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NF-κB在烧伤脓毒症大鼠肝损伤中的作用 被引量：9
1
作者 尹会男 柴家科 +3 位作者 姚咏明 吴焱秋 申传安 刘强 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期36-38,共3页
目的　研究NF κB在烧伤脓毒症大鼠急性肝损害中的作用。方法　采用 30 %Ⅲ度烫伤加内毒素攻击大鼠模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 3只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)... 目的　研究NF κB在烧伤脓毒症大鼠急性肝损害中的作用。方法　采用 30 %Ⅲ度烫伤加内毒素攻击大鼠模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 3只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组、单纯PDTC处理组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)分析肝脏NF κB活性 ,免疫印迹 (Westernblotting)法检测肝脏IκB α表达 ,酶联免疫吸附试验检测肝脏TNF α含量的变化。结果　NF κB于伤后 1h明显活化并达到高峰 (P <0 0 5 ) ;IκB α表达先减少 (P <0 0 5 )后逐渐恢复 ;NF κB抑制剂PDTC可以降低NF κB的活性和减少TNF α的释放 ,同时明显降低血清ALT、AST含量。结论　抑制NF κB活性有助于减轻烧伤脓毒症时肝脏的急性损害。 展开更多
关键词 脓毒症 NF-KB 肿瘤坏死因子 肝损伤
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核因子-κB在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢中的作用研究 被引量：6
2
作者 尹会男 柴家科 +3 位作者 申传安 吴焱秋 刘强 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期960-962,共3页
目的　观察核因子 κB(NF κB)对烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响 ,并探讨其可能机制。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,10 5只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症... 目的　观察核因子 κB(NF κB)对烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响 ,并探讨其可能机制。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,10 5只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)分析骨骼肌NF κB活性的变化 ,高效液相色谱分析法测定酪氨酸和 3 甲基组氨酸。结果　可见烧伤脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白、肌纤维蛋白降解率在伤后 2h即较对照组即显著升高 ,之后逐渐上升 ,以 12h升高最显著 (P <0 0 1) ;而骨骼肌NF κB的活性于伤后 2h显著升高 ,之后呈现下降趋势 ,伤后 12h其活性仍显著高于正常对照组 (P <0 0 5 )。结论　研究表明NF κB于烧伤脓毒症大鼠的骨骼肌中明显活化 ,而应用NF κB抑制剂PDTC能够明显降低脓毒症时骨骼肌代谢率 ,说明NF κB可能参与调控烧伤脓毒症时骨骼肌的异常代谢。 展开更多
关键词 烧伤 脓毒症 NF-κB 蛋白降解 骨骼肌
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泛素-蛋白酶体途径在烧伤脓毒症大鼠肝脏NF-κB活化中的作用研究 被引量：5
3
作者 尹会男 柴家科 +3 位作者 吴焱秋 申传安 刘强 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期963-965,共3页
