禽星状病毒检测技术研究进展

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作者 罗娟 尚佳静 +8 位作者 封莹洁 孟鸽 张富友 邓春冉 于晓慧 蒋文明 刘华雷 刘冠慧 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2024年第1期72-79,共8页

禽星状病毒(avian astroviruses,AAstV)是一种严重危害禽类健康的病原,可引起火鸡肠炎、鸡肾炎、鸭肝炎、雏鹅内脏痛风等病症,导致禽类生长缓慢、孵化率降低、死亡率增加。由于目前尚无有效疫苗及药物对AAstV感染进行防治,因此病原检测... 禽星状病毒(avian astroviruses,AAstV)是一种严重危害禽类健康的病原,可引起火鸡肠炎、鸡肾炎、鸭肝炎、雏鹅内脏痛风等病症,导致禽类生长缓慢、孵化率降低、死亡率增加。由于目前尚无有效疫苗及药物对AAstV感染进行防治,因此病原检测在AAstV感染的监测和鉴别诊断中起着重要作用。本文主要综述了电镜法以及病毒分离鉴定、免疫荧光、ELISA及PCR等AAstV检测技术的优缺点,以期为相关人员根据不同场合及需求选择合适的检测方法提供参考。 展开更多

关键词 禽星状病毒 检测技术 研究进展

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不同分子生物学方法在H5亚型禽流感病毒检测中的应用比较

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作者 尚佳静 罗娟 +8 位作者 于晓慧 房立春 亓丽红 孟鸽 封莹洁 蒋文明 刘华雷 刘冠慧 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2023年第11期100-106,共7页

H5亚型高致病性禽流感(H5-HPAI)是严重危害家禽养殖业和公共卫生健康的一类动物疫病,也是我国高度重视、严格防控的人兽共患病。目前常用检测H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)的分子生物学技术包括反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量P... H5亚型高致病性禽流感(H5-HPAI)是严重危害家禽养殖业和公共卫生健康的一类动物疫病,也是我国高度重视、严格防控的人兽共患病。目前常用检测H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)的分子生物学技术包括反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、反转录重组酶辅助扩增(RT-RAA)、RT-RAA结合侧流层析试纸条(RT-RAA-LFD)、RT-RAA-簇状规则间隔短回文重复序列及其相关蛋白结合侧流层析试纸条(RT-RAA-CRISPRCas13a-LFD)等。为比较不同检测方法对H5-AIV检测的灵敏度差异,将制备的cRNA标准品进行倍比稀释,分别用RT-PCR、RT-qPCR、RT-RAA、RT-RAA-LFD、RT-RAA-CRISPRCas13a-LFD进行检测。结果显示:RT-PCR、RT-qPCR、RT-RAA、RT-RAA-LFD与RT-RAA-CRISPRCas13a-LFD方法的检测灵敏度分别为10^(2)、10^(-1)、10^(0)、10^(0)、10^(-1)copies/μL。与RT-qPCR相比,RT-PCR、RT-RAA、RT-RAA-LFD、RT-RAA-CRISPRCas13a-LFD在临床样本检测上具有较高的符合率,分别为85.00%、93.75%、88.75%、91.25%。结果表明,5种方法均对H5-AIV具有良好的检出率,但RT-qPCR与RT-RAA-CRISPRCas13a-LFD灵敏度更高,分别适合在实验室与基层养殖场进行临床检测。本研究评估了不同方法在H5-AIV检测中的应用效果,为在不同场景下选择准确可靠的检测方法提供了参考,也为H5-AIV感染的防控提供了技术支撑。 展开更多

关键词 禽流感病毒 H5亚型 检测方法 灵敏度

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生物传感器概述及其在动物疫病检测中的应用 被引量：5

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作者 罗娟 尚佳静 +7 位作者 李丹 石慧花 张富友 于晓慧 邓春冉 刘华雷 刘冠慧 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2023年第1期72-79,共8页

生物传感器是由生物学、电化学、光学与信息科学等多学科交叉融合发展形成的一种传感新技术,具有成本低、操作简单、准确度高、专一性强等优点,被广泛应用于生物医学、食品工业、环境监测等领域,并为动物疫病检测提供了一种快速有效的... 生物传感器是由生物学、电化学、光学与信息科学等多学科交叉融合发展形成的一种传感新技术,具有成本低、操作简单、准确度高、专一性强等优点,被广泛应用于生物医学、食品工业、环境监测等领域,并为动物疫病检测提供了一种快速有效的新途径。目前生物传感器主要分为酶生物传感器、免疫生物传感器、微生物传感器、细胞生物传感器以及DNA生物传感器,每种生物传感器各有其优缺点及适应场合。近年来,生物传感器在动物疫病检测方面的应用逐渐成为研究热点,研究多聚集于禽流感、猪繁殖与呼吸障碍综合征、非洲猪瘟等病毒性疾病,沙门氏菌病、猪链球菌病等细菌性疾病,以及血吸虫病、弓形虫病等寄生虫病。未来生物传感器与新兴学科领域或新型材料的结合将进一步提高其检测效率、实用性和适用性。 展开更多

