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miR-185-5p影响小鼠乳腺癌PY8119细胞增殖、侵袭迁移的研究
1
作者 刘璐 赵燕乔 +4 位作者 王晓娜 王坤 尹崇高 刘清华 李洪利 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1126-1132,共7页
目的 探讨miR-185-5p对小鼠乳腺癌PY8119细胞增殖、侵袭迁移能力的影响。方法 通过前期研究获得乳腺癌中表达显著下调的miR-185-5p, NCBI查询人源与鼠源miR-185-5p基因序列;EdU增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕愈合实验、流式细胞术... 目的 探讨miR-185-5p对小鼠乳腺癌PY8119细胞增殖、侵袭迁移能力的影响。方法 通过前期研究获得乳腺癌中表达显著下调的miR-185-5p, NCBI查询人源与鼠源miR-185-5p基因序列;EdU增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕愈合实验、流式细胞术检测过表达和敲低miR-185-5p对PY8119细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡能力的影响;利用C57BL/6小鼠建立皮下肿瘤模型和肺转移模型,观察过表达miR-185-5p对体内肿瘤增殖能力以及肺部转移情况的变化。结果 EdU增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕愈合实验、流式细胞术结果分别显示,敲低miR-185-5p使PY8119细胞的增殖、侵袭、迁移能力显著增强,抑制细胞凋亡;而过表达miR-185-5p抑制PY8119细胞的增殖、侵袭、迁移能力,促进细胞凋亡;C57BL/6小鼠体内成瘤实验显示,过表达miR-185-5p减缓C57BL/6小鼠体内肿瘤生长速度;肺转移实验显示,过表达miR-185-5p抑制C57BL/6小鼠肺转移能力。结论 miR-185-5p作为抑癌基因抑制小鼠乳腺癌PY8119细胞体内外增殖、侵袭迁移的能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-185-5p 增殖 侵袭 皮下肿瘤模型
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hsa-miR-340-5p靶基因预测及生物信息学分析
2
作者 刘清华 陶秀丽 +3 位作者 尹崇高 李洪利 刘雨清 张宝刚 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期1880-1884,共5页
目的 通过对hsa-miR-340-5p的靶基因进行预测和生物信息学分析,探讨其靶基因所发挥的生物学功能及参与的信号传导通路。方法 应用RNAcentral和miRBase数据库在线对比分析miR-340-5p序列在不同物种之间的保守性。运用在线数据库DIANA-mic... 目的 通过对hsa-miR-340-5p的靶基因进行预测和生物信息学分析,探讨其靶基因所发挥的生物学功能及参与的信号传导通路。方法 应用RNAcentral和miRBase数据库在线对比分析miR-340-5p序列在不同物种之间的保守性。运用在线数据库DIANA-microT、Target Scan、miRWalk和miRDB分别预测hsa-miR-340-5p的靶基因,随后使用Venny2.1绘制韦恩图得到交集靶基因的集合,并对其交集靶基因的集合进行基因本体论(GO)功能注释分析、京都基因与基因组百科全书信号通路(KEGG Pathway)富集分析、蛋白互作(PPI)网络构建及关键(hub)基因筛选。结果 通过对比序列分析发现,miR-340-5p的成熟碱基序列在8个不同的物种中高度保守。采用4个miRNA靶基因在线数据库预测后,发现与hsa-miR-340-5p存在结合位点的交集靶基因集合共有92个,占其预测靶基因总和的1.9%。GO功能注释分析发现,hsa-miR-340-5p交集靶基因集合主要富集在核质、黏着斑、细胞间连接等细胞组分,同时,还参与了RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录和蛋白质结合等多种生物学过程和分子功能。KEGG Pathway富集分析发现,hsa-miR-340-5p所结合的交集靶基因集合主要富集在癌症中的蛋白多糖、癌症通路、人类嗜T细胞病毒Ⅰ型(HTLV-I)感染等7个信号通路中。基于hsa-miR-340-5p交集靶基因集合的PPI网络构建,筛选出了度(degree)值前10位的hub基因,分别是:母体抗生物皮肤生长因子同源物(SMAD)2、无翅型MMTV整合位点家族成员(WNT)3、激活素A的1C型受体(ACVR1C)、F-框蛋白(FBXO)30、重组人缺陷于清选蛋白neddylation蛋白1域含1(DCUN1D1)、PH结构域相互作用蛋白(PHIP)、CUB和Sushi多结构域(CSMD)3、分拣连接蛋白(SNX)9、人免疫缺陷病毒Ⅰ增强子结合蛋白(HIVEP)2、RWD结构域蛋白(RWDD)2A。结论 hsa-miR-340-5p调控的靶基因参与了癌症、炎症等疾病的多种生物学过程。 展开更多