目的　研究泛素 蛋白酶体途径对烧伤脓毒症大鼠肝脏NF κB的活性和IκB α含量以及肝脏TNF α表达的影响。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 0只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、... 目的　研究泛素 蛋白酶体途径对烧伤脓毒症大鼠肝脏NF κB的活性和IκB α含量以及肝脏TNF α表达的影响。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 0只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +蛋白酶体抑制剂ALLN处理组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂PDTC处理组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)分析肝脏NF κB活性 ,采用免疫印迹方法检测肝脏IκB α表达 ,采用酶联免疫吸附试验检测肝脏TNF α的变化。结果　NF κB于伤后 1h明显活化并达到高峰 (P <0 0 5 ) ,IκB α表达先减少后逐渐恢复 ,应用泛素系统抑制剂可以抑制IκB α在肝脏中的降解 ,而采用蛋白酶体抑制剂和NF κB抑制剂均可降低肝脏NF κB的活性和减少TNF α的释放。结论　表明烫伤脓毒症大鼠肝脏NF κB活性明显增强 ,而干预泛素 蛋白酶体途径可通过抑制IκB α降解实现对肝脏中NF κB活性的调控。 展开更多
关键词 脓毒症 泛素 NF-ΚB IΚB-Α 肿瘤坏死因子 肝
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雄激素对糖皮质激素所致大鼠骨骼肌萎缩的治疗作用 被引量：1
4
作者 尹会男 柴家科 +7 位作者 姚咏明 黎君友 董宁 申传安 吴焱秋 梁黎明 陶白江 刘东兴 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期425-426,共2页
目的研究睾酮对地塞米松所致大鼠骨骼肌萎缩的治疗作用以及与胰岛素样生长因子1(IGF-1)表达的关系。方法40只雌性SD大鼠随机均分为对照组、地塞米松组、睾酮组、睾酮+地塞米松组,每日检测大鼠体重,末次给药24h后处死动物,冻存血浆标本,... 目的研究睾酮对地塞米松所致大鼠骨骼肌萎缩的治疗作用以及与胰岛素样生长因子1(IGF-1)表达的关系。方法40只雌性SD大鼠随机均分为对照组、地塞米松组、睾酮组、睾酮+地塞米松组,每日检测大鼠体重,末次给药24h后处死动物,冻存血浆标本,分离腓肠肌、称重并冻存。采用定量PCR检测腓肠肌中IGF-1 mRNA的表达,ELISA法检测血浆中IGF-1蛋白水平。结果睾酮可减轻地塞米松所致的大鼠体重与骨骼肌重量降低(P<0.01),拮抗地塞米松引起的骨骼肌中IGF-1 mRNA水平下降(P<0.01),但对血浆中IGF-1蛋白水平无明显影响。结论睾酮可减轻地塞米松所致的大鼠骨骼肌萎缩,对骨骼肌中IGF-1表达的调控可能是雄激素治疗作用的机制之一。 展开更多
关键词 睾酮 胰岛素样生长因子Ⅰ 糖皮质激素类 肌萎缩 地塞米松 雄激素
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雄激素对骨骼肌萎缩大鼠泛素连接酶的调控作用研究 被引量：1
5
作者 尹会男 柴家科 +5 位作者 张瑾 韩翠华 申传安 吴焱秋 陶白江 刘东兴 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期337-339,共3页
目的研究睾酮对地塞米松所致大鼠骨骼肌萎缩的治疗作用以及对泛素连接酶表达的影响。方法40只雌性SD大鼠随机均分为对照组、地塞米松组、睾酮组、睾酮+地塞米松组,留取血浆和腓肠肌标本,采用图像采集和处理系统测量肌纤维横断面面积(CS... 目的研究睾酮对地塞米松所致大鼠骨骼肌萎缩的治疗作用以及对泛素连接酶表达的影响。方法40只雌性SD大鼠随机均分为对照组、地塞米松组、睾酮组、睾酮+地塞米松组,留取血浆和腓肠肌标本,采用图像采集和处理系统测量肌纤维横断面面积(CSA),定量PCR检测基因表达,放射免疫法检测睾酮含量。结果地塞米松可使腓肠肌中两种泛素连接酶MAFbx和MuRF1的基因表达均明显增高(P<0.01或0.05),睾酮对这两种基因的表达均无明显作用,但可明显减轻地塞米松引起的肌纤维CSA减小(P<0.01)。结论睾酮可减轻地塞米松引起的大鼠骨骼肌萎缩,其治疗作用可能并不是通过调控泛素连接酶MAFbx与MuRF1来实现的。 展开更多
关键词 雄激素 糖皮质激素 肌肉 泛素 连接酶
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泛素-蛋白酶体途径对烫伤脓毒症大鼠肠道炎症反应与屏障功能的作用研究 被引量：1
6
作者 尹会男 柴家科 +5 位作者 姚咏明 申传安 吴焱秋 马忠峰 刘强 盛志勇 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期649-652,共4页
