF诱导的ECV30 4细胞中NF κB的核转位。其中mAbD2的抑制作用最强 ,其次为mAbF6和E6 ,无关对照抗体也有一定的非特异性反应。抑制作用与加入的mAb呈良好的剂量依赖关系 ,在 10mg/L和 0 .1mg/L条件下 ,mAbD2的抑制率分别为 94 .2 %和75 .1% ,mAbE6分别为 6 4 .9%和 2 8.6 % ,mAbF6分别为 70 .3%和 4 9.5 % ,无关对照抗体分别为 2 0 .0 %和 11.1%。结论 :mAbD2、E6和F6可特异性地抑制TNF诱导的NF κB核转位 。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 单克隆抗体 NF-ΚB 电泳迁移率变动分析(EMSA)
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抗3种标签蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：4
15
作者 徐竹蔚 刘莹 +5 位作者 户义 朱参胜 张圆 宋朝君 许晓光 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期613-614,618,共3页
目的:制备并鉴定抗GST、His×6及FLAG的单克隆抗体(mAb)。方法:分别以含GST、His×6及FLAG标签的融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗相应标签蛋白的mAb。用Westernblot检测mAb对变性融合蛋白的反应性。用流式细胞... 目的:制备并鉴定抗GST、His×6及FLAG的单克隆抗体(mAb)。方法:分别以含GST、His×6及FLAG标签的融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗相应标签蛋白的mAb。用Westernblot检测mAb对变性融合蛋白的反应性。用流式细胞术(FCM)检测抗FLAGmAb对细胞膜表面融合蛋白的反应性。结果:共获得12株可稳定分泌抗3种标签蛋白mAb的杂交瘤细胞(其中5株可分泌抗GSTmAb,5株可分泌抗His×6mAb,2株可分泌抗FLAGmAb)。11株mAb均可用于相应融合蛋白的Westernblot检测。1株抗FLAGmAb检测细胞膜表面融合蛋白的阳性率,与商品化的mAbM2相接近。用1株抗His×6mAb制备亲和层析柱,并用于纯化IL-8-His融合蛋白,也获得较满意的结果。结论:成功地制备了抗GST、抗His×6及抗FLAG的mAb,为含标签的融合蛋白的研究和应用提供了重要的工具。 展开更多
关键词 标签蛋白 GST FLAG 单克隆抗体
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甲状腺肿瘤患者血清中甲状腺球蛋白含量的检测 被引量：4
16
作者 李琦 宋朝君 +4 位作者 张赟 陈丽华 王鑫 徐竹蔚 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期930-930,共1页
关键词 甲状腺球蛋白 夹心ELISA 检测
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抗CD30L/CD153单克隆抗体的制备与初步鉴定 被引量：4
17
作者 许晓光 刘雪松 +2 位作者 朱勇 宋朝君 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期747-747,共1页
关键词 CD30L/CD15 单克隆抗体 鉴定
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基于ZigBee协议的温度监测系统的设计
18
作者 宋朝君 《科技信息》 2013年第22期232-232,共1页
本文介绍了一种基于ZigBee协议的温度监测系统的设计,硬件设计以ATmega128L芯片和CC2420射频芯片为主要组成,软件设计建立了以轮询原理为主的两级混合控制型无线传感器网络。最后通过实验来验证本设计的可靠性。
关键词 无线传感网络 ZIGBEE协议 MAC 轮询原理
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肿瘤细胞表面抗原的单克隆抗体-免疫沉淀筛选法 被引量：2
19
作者 许晓光 黄海燕 +4 位作者 宋朝君 石炳毅 蔡明 李州利 金伯泉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1348-1351,共4页
目的筛选新的肿瘤特异性抗原,为探索新的肿瘤诊断标志物和肿瘤疫苗奠定基础。方法将人宫颈癌细胞系Hela细胞免疫BALB/c小鼠,制备杂交瘤,应用杂交瘤培养上清对人结肠癌细胞系Colo205、人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji等细胞进行红细胞花环形... 目的筛选新的肿瘤特异性抗原,为探索新的肿瘤诊断标志物和肿瘤疫苗奠定基础。方法将人宫颈癌细胞系Hela细胞免疫BALB/c小鼠,制备杂交瘤,应用杂交瘤培养上清对人结肠癌细胞系Colo205、人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji等细胞进行红细胞花环形成实验以筛选阳性杂交瘤。应用Colo205、Raji、人肺癌细胞系PLA801、人胃癌细胞系7901、人T细胞白血病细胞系Jurkat、小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0等肿瘤细胞系、胚胎细胞系人胚肾上皮细胞系293T、人脐静脉内皮细胞系ECV304和健康人外周血单个核细胞(PBMC)等对所筛选的单克隆抗体进行活细胞免疫荧光染色和流式细胞仪鉴定单克隆抗体对多种细胞系膜表面天然抗原的识别情况,同时应用免疫沉淀法和Western blotting检测所筛单克隆抗体对细胞膜抗原的识别。结果采用红细胞花环形成实验从制备的抗体中成功筛选出3株单克隆抗体,流式分析显示其可同时识别Hela、293T、ECV304、Raji和Colo205细胞,但却不能识别Jur-kat、PLA801、7901、SP2/0细胞以及静止或活化的人PBMC。Western blotting证实这3株抗体可识别表达于Hela、Raji细胞膜的分子量约为47kD的膜蛋白。结论成功地制备了3株可识别肿瘤抗原候选分子的mAb,为筛选和鉴定肿瘤特异性抗原提供了有力手段。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 免疫沉淀法 印记法 蛋白质 抗原 肿瘤
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Triton X-100洗涤剂对抗原包被效率的影响及其对策 被引量：3
20
作者 李永明 宋朝君 +3 位作者 张葵 李琦 田莹 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期308-309,共2页
目的:观察抗原中残留的洗涤剂成分在间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆时,对抗原包被效率的影响以及相应的对策。方法:以卵白蛋白(OVA)、卵运铁蛋白(OT)和本室制备的相应的单克隆抗体(mAb)作为实验模型,在抗原中加入不同浓度梯度的Triton X-... 目的:观察抗原中残留的洗涤剂成分在间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆时,对抗原包被效率的影响以及相应的对策。方法:以卵白蛋白(OVA)、卵运铁蛋白(OT)和本室制备的相应的单克隆抗体(mAb)作为实验模型,在抗原中加入不同浓度梯度的Triton X-100包被ELISA板,用相应的mAb细胞株培养上清做间接ELISA,确定Triton X-100对包被效率的影响。结果:当包被抗原中Triton X-100的浓度为3×10-6(v/v)时,可以明显抑制包被效率,当TritonX-100的浓度为1.6×10-4(v/v)时几乎可以完全抑制抗原的包被;在含有一定浓度Triton X-100的条件下,提高抗原的浓度,或适当增大包被过程中的稀释倍数,可以明显提高包被效率。结论:洗涤剂对抗原包被有较强的影响,在抗体制备过程中,应尽量提高抗原的初始浓度,降低洗涤剂的浓度,设计合理的针对含有洗涤剂抗原的ELISA筛选方案,是mAb制备成功的关键之一。 展开更多
关键词 抗体 ELISA 洗涤剂
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