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一张含有227个SSR标记的大豆遗传连锁图 被引量:24
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作者 宛煜嵩 王珍 +2 位作者 肖英华 吕蓓 方宣钧 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第1期15-20,共6页
利用由大豆主栽种晋豆23和农家种灰布支(ZDD2315)杂交培育的F10代大豆重组自交系群体Jinf,共474个家系作为作图群体。依据1999年Cregan等发表的大豆“公共图谱”,选用441对SSR引物,建成了含有227个SSR座位的大豆SSR连锁图,该图覆盖大豆... 利用由大豆主栽种晋豆23和农家种灰布支(ZDD2315)杂交培育的F10代大豆重组自交系群体Jinf,共474个家系作为作图群体。依据1999年Cregan等发表的大豆“公共图谱”,选用441对SSR引物,建成了含有227个SSR座位的大豆SSR连锁图,该图覆盖大豆基因组1900cM,两个相邻标记的平均间距为8.3cM,归属于20个大豆连锁群,与Song等2004年发表的公共图谱相比,所有标记都被定位于相同的连锁群,且排列顺序大致相同,具有很好的线性关系。 展开更多
关键词 大豆基因 遗传连锁图 SSR标记 杂交培育 连锁群 SSR引物 农家种 重组自交系群体 作图群体 图谱
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中国大豆孢囊线虫抗性研究进展 被引量:18
2
作者 宛煜嵩 王珍 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第5期609-619,共11页
中国是大豆的故乡,曾经是世界上最主要的大豆生产国和出口国。如今,中国的大豆生产量已从世界首位降到美国、巴西之后,由大豆出口国变为大豆进口国,其主要的原因之一是中国大豆生产未能有效的控制大豆孢囊线虫的危害,以致中国大豆平均... 中国是大豆的故乡,曾经是世界上最主要的大豆生产国和出口国。如今,中国的大豆生产量已从世界首位降到美国、巴西之后,由大豆出口国变为大豆进口国,其主要的原因之一是中国大豆生产未能有效的控制大豆孢囊线虫的危害,以致中国大豆平均单产处于较低水平。大豆孢囊线虫(Soybean Cyst Nematode, 简称SCN)是一种土传的定居性内寄生线虫,大豆孢囊线虫的二龄幼虫从根尖处侵入根部,造成根组织的代谢失调与组织损伤,受害的大豆根系短粗,植株矮小,叶片变黄,产量严重降低。SCN的特点是分布广、危害重、寄主范围宽、传播途径多,存活时间长,防治极难。SCN危害已遍及中国大豆主要生产区,主要分布在我国的东北大豆主产区的黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古及黄淮海大豆主产区的山东、河北、山西、安徽、河南、北京等省市,每年SCN发生面积达150万hm2以上。本文综述了近年来我国在大豆孢囊线虫研究方面取得的进展,主要包括以下几个方面:SCN生理小种的研究、SCN抗性资源发掘、SCN经典遗传及分子遗传学研究及SCN抗性育种等研究进展。 展开更多
关键词 中国 大豆 孢囊线虫 抗性
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用AFLP标记饱和大豆SSR遗传连锁图 被引量:11
3
作者 吕蓓 张丽霞 +3 位作者 宛煜嵩 肖英华 刘丕庆 方宣钧 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第2期163-172,共10页
