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TREM2单克隆抗体的制备及应用检测
1
作者 马宾 孟麟 +2 位作者 戎卓娜 赵传科 寿成超 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期168-173,177,共7页
目的:制备TREM2特异性单克隆抗体并对其特异性、亲和力及在免疫学检测中的应用进行鉴定,为TREM2的抗体药物研发奠定基础。方法:表达并纯化TREM2胞外段GST融合蛋白,用其作为抗原免疫小鼠,筛选抗血清效价较高的小鼠,经过细胞融合和单克隆... 目的:制备TREM2特异性单克隆抗体并对其特异性、亲和力及在免疫学检测中的应用进行鉴定,为TREM2的抗体药物研发奠定基础。方法:表达并纯化TREM2胞外段GST融合蛋白,用其作为抗原免疫小鼠,筛选抗血清效价较高的小鼠,经过细胞融合和单克隆筛选,制备TREM2的特异性单克隆抗体。对获得的单克隆抗体的特异性、亲和力及其在免疫学实验中的应用进行检测。结果:获得了29株TREM2单克隆抗体,其中的24株可与TREM2特异性结合;29株单抗与TREM2结合的EC50均在nmol以上;它们可分别在Western blot、免疫沉淀、流式细胞术和免疫荧光中用于对TREM2的特异检测。结论:成功制备并获得了亲和力高、特异性好的抗TREM2单克隆抗体,为TREM2靶点的成药性抗体开发奠定了基础。 展开更多
关键词 TREM2 单克隆抗体 制备 鉴定
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抗血管生成与肿瘤生物治疗 被引量：3
2
作者 寿成超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第6期401-403,共3页
关键词 肿瘤生物治疗 抗血管生成 新生血管 肿瘤治疗 实体瘤 抗瘤谱
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分子信号传导与肿瘤生物治疗
3
作者 寿成超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第3期167-168,共2页
生长因子、细胞因子或激素均可与其相应受体结合,激活特定的信号通路,通过一系列分子间相互作用即分子信号传导,最终调节某些重要基因的转录,使细胞发生增殖、分化或凋亡.癌基因产物大都与细胞信号传导有关,其过度表达或突变使细胞增殖... 生长因子、细胞因子或激素均可与其相应受体结合,激活特定的信号通路,通过一系列分子间相互作用即分子信号传导,最终调节某些重要基因的转录,使细胞发生增殖、分化或凋亡.癌基因产物大都与细胞信号传导有关,其过度表达或突变使细胞增殖调节发生紊乱,进而导致肿瘤发生,基于大部分肿瘤由于信号通路活性过高导致细胞无限增殖,以分子信号通路为靶点,通过阻断信号传导抑制肿瘤生长是目前肿瘤治疗的重要研究领域,有的方案已进入临床试用,显示出良好的应用前景. 展开更多
关键词 肿瘤 生物疗法 分子信号传导
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胃癌组织中猪鼻支原体的分离培养与鉴定 被引量：11
4
作者 马华崇 马泓 +5 位作者 张艳丽 季加孚 王怡 李吉友 徐光炜 寿成超 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期31-33,共3页
目的　获得胃癌组织中存在猪鼻支原体感染的直接证据。方法　收集新鲜的胃癌手术标本 2 0例 ,利用PPLO培养基从胃癌组织中分离培养猪鼻支原体 ,并用聚合酶链反应 (PCR)检测阳性培养产物中猪鼻支原体的特异性基因序列片段。结果　除 1例... 目的　获得胃癌组织中存在猪鼻支原体感染的直接证据。方法　收集新鲜的胃癌手术标本 2 0例 ,利用PPLO培养基从胃癌组织中分离培养猪鼻支原体 ,并用聚合酶链反应 (PCR)检测阳性培养产物中猪鼻支原体的特异性基因序列片段。结果　除 1例标本细菌污染外 ,1 9例胃癌组织中有 4例获得阳性培养产物 ,阳性率为 2 1 1 % ;该 4例阳性培养物中均扩增出猪鼻支原体的特异性序列片段。结论　胃癌组织中存在猪鼻支原体感染 ,说明猪鼻支原体对人亦具感染性。 展开更多
关键词 胃癌 猪鼻支原体 分离培养 鉴定 癌组织