关键词 hsa-miR-340-5p 靶基因 生物信息学
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miR-186-5p调控PRKAA2促进肺腺癌细胞铁死亡的机制研究
3
作者 刘璐 管欣 +4 位作者 赵燕乔 王晓娜 尹崇高 刘清华 李洪利 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期813-821,共9页
背景与目的肺腺癌是最常见的非小细胞肺癌组织学类型,miRNAs作为基因表达的调控分子调控细胞增殖、凋亡和分化,从而影响细胞内稳态。本研究通过实验验证miR-186-5p通过调控其下游靶蛋白PRKAA2影响铁死亡途径从而抑制肺腺癌细胞增殖、迁... 背景与目的肺腺癌是最常见的非小细胞肺癌组织学类型,miRNAs作为基因表达的调控分子调控细胞增殖、凋亡和分化,从而影响细胞内稳态。本研究通过实验验证miR-186-5p通过调控其下游靶蛋白PRKAA2影响铁死亡途径从而抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。方法前期研究获得肺癌中表达显著下调的miRNA,即miR-186-5p;生物信息学方法预测其下游铁死亡相关靶蛋白并查询其在肺腺癌中的表达水平及对患者生存预后的影响;双荧光素酶验证两者结合位点;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blot检测过表达miR-186-5p后PRKAA2的基因和蛋白表达情况;EdU、Transwell、划痕实验验证miR-186-5p在A549、H1299细胞中的增殖、侵袭迁移能力的影响以及miR-186-5p对Fer-1抑制铁死亡敏感性的作用机制;活性氧(reactive oxygen species,ROS)实验检测miR-186-5p对肺腺癌细胞ROS含量的影响;丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)实验检测miR-186-5p、PRKAA2对肺腺癌细胞铁死亡指标变化的影响;脂质ROS(lipid ROS,L-ROS)实验检测miR-186-5p、PRKAA2对肺腺癌细胞L-ROS含量的影响。结果PRKAA2在肺腺癌中表达上调;过表达miR-186-5p使PRKAA2的基因和蛋白表达量下降;过表达miR-186-5p通过调控PRA2促进铁死亡抑制肺腺癌细胞增殖、侵袭迁移能力;miR-186-5p能够增加A549细胞ROS含量;过表达miR-186-5p和敲低PRKAA2上调肺腺癌细胞MDA含量,下调还原型GSH含量;miR-186-5p通过靶向PRKAA2增加肺腺癌细胞L-ROS含量,促进肺腺癌细胞铁死亡敏感性。结论miR-186-5p通过靶向调控PRA2促进肺腺癌A549、H1299细胞铁死亡,从而抑制肺腺癌增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 肺肿瘤 miR-186-5p PRKAA2 增殖 侵袭 迁移 铁死亡
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MiR-326调控EphB3抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移 被引量：1
4
作者 陈新璐 陈琳 +5 位作者 左伟 赵燕乔 刘璐 李洪利 李承德 尹崇高 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期665-672,共8页
目的 探究miR-326通过调控EphB3的表达,抑制乳腺癌侵袭转移的分子机制。方法 RTFQ-PCR用于检测miR-326在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况及miR-326过表达质粒的转染效率。EdU细胞增殖实验、Transwell实验用于检测不同分组细... 目的 探究miR-326通过调控EphB3的表达,抑制乳腺癌侵袭转移的分子机制。方法 RTFQ-PCR用于检测miR-326在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况及miR-326过表达质粒的转染效率。EdU细胞增殖实验、Transwell实验用于检测不同分组细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。双荧光素酶实验用于验证miR-326与EphB3是否存在结合位点。Western blot法检测过表达miR-326后乳腺癌细胞中EphB3的表达情况。结果 RTFQ-PCR结果显示,miR-326在乳腺癌细胞中低表达,且转染成功(P<0.05)。EdU增殖实验和Transwell实验结果表明,过表达miR-326能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-326可以与EphB3的3′-UTR相互结合(P<0.05)。Western blot和Transwell实验结果显示,miR-326可以负向调控EphB3抑制乳腺癌细胞的侵袭转移(P<0.05)。结论 miR-326在乳腺癌的发生发展过程中起着抑癌基因的作用,并通过调控EphB3的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 MiR-326 EphB3 侵袭 转移 增殖