本研究将52个AFLP标记整合到由宛煜嵩等(2005)构建的含有227个SSR标记的大豆遗传连锁图上,绘制成一张基于SSR-AFLP标记的大豆遗传连锁图,总遗传图距为2512cM,相邻标记间的平均距离为9.0cM。AFLP标记的整合使得图谱的总图距增长了32%。在... 本研究将52个AFLP标记整合到由宛煜嵩等(2005)构建的含有227个SSR标记的大豆遗传连锁图上,绘制成一张基于SSR-AFLP标记的大豆遗传连锁图,总遗传图距为2512cM,相邻标记间的平均距离为9.0cM。AFLP标记的整合使得图谱的总图距增长了32%。在D1a、E、F、G、K连锁群上,AFLP标记主要整合在连锁群的末端,其中G连锁群尤为明显,末端增加了19个AFLP标记,使得G连锁群的长度由原来的121.2cM增加到259.1cM,相邻标记间的平均距离由原来的7.129cM变为7.197cM;在A2、B1、C2、D2、H、J、L、N、O连锁群,由于加入了AFLP标记使得这些连锁群的标记密度有所增加,改善了标记分布的均匀性。A2连锁群上添加了1个AFLP标记,消除了1个间隙;D2连锁群上添加了2个AFLP标记,提高了原来的一个超过40cM的区间(Satt301和Satt186)标记密度;J连锁群上添加了2个AFLP标记,消除了2个间隙。AFLP标记整合后,大多数连锁群上的SSR标记的顺序和遗传图距几乎与宛煜嵩等(2005)构建的大豆遗传连锁图上的顺序和图距一致,只有M、N和O3个连锁群上的SSR标记顺序发生了一些变化,如M连锁群上的Satt590、Satt201和Satt150及O连锁群上的Satt241和Satt479发生换位;N连锁群上的几个SSR标记的位置发生随机换位。我们认为构建一张理想的遗传图谱,需要来源于不同遗传背? 展开更多
关键词 AFLP标记 连锁群 遗传连锁图 SSR标记 大豆 遗传图 添加 末端 构建 遗传背景
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大豆重组自交系Jinf的构建及主要农艺性状和SSR基因型分析 被引量:10
4
作者 刘学义 宛煜嵩 +10 位作者 王珍 马俊奎 史宏 任小俊 任冬莲 张小虎 李有应 冯凤鸣 徐俊 李永起 方宣钧 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第2期157-177,共21页
本研究以晋豆 2 3为母本 ,灰布支黑豆为父本 ,用“单粒混传”法构建了一个含有 4 74个家系的F10代的大豆重组自交系Jinf。 2 0 0 2年本研究组对F8代RIL群体Jinf进行生育期、形态性状、产量构成及抗逆性等 2 9个性状进行了观察记载和统... 本研究以晋豆 2 3为母本 ,灰布支黑豆为父本 ,用“单粒混传”法构建了一个含有 4 74个家系的F10代的大豆重组自交系Jinf。 2 0 0 2年本研究组对F8代RIL群体Jinf进行生育期、形态性状、产量构成及抗逆性等 2 9个性状进行了观察记载和统计分析研究。所有观察性状在RIL群体Jinf中均表现有较大的变异范围 ,绝大部分性状呈连续变异、正态分布 ,且存在双向超亲分离现象 ,表明这些观察性状大都为数量性状由多基因控制。从表型分析初步认为各家系内部趋于纯合。本研究进一步选取了能覆盖大豆基因组的 35 5对SSR引物对RIL群体Jinf进行SSR分析 ,2 12对SSR在亲本中表现有多态性 ,多态率为5 9 72 %。 2 12对引物获得 2 13个座位用来评估大豆群体的遗传结构 ,各座位在群体中的多态性指数趋向于 0 5 ,在 0 375 - 0 5 0 0范围内波动。 16 0个SSR座位 (75 12 % )在群体中呈 1∶1的分离比 ,5 3个SSR座位 (2 4 88% )在群体中偏分离 ,SSR座位的杂异率在 0 - 9 32 %之间。分析还表明 111个家系(94 0 7% )趋于纯合 ,其中 31个家系 (2 6 2 7% )完全纯合 ,而有 7个家系的杂合率在 15 31- 42 72 %之间。分析表明大豆RIL群体Jinf的各个家系的基因型组成父本灰布支的贡献率为 5 1% 。 展开更多
关键词 大豆 重组自交系 农艺性状 SSR 基因型分析 单粒混传法 数量性状
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转基因抗虫棉外源DNA插入整合结构分析和转化事件特异性检测方法的建立 被引量:11
5
作者 侯娜 贺辉群 +4 位作者 董美 徐荣旗 宛煜嵩 金芜军 刘好宝 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期317-323,共7页
