目的:探讨去甲基化制剂5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR or DAC)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(tri-chostatin A,TSA)对人子宫内膜腺癌Ishikawa和AN3细胞增殖和凋亡的影响。方法:台盼蓝拒染法观察药物对细胞生长曲线的影响;Annexin...目的:探讨去甲基化制剂5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR or DAC)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(tri-chostatin A,TSA)对人子宫内膜腺癌Ishikawa和AN3细胞增殖和凋亡的影响。方法:台盼蓝拒染法观察药物对细胞生长曲线的影响;AnnexinⅤ染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪分析细胞周期;Western blot检测凋亡信号通路中Caspase-8、Caspase-9活化及多聚ADP核糖聚合酶(PARP)裂解情况。结果:DAC和TSA对Ishikawa和AN3细胞均有时间依赖性的抑制作用,联用后抑制作用更强。单用DAC或TSA均可诱导细胞凋亡。单用DAC或TSA对细胞G1期无影响,单用TSA使G2/M期细胞比例增高,联合用药发生明显的G1期阻滞。Western blot检测表明,DAC和TSA诱导了Caspase-8、Caspase-9裂解活化及PARP裂解。结论:DAC与TSA协同可抑制细胞生长,并使细胞阻滞在G1期,且细胞凋亡发生的时相不同于单独用药组。展开更多
收集2×106个A 549肺腺癌细胞,以含10%胎牛血清培养后,随机分为观察组及对照组各1×106个细胞,观察组分别加入0.1、0.2、0.5μm o l/L浓度的曲古抑菌素A(TSA),对照组不予处理。观察两组A 549细胞凋亡、细胞周期及caspase-8、cas...收集2×106个A 549肺腺癌细胞,以含10%胎牛血清培养后,随机分为观察组及对照组各1×106个细胞,观察组分别加入0.1、0.2、0.5μm o l/L浓度的曲古抑菌素A(TSA),对照组不予处理。观察两组A 549细胞凋亡、细胞周期及caspase-8、caspase-9表达情况。结果观察组A 549细胞凋亡率明显高于对照组,呈现时间、浓度依赖性效应关系,药物作用后72 h,0.5μm o l/L TSA处理的A 549细胞凋亡率最高,达50%;而对照组A 549细胞凋亡率在各时间点均无明显变化。观察组细胞主要积聚在G2/M期,呈浓度依赖性,0.1、0.2、0.5μm o l/L的TSA处理后,细胞积聚在G2/M期的比例分别为23.4、35.8、39.7,与对照组比较P均<0.05。W estern b lot检测证实,TSA诱导了A 549肺腺癌细胞caspase-8、caspase-9裂解活化,随着TSA作用时间延长,其蛋白着色深度逐步升高。证实TSA可诱导A 549细胞株凋亡,其机制可能为触发一种存在于正常细胞的G2检测点功能,引发cas-pase蛋白酶的级联反应。展开更多
文摘收集2×106个A 549肺腺癌细胞,以含10%胎牛血清培养后,随机分为观察组及对照组各1×106个细胞,观察组分别加入0.1、0.2、0.5μm o l/L浓度的曲古抑菌素A(TSA),对照组不予处理。观察两组A 549细胞凋亡、细胞周期及caspase-8、caspase-9表达情况。结果观察组A 549细胞凋亡率明显高于对照组,呈现时间、浓度依赖性效应关系,药物作用后72 h,0.5μm o l/L TSA处理的A 549细胞凋亡率最高,达50%;而对照组A 549细胞凋亡率在各时间点均无明显变化。观察组细胞主要积聚在G2/M期,呈浓度依赖性,0.1、0.2、0.5μm o l/L的TSA处理后,细胞积聚在G2/M期的比例分别为23.4、35.8、39.7,与对照组比较P均<0.05。W estern b lot检测证实,TSA诱导了A 549肺腺癌细胞caspase-8、caspase-9裂解活化,随着TSA作用时间延长,其蛋白着色深度逐步升高。证实TSA可诱导A 549细胞株凋亡,其机制可能为触发一种存在于正常细胞的G2检测点功能,引发cas-pase蛋白酶的级联反应。