目的研究泛素蛋白酶体途径对烫伤脓毒症大鼠肠组织核转录因子κB(NFκB)活化、肿瘤坏死因子α(TNFα)表达以及血浆二胺氧化酶(DAO)活性的作用。方法采用30%总体表面积(TBSA)度烫伤合并内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烫伤脓毒症。60只Wis... 目的研究泛素蛋白酶体途径对烫伤脓毒症大鼠肠组织核转录因子κB(NFκB)活化、肿瘤坏死因子α(TNFα)表达以及血浆二胺氧化酶(DAO)活性的作用。方法采用30%总体表面积(TBSA)度烫伤合并内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烫伤脓毒症。60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烫伤脓毒症模型组、泛素蛋白酶体抑制剂N乙酰亮氨酰亮氨酰正亮氨酸(ALLN)组、NFκB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)组。采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)分析肠组织NFκB活性;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肠组织TNFα含量;采用分光光度法检测血浆DAO活性。结果各组肠组织NFκB活性于伤后1h均明显增强,并达到高峰(P均<0.01),之后呈现下降趋势;两种抑制剂均可显著降低伤后1h和2h NFκB的活性。ALLN可明显降低伤后1h肠组织中TNFα含量(P<0.01)。两种抑制剂对伤后1h和2h血浆DAO活性均无明显影响。结论早期使用泛素蛋白酶体抑制剂可降低烫伤脓毒症大鼠肠组织NFκB活性,降低肠组织中炎症反应,但对肠组织屏障功能无保护作用。 展开更多
关键词 脓毒症 泛素 核转录因子-ΚB 肿瘤坏死因子-Α 烧伤
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红光对猪Ⅱ度烧伤创面治疗作用的初步研究 被引量：15
7
作者 尹会男 柴家科 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2011年第3期210-212,共3页
目的研究红光治疗对猪Ⅱ度烧伤创面的治疗作用。方法雌性小型猪3只，采用截面2．5cm×2．5cm大小，150g，80℃黄铜块于猪皮肤烫伤20s复制Ⅱ度烧伤模型，在每只猪的左右两侧各烫伤8个创面，共48个创面。左侧为常规治疗组；右侧为红... 目的研究红光治疗对猪Ⅱ度烧伤创面的治疗作用。方法雌性小型猪3只，采用截面2．5cm×2．5cm大小，150g，80℃黄铜块于猪皮肤烫伤20s复制Ⅱ度烧伤模型，在每只猪的左右两侧各烫伤8个创面，共48个创面。左侧为常规治疗组；右侧为红光治疗组。常规治疗组采用组磺胺嘧啶银每日换药；红光治疗组在常规治疗基础上，每日红光照射30min。于伤后2d、6d、10d：14d分别取病理组织标本，进行HE染色。检测伤后Ⅱ度烧伤创面深度（采用血管内皮细胞坏死最大深度与毛囊细胞坏死最大深度表示），创面再上皮化百分率以及创面感染发生率。结果红光治疗组与常规治疗组相比，伤后2d烧伤创面深度差异无统计学意义（P〉0．05），伤后6d、10d红光治疗组烧伤创面再上皮化百分率显著高于常规治疗组（P〈0．05），烧伤创面感染发生率2组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论红光治疗可促进猪Ⅱ度烧伤创面的再上皮化，从而促进创面愈合，其机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 红光 烧伤 再上皮化 愈合 猪
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雄激素对糖皮质激素致大鼠不同类型骨骼肌萎缩的拮抗作用研究 被引量：2
8
作者 尹会男 柴家科 吉凯 《感染．炎症．修复》 2011年第1期3-6,共4页
目的:探讨地塞米松对不同类型骨骼肌的致萎缩作用以及睾酮的拮抗效果。方法:雌性SD大鼠160只,随机分为4组(n=40):①对照组:前肢皮下注射芝麻油1 ml·kg^(-1)·d^(-1),连续3 d后同时腹腔注射生理盐水1 ml·kg^(-1)·d^(-... 目的:探讨地塞米松对不同类型骨骼肌的致萎缩作用以及睾酮的拮抗效果。方法:雌性SD大鼠160只,随机分为4组(n=40):①对照组:前肢皮下注射芝麻油1 ml·kg^(-1)·d^(-1),连续3 d后同时腹腔注射生理盐水1 ml·kg^(-1)·d^(-1),每日1次;②地塞米松组:注射地塞米松1 mg·kg^(-1)·d^(-1)(代替生理盐水)和芝麻油;③睾酮组:注射睾酮5 mg·kg^(-1)·d^(-1)(代替芝麻油)和生理盐水;④睾酮+地塞米松组:注射睾酮和地塞米松。分别在开始注射地塞米松或生理盐水后1、3、5、10 d麻醉后处死动物,每个时间点10只动物,留取趾长伸肌、比目鱼肌、胫骨前肌标本,称量肌肉重量;肌肉组织切片,HE染色后采用图像采集与分析系统计算肌纤维横断面面积(CSA)。结果:对照组与睾酮组趾长伸肌、比目鱼肌、胫骨前肌重量呈进行性上升趋势,以睾酮组更为明显。地塞米松组趾长伸肌、胫骨前肌重量呈进行性下降趋势,比目鱼肌重量变化不明显。10 d时,地塞米松组趾长伸肌、胫骨前肌重量与肌纤维CSA明显低于对照组(P<0.01);睾酮+地塞米松组趾长伸肌、胫骨前肌重量与肌纤维CSA明显高于地塞米松组(P<0.05或P<0.01);而比目鱼肌重量与肌纤维CSA在地塞米松组、对照组、睾酮+地塞米松组之间差异无显著的统计学意义(P>0.05)。结论:地塞米松可引起大鼠快白肌萎缩,而对于慢红肌作用不明显;睾酮可以部分拮抗地塞米松引起的骨骼肌萎缩。骨骼肌重量的改变与肌纤维的萎缩与肥大有关。 展开更多