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支原体感染与肿瘤的发生 被引量：7
5
作者 马华崇 马泓 +6 位作者 黄甦 张霁 季加孚 李吉友 王怡 徐光炜 寿成超 《中国肿瘤》 CAS 2002年第2期101-103,共3页
一直被视为抗肿瘤单抗的PD4在对其抗原进行纯化、测序后被证实为抗猪鼻支原体抗体。用单抗PD4通过免疫组化检测发现 ,胃癌、大肠癌有较高的支原体感染率。细胞学实验表明 ,猪鼻支原体可提高胃癌细胞MGC803在软琼脂上克隆形成能力 ,单抗... 一直被视为抗肿瘤单抗的PD4在对其抗原进行纯化、测序后被证实为抗猪鼻支原体抗体。用单抗PD4通过免疫组化检测发现 ,胃癌、大肠癌有较高的支原体感染率。细胞学实验表明 ,猪鼻支原体可提高胃癌细胞MGC803在软琼脂上克隆形成能力 ,单抗PD4则能够抑制这种作用。作者在回顾相关文献的基础上结合自己实验室的上述工作得出结论:支原体感染和肿瘤发生可能存在被人们忽视的某种相关性 。 展开更多
关键词 肿瘤 胃肿瘤 PD4单抗 猪鼻支原体 病因学 支原体感染
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外源p53基因和抗血管生成小肽F56联合对小鼠乳腺癌移植瘤生长和转移的抑制作用 被引量：4
6
作者 肖绍文 颜博 +2 位作者 杨敬贤 寿成超 张珊文 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期171-176,共6页
目的:观察腺病毒介导的野生型p53基因联合抗血管生成小肽F56对乳腺癌移植瘤及其肺转移灶的抑制作用。方法:将人乳腺癌BICR-H1细胞接种于裸鼠或NOD/SCID小鼠乳垫内。成瘤后,裸鼠随机分成Adp53+F56组、Adp53组、F56组和空白对照组,NOD/SCI... 目的:观察腺病毒介导的野生型p53基因联合抗血管生成小肽F56对乳腺癌移植瘤及其肺转移灶的抑制作用。方法:将人乳腺癌BICR-H1细胞接种于裸鼠或NOD/SCID小鼠乳垫内。成瘤后,裸鼠随机分成Adp53+F56组、Adp53组、F56组和空白对照组,NOD/SCID小鼠则随机分成Adp53+F56组、Adp53组、F56组、Adlacz组和空白对照组,分别采用腺病毒p53、F56或二者联合治疗,以小肽溶剂作对照,NOD/SCID小鼠还加用腺病毒空载体(Adlacz)作对照。观察裸鼠移植肿瘤体积、组织病理学改变,用免疫组织化学方法检测肿瘤p53、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及微血管密度(microrascular density,MVD);观察NOD/SCID小鼠移植瘤的肺转移情况。结果:p53基因、F56及二者联合治疗均能明显抑制裸鼠移植瘤生长,但以联合治疗组最显著,Adp53+F56组、Adp53组、F56组和空白对照组肿瘤最终的相对生长体积分别为2.47、4.37、4.69和12.49;免疫组织化学检测发现,Adp53+F56组和Adp53组肿瘤内p53表达增高,P53阳性率分别增高了9.4%、6.3%,但与空白对照组比较,差异无统计学意义(P=0.693);Adp53+F56组、Adp53组、F56组VEGF表达下降,VEGF阳性率分别下降21.9%、9.4%和3.1%,但与空白对照组比较,差异亦无统计学意义(P=0.284);Adp53+F56组、Adp53组、F56组MVD分别为14.50±2.54、16.28±3.44和18.06±7.66,与空白对照组(24.93±6.53)比较,差异有统计学意义(P=0.000),且Adp53+F56组、Adp53组、F56组瘤内出现坏死,并以Adp53+F56组最为明显。NOD/SCID小鼠Adp53+F56组、Adp53组、F56组肺转移灶平均数目分别为1.143±0.378,2.750±0.886,3.375±0.518,较Adlacz组(5.000±0.816)和空白对照组(5.670±0.817)都显著减少(P=0.000),尤以Adp53+F56组最少。结论:p53基因联合抗肿瘤血管生成小肽F56可显著抑制肿瘤的生长和转移。p53基因影响肿瘤生长与转移的因素之一可能与p53对VEGF的抑制作用有一定关系。 展开更多
关键词 基因 p53 血管内皮生长因子类 乳腺肿瘤 腺病毒科