通过3'端2次高效热不对称交互PCR(hiTAIL-PCR)和5'端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ基因和Bt基因两个表达盒串联构成。插入位点处缺... 通过3'端2次高效热不对称交互PCR(hiTAIL-PCR)和5'端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ基因和Bt基因两个表达盒串联构成。插入位点处缺失75个碱基,未发生基因重组现象。根据3'端旁侧序列设计引物,特异性和灵敏度检测结果表明,建立的3'端定性PCR检测方法特异性强,灵敏度高,最低检测限为每100ng模板量的0.05%,相当于11个靶标序列拷贝。本研究结果对转基因抗虫棉外源基因检测和生物安全评价具有重要意义。 展开更多
关键词 抗虫棉 整合结构 PCR检测 转化事件特异性
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大豆抗病基因同源序列的克隆与分析 被引量:15
6
作者 丁海 宛煜嵩 +1 位作者 朱美霞 方宣钧 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第2期217-223,共7页
本研究根据已知抗病基因的NBS保守序列区设计 4对简并引物和 1对特异引物 ,以大豆农家种兴县灰布支黑豆为材料 ,应用PCR方法获得了 11条来自基因组DNA的RGA序列和 2条来自cDNA的RGA序列 ,序列长度在 5 0 0 - 6 33bp之间 ,其中 8条来自... 本研究根据已知抗病基因的NBS保守序列区设计 4对简并引物和 1对特异引物 ,以大豆农家种兴县灰布支黑豆为材料 ,应用PCR方法获得了 11条来自基因组DNA的RGA序列和 2条来自cDNA的RGA序列 ,序列长度在 5 0 0 - 6 33bp之间 ,其中 8条来自基因组DNA和 2条来自cDNA的RGA序列已在GeneBank登录 (登录号为 :AF30 5 388- 30 5 392 ,AY0 0 8380 - 0 0 8382 ,AY0 4 886 3-AY0 4 886 4)。 13条序列都不同程度的含有NBS保守区的P -环 (GGVGKTT)、kinase - 2 (VLDD)、kinase - 3(GSRII)及跨膜区GLPL等特征序列结构 ,由此推导出的氨基酸序列同已知抗病基因L6、RPM 1、SRPS2、N编码的氨基酸序列表现出从 2 5 % - 42 %的同源性。本研究克隆的RGA序列根据其相似性可分为 4组 ,与已发表的大豆抗病类似基因 (RLG)具有较高的相似性。 展开更多
关键词 大豆 抗病基因 基因克隆 序列分析 PCR 抗病基因类似物
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水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织再生体系的建立 被引量:12
7
作者 伍成祥 宛煜嵩 +2 位作者 徐俊 苏金 方宣钧 《热带作物学报》 CSCD 2002年第3期88-95,共8页
采用水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织作为分化再生的外植体,通过优化激素组合和调节培养基渗透压,建立了适合水稻遗传转化的高效再生体系.将水稻成熟胚诱导愈伤组织分化再生的过程划分为3个不同时期,即成熟胚盾片愈伤组织诱导,胚性细胞诱导... 采用水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织作为分化再生的外植体,通过优化激素组合和调节培养基渗透压,建立了适合水稻遗传转化的高效再生体系.将水稻成熟胚诱导愈伤组织分化再生的过程划分为3个不同时期,即成熟胚盾片愈伤组织诱导,胚性细胞诱导保持,胚性愈伤组织分化再生.以Culture I(LS+2,4-D 2.0 mg/L)诱导成熟胚盾片愈伤组织,愈伤组织剥离后接种于CultureⅡ-3(LS+2,4-D 2.5 mg/L+山梨醇3g/L)上诱导胚性愈伤组织,继代后接种于CultureⅢ-2(MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/t+Kinetin 2.0 mg/L+山梨醇8g/L)上分化成苗.培养结果表明,该再生体系所获得的胚性愈伤组织分化再生率均在60%~80%之间.利用本研究建立的高效再生体系建立水稻外源基因遗传转化系统,使转化过程中所得转化愈伤组织高效再生成苗,从而顺利获得转化植株,可以提高水稻外源基因转化的效率,为水稻品种的定向遗传改良提供优良的遗传转化技术体系. 展开更多