关键词 雄激素 糖皮质激素 大鼠肌肉萎缩 骨骼肌
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PiCCO心肺容量监护仪在危重烧伤患者血流动力学监测中的临床应用 被引量：19
9
作者 胡泉 柴家科 +4 位作者 郝岱峰 尹会男 胡清刚 邹晓防 刘伟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1228-1230,共3页
目的研究PiCCO心肺容量监护仪在危重烧伤患者的休克期和围术期应用的可行性。方法选取2008年5月-11月住院治疗的大面积危重烧伤患者10例,烧伤面积82.5%±15.7%,均在入院后3d内即行手术切痂,分别于休克期和围术期采用PiCCO进行血流... 目的研究PiCCO心肺容量监护仪在危重烧伤患者的休克期和围术期应用的可行性。方法选取2008年5月-11月住院治疗的大面积危重烧伤患者10例,烧伤面积82.5%±15.7%,均在入院后3d内即行手术切痂,分别于休克期和围术期采用PiCCO进行血流动力学检测,项目包括平均动脉压(MAP)、心排出量指数(CI)、心功能指数(CFI)、胸腔内血容量指数(ITBI)、外周血管阻力指数(SVRI)、血管外肺水含量指数(ELWI),其中休克期监测6例次,围术期监测10例次。结果所有导管均留置成功,留置时间3.0±0.4d,导管尖细菌培养均为阴性,未发生导管并发症。患者烧伤后CI、CFI、ITBI均低于正常水平,SVRI高于正常水平,而后随着液体复苏的进行,36h后各项指标均逐渐恢复正常;MAP和EVLW无明显变化(P>0.05)。在围术期,经过严密的心肺容量监护,所有患者在休克期及感染期切痂过程中,除SVRI在切痂后显著降低、CFI在切痂后明显升高(P<0.05)外,余各项血流动力学指标均较平稳。结论采用PiCCO对严重烧伤患者的休克期和围术期进行血流动力学监测,可有效协助液体复苏及维护围术期患者生命体征的稳定。 展开更多
关键词 烧伤 监测 生理学 血液动力学过程
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不同方法制备猪脱细胞真皮基质及创面移植的实验研究 被引量：16
10
作者 马忠锋 柴家科 +3 位作者 杨红明 刘强 许明火 尹会男 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期92-94,F007,共4页
目的　比较两种方法制备的猪脱细胞真皮基质分别与自体刃厚皮复合移植修复大鼠全层皮肤缺损的效果。方法　使用 Dispase /Triton X 10 0 (中性蛋白酶 /曲拉通 )和高渗盐水 /十二烷基硫酸钠 (SDS)两种方法去除猪表皮及真皮中的细胞成分 ... 目的　比较两种方法制备的猪脱细胞真皮基质分别与自体刃厚皮复合移植修复大鼠全层皮肤缺损的效果。方法　使用 Dispase /Triton X 10 0 (中性蛋白酶 /曲拉通 )和高渗盐水 /十二烷基硫酸钠 (SDS)两种方法去除猪表皮及真皮中的细胞成分 ,分别得到猪脱细胞真皮基质 和 。 6 3只 SD大鼠背部全层皮肤缺损分别使用猪脱细胞真皮基质 +自体刃厚皮及猪脱细胞真皮基质 +自体刃厚皮覆盖 ,术后观察移植物成活率和植皮区收缩率 ,同时取移植物进行组织学观察 ,并与单纯自体刃厚皮移植相比较。结果　两种方法制备的猪脱细胞真皮基质分别与自体刃厚皮复合移植的移植物成活率和植皮区收缩率差异无显著性 ,组织学观察显示复合皮上皮化良好 ,胶原纤维排列有序 ,基底膜结构完整。两复合皮组术后第 6周移植物成活率与自体刃厚皮组比较差异均无显著性 ,术后第 4周开始两复合皮组移植物收缩率明显降低。结论　两种方法制备的异种脱细胞真皮基质与自体皮复合移植都能很好地修复全层皮肤缺损 ,改善创面愈合质量。 展开更多
关键词 猪脱细胞 真皮基质 创面移植 复合移植 皮肤移植
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性别差异对脓毒症大鼠肺组织Toll样受体4及髓样分化蛋白-2基因表达的影响 被引量：10
11
作者 杜晓辉 姚咏明 +2 位作者 李荣 申传安 尹会男 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期726-728,共3页