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抗人p185^(erbB2)人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建表达及活性测定 被引量：2
7
作者 姜北海 刘文斌 +2 位作者 孟麟 吴健 寿成超 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期491-495,共5页
目的 :HER2 /neu过度表达见于多种恶性肿瘤。作为肿瘤抗原 ,p185 erbB2 是一个理想的肿瘤治疗靶点。本实验在既往工作基础上 ,构建嵌合型抗p185 erbB2 单克隆抗体 (单抗 )的真核表达载体 ,并在CHO dhfr-细胞中表达 ,从而降低鼠源性抗体... 目的 :HER2 /neu过度表达见于多种恶性肿瘤。作为肿瘤抗原 ,p185 erbB2 是一个理想的肿瘤治疗靶点。本实验在既往工作基础上 ,构建嵌合型抗p185 erbB2 单克隆抗体 (单抗 )的真核表达载体 ,并在CHO dhfr-细胞中表达 ,从而降低鼠源性抗体的免疫原性 ,为进一步的应用研究奠定基础。方法 :RT -PCR扩增p185 erbB2 单抗 1 2的轻、重链可变区基因 ,插入嵌合抗体真核表达载体pWSD2中 ,脂质体转染CHO dhfr-细胞。经RT -PCR、间接ELISA、Westernblot检测人 -鼠嵌合抗体的表达水平 ,用ELISA、免疫沉淀方法对嵌合抗体的亲和力和特异性进行初步鉴定。此外 ,采用MTT比色法检测嵌合抗体对高表达p185 erbB2 的乳腺癌细胞系SKBR3的生长抑制作用。结果 :用RT -PCR、间接ELISA、Westernblot方法证明人 -鼠嵌合抗体在CHO dhfr-细胞中表达 ;ELISA检测提示嵌合抗体与高表达p185 erbB2的细胞反应阳性 ,与低表达p185 erbB2 的细胞反应阴性 ;免疫沉淀结果表明嵌合抗体可与p185 erbB2 分子特异性结合 ;MTT比色法检测表明嵌合抗体对过表达p185 erbB2 的乳腺癌细胞SKBR3的生长有抑制作用。结论 :CHO dhfr-细胞表达的人 -鼠嵌合抗体可与p185 erbB2 特异性结合 ,并可抑制高表达p185 erbB2 的肿瘤细胞生长 ,表明抗人p185 erbB2 人 展开更多
关键词 p185^erbB2 人-鼠嵌合抗体 真核表达载体 CHO 高表达 RT-PCR 乳腺癌细胞 特异性结合 HER2/NEU 重链可变区
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胃癌细胞MGC-803耐药细胞株的建立及分泌蛋白差异分析 被引量：3
8
作者 黄昊 韩勇 +3 位作者 吴健 田志华 曲立科 寿成超 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期183-189,共7页
目的:应用蛋白质组学技术系统比较5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂耐药细胞与敏感细胞的分泌蛋白表达谱,以期发现胃癌耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法:通过药物梯度诱导建立胃癌MGC-803耐药细胞株。从培... 目的:应用蛋白质组学技术系统比较5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂耐药细胞与敏感细胞的分泌蛋白表达谱,以期发现胃癌耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法:通过药物梯度诱导建立胃癌MGC-803耐药细胞株。从培养上清中收集MGC-803亲代及耐药细胞的分泌蛋白,应用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)进行分离,通过PD Quest 7.1.0软件分析获得差异蛋白,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行鉴定,并用实时定量PCR检测各差异蛋白在耐药细胞株和亲本细胞间mRNA水平上的表达差异。结果:分别建立了对5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂耐药指数为110.6、70.0和13.3的耐药细胞株。