关键词 水稻 成熟胚 盾片诱导 再生体系 愈伤组织
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中国转基因水稻的研究进展及产业化问题分析 被引量:15
8
作者 孙国庆 金芜军 +1 位作者 宛煜嵩 林敏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1-6,共6页
水稻在我国粮食生产和消费中占有重要地位,也是世界上最重要的粮食作物之一。水稻转基因研究已成为当前国内外植物分子生物学和作物育种研究的热点。目前我国转基因水稻研究处于国际领先水平,有望成为转基因抗虫棉之后又一个进入产业化... 水稻在我国粮食生产和消费中占有重要地位,也是世界上最重要的粮食作物之一。水稻转基因研究已成为当前国内外植物分子生物学和作物育种研究的热点。目前我国转基因水稻研究处于国际领先水平,有望成为转基因抗虫棉之后又一个进入产业化的转基因粮食作物,这可能将在确保我国粮食安全中发挥重要贡献。从国内外转基因水稻研发概况、我国Bt抗虫水稻生物安全评价两方面综述了我国转基因水稻产业化的前景,并在此基础上对产业化提出相关建议与对策。 展开更多
关键词 转基因 水稻 产业化
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转基因作物安全性评价与商品化前景分析 被引量:12
9
作者 陈洁君 王劲 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2007年第3期38-43,共6页
转基因作物的安全性评价是转基因作物生产和推广的前提,全面了解转基因作物安全性评价对于指导当前的转基因作物研究具有重要意义。以转基因作物安全性评价实施以来的数据为依据,全面分析转基因作物安全性评价中使用的基因、改变的性状... 转基因作物的安全性评价是转基因作物生产和推广的前提,全面了解转基因作物安全性评价对于指导当前的转基因作物研究具有重要意义。以转基因作物安全性评价实施以来的数据为依据,全面分析转基因作物安全性评价中使用的基因、改变的性状、转化方法和推广的面积等参数标准,试图阐明当前转基因发展的趋势和现状。同时还介绍了中国当前转基因作物安全性评价的成果和相关问题。 展开更多
关键词 转基因作物 生物技术 商品化 生物安全性
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三种土壤微生物总DNA提取方法的比较 被引量:11
10
作者 王丽娜 许修宏 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期331-334,共4页
本文对3种常用的土壤微生物总DNA提取方法Martin法、高盐改进法及试剂盒法进行了比较,并通过DNA得率、纯度及16S rDNA V3可变区的PCR扩增结合DGGE法(denaturinggradient gel electrophoresis),分别对3种方法进行评价。结果表明,3种方法... 本文对3种常用的土壤微生物总DNA提取方法Martin法、高盐改进法及试剂盒法进行了比较,并通过DNA得率、纯度及16S rDNA V3可变区的PCR扩增结合DGGE法(denaturinggradient gel electrophoresis),分别对3种方法进行评价。结果表明,3种方法提取的DNA均能满足土壤微生物多样性分析的要求。其中试剂盒方法操作简单,提取的DNA质量较高,但DNA得率较低且成本昂贵。Martin法和高盐改进法用时较长,DNA得率较高,纯度较低,但对后续PCR扩增和DGGE分析没有明显影响,且成本低廉。 展开更多
关键词 土壤微生物 DNA提取 DGGE
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脱氧核糖核酸定量的潜在基准方法研究进展 被引量:4
11
作者 李亮 张秀杰 +2 位作者 宛煜嵩 楚燕春 金芜军 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期158-163,共6页
