目的探讨重组2/1型腺相关病毒载体(rAAV2/1)介导人源性神经肽Y(hNPY)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因(rAAV2/1-hNPY-EGFP)转染红藻氨酸(KA)致痫老年大鼠脑组织的有效途径。方法将造模成功的36只健康老年雄性Wistar大鼠,随机分为二组:海...目的探讨重组2/1型腺相关病毒载体(rAAV2/1)介导人源性神经肽Y(hNPY)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因(rAAV2/1-hNPY-EGFP)转染红藻氨酸(KA)致痫老年大鼠脑组织的有效途径。方法将造模成功的36只健康老年雄性Wistar大鼠,随机分为二组:海马注射组和脑室注射组。应用立体定向仪将rAAV2/1-hNPY-EGFP基因注射至颅内相应的靶区,于注射后2、3、4 w分别取材,脑组织冰冻切片,荧光显微镜检测rAAV2/1-hNPY-EGFP表达情况。结果注射后2 w两组均未见有rAAV2/1-hNPY-EGFP阳性细胞表达;注射后4 w rAAV2/1-hNPY-EGFP阳性细胞的表达体积和灰度值达到最大,脑室注射组要优于海马注射组。结论脑室注射的方法可以有效地将rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染到癫痫脑组织中,为转基因治疗癫痫病提供了新的转染途径。展开更多
文摘目的探讨重组2/1型腺相关病毒载体(rAAV2/1)介导人源性神经肽Y(hNPY)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因(rAAV2/1-hNPY-EGFP)转染红藻氨酸(KA)致痫老年大鼠脑组织的有效途径。方法将造模成功的36只健康老年雄性Wistar大鼠,随机分为二组:海马注射组和脑室注射组。应用立体定向仪将rAAV2/1-hNPY-EGFP基因注射至颅内相应的靶区,于注射后2、3、4 w分别取材,脑组织冰冻切片,荧光显微镜检测rAAV2/1-hNPY-EGFP表达情况。结果注射后2 w两组均未见有rAAV2/1-hNPY-EGFP阳性细胞表达;注射后4 w rAAV2/1-hNPY-EGFP阳性细胞的表达体积和灰度值达到最大,脑室注射组要优于海马注射组。结论脑室注射的方法可以有效地将rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染到癫痫脑组织中,为转基因治疗癫痫病提供了新的转染途径。