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MiR-525-5p通过靶向结合围脂滴蛋白3调控胶质瘤细胞的迁移、侵袭与增殖
5
作者 左伟 贾丽艳 +4 位作者 罗栋梁 李洪利 尹崇高 刘清华 刘伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期821-830,共10页
颅内恶性肿瘤中最常见的是胶质瘤。虽然目前的治疗手段是手术、放疗和化疗,但胶质瘤患者的预后并不乐观。因此,找到有效的处理办法就变得十分关键。文献显示,在肿瘤发生和发展过程中,微RNA(microRNA,miRNA)发挥了重要作用。基于此,本研... 颅内恶性肿瘤中最常见的是胶质瘤。虽然目前的治疗手段是手术、放疗和化疗,但胶质瘤患者的预后并不乐观。因此,找到有效的处理办法就变得十分关键。文献显示,在肿瘤发生和发展过程中,微RNA(microRNA,miRNA)发挥了重要作用。基于此,本研究旨在探究miR-525-5p在调控胶质瘤细胞的迁移、侵袭与增殖的分子机制。利用TCGA数据库识别出在正常组织与胶质瘤组织中差异表达的围脂滴蛋白3(PLIN3),并利用CGGA与GEPIA数据库查询到高表达的PLIN3与胶质瘤患者预后不良相关,且Western印迹结果揭示了PLIN3在胶质瘤细胞中高度表达(P<0.05)。细胞划痕(wound healing)实验和Transwell侵袭实验结果显示,敲除和过表达PLIN3分别抑制或者促进胶质瘤细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。使用在线数据库反向选择能与PLIN3靶向相结合的miR-525-5p。双荧光素酶结果证实,PLIN3能与miR-525-5p靶向结合。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)显示,miR-525-5p在胶质瘤细胞LN229、U251中的表达要比人星形胶质细胞(Human astrocyte,HA)中低(P<0.05)。Transwell实验和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2-deoxyuridine,EdU)细胞增殖结果表明,下调和上调miR-525-5p可逆转过表达和敲除PLIN3对胶质瘤细胞LN229的抑制作用(P<0.05)。综上所述,通过靶向结合PLIN3,miR-525-5p能够调节胶质瘤细胞的迁移、侵袭和增殖。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-525-5p 围脂滴蛋白3 增殖 侵袭
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ICU肠外营养患者中心静脉导管相关血流感染病原学分析及预测模型构建
6
作者 孙宁鑫 贾维慧 +5 位作者 宋艳梅 李春莲 刘晨 宋宜芬 厉丹阳 尹崇高 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第20期89-92,共4页
目的 探讨ICU肠外营养患者发生中心静脉导管相关血流感染的危险因素,为针对性干预提供参考。方法 将ICU 987例经中心静脉导管进行肠外营养的患者分为建模组708例、验证组279例,通过单因素和多因素分析危险因素并构建预测模型。结果 建模... 目的 探讨ICU肠外营养患者发生中心静脉导管相关血流感染的危险因素,为针对性干预提供参考。方法 将ICU 987例经中心静脉导管进行肠外营养的患者分为建模组708例、验证组279例,通过单因素和多因素分析危险因素并构建预测模型。结果 建模组708例中85例(12.01%)发生血流感染,病原菌以革兰阳性菌为主(占53.98%)。筛选出APACHEⅡ评分、拔管时最高体温、白蛋白含量、营养液中加入谷氨酰胺、导管留置时间、肠外营养时间6项影响因素(均P<0.05),构建风险预测模型。预测曲线和观察曲线具有较好的一致性,建模组及验证组ROC曲线下面积分别为0.816和0.847。结论 该模型能较好地预测ICU肠外营养患者发生中心静脉导管相关血流感染风险,可为预防性管理提供参考。 展开更多
关键词 危重症患者 肠外营养 中心静脉置管 中心静脉导管相关血流感染 ICU 预测模型
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NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移 被引量：5
7
作者 尹崇高 李平 +5 位作者 李洪利 孙磊 刘菲 张丽娜 李文通 张宝刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期978-982,共5页