脱氧核糖核酸定量分析是食品安全检验、医疗诊断、转基因检测与病原微生物鉴定等相关领域的基础。常见的定量方法种类繁多,如紫外分光光度法、荧光染料法和实时荧光定量PCR法等等,各有所长,但测量结果缺乏可靠性、可比性和一致性。随着... 脱氧核糖核酸定量分析是食品安全检验、医疗诊断、转基因检测与病原微生物鉴定等相关领域的基础。常见的定量方法种类繁多,如紫外分光光度法、荧光染料法和实时荧光定量PCR法等等,各有所长,但测量结果缺乏可靠性、可比性和一致性。随着研究的深入与应用要求的提高,基准方法成为了核酸分析以及核酸测量能力评估的关键。本文综述了近年来三种成为潜在脱氧核糖核酸定量基准方法的研究发展,评述了各种方法的技术优势、不足与应用潜力,以期为其相关研究和利用提供参考。 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸定量 基准方法 IDMS ICP—OES MS dPCR
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转基因成分低水平混杂问题的现状 被引量:5
12
作者 柳方方 董美 +3 位作者 李凯 宛煜嵩 金芜军 李亮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期1-5,共5页
近20年来,转基因作物的种植面积持续增加,转基因产品的流通量和流通速度呈迅速上升趋势。在不同国家与地区间,非转基因产品内出现低含量转基因成分的问题,即转基因成分低水平混杂日趋严重。以此问题为立脚点,比较全面的阐述了7个不同国... 近20年来,转基因作物的种植面积持续增加,转基因产品的流通量和流通速度呈迅速上升趋势。在不同国家与地区间,非转基因产品内出现低含量转基因成分的问题,即转基因成分低水平混杂日趋严重。以此问题为立脚点,比较全面的阐述了7个不同国家与地区(组织)的转基因成分低水平混杂的定义,分析了共同特点;总结了各国的现行政策与允许值的规定;概述了低水平混杂问题对进出口贸易方面产生的影响,旨为我国制定低水平混杂的相关政策及检测标准提供基础资料。 展开更多
关键词 转基因作物 低水平混杂 无意混杂 阈值
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基于色谱法的超螺旋质粒DNA纯化与分析进展 被引量:4
13
作者 李亮 柳方方 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1089-1094,共6页
质粒DNA含有独立复制的遗传结构,是基因工程的常用工具,广泛应用于分子生物学基础研究、农业转基因检测、医疗诊断与基因治疗等领域。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、开口环状及线性3种。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型,并且掺杂... 质粒DNA含有独立复制的遗传结构,是基因工程的常用工具,广泛应用于分子生物学基础研究、农业转基因检测、医疗诊断与基因治疗等领域。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、开口环状及线性3种。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型,并且掺杂一定量的蛋白质、RNA、内毒素以及宿主基因组DNA,这些杂质会影响后续的应用,因此质粒DNA需要进一步精细纯化。该文对质粒DNA的新应用领域、基于色谱的精细纯化技术及产物质量分析体系进行了综述,并展望了高纯度质粒DNA精细纯化及产物分析的发展方向。 展开更多
关键词 超螺旋质粒DNA 精细纯化 色谱技术 数字PCR 综述
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莽草酸的应用及其微生物代谢合成 被引量:10
14
作者 高杰 许修宏 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2008年第S1期46-51,共6页