顺铂耐药细胞对5-氟尿嘧啶和紫杉醇、5-氟尿嘧啶耐药细胞对紫杉醇均有较强的交叉耐药,前者耐药指数分别为23.5和114.0,后者为70.0。制备获得了耐药细胞培养上清的双向凝胶电泳蛋白组分图谱;经PD Quest软件分析获得18个差异在2倍以上、3株耐药细胞培养上清中丰度均增高的蛋白点,其中13个得到了质谱鉴定,它们分别属于蛋白酶类、信号转导分子等。与亲本细胞相比,在mRNA水平上,SLMAP、TOP3A、DYNC1H1、RHPN1、PUF60和SIAH1在3种耐药细胞中皆有明显上调;IFT172、FILIP在耐5-氟尿嘧啶和紫杉醇细胞中上调显著;PLVAP、LMNA在耐紫杉醇及顺铂细胞中表达有所升高,但在耐5-氟尿嘧啶细胞中升高不显著。在蛋白水平上的进一步验证发现,SIAH1在3种耐药细胞中的表达量及培养上清中的含量皆有升高。结论:本研究以胃癌细胞MGC-803为亲本细胞分别建立了针对5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂的耐药细胞株,在此基础上应用双向电泳及蛋白质谱技术,整体展示了耐药细胞与亲本细胞的差异分泌蛋白,并发现SIAH1蛋白在耐药细胞总蛋白及培养上清中的含量均明显升高,其有可能成为研发胃癌血清耐药标志物的候选分子。 展开更多
关键词 胃肿瘤 抗药性 多药 泛素蛋白连接酶 蛋白质组学
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P^(53)融合蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备 被引量：3
9
作者 刘彩云 寿成超 +2 位作者 孙素莲 张蕾 曾荔 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期61-64,共4页
目的为研制出能特异与Ｐ５３结合的单克隆抗体，使对Ｐ５３的检测得到更为广泛的应用。方法用ＰＣＲ技术扩增编码人Ｐ５３Ｎ－端１８０个氨基酸的ＤＮＡ片段并将其克隆在谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）表达质粒ＰＧＥＸ－２Ｔ中。用该重组质... 目的为研制出能特异与Ｐ５３结合的单克隆抗体，使对Ｐ５３的检测得到更为广泛的应用。方法用ＰＣＲ技术扩增编码人Ｐ５３Ｎ－端１８０个氨基酸的ＤＮＡ片段并将其克隆在谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）表达质粒ＰＧＥＸ－２Ｔ中。用该重组质粒转化大肠杆菌ＪＭ１０９，并经异丙基β－Ｄ硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导产生Ｐ５３－ＧＳＴ融合蛋白。用Ｐ５３－ＧＳＴ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。常规细胞融合，间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）双筛和免疫组织化学（ＩＨＣ）筛选。结果获得一株能稳定分泌抗Ｐ５３单抗的杂交瘤细胞株，其分泌的单抗（命名为Ｍ１２６），亚类为ＩｇＧ２ｂ。用单抗Ｍ１２６与常用Ｐ５３进口单抗ＰＡＢ１８０１（ＺＹＭＥＤ公司）同时对５２例乳腺癌的石蜡切片标本进行ＩＨＣ分析，阳性检测率分别为４８．１％（２５／５２）和４２．３（２２／５２），与ＰＡＢ１８０１相比Ｍ１２６表现出更强的反应特异性，在一定程度上优于ＰＡＢ１８０１。结论Ｍ１２６可替代进口单抗ＰＡＢ１８０１用于Ｐ５３免疫组织化学研究。 展开更多
关键词 融合蛋白 单克隆抗体 P53基因 原核表达
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支原体感染与肿瘤 被引量：7
10
作者 宁金鹰 寿成超 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期602-604,共3页
支原体是广泛存在于自然界的条件致病微生物,可能是唯一可以与真核生物共生,并可与哺乳动物细胞长期相互作用的原核生物。多种不同的肿瘤组织中可检测到支原体的存在,某些支原体的持续感染可导致哺乳动物细胞的转化、上调癌基因的表达... 支原体是广泛存在于自然界的条件致病微生物,可能是唯一可以与真核生物共生,并可与哺乳动物细胞长期相互作用的原核生物。多种不同的肿瘤组织中可检测到支原体的存在,某些支原体的持续感染可导致哺乳动物细胞的转化、上调癌基因的表达并引起肿瘤细胞生物学行为的改变,提示支原体感染与肿瘤的发生有潜在的相关性。 展开更多