目的 探讨性别差异对脓毒症大鼠肺组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-2(MD-2)和 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的影响。方法 脂多糖(LPS)刺激前后留取雌性和雄性大鼠肺组织标本, 提取总RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR... 目的 探讨性别差异对脓毒症大鼠肺组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-2(MD-2)和 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的影响。方法 脂多糖(LPS)刺激前后留取雌性和雄性大鼠肺组织标本, 提取总RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TLR4、MD-2和TNF-α的基因表达情况, 采用放射免疫测定法检测大鼠血浆雌二醇(E2)含量。结果 正常雌性和雄性大鼠肺组织均可表达少量 TLR4、MD-2和TNF-α基因,性别间差异均无显著性(P均>0．05),但脓毒症雌性大鼠各项指标表达均明 显弱于雄性(P均<0．01)。相关分析表明,雌性和雄性脓毒症大鼠肺组织TLR4、TNF-α的mRNA表达与血 浆E2含量均呈显著负相关(P均<0．05)。结论 LPS诱导的肺组织TLR4信号转导通路活化存在性别差异, 内源性雌激素作用可能导致雌性脓毒症大鼠对LPS的反应性弱于雄性。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 髓样分化蛋白-2 肿瘤坏死因子-α 脂多糖 脓毒症 性别差异
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脂质体包裹Clodronate对单核/巨噬细胞选择性清除作用的研究 被引量：11
12
作者 高建川 柴家科 +2 位作者 尹会男 刘强 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期890-893,共4页
为探讨脂质体色裹clodronate清除单核 /巨噬细胞的作用 ,将clodronate用脂质体包裹 ,导入具有吞噬作用的单核 /巨噬细胞内 ,使其在单核/巨噬细胞内浓集 ,并形成具有毒性作用的ATP类似物。结果显示 ,所制备的脂质体直径 2 0 0nm ,表面呈... 为探讨脂质体色裹clodronate清除单核 /巨噬细胞的作用 ,将clodronate用脂质体包裹 ,导入具有吞噬作用的单核 /巨噬细胞内 ,使其在单核/巨噬细胞内浓集 ,并形成具有毒性作用的ATP类似物。结果显示 ,所制备的脂质体直径 2 0 0nm ,表面呈负电荷 (-40mV) ,clodronate包裹率高 (17 6 %～ 19 0 %) ,透射电镜及激光扫描共聚焦显微镜检查均见其大小均匀 ;体外实验证实clodronate溶液、未包裹clodronate脂质体对培养巨噬细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞增殖无明显影响 (P >0 0 5 ) ,clodronate脂质体包裹后对内皮细胞、平滑肌细胞增殖仍无影响 ,但明显抑制巨噬细胞增殖 (P <0 0 1) ,激光扫描共聚焦显微镜观察发现 ,罗丹明标记的脂质体与单核细胞及上述细胞孵育 4h后 ,平滑肌细胞内无脂质体 ,而脂质体可快速进入单核细胞 /巨噬细胞内 ,且包裹clodronate的脂质体对巨噬细胞有明显损伤作用。上述结果表明 ,clodronate经脂质体包裹后可选择性清除单核 /巨噬细胞 ,而对非吞噬细胞无明显影响。 展开更多
关键词 脂质体 CLODRONATE 单核细胞 巨噬细胞
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脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的变化规律 被引量：5
13
作者 杜晓辉 姚咏明 +2 位作者 李荣 申传安 尹会男 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期870-872,共3页