莽草酸是一种高价值的药用原初产物,其衍生物在抗炎、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗禽流感等方面有重要的作用。通过综述莽草酸的理化性质、药理特性及生产方法,并结合国内外的最新研究进展,重点探讨微生物代谢合成在提高莽草酸生产效率中... 莽草酸是一种高价值的药用原初产物,其衍生物在抗炎、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗禽流感等方面有重要的作用。通过综述莽草酸的理化性质、药理特性及生产方法,并结合国内外的最新研究进展,重点探讨微生物代谢合成在提高莽草酸生产效率中的应用。 展开更多
关键词 莽草酸 莽草酸途径 代谢合成
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植物抗线虫策略的分子研究进展 被引量:6
15
作者 丁海 宛煜嵩 +1 位作者 朱美霞 方宣钧 《中国农学通报》 CSCD 2002年第5期60-64,共5页
植物寄生线虫给农业生产带来极大危害。随着人们对线虫侵染的方式、植物自身抗病防御体系等研究的深入 ,利用基因工程手段从分子水平防治线虫的抗线虫策略受到了广泛关注并取得长足的进步。通过对由外源蛋白、特异表达启动子及抗线虫基... 植物寄生线虫给农业生产带来极大危害。随着人们对线虫侵染的方式、植物自身抗病防御体系等研究的深入 ,利用基因工程手段从分子水平防治线虫的抗线虫策略受到了广泛关注并取得长足的进步。通过对由外源蛋白、特异表达启动子及抗线虫基因介导的抗线虫策略的简要概述 。 展开更多
关键词 抗线虫策略 植物 寄生线虫 外源蛋白 特异启动子 抗病基因 抗病育种
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应县小黑豆对大豆孢囊线虫4号生理小种抗性的遗传分析 被引量:6
16
作者 王敬强 程大新 +1 位作者 宛煜嵩 方宣钧 《中国农学通报》 CSCD 2001年第6期12-15,共4页
大豆孢囊线虫(Heterodera glycine Ichinohe)是大豆生长过程中最具破坏力的病害之一,我国大豆孢囊线虫以4号生理小种危害最为严重。研究其抗性的遗传机理,对我国大豆抗病育种具有重要意义。应县小黑豆... 大豆孢囊线虫(Heterodera glycine Ichinohe)是大豆生长过程中最具破坏力的病害之一,我国大豆孢囊线虫以4号生理小种危害最为严重。研究其抗性的遗传机理,对我国大豆抗病育种具有重要意义。应县小黑豆是我国山西省农家品种,对大豆孢囊线虫4号生理小种表现为良好的抗性,本研究以应县小黑豆 x晋豆23组合的后代群体为试验材料,利用塑料钵柱法对F2和 F3群体进行抗性鉴定,采用两种抗病性评价标准,对大豆孢囊线虫4号生理小种杭性进行遗传分析。结果表明:采用标准品种法评价应县小黑豆对大豆孢囊线虫4号生理小种的抗性时,由1对隐性基因控制,而采用绝对孢囊数评价应县小黑豆对大豆孢囊线虫4号生理小种的抗性时,由2对隐性基因控制。显然,在晋豆23与应县小黑豆的杂交组合中,大豆孢囊线虫4号生理小种的抗性表现为隐性遗传,由1~2对隐性基因控制。研究结果还表明,利用F3代株系进行大豆孢囊线虫杭性鉴定比对马代单株直接进行大豆孢囊线虫抗性鉴定具有更好的稳定性和可靠性。 展开更多
关键词 应县小黑豆 大豆孢囊线虫 4号生理小种 抗性鉴定 遗传分析 抗病育种
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利用复合PCR结合DNA芯片的方法进行快速转基因事件检测 被引量:4
17
作者 肖一争 唐咏 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2007年第4期101-107,共7页
以我国批准进口用作加工原料的6种转基因玉米为材料,根据其外源基因、载体构建及插入位点,应用6对特异性引物及35S、NOS引物,设计并优化了复合PCR反应体系,对其进行转基因成分检测。同时尝试利用复合PCR与DNA芯片相结合,对不同转基因玉... 以我国批准进口用作加工原料的6种转基因玉米为材料,根据其外源基因、载体构建及插入位点,应用6对特异性引物及35S、NOS引物,设计并优化了复合PCR反应体系,对其进行转基因成分检测。同时尝试利用复合PCR与DNA芯片相结合,对不同转基因玉米混合样品进行检测,探索建立转基因事件快速检测和确认方法。 展开更多