本课题组先前研究证明NUAK1/ARK5参与乳腺癌、胶质瘤侵袭转移,但机制尚不清楚.本文证明,NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移.应用小RNA干扰技术敲除乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的NUAK1,用G418进行稳定筛选,并用Western印迹进... 本课题组先前研究证明NUAK1/ARK5参与乳腺癌、胶质瘤侵袭转移,但机制尚不清楚.本文证明,NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移.应用小RNA干扰技术敲除乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的NUAK1,用G418进行稳定筛选,并用Western印迹进行蛋白质表达检测,结果显示,成功敲除MDA-MB-231细胞中的NUAK1;采用Transwell侵袭实验检测NUAK1在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用,结果表明,NUAK1被干扰的SiNUAK1/MDA-231细胞的侵袭能力明显减弱;应用免疫荧光法对细胞的F-actin进行荧光染色,半定量F-actin聚合分析结果显示,IGF-1在转染空载的细胞组(Scr/MDA-231)能诱导肌动蛋白短暂的聚合反应,而在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231)肌动蛋白的聚合显著减少;用细胞因子IGF-1刺激乳腺癌细胞观察cofilin磷酸化,结果显示,在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231),IGF-1诱导的cofilin的磷酸化明显受抑制.上述结果表明,NUAK1能通过促进F-actin的聚合从而影响乳腺癌细胞的侵袭转移. 展开更多
关键词 NUAK1 肌动蛋白丝聚合 乳腺肿瘤
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被动吸烟下调大鼠卵泡刺激素、黄体生成素、促性腺激素释放激素及其受体的表达 被引量：3
8
作者 尹崇高 李若葆 李洪利 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期714-718,共5页
目的研究被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构、激素受体及血清中激素的影响。方法 Wistar大鼠32只,分为实验组和对照组(各16只)。实验组大鼠吸烟3个月,对照组不予吸烟,3个月后处死大鼠。光镜及电镜下观察各组大鼠卵巢结构的改变,免疫组织化... 目的研究被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构、激素受体及血清中激素的影响。方法 Wistar大鼠32只,分为实验组和对照组(各16只)。实验组大鼠吸烟3个月,对照组不予吸烟,3个月后处死大鼠。光镜及电镜下观察各组大鼠卵巢结构的改变,免疫组织化学染色检测激素受体的改变,酶联免疫吸附试验检测血清中激素的改变情况。结果实验组大鼠卵巢髓质血管收缩、减少,间质疏松。卵巢颗粒细胞内线粒体水样变、空泡样变,线粒体嵴断裂、模糊;粗面内质网脱颗粒样变。血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)水平比对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。实验组大鼠卵巢组织中卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)的表达显著低于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论被动吸烟可使大鼠血清中FSH、LH及GnRH水平明显降低,大鼠卵巢中FSHR及LHR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的结构及功能,引起生殖内分泌失调。 展开更多
关键词 被动吸烟 卵巢 卵泡刺激素 黄体生成素 促性腺激素释放激素 免疫组织化学 大鼠
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生长抑素及其受体与消化道疾病的研究 被引量：9
9
作者 尹崇高 李洪利 张伟栋 《医学综述》 2006年第24期1485-1487,共3页
生长抑素(SST)是一种典型的脑肠肽,广泛分布于全身及胃肠道各器官组织中,发挥广泛而重要的生理调控功能。本文就SST及其受体的结构、分布、功能及与消化系统疾病的研究现状作一综述。
关键词 消化系统肿瘤 消化性溃疡 生长抑素 受体 生理功能
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乳腺癌中MTDH的表达及意义 被引量：3
10
作者 尹崇高 高乃尧 +2 位作者 李洪利 李文通 张宝刚 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第1期87-88,共2页
乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,其侵袭转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因[1]。近来,美国新泽西癌症研究所和普林斯顿大学的研究人员发现身患严重乳腺癌的患者体内,8号人类染色体的一小部分被重复了多次,肿瘤内一种名为Metadherin（M... 乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,其侵袭转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因[1]。近来,美国新泽西癌症研究所和普林斯顿大学的研究人员发现身患严重乳腺癌的患者体内,8号人类染色体的一小部分被重复了多次,肿瘤内一种名为Metadherin（MTDH）基因发生变异,表现异常活跃[2]。本研究探讨MTDH在乳腺癌发病中的作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤患者 癌症研究所 人类染色体 恶性肿瘤 侵袭转移 研究人员 新泽西
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被动吸烟下调大鼠卵巢雌、孕激素及其受体的表达 被引量：3
11
作者 尹崇高 李若葆 +1 位作者 李洪利 杨晓 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第4期331-334,I0006,共5页
目的利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构的影响,检测生殖激素水平,分析生殖内分泌的变化,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供新的理论依据。方法建立大鼠烟雾吸入模型。32只健康雌性Wistar大鼠,鼠龄(60±5... 目的利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构的影响,检测生殖激素水平,分析生殖内分泌的变化,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供新的理论依据。方法建立大鼠烟雾吸入模型。32只健康雌性Wistar大鼠,鼠龄(60±5)d,每只体重200～250g,随机分为空白对照组和实验组,每组16只。实验组吸烟3个月,对照组正常饲养。3个月后处死两组大鼠。酶联免疫吸附试验方法 (enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA)检测雌鼠血清中雌激素(estrogen,E2)、孕激素(progesterone,P4)的水平;常规石蜡切片,免疫组织化学SP法检测各组雌鼠卵巢雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)的表达情况。所得数据采用SPSS软件作统计学处理分析,比较各组间差异程度。结果①酶联免疫吸附试验结果 :吸烟3个月大鼠血清E2水平比空白对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性;吸烟3个月大鼠血清P4水平比空白对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性。②免疫组织化学结果 :ER主要表达在大鼠卵巢组织的各级生长卵泡的颗粒细胞的细胞核内,呈棕黄色颗粒状分布,卵泡膜细胞和间质细胞也有少量表达。吸烟3个月的大鼠卵巢组织中ER的表达显著低于空白对照组。PR主要表达在大鼠卵巢组织卵泡的颗粒细胞的细胞质和细胞核中,呈棕黄色颗粒状分布,吸烟3个月的大鼠卵巢组织中PR的表达显著低于空白对照组。结论①成功的建立了大鼠被动吸烟模型。②被动吸烟可使大鼠血清中E2及P4水平明显降低,使大鼠卵巢中ER及PR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的功能,引起生殖内分泌失调。 展开更多
关键词 被动吸烟 卵巢 雌激素 孕激素 雌激素受体 孕激素受体
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TGF-β_1对乳腺癌细胞系Snail表达的影响 被引量：3
12
作者 尹崇高 李洪利 +2 位作者 李文通 孙永红 张宝刚 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期120-123,共4页