关键词 支原体感染 肿瘤 原核生物 持续感染 癌基因 基因表达
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早期乳腺癌患者手术、化疗后血清HER-2/neu ECD水平变化 被引量：2
11
作者 刘彩云 吴健 +2 位作者 杨蔚 孙素莲 寿成超 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期728-730,共3页
目的:探讨乳腺癌患者手术或化疗后血清HER-2/neuECD水平变化的临床意义。方法:双抗体夹心ELISA法检测早期乳腺癌患者及其配对手术、化疗前后血清HER-2/neuECD水平,进行统计分析。结果:82例乳腺癌患者手术后,血清HER-2/neuECD水平90.24%(... 目的:探讨乳腺癌患者手术或化疗后血清HER-2/neuECD水平变化的临床意义。方法:双抗体夹心ELISA法检测早期乳腺癌患者及其配对手术、化疗前后血清HER-2/neuECD水平,进行统计分析。结果:82例乳腺癌患者手术后,血清HER-2/neuECD水平90.24%(74/82)下降,3.66%(3/82,C.V≤5%)未变化,6.10%(5/82)升高;46例乳腺癌患者化疗后HER-2/neuECD水平升高组(15/46)对化疗的反应率73.33%(11/15)与HER-2/neuECD水平非升高组(HER-2/neuECD水平下降或不变,C.V≤5%,31/46)对化疗的反应率77.42%(24/31)无差别(P>0.05)。结论:检测乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水平变化对预后可能具有一定的临床提示意义。 展开更多
关键词 血清HER-2/NEU ECD水平 乳腺癌 ELISA 手术 化疗
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PCR条件及程序改变对抗体库多样性的影响 被引量：2
12
作者 田学军 寿成超 +1 位作者 孟麟 董志伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第2期172-176,共5页
用家族特异性免疫球蛋白可变区基因引物两两组合分别对轻、重链进行ＲＴＰＣＲ扩增．在不同退火温度下得到了全部轻链及大部分重链（１３／１６）可变区基因．当先用免疫球蛋白信号肽序列５′端引物与未扩出基因３′端引物组合进行... 用家族特异性免疫球蛋白可变区基因引物两两组合分别对轻、重链进行ＲＴＰＣＲ扩增．在不同退火温度下得到了全部轻链及大部分重链（１３／１６）可变区基因．当先用免疫球蛋白信号肽序列５′端引物与未扩出基因３′端引物组合进行一次ＰＣＲ，再以该产物为模板进行二次ＰＣＲ，则获得了未扩出三条重链的ＰＣＲ产物．这表明通过ＰＣＲ反应条件的改变及程序调整，可增加所获得可变区基因的种类及数量。 展开更多
关键词 退火温度 抗体库 多样性 半套式PCR
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抗p185^(erbB2)单抗的制备及其生物学活性 被引量：2
13
作者 韩梅 姜北海 +1 位作者 吴健 寿成超 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期154-158,共5页
目的 :制备抗 p185 erbB2 单克隆抗体 ,并研究其对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的结合及生长抑制作用。为后续工作奠定基础。方法 :用NIH3T3 erbB2细胞免疫BALB/c小鼠 ,制备抗p185 erbB2 单克隆抗体。经ELISA、免疫沉淀、Westernblot及免... 目的 :制备抗 p185 erbB2 单克隆抗体 ,并研究其对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的结合及生长抑制作用。为后续工作奠定基础。方法 :用NIH3T3 erbB2细胞免疫BALB/c小鼠 ,制备抗p185 erbB2 单克隆抗体。