关键词 转基因玉米 复合PCR DNA芯片
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cry1A基因通用检测方法的建立
18
作者 董美 胡晓颖 +4 位作者 孟丽霞 宛煜嵩 刘卫晓 金芜军 李亮 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期174-180,共7页
cry1A基因编码苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白,是转基因植物使用最为广泛的抗虫基因,包括cry1Ab、cry1Ac、cry1A.105、cry1Ab/Ac等类型,cry1A基因为靶标的检测方法在转基因植物安全监管与检测中尤为重要。虽已建立数种cry1A基因检测方法,... cry1A基因编码苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白,是转基因植物使用最为广泛的抗虫基因,包括cry1Ab、cry1Ac、cry1A.105、cry1Ab/Ac等类型,cry1A基因为靶标的检测方法在转基因植物安全监管与检测中尤为重要。虽已建立数种cry1A基因检测方法,但均因该基因间序列差别较大而无法覆盖大部分转化体。由此,采用简并引物的策略,开发了一种cry1A基因通用检测方法,检测能力覆盖了常见的16种含cry1A的转化体,开发过程包括实验室内部方法建立和实验室间循环验证。结果表明,该方法在引物终浓度0.4μmol·L^-1,退火温度64℃的条件下,能够特异性检测样品中含有的cry1A基因,检出限为0.1%。开发的cry1A基因检测方法参数全面,重复性和重现性良好,为国内外转基因成分监管与检测提供方法参考。 展开更多
关键词 cry1A基因 简并引物 方法建立 成分检测 转基因监管
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分子植物育种实验室的设置
19
作者 江良荣 宛煜嵩 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第3期395-405,共11页
本文依据分子植物育种实验室的最基本的目标和功能 ,介绍了分子植物育种实验室必备的仪器设备和化学试剂 ,并对仪器设备的选配进行了讨论。提出了最基本的和较优水平的分子植物育种实验室配置方案及经费预算。
关键词 分子植物育种实验室 仪器设备 化学试剂 选配 配置方案 经费 预算
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草甘膦高抗菌株的分离、鉴定及生理生化特性研究 被引量:8
20
作者 李海红 宛煜嵩 +2 位作者 金芜军 王英典 林敏 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第2期69-72,97,共5页
从采自新疆的土壤中分离到一株草甘膦抗性菌株P23,该菌株能够耐受200mmol/L的草甘膦,可在最高含350mmol/L草甘膦的培养基中生长。在草甘膦浓度为100~200mmol/L之间时,菌株生长迅速,最适pH为7.0,最适生长温度为37℃,具有氨苄青霉素、卡... 从采自新疆的土壤中分离到一株草甘膦抗性菌株P23,该菌株能够耐受200mmol/L的草甘膦,可在最高含350mmol/L草甘膦的培养基中生长。在草甘膦浓度为100~200mmol/L之间时,菌株生长迅速,最适pH为7.0,最适生长温度为37℃,具有氨苄青霉素、卡那霉素抗性。用16S rDNA通用引物,经PCR扩增、测序得到P23的16S rDNA序列,该序列在GenBank的登录号为FJ374126。在NCBI中经BLAST后发现与苍白杆菌属(Ochrobactrum)的16S rDNA序列相似性达到99%。结合各项生理生化指标鉴定结果将菌株命名为人苍白杆菌P23(Ochrobactrum anthropiP23)。 展开更多
关键词 草甘膦 筛选 鉴定 16S RDNA 人苍白杆菌
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