目的探讨脓毒症大鼠肝脏组织内毒素复合受体--Toll样受体4 (TLR4)/髓样分化蛋白-2(MD-2)mRNA的表达变化,研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的关系.方法腹腔注射内毒素(LPS)5mg/kg制作大鼠脓毒症模型.动物分为正常对照组... 目的探讨脓毒症大鼠肝脏组织内毒素复合受体--Toll样受体4 (TLR4)/髓样分化蛋白-2(MD-2)mRNA的表达变化,研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的关系.方法腹腔注射内毒素(LPS)5mg/kg制作大鼠脓毒症模型.动物分为正常对照组(20只)及内毒素注射后1h、2h、6h组(各20只),检测肝脏组织TLR4/MD-2以及TNF-α mRNA的表达.结果 LPS注射后1h,TLR4/MD-2及TNF-α mRNA表达开始升高并达高峰,伤后2～6h逐渐下降,各时间点的表达量均显著高于对照组(P<0.01),TLR4与MD-2 mRNA的表达呈明显正相关(P<0.05),且分别与TNF-α mRNA的表达呈显著正相关(P<0.05).结论 LPS可迅速上调肝脏组织TLR4/MD-2的基因表达并诱导早期炎症细胞因子TNF-α的基因表达.脓毒症时TLR4识别LPS是可能以TLR4/MD-2复合体的形式完成的,且在识别过程中MD-2是TLR4必需的作用分子. 展开更多
关键词 TOLL样受体4 髓样分化蛋白-2 胀毒症 肿瘤坏死因子
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TNF-α对大鼠Leydig细胞的作用及机制研究 被引量：5
14
作者 孙强 柴家科 +3 位作者 姜恩魁 尹会男 梁黎明 蔺静 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期55-58,共4页
目的 观察TNF-α对睾丸细胞功能的影响并探讨其可能机制。方法 通过Percoll不连续密度梯度分离获取大鼠Leydig细胞进行原代培养。HE染色进行细胞形态学观察。Leydig细胞培养48h后在培养液中分别加入不同浓度的大鼠TNF-α，使其终浓度达... 目的 观察TNF-α对睾丸细胞功能的影响并探讨其可能机制。方法 通过Percoll不连续密度梯度分离获取大鼠Leydig细胞进行原代培养。HE染色进行细胞形态学观察。Leydig细胞培养48h后在培养液中分别加入不同浓度的大鼠TNF-α，使其终浓度达到0．1、1、10、100ng／ml，分别在培养的第1、2．3、4天取上清，通过放免法测定上清液中睾酮的含量，应用MTT法测定细胞增殖情况，流式细胞术与丫啶橙（AO）染色检测及观察Leydig细胞凋亡情况。结果 原代细胞通过提纯后的细胞纯度可达70％～80%。HE染色后可见细胞胞质含量丰富，含有分泌颗粒，胞核圆。TNF-α在0．1～100ng／ml浓度范围内能呈剂量依赖的方式抑制Leydig细胞睾酮的基础分泌。0．1、1、10、100ng／ml TNF-α作用24h后，对Leydig细胞睾酮分泌量的抑制率分别为22．03％、34．98％、52．95％、74．83％。各组Leydig细胞睾酮的分泌量随时间延长呈减少的趋势，但除100ng／ml组外，其他各组各时间点比较差异无统计学意义。高浓度TNF-α（10、100ng／m1）组具有抑制Leydig细胞增殖和促进其凋亡作用，其增殖抑制率分别达到38．35％±4．17％、76．35％±8．65％，而凋亡率分别为13．23％±1．11％、26．43％±5．82％，与对照组比较有统计学意义（P〈0．01）。AO染色见高浓度TNF-α（10、100ng／ml）组出现明显的细胞凋亡。结论TNF-α对Leydig细胞睾酮的基础分泌具有抑制作用，在较高浓度时该作用可能与其抑制Leydig细胞增殖并促进细胞凋亡有相关。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 细胞培养 LEYDIG细胞 细胞凋亡
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激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质 被引量：6
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作者 梁黎明 柴家科 +3 位作者 冯瑞 李江明 孙强 尹会男 《中国激光医学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期88-91,共4页
目的探讨激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质(PADM)的可行性。方法采用胰蛋白酶/Triton X-100的方法制备PADM,使用CO2激光加工机进行打孔。对比激光微孔PADM与传统网状PADM的外观。将48只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,随机分为3组,每... 目的探讨激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质(PADM)的可行性。方法采用胰蛋白酶/Triton X-100的方法制备PADM,使用CO2激光加工机进行打孔。对比激光微孔PADM与传统网状PADM的外观。将48只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,随机分为3组,每组16只。微孔组:移植激光微孔PADM+自体刃厚皮;网状组:移植网状PADM+自体刃厚皮;对照组:仅移植自体刃厚皮。术后定期观察各组大鼠创面愈合情况,计算移植物成活率和创面收缩率。结果激光微孔PADM微孔呈矩阵样整齐排列,与网状PADM比较真皮基质分布更均匀。术后6周,微孔组移植物成活率与对照组比较差异无统计学意义,但明显高于网状组(P<0.05);微孔组创面收缩率明显低于网状组和对照组(P<0.05)。结论激光打孔可制备激光微孔PADM,其真皮基质与自体刃厚皮复合移植可提高创面修复质量。 展开更多
