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RBM8A基因对子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、迁移和凋亡的作用及其机制 被引量:3
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作者 谭冬梅 张静静 +5 位作者 师一民 韩赛 耿炜 孙建一 王雅玉 张秀荣 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第1期27-32,共6页
目的探讨沉默RBM8A基因表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞生物学行为的影响及其可能机制。方法设计RBM8A基因靶向的发夹状shRNA,筛选出最佳shRNA沉默片段,构建携带有目的基因的重组慢病毒干扰载体并感染HEC-1A细胞,通过嘌呤霉素筛选出稳定敲低... 目的探讨沉默RBM8A基因表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞生物学行为的影响及其可能机制。方法设计RBM8A基因靶向的发夹状shRNA,筛选出最佳shRNA沉默片段,构建携带有目的基因的重组慢病毒干扰载体并感染HEC-1A细胞,通过嘌呤霉素筛选出稳定敲低RBM8A基因的细胞作为实验组(shRBM8A),同时设计无意义序列的shRNA作为对照组(shControl)。CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞计数法检测细胞凋亡,Western blot法分析凋亡相关蛋白、上皮间质转化(EMT)信号转导通路相关蛋白的表达。结果与shControl组比较,敲低RBM8A后HEC-1A细胞增殖减慢,凋亡率增加,且迁移与侵袭能力受到明显抑制(P<0.05),凋亡相关蛋白cleaved-caspase 9和cleaved-caspase 3表达增加,EMT相关蛋白E-cadherin表达升高,Vimentin表达降低。结论沉默RBM8A基因可抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡,抑制EMT信号转导通路可能是其作用机制。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 RBM8A 增殖 迁移 凋亡 上皮间质转化
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补肾益髓方及其拆方对自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中BDNF/TrkB的影响 被引量:6
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作者 师一民 王永强 +8 位作者 安辰 赵晖 李君玲 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 李明 王蕾 《世界中医药》 CAS 2017年第9期2155-2159,共5页
目的:观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui,BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen,BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue,HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)小鼠脑和脊髓中脑源性神经营养因子(Brain-derived... 目的:观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui,BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen,BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue,HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)小鼠脑和脊髓中脑源性神经营养因子(Brain-derived Neurotrophic Factor,BDNF)与受体Trk B的影响。方法:将EAE造模小鼠于当天和第7天背部皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein,MOG)35-55抗原,并在免疫当天和第2天后腹腔注射百日咳毒素(Pertussis toxin,PTX)。每日对小鼠进行不同药物的灌胃,并于造模第20和40天分别取脑和脊髓,采用实时荧光定量RTPCR(qRT-PCR)与Western Blot法检测BDNF和Trk B的表达。结果:BSYS及其拆方BS方与HTHX方均可明显上调EAE小鼠脑和脊髓BDNF和Trk B mRNA与蛋白的表达,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。BSYS方作用优于其BS与HTHX方,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BSYS及其拆方促进轴突修复的作用可能与增强BDNF/Trk B表达有关,BSYS全方更有显著趋势。 展开更多
关键词 补肾益髓方 拆方 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 脑源性神经营养因子/Trk B