关键词 生物传感器 动物疫病检测 应用

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鸭星状病毒3型探针法荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：1

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作者 罗娟 尚佳静 +7 位作者 张富友 邓春冉 王素春 于晓慧 蒋文明 刘华雷 刘冠慧 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2023年第6期83-89,共7页

鸭星状病毒3型(duck astrovirus 3,DAstV-3)是近年来导致我国鸭群感染率和发病率均较高的一类星状病毒,对我国养鸭业的发展造成了一定影响。为实现DAstV-3的快速检测,根据GenBank中DAstV-3参考序列(KJ020899),针对ORF1b基因保守序列设... 鸭星状病毒3型(duck astrovirus 3,DAstV-3)是近年来导致我国鸭群感染率和发病率均较高的一类星状病毒,对我国养鸭业的发展造成了一定影响。为实现DAstV-3的快速检测,根据GenBank中DAstV-3参考序列(KJ020899),针对ORF1b基因保守序列设计并合成特异性引物和探针,建立了检测DAstV-3的荧光定量PCR方法。结果显示:该方法的标准曲线循环域值(Ct)与标准品模板浓度为1.0×10^(7)~1.0×10^(2) copies/μL时线性关系良好;特异性较好,仅能检测到DAstV-3,与鹅星状病毒1型、鹅星状病毒2型、鸭星状病毒4型、禽流感病毒、新城疫病毒、禽呼肠孤病毒等常见病毒均无交叉反应,最低检出限为10^(1) copies/μL;批内和批间重复试验变异系数(CV)均小于1.5%,稳定性和可重复性良好。利用建立的方法对128份临床样品进行检测,对鉴定为阳性的样品进行DAstV-3核酸扩增并送测序,并分析遗传进化关系及同源性,结果检出10份DAstV-3阳性样品,且阳性样品与参考株CPH在同一分支,核苷酸及推导氨基酸的同源性分别为94.7%~95.3%和94.5%~95.1%。结果表明,本研究成功建立了DAstV-3荧光定量PCR检测方法,可实现对DAstV-3的快速定量检测,为我国开展DAstV-3的分子流行病学调查和临床诊断提供了技术支撑。 展开更多

关键词 鸭星状病毒3型 荧光定量PCR 性能评估 遗传进化

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海上风电柔性低频送出系统无功电压协调控制策略

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作者 陆振纲 谢立军 +3 位作者 赵国亮 王秀丽 尚佳静 王锡凡 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3708-3718,共11页

柔性低频交流输电在海上风电送出具有广阔的应用前景,但国内外针对海上风电柔性低频送出系统无功电压特性分析与运行控制的研究较少。为此,首先建立了低频下海上风电经电缆送出系统的无功/电压数学模型;其次,建立了以降低海缆最大电流... 柔性低频交流输电在海上风电送出具有广阔的应用前景,但国内外针对海上风电柔性低频送出系统无功电压特性分析与运行控制的研究较少。为此,首先建立了低频下海上风电经电缆送出系统的无功/电压数学模型;其次,建立了以降低海缆最大电流和系统损耗的目标函数和数学模型,提出了海上风电柔性低频送出系统无功协调控制策略;最后,建立了海上风电经柔性低频送出系统算例,开展了多运行工况下的动态仿真验证,结果表明:所提无功优化控制策略具备响应快速灵活的优点,且无需额外安装无功补偿装置。研究结果证明了所提优化控制策略的有效性。 展开更多

关键词 海上风电 柔性低频输电 海缆 无功电压 协调控制

原文传递

玉米赤霉烯酮对猪生产性能的影响及其脱毒方法研究进展 被引量：3

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作者 张议心 尚佳静 +4 位作者 罗娟 郝洪丹 张永英 石玉祥 刘冠慧 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第2期140-144,共5页