目的通过TGF-β1诱导乳腺癌MCF-7发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)后检测锌指转录因子Snail表达的改变,探讨Snail在EMT及乳腺癌发生发展中的作用。方法常规培养乳腺癌细胞株MCF-7后,用TGF-β1诱导其发生EMT,用... 目的通过TGF-β1诱导乳腺癌MCF-7发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)后检测锌指转录因子Snail表达的改变,探讨Snail在EMT及乳腺癌发生发展中的作用。方法常规培养乳腺癌细胞株MCF-7后,用TGF-β1诱导其发生EMT,用Transwell侵袭小室法进行细胞体外侵袭能力检测;用免疫组织化学方法及免疫荧光检测E-cadherin、Vi mentin、Snail的表达;用real ti me PCR检测E-cadherin、Vi mentin、Snail mRNA的表达。结果TGF-β1处理72h后的MCF-7细胞穿透能力明显增强。E-cadherin蛋白及mRNA表达减少,Vi mentin、Snail蛋白及mRNA表达增加。结论E-cadherin、Vi mentin是细胞发生EMT的重要生物学标志,Snail可能在转录水平上调控E-cadherin、Vi mentin蛋白的表达,Snail在EMT和乳腺癌的发生发展中起着重要的作用。 展开更多
关键词 TGF-Β1 乳腺肿瘤 上皮-间质转化 SNAIL
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胃泌素、生长抑素在胃溃疡发病中的作用 被引量：16
13
作者 尹崇高 李洪利 杨晓 《实用全科医学》 2008年第6期563-564,共2页
目的检测胃溃疡中胃泌素(gastrin,GAS)、生长抑素(somatostatin,SOM)mRNA的表达,探讨胃泌素和生长抑素在胃溃疡发病中的作用。方法取胃溃疡新鲜标本30例(其中胃镜标本10例),正常胃组织20例。运用逆转录PCR(Reverse transcriptase-polyme... 目的检测胃溃疡中胃泌素(gastrin,GAS)、生长抑素(somatostatin,SOM)mRNA的表达,探讨胃泌素和生长抑素在胃溃疡发病中的作用。方法取胃溃疡新鲜标本30例(其中胃镜标本10例),正常胃组织20例。运用逆转录PCR(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测胃溃疡和正常胃组织GAS、SOM mRNA的表达,比较这2个部位光密度(OD)比值的差异。结果胃溃疡和正常胃组织均有GAS、SOM mRNA的表达,胃溃疡GAS mR-NA的OD比值明显高于正常胃组织的OD比值,差异有统计学意义(P<0.05);胃溃疡SOMmRNA的OD比值明显低于正常胃组织的OD比值,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在基因水平证实了GAS、SOM在胃溃疡中的表达,结果表明GAS、SOM在胃溃疡的发病过程中起着非常重要的作用。 展开更多
关键词 胃溃疡 胃泌素 生长抑素 RT-PCR
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观摩外科手术对外科护理学实践教学效果影响的研究 被引量：1
14
作者 尹崇高 李洪利 魏秀红 《卫生职业教育》 2016年第4期128-129,共2页
目的探讨观摩外科手术对外科护理学实践教学效果的影响,为加强高校护理本科生外科护理学的实践教学效果提供依据。方法正常理论教学后将护生随机分成实验组(75人)及对照组(75人),实验组观摩外科手术,对照组观看手术录像,临床实习结束后... 目的探讨观摩外科手术对外科护理学实践教学效果的影响,为加强高校护理本科生外科护理学的实践教学效果提供依据。方法正常理论教学后将护生随机分成实验组(75人)及对照组(75人),实验组观摩外科手术,对照组观看手术录像,临床实习结束后对两组护生进行综合评价。结果实验组的理论考试成绩及操作技能考试成绩均明显优于对照组(P<0.05)。调查显示,97.3%的实验组护生认为观摩外科手术能提高实践教学效果,94.7%的实验组护生认为观摩外科手术可以提高学习兴趣,96.0%的实验组护生认为观摩外科手术可以发挥其桥梁作用。结论观摩外科手术既有利于护生理论知识及操作技能的掌握,又有助于调动护生的学习兴趣,从而提高外科护理学实践教学效果。 展开更多
关键词 观摩外科手术 外科护理学 实践教学
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胃溃疡活动期患者胃泌素mRNA的表达及意义 被引量：1
15
作者 尹崇高 常亮 李洪利 《潍坊医学院学报》 2007年第6期517-518,F0003,共3页
目的检测胃溃疡患者胃泌素(gastrin,GAs)mRNA的表达,探讨胃泌素在胃溃疡发病中的作用。方法取手术切除的胃溃疡新鲜标本15例,分别在胃溃疡边缘及切端(相对正常胃组织)取材。胃镜胃溃疡标本15例。运用逆转录PCR(RT- PCR)的方法检测2个不... 目的检测胃溃疡患者胃泌素(gastrin,GAs)mRNA的表达,探讨胃泌素在胃溃疡发病中的作用。方法取手术切除的胃溃疡新鲜标本15例,分别在胃溃疡边缘及切端(相对正常胃组织)取材。胃镜胃溃疡标本15例。运用逆转录PCR(RT- PCR)的方法检测2个不同部位中GAS mRNA的表达,其光密度值(OD)与内参照β-actin的光密度值比较,分析2个部位的OD比值的不同。结果胃溃疡标本的2个不同部位均有GAS mRNA的表达,在胃溃疡边缘GAS mRNA的OD比值明显高于胃溃疡切端相对正常胃组织的OD值,差异有显著性(P<0.05)。结论在基因水平证实了GAS在胃溃疡中的表达,而且表明GAS等胃肠激素在胃溃疡的发病过程中起着非常重要的作用。 展开更多