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补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中β-APP和MAP-2表达的影响 被引量:7
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作者 安辰 王永强 +7 位作者 师一民 赵晖 李明 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 王蕾 《中国中医急症》 2016年第4期565-568,587,共5页
目的观察补肾益髓(BSYS)方及其拆方补肾(BS)和化痰活血(HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脑和脊髓中β-淀粉样前体蛋白(β-APP)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的作用。方法 56只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC)、模型组(MO... 目的观察补肾益髓(BSYS)方及其拆方补肾(BS)和化痰活血(HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脑和脊髓中β-淀粉样前体蛋白(β-APP)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的作用。方法 56只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC)、模型组(MO)、醋酸泼尼松组(PA)、梓醇组(CA)、补肾益髓组(BSYS)、补肾组(BS)和化痰活血组(HTHX),每组8只。对照药给予PA(6 mg/kg),CA(40 mg/kg);BSYS、BS和HTHX组分别以3.02 g,1.44 g和1.57 g生药/kg给药。NC及MO组以等量蒸馏水代替。每日1次,连续灌胃40 d。小鼠发病第25日(急性期)和第40日(缓解期)取脑和脊髓,采用免疫荧光(IF)法检测β-APP表达,免疫组化(IHC)法检测MAP-2的表达。结果发病第25日和第40日,MO组小鼠脑β-APP表达较NC组显著上调(P<0.001),而MAP-2表达则较NC组明显下调(P<0.01或P<0.001),与MO组比较,各治疗组(PA、CA、BSYS、BS和HTHX组)均可明显下调β-APP蛋白表达(P<0.05或P<0.01),上调MAP-2表达(P<0.05或P<0.01)。其中发病第25日小鼠脑β-APP表达PA组效果优于CA、BS及HTHX组(P<0.05)。各组小鼠脊髓内β-APP、MAP-2表达变化趋势与脑相似。结论 BSYS方及其拆方均能减轻轴突损伤及促进其修复,尤以BSYS全方更为显著。 展开更多
关键词 补肾益髓方及其拆方 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 Β-APP MAP-2
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补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin表达的影响 被引量:5
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作者 师一民 王永强 +7 位作者 安辰 赵晖 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 李明 王蕾 《世界中医药》 CAS 2016年第9期1825-1830,共6页
目的:观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui,BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen,BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue,HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin的作用。方法:... 目的:观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui,BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen,BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue,HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin的作用。方法:C57BL/6小鼠雌性随机分为正常对照(NC)、模型(MO)、醋酸泼尼松(PA)、梓醇(CA)、BSYS、BS和HTHX组。造模当天与造模后第7天于小鼠背部两侧皮下注射抗原,即50μg髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35-55、完全弗氏佐剂(CFA)与结核分支杆菌(TB)混合,并在免疫当天和2 d后腹腔注射500 ng的百日咳毒素(PTX)。每天对小鼠进行灌胃,观察其体重及神经功能评分,并于造模第20 d和第40 d分别取脑和脊髓进行病理检测。采用免疫组化法检测p-Tau和beta-tubulin的表达。结果:与MO组比较,BSYS、BS和HTHX组体重与神经功能评分均出现明显上升,HE染色可观察到炎细胞显著减少,核固缩减轻,同时,BSYS、BS和HTHX方均可明显下调p-Tau表达(P<0.05,P<0.01),上调beta-tubulin蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:BSYS方及其拆方BS和HTHX均对EAE小鼠有神经保护作用,表现在减少体重丢失,降低神经功能评分,减轻炎炎性细胞浸润,减轻轴突损伤及促进其修复,尤以BSYS全方更为显著。 展开更多