玉米赤霉烯酮(ZEA)是谷物中最常见的真菌毒素之一,可造成20%~30%的饲料浪费。ZEA可以对动物的肝脏、肠道、肾脏造成严重的氧化损伤。ZEA作为雌激素类似物,能够干扰内分泌平衡,影响动物的繁殖性能。文章总结了ZEA对猪生长性能的影响及其... 玉米赤霉烯酮(ZEA)是谷物中最常见的真菌毒素之一,可造成20%~30%的饲料浪费。ZEA可以对动物的肝脏、肠道、肾脏造成严重的氧化损伤。ZEA作为雌激素类似物,能够干扰内分泌平衡,影响动物的繁殖性能。文章总结了ZEA对猪生长性能的影响及其作用机制,列举了消除ZEA的物理、化学和微生物法并分析其局限性,重点阐述利用天然植物提取物,如葡萄籽提取物、番茄红素缓解(消除)ZEA毒性的研究进展,为解决饲料霉菌污染问题提供参考。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 猪 氧化应激 脱毒方法 葡萄籽提取物 番茄红素

原文传递

禽腺病毒4型检测方法研究进展

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作者 孟鸽 张同锋 +8 位作者 尚佳静 张永英 罗娟 封莹洁 于晓慧 蒋文明 刘华雷 刘冠慧 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2023年第12期80-85,共6页

禽腺病毒4型(FAdV-4)是禽群中常见的免疫抑制性病毒,也是危害家禽养殖业健康发展的重要病原之一。FAdV-4主要引起肝炎-心包积液综合征(HHS),其临床表现以心包积液和肝炎为主,死亡率高达80%,严重危害家禽养殖业的健康发展。快速准确的检... 禽腺病毒4型(FAdV-4)是禽群中常见的免疫抑制性病毒,也是危害家禽养殖业健康发展的重要病原之一。FAdV-4主要引起肝炎-心包积液综合征(HHS),其临床表现以心包积液和肝炎为主,死亡率高达80%,严重危害家禽养殖业的健康发展。快速准确的检测方法能够为有效监测FAdV-4流行情况提供技术支撑,为疾病诊断和防控以及深入研究打下基础。本文针对目前国内外建立的FAdV-4检测技术,包括血清学检测技术,如中和试验、琼脂凝胶免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光技术,分子生物学诊断技术,如聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR、环介导等温扩增等进行综述,以期为FAdV-4的快速检测技术研究提供参考。 展开更多

关键词 禽腺病毒4型 检测方法 血清学 分子生物学

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化学发光免疫分析法简介及其在动物疫病检测中的研究进展

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作者 封莹洁 张同锋 +7 位作者 罗娟 尚佳静 孟鸽 于晓慧 蒋文明 刘华雷 范春艳 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2023年第12期73-79,共7页

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是将化学发光测定和免疫反应结合起来的一种检测分析技术。与放射性免疫和酶联免疫相比,此方法具有更高的特异性和灵敏度,因此被广泛应用于临床医学、药物检测、环境监测等方面,... 化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是将化学发光测定和免疫反应结合起来的一种检测分析技术。与放射性免疫和酶联免疫相比,此方法具有更高的特异性和灵敏度,因此被广泛应用于临床医学、药物检测、环境监测等方面,但在动物疫病检测领域,CLIA仍处于发展阶段。CLIA大致分为直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。近年来,CLIA与新技术的联合以及纳米颗粒等新型材料的使用,显著推动了此检测技术在动物疫病上的应用。本文主要对CLIA的原理、分类、发展,以及该方法在动物病毒性、细菌性和寄生虫性疫病检测方面的研究进行综述,以期为CLIA在动物疫病检测中更深入的应用和发展提供参考。 展开更多

关键词 化学发光免疫分析法 动物疫病检测 应用进展

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中成药注射液治疗犬细小病毒继发肺炎的可行性分析 被引量：1

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作者 孙鹏翔 尚佳静 +3 位作者 罗娟 郝洪丹 张议心 刘冠慧 《现代畜牧兽医》 2023年第3期37-41,共5页

犬细小病毒病是由细小病毒所引起的一种烈性的传染病,是一种较常见的犬类传染病,以幼犬多发为主要特征。一出现呕吐、腹泻、咳嗽等症状的比熊幼犬,通过犬猫传染病荧光定量分析仪、血常规、血气电解质等进行诊断,确诊为细小病毒感染并发... 犬细小病毒病是由细小病毒所引起的一种烈性的传染病,是一种较常见的犬类传染病,以幼犬多发为主要特征。一出现呕吐、腹泻、咳嗽等症状的比熊幼犬,通过犬猫传染病荧光定量分析仪、血常规、血气电解质等进行诊断,确诊为细小病毒感染并发肺炎;采用中药注射液、中药饮片与西药结合治疗,患犬最终康复出院。文章记录该病例的诊断、治疗过程,以期为犬细小病毒病并发白细胞减少症和肺炎提供治疗思路。 展开更多