关键词 脱细胞真皮基质 激光 微孔 皮肤移植
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内毒素对心肌组织核因子-κB活化的影响及其意义 被引量：3
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作者 杜晓辉 姚咏明 +2 位作者 李荣 申传安 尹会男 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期423-424,共2页
目的通过观察内毒素(LPS)攻击大鼠心肌组织核因子-κB(NF-κB)的活化情况,探讨心肌损伤的可能信号机制。方法大鼠腹腔注射5mg/kgLPS制作脓毒症模型,采用凝胶阻滞迁移分析法(EMSA)检测心肌组织NF-κB活化情况,RT-PCR法检测TNF-α基因表... 目的通过观察内毒素(LPS)攻击大鼠心肌组织核因子-κB(NF-κB)的活化情况,探讨心肌损伤的可能信号机制。方法大鼠腹腔注射5mg/kgLPS制作脓毒症模型,采用凝胶阻滞迁移分析法(EMSA)检测心肌组织NF-κB活化情况,RT-PCR法检测TNF-α基因表达情况。结果LPS攻击后1h,NF-κB活化及TNF-α基因表达开始升高,2h达高峰,6h后逐渐下降。相关分析表明,心肌组织NF-κB活化与TNF-α基因表达呈显著正相关(r=0.9922,P<0.05)。结论LPS可增强心肌组织NF-κB的活化并诱导TNF-α基因表达。NF-κB活化导致的TNF-α合成增加在LPS介导心肌损害的分子机制中可能具有重要作用。 展开更多
关键词 NF-ΚB 肿瘤坏死因子 内毒素类 心肌
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烫伤大鼠肠道防御素-5和相关酶转录表达及与细菌移位关系的探讨 被引量：4
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作者 杨红明 柴家科 +5 位作者 吴焱秋 吕艺 尹会男 刘强 晋桦 盛志勇 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2004年第6期345-347,共3页
目的　探讨烧伤对大鼠肠道防御素 5 ( RD 5 )及其活化所需的基质金属蛋白酶 Matrilysin表达的影响及与肠道细菌移位的关系。方法　 SPF级 Wistar大鼠 32只 ,随机分为对照组 (假烫组 ,n=8)和烫伤组 ( n=2 4 )。烫伤组大鼠均在背上造成 3... 目的　探讨烧伤对大鼠肠道防御素 5 ( RD 5 )及其活化所需的基质金属蛋白酶 Matrilysin表达的影响及与肠道细菌移位的关系。方法　 SPF级 Wistar大鼠 32只 ,随机分为对照组 (假烫组 ,n=8)和烫伤组 ( n=2 4 )。烫伤组大鼠均在背上造成 30 %总体表面积 度烫伤。伤后 8、2 4和 72 h切取末端回肠 ,利用逆转录聚合酶链反应 ( RT PCR)方法测定不同时间点 RD 5 m RNA及 Matrilysin m RNA表达变化。伤后 2 4 h同时取肠系膜淋巴结 ( ML N )、肝、脾、肺组织进行细菌培养 ,计算脏器细菌移位频率 ;取回肠观察帕内特细胞形态。结果　 RD 5 m RNA表达量在伤后 8h显著升高 ( P<0 .0 5 ) ,伤后 2 4 h降低 ,但仍高于对照组水平 ,而伤后 72 h则降至对照组以下 ;Matrilysin m RNA在伤后 8h和 2 4 h略有增高 ,但伤后 72 h表达显著增强( P<0 .0 5 )。伤后 2 4 h脏器细菌移位频率 ( 5 8.3% )显著高于对照组 ( 8.3% ) ,P<0 .0 1;帕内特细胞无明显形态学改变。结论　大鼠烫伤后早期肠道 RD 5 m RNA及 Matrilysin m RNA表达增强 ,但时相略有不同。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 肠道防御素-5 细菌移位 烫伤
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胰岛素强化治疗对腹腔严重感染应激性高血糖的疗效及机制研究 被引量：3