关键词 胃溃疡 胃泌素 RT-PCR
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生长抑素mRNA在活动期胃溃疡中的表达及意义
16
作者 尹崇高 李洪利 张伟栋 《中国医药导报》 CAS 2008年第3期27-28,共2页
目的:检测胃溃疡中生长抑素(somatostatin,SOM)mRNA的表达,探讨生长抑素在胃溃疡发病中的作用。方法:取手术切除的胃溃疡新鲜标本18例,分别在胃溃疡边缘及切端(相对正常胃组织)取材,胃镜胃溃疡标本12例。运用逆转录PCR(RT-PCR)的方法检... 目的:检测胃溃疡中生长抑素(somatostatin,SOM)mRNA的表达,探讨生长抑素在胃溃疡发病中的作用。方法:取手术切除的胃溃疡新鲜标本18例,分别在胃溃疡边缘及切端(相对正常胃组织)取材,胃镜胃溃疡标本12例。运用逆转录PCR(RT-PCR)的方法检测两个不同部位中SOMmRNA的表达,其光密度值(OD)与内参照β-Actin的光密度值比较,分析两个部位的OD比值的不同。结果:胃溃疡标本的两个不同部位均有SOMmRNA的表达,在胃溃疡边缘SOMmRNA的OD比值明显低于胃溃疡切端相对正常胃组织的OD值,差异有显著性(P<0.05)。结论:在基因水平证实了SOM在胃溃疡中的表达,而且表明SOM等胃肠激素在胃溃疡的发病过程中起着非常重要的作用。 展开更多
关键词 胃溃疡 生长抑素 RT-PCR
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被动吸烟对雌鼠生殖内分泌激素的影响
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作者 尹崇高 李若葆 李洪利 《潍坊医学院学报》 2011年第5期354-356,共3页
目的 观察被动吸烟对Wistar雌鼠血清生殖内分泌激素水平的影响.方法 将32只健康雌性Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,每组16只.实验组被动吸烟3个月,对照组正常饲养.3个月后心脏取血,分离血清,应用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血... 目的 观察被动吸烟对Wistar雌鼠血清生殖内分泌激素水平的影响.方法 将32只健康雌性Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,每组16只.实验组被动吸烟3个月,对照组正常饲养.3个月后心脏取血,分离血清,应用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血清中生殖内分泌激素水平.结果 血清E2,P4,FSH水平与对照组相比差异非常显著（P＜0.01）,LH,GnRH浓度值比较差异有显著性（P＜0.05）.结论 被动吸烟可使大鼠血清中E2,P4,FSH,LH及GnRH水平明显降低,提示被动吸烟可引起生殖内分泌失调. 展开更多
关键词 被动吸烟 Wistar雌鼠 生殖内分泌激素
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多发性导管内乳头状瘤1例
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作者 尹崇高 高学军 李洪利 《潍坊医学院学报》 2006年第2期133-133,共1页
关键词 导管内乳头状瘤 多发性 病例报告
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Gab2通过PI3K/Akt/ARK5/MMP途径影响乳腺癌的侵袭和转移 被引量：16
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作者 田红艳 陈萍萍 +5 位作者 李笑 李洪利 任甜甜 张宝刚 尹崇高 刘雨清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1014-1018,共5页
目的探讨Gab2在乳腺浸润性导管癌侵袭和转移中的分子机制,为临床预防乳腺癌的侵袭和转移提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测80例乳腺浸润性导管癌组织及癌旁相对正常组织(>5 cm)中Gab2蛋白表达情况,并分析其表达与乳腺浸润... 目的探讨Gab2在乳腺浸润性导管癌侵袭和转移中的分子机制,为临床预防乳腺癌的侵袭和转移提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测80例乳腺浸润性导管癌组织及癌旁相对正常组织(>5 cm)中Gab2蛋白表达情况,并分析其表达与乳腺浸润性导管癌临床病理参数的相关性,分析浸润性导管癌中Gab2、MMP-2及MMP-9蛋白表达的相关性。采用Western blot检测乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231中Gab2蛋白的表达情况。