关键词 犬 细小病毒病 肺炎 黄芪注射液 参麦注射液 苦参 地榆炭

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滑液支原体分子分型及免疫原性蛋白研究进展

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作者 刘子卿 尚佳静 +2 位作者 刘冠慧 周守长 许金朋 《中国动物检疫》 CAS 2023年第6期62-68,共7页

滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是感染鸡和火鸡的主要病原体之一,对全球养禽业造成了巨大经济损失。为了选择分子分型方法进行分子生物学鉴定分析,以便研制出安全有效的亚单位疫苗,从病原特征、分子分型和免疫原性蛋白等方面对MS... 滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是感染鸡和火鸡的主要病原体之一,对全球养禽业造成了巨大经济损失。为了选择分子分型方法进行分子生物学鉴定分析,以便研制出安全有效的亚单位疫苗,从病原特征、分子分型和免疫原性蛋白等方面对MS进行了综述。病原特征主要包括MS生长条件、传播方式和敏感性。MS分型方法众多,目前较为常用的是可变脂蛋白血凝素(vlhA)基因序列分析,其识别力较高,但具有多变性,有时难以确定分离株亲缘关系的相关性;多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)具有分子分型能力强的特点,更适合流行病学调查。目前,亚单位疫苗是支原体疫苗研发的重要方向,而筛选出合适的抗原是制备亚单位疫苗的前提,现已报道多种免疫原性蛋白,如NADH氧化酶、PDHA、MSPB、P35等。未来还需对MS毒力基因、致病机制和传播机制等深入研究,采用统一的分型方法对全球MS菌株进行分子生物学鉴定分析,积极研究免疫原性良好的抗原蛋白。本文为MS分子生物学鉴定及亚单位疫苗研制提供了参考。 展开更多

关键词 滑液支原体 病原特征 分子分型 免疫原性蛋白

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加味理中汤方对脾虚泄泻小鼠血常规、血糖及脏器指数的影响

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作者 郝洪丹 刘冠慧 +2 位作者 张议心 尚佳静 罗娟 《现代畜牧兽医》 2023年第9期5-10,共6页

试验旨在研究加味理中汤方对脾虚泄泻模型小鼠血常规、血糖及脏器指数的影响。试验中复方由干姜、党参、白术、甘草、茯苓、山药、木香、桂枝、砂仁组成。选择无特定病原体级ICR小鼠72只,随机分为6组,每组12只小鼠,雌、雄各半。除空白... 试验旨在研究加味理中汤方对脾虚泄泻模型小鼠血常规、血糖及脏器指数的影响。试验中复方由干姜、党参、白术、甘草、茯苓、山药、木香、桂枝、砂仁组成。选择无特定病原体级ICR小鼠72只,随机分为6组,每组12只小鼠,雌、雄各半。除空白对照组(C组)小鼠灌胃同体积的生理盐水外,其余各组小鼠灌胃番泻叶提取物9 d建立脾虚泄泻模型。试验第10 d停用番泻叶,恩诺沙星治疗组(A组)小鼠灌胃恩诺沙星水溶液,各中药组分别给予低剂量(6.5 g/kg)、中剂量(13.0 g/kg)、高剂量(26.0 g/kg)灌胃治疗,C组和泄泻模型组(M组)用同体积的生理盐水灌胃,连续治疗3 d。结果显示,与C组相比,M组小鼠空腹血糖含量、淋巴细胞百分比、肝脏指数均极显著降低(P<0.01),血小板数目显著降低(P<0.05),中性粒细胞百分比及白细胞数目显著增加(P<0.01)。与M组比,各治疗组小鼠中性粒细胞百分比极显著降低(P<0.01),淋巴细胞百分及空腹血糖含量极显著升高(P<0.01);中药高剂量组(ZH组)小鼠血小板数目显著提高(P<0.05),肝脏指数极显著提高(P<0.01)。与A组比,ZH组小鼠血糖含量、肝脏指数均极显著升高(P<0.01),血小板数目、肾脏指数均显著升高(P<0.05)。研究表明,加味理中汤方对脾虚泄泻小鼠的血常规、血糖及肝肾脏器指数等指标异常具有一定的改善作用,高剂量中药效果最佳且优于恩诺沙星。 展开更多