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作者 杜俊东 黎沾良 +3 位作者 李基业 焦华波 尹会男 姚咏明 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期434-436,共3页
目的探讨胰岛素强化治疗对于脓毒症白兔应激性高血糖的疗效及其机制。方法采用家兔盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症模型,60只家兔随机分为对照组(12只),CLP组(24只),胰岛素强化治疗组(24只)。应用利舒坦血糖仪快速测定各组不同时间点血糖的变化... 目的探讨胰岛素强化治疗对于脓毒症白兔应激性高血糖的疗效及其机制。方法采用家兔盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症模型,60只家兔随机分为对照组(12只),CLP组(24只),胰岛素强化治疗组(24只)。应用利舒坦血糖仪快速测定各组不同时间点血糖的变化,采用逆转录聚合酶链反应方法检测骨骼肌中葡萄糖转运蛋白4(GluT4)mRNA水平,采用Westernblot方法测定骨骼肌细胞膜GluT4含量。结果血糖于伤后2h明显增高,12h达高峰;骨骼肌GluT4mRNA表达及GluT4蛋白含量于伤后2h明显减少。采用胰岛素强化治疗后,可将血糖维持在正常范围内,并明显抑制骨骼肌中GluT4mRNA的表达及蛋白含量的减少。结论脓毒症可引起家兔应激性高血糖,而胰岛素强化治疗可通过抑制骨骼肌的GluT4表达降低来治疗应激性高血糖,降低死亡率。 展开更多
关键词 脓毒症 胰岛素 单糖转运蛋白质类 肌 骨骼
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不同因素刺激对大鼠骨骼肌组织蛋白代谢影响的比较与分析 被引量：2
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作者 吴焱秋 柴家科 +5 位作者 杨红明 郝岱峰 尹会男 刘强 庹晓烨 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期952-953,共2页
目的　探讨不同作用因素对大鼠骨骼肌蛋白代谢的影响。方法　雄性Wistar大鼠 12 0只 ,分别制作单纯烧伤、内毒素腹腔注射、烧伤复合内毒素攻击三种模型应用充分氧供肌肉离体孵育系统和氨基酸自动分析仪测定不同刺激因素后大鼠伸趾长肌... 目的　探讨不同作用因素对大鼠骨骼肌蛋白代谢的影响。方法　雄性Wistar大鼠 12 0只 ,分别制作单纯烧伤、内毒素腹腔注射、烧伤复合内毒素攻击三种模型应用充分氧供肌肉离体孵育系统和氨基酸自动分析仪测定不同刺激因素后大鼠伸趾长肌蛋白降解率的变化。结果　三种模型骨骼肌蛋白降解率均显著增强 ,尤以肌纤维蛋白为著 ;单纯烧伤后早期肌蛋白的消耗相对较小 ,内毒素腹腔注射早期肌蛋白的消耗相对较大 ,烧伤复合内毒素攻击后肌蛋白的消耗显著增加。结论　烧伤、脓毒症、烧伤合并脓毒症三种状态下骨骼肌蛋白降解率的变化与伤情有关 ,随病情的加重而加剧。 展开更多
关键词 骨骼肌 蛋白 代谢 烧伤 脓毒症
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严重烧伤大鼠早期切痂植皮后骨骼肌泛素转录的变化 被引量：2
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作者 吴焱秋 柴家科 +5 位作者 杨红明 尹会男 刘强 郝岱峰 庹晓烨 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期954-955,965,共3页
目的　探讨大鼠严重烧伤早期切痂后骨骼肌蛋白降解率变化的内在机制。方法　应用大鼠 30 %Ⅲ度背部烫伤模型 ,随机分为伤前、单纯烧伤、早期切痂和非早期切痂组 ,切痂组分别于伤后 1天和 4天行切痂手术 ,采用无创技术和骨骼肌充分氧供... 目的　探讨大鼠严重烧伤早期切痂后骨骼肌蛋白降解率变化的内在机制。方法　应用大鼠 30 %Ⅲ度背部烫伤模型 ,随机分为伤前、单纯烧伤、早期切痂和非早期切痂组 ,切痂组分别于伤后 1天和 4天行切痂手术 ,采用无创技术和骨骼肌充分氧供离体孵育系统测定伸趾长肌肌纤维蛋白降解率 ,Northernblot方法测定伸趾长肌组织中泛素转录表达的变化。结果　伸趾长肌肌纤维蛋白降解率在伤后各时间点均显著增加 (P<0 0 1) ,早期切痂组较非早期切痂组在伤后 2、4、5天显著降低 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。泛素转录表达在伤后均显著增加 ,但早期切痂组呈持续下降的趋势。蛋白降解率与泛素转录表达间呈显著正相关 (r=0 94 78,P <0 0 5 )。结论　烧伤早期切痂可降低骨骼肌蛋白的高分解代谢反应 ,与泛素 展开更多
关键词 烧伤 骨骼肌 皮肤移植 泛素
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