关键词 补肾益髓方及其拆方 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 P-Tau BETA-TUBULIN
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补肾益髓方促进实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠髓鞘再生的作用 被引量:7
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作者 王永强 师一民 +7 位作者 安辰 赵晖 李明 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 王蕾 《环球中医药》 CAS 2016年第12期1443-1449,共7页
目的观察补肾益髓方促进实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠髓鞘再生的作用。方法 80只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照、模型、醋酸泼尼松及补肾益髓方组。以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myeli... 目的观察补肾益髓方促进实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠髓鞘再生的作用。方法 80只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照、模型、醋酸泼尼松及补肾益髓方组。以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendroglia glycoprotein,MOG)35-55诱导小鼠EAE模型。治疗组小鼠每天给予相应药物灌胃治疗,共40天,醋酸泼尼松为阳性对照药物。每天观察动物的一般情况,记录小鼠神经功能评分,统计小鼠的发病率、潜伏期、病程和疾病负荷等。取小鼠脑和脊髓经固蓝染色观察其髓鞘变化,免疫组化法测定髓鞘再生相关蛋白硫酸软骨素蛋白多糖2胶质细胞和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表达。结果补肾益髓方能够延长小鼠发病潜伏期、缩短EAE病程、降低小鼠疾病负荷(P<0.05),减少小鼠脑和脊髓内炎细胞浸润和髓鞘脱失;本方还可促进NG2和MBP蛋白的表达(P<0.01)。结论补肾益髓方对EAE小鼠有神经保护作用,并能减轻髓鞘损伤和促进髓鞘修复。 展开更多
关键词 补肾益髓方 实验性自身免疫性脑脊髓炎 髓鞘再生
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小儿喘宝对哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液Th1/Th2平衡的影响 被引量:3
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作者 陈诚 李明 +2 位作者 周耀庭 刘仁慧 师一民 《世界中医药》 CAS 2016年第2期301-304,共4页
目的:研究小儿喘宝对哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中Th1/Th2平衡的影响,探索其治疗哮喘的作用机制。方法:采用卵蛋白(OVA)致敏、激发的方式制作大鼠慢性哮喘模型,以地塞米松为对照药。通过对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞涂片中嗜酸... 目的:研究小儿喘宝对哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中Th1/Th2平衡的影响,探索其治疗哮喘的作用机制。方法:采用卵蛋白(OVA)致敏、激发的方式制作大鼠慢性哮喘模型,以地塞米松为对照药。通过对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞涂片中嗜酸性粒细胞(EOS)的计数,血清及肺泡灌洗液(BALF)中IFN-γ、IL-4含量以及IFN-γ/IL-4比值的测定,探索小儿喘宝治疗哮喘大鼠的作用机制。结果:小儿喘宝可减轻大鼠的哮喘症状,减少BALF中EOS的数量,降低血清及BALF中IL-4的含量,升高血清及BALF中IFN-γ的含量,升高IFN-γ/IL-4的比值。结论:小儿喘宝能升高哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中IFN-γ/IL-4的比值,从而纠正失衡的Th1/Th2,这可能是小儿喘宝调节哮喘的作用机制之一。 展开更多
关键词 小儿喘宝 哮喘 TH1/TH2
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神经营养因子在多发性硬化神经再生修复中的作用研究进展 被引量:2
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作者 师一民 李明 王蕾 《医学综述》 2016年第24期4785-4788,共4页
神经营养因子(NTFs)是指一类能促进神经细胞存活、生长、分化的蛋白质,在胚胎时期即可调控人体的生长发育。在中枢神经系统中,NTFs不仅可减轻神经变性,还具有刺激轴突生长,促进再生的功能。多发性硬化(MS)是一种以髓鞘脱失和轴突损伤等... 神经营养因子(NTFs)是指一类能促进神经细胞存活、生长、分化的蛋白质,在胚胎时期即可调控人体的生长发育。在中枢神经系统中,NTFs不仅可减轻神经变性,还具有刺激轴突生长,促进再生的功能。多发性硬化(MS)是一种以髓鞘脱失和轴突损伤等为病理学特征的自身免疫介导的神经退行性病变。NTFs对MS疾病有神经再生和修复作用,为NTFs应用到MS患者的治疗提供了依据。 展开更多