关键词 理中汤 番泻叶 脾虚泄泻 小鼠 血常规 血糖 脏器指数

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CRISPR/Cas技术在动物疫病诊断中的应用

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作者 尚佳静 罗娟 +6 位作者 王帅 张富友 邓春冉 于晓慧 刘华雷 刘冠慧 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2022年第11期80-88,共9页

传统的动物疫病检测方法大多耗时长,操作复杂,对人员和仪器设备要求较高,不适用于基层动物疫病监测和初步筛查,因此开发灵敏度高、低成本、快速、便携,可实现现场诊断的病原检测新技术尤为重要。成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白... 传统的动物疫病检测方法大多耗时长,操作复杂,对人员和仪器设备要求较高,不适用于基层动物疫病监测和初步筛查,因此开发灵敏度高、低成本、快速、便携,可实现现场诊断的病原检测新技术尤为重要。成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas)作为一种适应性免疫系统,因其简单、高效的基因编辑能力,已被广泛用于动物疫病、植物育种、人类医学等领域。近年来,CRISPR/Cas系统得到不断发展,已被开发为一种分子诊断工具,在动物疫病诊断领域显示出巨大潜力。本文简要介绍了CRISPR/Cas系统的基本结构、分类和作用机制,重点阐述了其在动物病毒病、细菌病及寄生虫病等诊断领域的应用研究进展,旨在为相关领域研究提供参考。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas 动物疫病 诊断 应用

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鸭星状病毒3型RT-RAA快速检测方法的建立 被引量：2

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作者 邓春冉 张富友 +8 位作者 尚佳静 罗娟 于晓慧 蒋文明 刘华雷 王一新 刘冠慧 徐丽娜 李阳 《中国动物检疫》 CAS 2022年第11期105-110,共6页

鸭星状病毒是近年来危害我国鸭业发展的新发病原之一,给养鸭业造成了较大的经济损失,其中鸭星状病毒3型(DAstV-3)是近年来感染率较高的星状病毒。为实现DAstV-3的快速检测,根据DAstV-3的RNA依赖性核糖核酸聚合酶基因(RNA-dependent RNA ... 鸭星状病毒是近年来危害我国鸭业发展的新发病原之一,给养鸭业造成了较大的经济损失,其中鸭星状病毒3型(DAstV-3)是近年来感染率较高的星状病毒。为实现DAstV-3的快速检测,根据DAstV-3的RNA依赖性核糖核酸聚合酶基因(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)设计特异性探针与引物,建立了DAstV-3的荧光RT-RAA检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性、重复性和临床适用性进行了评估。结果显示:建立的RT-RAA方法能够在39℃恒温条件下,在20 min内实现对DAstV-3的快速检测,与H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、鹅星状病毒、禽呼肠孤病毒等常见病毒均无交叉反应,最低检测限为10~1 copies/μL;临床样本检测发现RT-RAA方法阳性检出率高于常规RT-PCR方法,且检测时间较RT-PCR更短。结果表明,本研究建立的RT-RAA方法灵敏度高,特异性强,操作简便,临床适用性好,适合DAstV-3的现场快速检测。 展开更多

关键词 鸭星状病毒3型 RT-RAA 快速检测

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1例犬蠕形螨的诊断及中西药结合治疗 被引量：1

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作者 孙鹏翔 尚佳静 +3 位作者 罗娟 郝洪丹 张议心 刘冠慧 《现代畜牧兽医》 2022年第12期40-43,共4页

犬蠕形螨病由蠕形螨引起,是一种常见且顽固的寄生虫皮肤病。根据患犬临床症状,结合血常规、犬炎症C反应蛋白及血凝检测、血液生化检测,采用皮肤刮片显微镜检查,确定患犬为蠕形螨感染。采用中药(地榆、黄檗、黄连、百部、白鲜皮、苦参、... 犬蠕形螨病由蠕形螨引起,是一种常见且顽固的寄生虫皮肤病。根据患犬临床症状,结合血常规、犬炎症C反应蛋白及血凝检测、血液生化检测,采用皮肤刮片显微镜检查,确定患犬为蠕形螨感染。采用中药(地榆、黄檗、黄连、百部、白鲜皮、苦参、艾叶等)药浴,配合炉甘石、石膏等涂抹起到敛疮作用,采用西药头孢曲松钠、甲硝唑氯化钠、多拉菌素注射液进行消炎、杀灭蠕形螨虫体,患犬治疗20 d后康复出院,且半年后回访未复发。文章记录并分析该病例的诊断及治疗过程,以期为犬蠕形螨的治疗提供参考。 展开更多

关键词 犬 蠕形螨病 黄檗 百部 头孢曲松钠 甲硝唑氯化钠 多拉菌素

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