经ELISA、免疫沉淀、Westernblot及免疫组化检测单抗的结合特异性。并用MTT比色法检测所获抗体对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的生长抑制作用。结果 :经筛选获得 1株对表达 p185 erbB2 细胞反应阳性 ,不表达 p185 erbB2 细胞反应阴性的单克隆抗体1H3 ;免疫沉淀、Westernblot均表明 1H3可与p185 erbB2 分子特异性结合 ;免疫组化结果显示 1H3对c erbB2阳性的乳癌组织呈特异性着染 ;MTT比色法检测表明 1H3对不同的 p185 erbB2 阳性肿瘤细胞均有不同程度的生长抑制作用。结论 :单克隆抗体 1H3能与p185 erbB2 特异结合 ,并可不同程度地抑制NIH3T3 erbB2或SKBR3细胞的生长 ,除可应用于临床对 p185 erbB2 的检测外 ,尚具有肿瘤生物治疗的潜在应用开发价值。 展开更多
关键词 p185^erbB2 抗体 单克隆/生物合成 抗体 肿瘤/生物合成 肿瘤细胞 培养的/药物作用
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肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65与低密度脂蛋白受体相关蛋白关联蛋白的结合 被引量：1
14
作者 靳更林 张建芝 +4 位作者 苏荣 刘晓颖 吴健 孟麟 寿成超 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-301,共5页
目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancerandembryoexpressionprotein65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索。方法: 以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法, 筛选人胚胎组织cDNA表达文库。... 目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancerandembryoexpressionprotein65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索。方法: 以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法, 筛选人胚胎组织cDNA表达文库。将获得的阳性克隆cDNA片段分别克隆到原核和哺乳细胞表达质粒,通过GSTpull down和免疫共沉淀对相互作用蛋白作进一步验证。结果: 筛选到能与CEP65相互结合的低密度脂蛋白受体相关蛋白产关联蛋白(lowdensitylipoproteinreceptor relatedprotein associatedprotein1,RAP)。将分别在原核和哺乳细胞中表达的RAP与CEP65进行GSTpull down实验,结果显示,原核表达的GST RAP可以与His CEP65相互结合,而在哺乳细胞共表达的GST CEP65和Myc RAP也能相互结合。结论:RAP可以和CEP65相结合,CEP65有可能通过与RAP相互作用,在肿瘤的浸润、转移及增生中发挥其功能。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白受体相关蛋白 特异表达蛋白 胚胎组织 关联 protein CDNA表达文库 receptor 酵母双杂交方法 相互结合 哺乳细胞 CDNA片段 相互作用蛋白 免疫共沉淀 RAP GST 蛋白分子 作用机制 肿瘤发生 诱饵蛋白 表达质粒
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乳腺癌患者血清HER-2/neu胞外域的临床意义 被引量：7
15
作者 刘彩云 寿成超 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第3期237-239,共3页