关键词 多发性硬化 神经营养因子 神经再生修复
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糖肾宁对高糖诱导的足细胞损伤模型Rho/ROCK通路的影响 被引量:4
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作者 徐嘉一 高彦彬 +4 位作者 邹大威 王晓磊 王涛 师一民 吴冰杰 《世界中医药》 CAS 2019年第12期3164-3168,共5页
目的:基于Rho/ROCK信号通路研究中药糖肾宁对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。方法:高糖培养足细胞,以不同药物分组干预足细胞24 h,用罗丹明染色的鬼笔环肽法检测足细胞骨架,细胞免疫荧光检测足细胞标志蛋白Nephrin,Western Blotting检测... 目的:基于Rho/ROCK信号通路研究中药糖肾宁对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。方法:高糖培养足细胞,以不同药物分组干预足细胞24 h,用罗丹明染色的鬼笔环肽法检测足细胞骨架,细胞免疫荧光检测足细胞标志蛋白Nephrin,Western Blotting检测RhoA、ROCK1、Nephrin蛋白的表达。比较不同药物或药物浓度对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。结果:糖肾宁可改善足细胞骨架结构,下调高糖诱导的足细胞损伤模型中异常升高的RhoA和ROCK1蛋白表达,上调Nephrin表达。结论:中药糖肾宁可抑制高糖诱导的足细胞损伤模型RhoA/ROCK1信号通路,减轻足细胞骨架重构,改善足细胞损伤。 展开更多
关键词 中药 糖肾宁 高糖 足细胞损伤 Rho/ROCK通路 实验研究 足细胞标志蛋白 糖尿病肾病
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益气固肾通络方治疗早期糖尿病肾脏病临床观察及机制研究 被引量:16
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作者 吴冰杰 孟元 +5 位作者 张涛静 李益萌 王涛 师一民 徐嘉一 高彦彬 《北京中医药》 2020年第5期431-435,共5页
目的客观评价益气固肾通络方治疗气阴两虚、肾络瘀滞型早期糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)临床疗效及其安全性。方法纳入符合标准的患者90例,随机分为治疗组、对照组各45例,均予西药常规治疗,且治疗组加服益气固肾通络方;治... 目的客观评价益气固肾通络方治疗气阴两虚、肾络瘀滞型早期糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)临床疗效及其安全性。方法纳入符合标准的患者90例,随机分为治疗组、对照组各45例,均予西药常规治疗,且治疗组加服益气固肾通络方;治疗12周后,对患者血清肌酐(SCr)、肾小球滤过率估算值(eGFR)、尿白蛋白排泄率(UAER)、尿白蛋白肌酐比值(UACR)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、转化生长因子β1(TGF-β1)、中医证候积分和有效率进行评价。结果治疗组总有效率为93.33%,对照组为73.33%,治疗组优于对照组(P<0.05)。2组治疗前后SCr、eGFR虽有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗组降低患者UAER、UACR、中医证候积分改变均明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者血清SOD水平明显高于对照组(P<0.05);血清MDA、hs-CRP、TGF-β1水平明显低于对照组(P<0.05)。试验过程中未出现明显不良反应。结论益气固肾通络方可明显改善气阴两虚、肾络瘀滞型早期DKD患者的临床症状,降低尿蛋白水平,改善肾脏功能,其作用机制可能与改善机体的氧化应激状态和微炎症反应状态相关。 展开更多
关键词 早期糖尿病肾脏病 气阴两虚 肾络瘀滞 益气固肾通络方
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补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的神经保护作用及NF200和CSPGs表达的影响 被引量:8
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作者 安辰 王永强 +7 位作者 师一民 赵晖 李明 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 王蕾 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1215-1220,共6页