采用RNAi技术将小RNA干扰质粒瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,应用Western blot检测转染成功后各组细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达情况,应用Transwell体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭性,用EGF刺激细胞后Western blot检测Akt及ARK5的磷酸化情况。结果浸润性导管癌组织中Gab2蛋白的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),浸润性导管癌中Gab2蛋白的表达与ER、组织学分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),且其表达与MMP-2及MMP-9蛋白的表达呈正相关;MDA-MB-231细胞系中Gab2蛋白表达量高于MCF-7细胞系中表达量;转染干扰质粒24 h后,与转染空载细胞组相比,SiG ab2/MDA-MB-231细胞组中Gab2蛋白的表达量明显降低,结果显示转染成功。同时,SiG ab2/MDA-MB-231细胞组穿过Transwell小室人工基膜数量明显减少(P<0.05),并伴有MMP-2、MMP-9蛋白表达降低(P<0.05)。用EGF刺激各组细胞,结果显示:在SiG ab2/MDAMB-231细胞组Akt及ARK5的磷酸化明显受到抑制。结论Gab2通过PI3K/Akt/ARK5信号通路影响MMP-2、MMP-9的表达从而促进乳腺癌的侵袭与转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 Gab2 AKT ARK5 MMP 侵袭 转移
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miR-186-5p通过靶向调控PTTG1抑制肺腺癌细胞的上皮-间质转化 被引量：19
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作者 张国新 徐新伟 +4 位作者 孟斌 朱优秀 曾国栋 尹崇高 李洪利 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期380-385,共6页
先前研究表明,miR-186-5p在人类许多恶性肿瘤中扮演抑癌基因的作用,但其在肺腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用并不明确。本研究旨在证明,miR-186-5p可通过靶向调控PTTG1抑制肺腺癌细胞的上皮-间质转... 先前研究表明,miR-186-5p在人类许多恶性肿瘤中扮演抑癌基因的作用,但其在肺腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用并不明确。本研究旨在证明,miR-186-5p可通过靶向调控PTTG1抑制肺腺癌细胞的上皮-间质转化。我们首先分析了miR-186-5p在人肺癌细胞中的表达。荧光定量PCR(QRT-PCR)结果显示,与人正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,肺腺癌细胞SPC-A1、A549中的miR-186-5p表达量明显降低。为研究miR-186-5p在肺腺癌细胞中的功能,利用GV369-miR-186-5p表达载体,实现了在A549细胞中的过表达。基因转染结合Transwell侵袭结果显示,与对照质粒转染的A549细胞相比,过表达miR-186-5p的A549细胞的体外侵袭能力明显下降。Western印迹检测细胞中EMT相关标志物揭示,GV369-miR-186-5p转染的A549细胞中的上皮-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达明显上调,而神经-钙黏着蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达明显下调。同时,GV369-miR-186-5p转染引起其靶基因——垂体肿瘤转化基因1(pituitary tumor-transforming gene 1,PTTG1)编码蛋白在A549细胞中明显降低。重要的是,过表达miR-186-5p与敲减PTTG1均可导致上皮-钙黏着蛋白表达上调,而神经-钙黏着蛋白和波形蛋白下调;而miR-186-5p和PTTG1表达载体共转染后,3种EMT相关标志物在A549的表达与对照细胞的表达无明显差异,提示过表达PTTG1可抵消miR-186-5p对EMT相关标志物表达的影响。综上所述,miR-186-5p可通过靶向调控PTTG1抑制EMT的发生,进而抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。 展开更多
关键词 肺腺癌 miR-186-5p 侵袭 转移 上皮-间质转化
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