乳腺癌患者血清HER-2/neu胞外域(ECD)水平升高与预后差指标如总生存期、无疾病生存期短有关,对激素治疗和某些化疗制剂反应差,但对Herceptin单独或与化疗制剂联合治疗的反应增强。许多研究者赞成检测进展期乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水... 乳腺癌患者血清HER-2/neu胞外域(ECD)水平升高与预后差指标如总生存期、无疾病生存期短有关,对激素治疗和某些化疗制剂反应差,但对Herceptin单独或与化疗制剂联合治疗的反应增强。许多研究者赞成检测进展期乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水平,因为在转移出现之前常出现血清HER-2/neuECD水平升高,而且血清HER-2/neuECD的变化与疾病临床过程相平行。因此,检测乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水平对选择合适的治疗方案及评估预后具有重要意义。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 ERBB-2 血清 HER-2/neu胞外域
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应用噬菌体随机肽库筛选结肠癌患者血清中的肿瘤标记物的研究 被引量：8
16
作者 苏荣 李秀萍 +3 位作者 靳更林 彭丽容 王丽 寿成超 《宁夏医学杂志》 CAS 2006年第2期86-88,共3页
目的用噬菌体随机肽库技术对结肠癌病人血清进行差异性筛选,以获得特异性的肿瘤标志物。方法用噬菌体随机十二肽库与结肠癌病人血清和正常人血清进行淘选,经过几轮吸附和洗脱得到重组噬菌体库。采用ELISA方法进行单克隆鉴定,挑选20个阳... 目的用噬菌体随机肽库技术对结肠癌病人血清进行差异性筛选,以获得特异性的肿瘤标志物。方法用噬菌体随机十二肽库与结肠癌病人血清和正常人血清进行淘选,经过几轮吸附和洗脱得到重组噬菌体库。采用ELISA方法进行单克隆鉴定,挑选20个阳性克隆测序获得相同的序列:19B(GSMSRYVRWYTP),人工合成小肽19B的寡核苷酸序列,并将其与原核表达载体PGEX-4T-I连接,转化大肠杆菌BL-21(DE3),诱导融合蛋白的表达,以Glutathione Sepharose 4B进行纯化。结果用纯化的蛋白包被抗原板检测24例正常人血清和24例结肠癌病人的血清,证实小肽在正常人血清和结肠癌病人血清间存在差异。结论小肽19B有可能作为检测结肠癌的生物标志物。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 差异性筛选 肿瘤标志物 结肠癌血清
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人源噬菌体抗体库的构建及抗VEGF抗体的初步筛选分析 被引量：4
17
作者 田学军 寿成超 董志伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期200-205,共6页
应用噬菌体表面呈递技术构建人抗体组合文库 .筛选获得了结合血管内皮细胞生长因子( VEGF)的人噬菌体 Fab抗体 ,并对所获抗体的多样性进行了进一步分析 .从不同人群外周血淋巴细胞提取总 RNA,经反转录后采用家族特异性免疫球蛋白可变区... 应用噬菌体表面呈递技术构建人抗体组合文库 .筛选获得了结合血管内皮细胞生长因子( VEGF)的人噬菌体 Fab抗体 ,并对所获抗体的多样性进行了进一步分析 .从不同人群外周血淋巴细胞提取总 RNA,经反转录后采用家族特异性免疫球蛋白可变区基因引物与免疫球蛋白信肽序列引物 ,通过改变 PCR条件或半套式扩增分别获得全部亚型的轻、重链抗体 Fab段 ,并重组到噬粒载体 p Comb3H中 ,经电转化大肠杆菌 XL- 1 Blue,构建了 1 .5× 1 0 8完整组合抗体库 .利用 VEGF12 1对该库经过 4轮固相筛选后 ,获得 1 2个可与 VEGF特异结合的阳性克隆 .酶谱分析表明了所获抗体克隆的多样性 .为通过基因工程改造 ,进一步获得可用于临床的人源 VEGF抗体奠定了基础 . 展开更多
关键词 人噬菌体抗体库 多样性 抗VEGF抗体 肿瘤治疗
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抗肿瘤单抗3H11对应抗原cDNA片段的克隆 被引量：3