目的:观察补肾益髓(BSYS)方及其拆方补肾(BS)和化痰活血(HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的神经保护作用及脑和脊髓神经丝蛋白(NF)200和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)表达的影响。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模... 目的:观察补肾益髓(BSYS)方及其拆方补肾(BS)和化痰活血(HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的神经保护作用及脑和脊髓神经丝蛋白(NF)200和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)表达的影响。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松组、梓醇组、BSYS组、BS组和HTHX组。各造模小鼠以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35-55诱导EAE模型。各治疗组小鼠每日予相应药物灌胃,共40d。醋酸泼尼松和梓醇为阳性对照药物。每日观察小鼠神经功能评分。取小鼠脑和脊髓,HE染色观察其病理变化,透射电镜观察轴突和髓鞘变化,免疫组化法测定NF200和CSPGs蛋白表达。结果:发病第25-40天,BSYS方和BS方明显降低小鼠神经功能评分(P<0.05,P<0.01);第37-40天,BSYS方优于BS方(P<0.05)。BSYS方及BS方可明显减轻小鼠脑和脊髓内炎细胞浸润评分(P<0.05,P<0.01);降低髓鞘/轴突面积比值(P<0.05,P<0.01),明显减轻髓鞘及轴突损伤;升高NF200蛋白表达(P<0.05,P<0.01);下调CSPGs表达(P<0.05,P<0.01)。HTHX方只升高NF200蛋白表达(P<0.05)。结论:补肾益髓方及其拆方补肾方具有明显的神经保护作用。并通过上调NF200及下调CSPGs促进轴突修复及再生,化痰活血方的作用不明显。 展开更多
关键词 补肾益髓方 拆方 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 神经丝蛋白200 硫酸软骨素蛋白多糖
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芪卫颗粒含药血清调控SIRT1-NF-κB p65通路减轻高糖环境下肾小球足细胞转分化的机制 被引量:7
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作者 王晓磊 高彦彬 +3 位作者 田年秀 王涛 师一民 何佳鑫 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期4528-4531,共4页
目的:观察芪卫颗粒(QWKL)含药血清对高糖环境下肾小球足细胞转分化及SIRT1-NF-κB p65通路的影响,探讨其保护足细胞损伤的作用机制。方法:采用QWKL含药血清干预体外培养的小鼠肾小球足细胞株,干预48h后,采用RT-PCR和Western Blot检测足... 目的:观察芪卫颗粒(QWKL)含药血清对高糖环境下肾小球足细胞转分化及SIRT1-NF-κB p65通路的影响,探讨其保护足细胞损伤的作用机制。方法:采用QWKL含药血清干预体外培养的小鼠肾小球足细胞株,干预48h后,采用RT-PCR和Western Blot检测足细胞转分化标志物(nephrin和α-SMA)及SIRT1-NF-κB p65通路相关分子(SIRT1和乙酰化P)的表达水平。结果:QWKL含药血清和SIRT1激活剂SRT1720能够通过增加SIRT1水平和降低NF-κB p65乙酰化水平抑制足细胞转分化(P<0.05),而抑制剂EX527可以阻断QWKL含药血清的作用(P<0.05)。另外,在高糖环境下,NF-κB p65通路抑制剂PDTC抑制了足细胞转分化(P<0.05)。结论:芪卫颗粒含药血清能够减轻高糖环境下足细胞转分化,其部分作用机制是通过调控SIRT1-NF-κB p65通路实现的。 展开更多
关键词 芪卫颗粒 足细胞 转分化 SIRT1-NF-κB p65通路
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芪卫颗粒含药血清通过Caspase12途径减轻高糖环境下肾足细胞损伤的机制研究 被引量:13
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作者 田年秀 王晓磊 +2 位作者 王涛 师一民 高彦彬 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1858-1862,共5页
目的:观察芪卫颗粒(QWG)含药血清对高糖环境下肾足细胞Caspase12凋亡途径的影响,探讨其保护足细胞损伤的作用机制。方法:将体外培养的条件永生系小鼠足细胞分为正常组,甘露醇组,模型组,QWG高、中、低浓度组。干预24h后,罗丹明-鬼笔环肽... 目的:观察芪卫颗粒(QWG)含药血清对高糖环境下肾足细胞Caspase12凋亡途径的影响,探讨其保护足细胞损伤的作用机制。方法:将体外培养的条件永生系小鼠足细胞分为正常组,甘露醇组,模型组,QWG高、中、低浓度组。干预24h后,罗丹明-鬼笔环肽染色观察足细胞骨架结构;CCK8法、Annexin V-FITC/PI双染色法检测高糖环境下足细胞活力及凋亡情况;免疫细胞化学检测Caspase12及GRP78蛋白表达变化,Western blot检测足细胞标志蛋白Nephrin水平。结果:QWG含药血清能够增加高糖环境下足细胞活力(P<0.05,P<0.01),减少细胞凋亡,改善足细胞骨架结构,增加Nephrin表达(P<0.05),同时降低高糖环境下足细胞内质网应激GRP78及Caspase12蛋白水平(P<0.05,P<0.01)。结论:芪卫颗粒含药血清能够保护高糖环境下足细胞损伤,与内质网应激介导的Caspase12凋亡途径相关。 展开更多
关键词 芪卫颗粒 糖尿病肾病 内质网应激 Caspase12
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