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作者 陈东海 寿成超 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期232-235,共4页
单克隆抗体３Ｈ１１能与多种肿瘤细胞特异结合，克隆其对应抗原无疑具重要意义．用胃癌细胞ＭＧＣ８０３构建ｃＤＮＡ表达文库，通过抗体３Ｈ１１对其进行原核表达筛选，获得一株能与３Ｈ１１特异反应的阳性克隆．其ｃＤＮＡ插入片段为... 单克隆抗体３Ｈ１１能与多种肿瘤细胞特异结合，克隆其对应抗原无疑具重要意义．用胃癌细胞ＭＧＣ８０３构建ｃＤＮＡ表达文库，通过抗体３Ｈ１１对其进行原核表达筛选，获得一株能与３Ｈ１１特异反应的阳性克隆．其ｃＤＮＡ插入片段为５５４ｂｐ．ＧｅｎＢａｎｋ不含其同源序列．将此ｃＤＮＡ片段与谷胱甘肽转移酶表达质粒ｐＧＥＸ－４Ｔ重组，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和竞争抑制实验表明，表达产物依然保持同３Ｈ１１反应的特异性．可见它是３Ｈ１１对应抗原的ｃＤＮＡ． 展开更多
关键词 CDNA文库 单克隆抗体 肿瘤相关抗原 克隆
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抗血管内皮细胞生长因子受体单抗的制备及鉴定 被引量：2
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作者 宋述梅 吴健 寿成超 《北京医科大学学报》 CSCD 1998年第6期509-511,共3页
目的：制备血管内皮细胞生长因子受体（ｋｉｎａｓｅｉｎｓｅｒｔｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＫＤＲ）的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法：在大肠杆菌中表达重组ＫＤＲ融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫... 目的：制备血管内皮细胞生长因子受体（ｋｉｎａｓｅｉｎｓｅｒｔｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＫＤＲ）的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法：在大肠杆菌中表达重组ＫＤＲ融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞，用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ＥＬＩＳＡ双筛和ＳＰ免疫组化筛选并鉴定其亚类。结果：经ＥＬＩＳＡ双筛和组化筛选获得了一株能稳定分泌人ＫＤＲ单克隆抗体的杂交瘤细胞株（命名为ＳＳＷ２），其分泌抗体亚类为ＩｇＧ１，产生的腹水效价可达１×１０－６。结论：ＳＳＷ２同血管内皮细胞尤其是肿瘤组织的血管内皮细胞有较强的阳性反应。 展开更多
关键词 KDR 单克隆抗体 制备 鉴定
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抗胃癌单链抗体免疫毒素重组质粒的构建及表达 被引量：1
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作者 韩梅 靳更林 +1 位作者 寿成超 戴寿芝 《宁夏医学杂志》 CAS 2001年第4期195-196,共2页
目的　构建能表达抗胃癌单链抗体免疫毒素的重组质粒并进行表达。方法　应用基因工程方法 ,将抗胃癌的单链抗体基因与绿脓杆菌外毒素基因进行重组 ,得到的重组质粒转化大肠杆菌BL - 2 1,鉴定后的阳性克隆经IPTG诱导表达。结果　重组质... 目的　构建能表达抗胃癌单链抗体免疫毒素的重组质粒并进行表达。方法　应用基因工程方法 ,将抗胃癌的单链抗体基因与绿脓杆菌外毒素基因进行重组 ,得到的重组质粒转化大肠杆菌BL - 2 1,鉴定后的阳性克隆经IPTG诱导表达。结果　重组质粒经酶切鉴定正确 ,IPTG诱导后可看到明显的表达带 ,分子大小与预计值相符。结论　得到了能表达抗胃癌单链抗体免疫毒素的重组质粒。 展开更多
关键词 免疫毒素类 胃癌 抗单链抗体 重组质粒
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