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肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)的研制和应用 被引量：26
1
作者 干小仙 施晓华 +5 位作者 王越 王芃芃 沈慧英 朱明东 汤益 张素娥 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期988-990,共3页
目的开发研制简易、快速、经济、准确的肺吸虫病诊断试剂盒。方法以肺吸虫成虫可溶性蛋白为检测用抗原,以胶体金标记羊抗人IgG为探针,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中肺吸虫特异性IgG抗体;用深圳康百得生物技术有限公司提供的肺... 目的开发研制简易、快速、经济、准确的肺吸虫病诊断试剂盒。方法以肺吸虫成虫可溶性蛋白为检测用抗原,以胶体金标记羊抗人IgG为探针,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中肺吸虫特异性IgG抗体;用深圳康百得生物技术有限公司提供的肺吸虫抗体ELISA检测试剂盒作比较。结果用本试剂盒检测90人份肺吸虫病人血清和100人份健康人血清,其敏感性为98.9%(89/90),特异性为100%(100/100),Youden’s指数为0.989。用该试剂盒分别检测25人份血吸虫病和华支睾吸虫病患者血清,交叉反应率为24%(6/25)和4%(1/25);与姜片虫、囊虫、丝虫、肺结核病人血清均未见交叉反应。ELISA检测结果比较,符合率为93.5%,无显著性差异(χ2=0.7949,P>0.05)。结论肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)敏感性高、特异性强,可与ELISA相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,不需特殊仪器设备,非常适合临床检验和现场查病。 展开更多
关键词 肺吸虫病 抗体 金标免疫渗滤法 免疫诊断
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日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白重组抗原的免疫保护性研究 被引量：3
2
作者 干小仙 曾肖芃 +4 位作者 王越 丁建祖 沈慧英 沈丽英 樊晋江 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期97-99,105,共4页
目的探讨日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白(SVLBP)重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原,以镍-次氮基三乙酸琼脂糖树脂(Ni-NTA)亲和层析法纯化制备S... 目的探讨日本血吸虫极低密度脂蛋白结合蛋白(SVLBP)重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原,以镍-次氮基三乙酸琼脂糖树脂(Ni-NTA)亲和层析法纯化制备SVLBP重组抗原;将纯化的重组抗原加福氏佐剂经皮下免疫C57BL/6小鼠,每隔2周免疫1次,在第3次免疫后10d,经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴35±1条,感染后45d剖杀,计数检获虫数和每克肝虫卵数(LEPG)。小鼠在免疫前和攻击感染后分别采眶窦血,用ELISA测定特异性IgG及其亚群抗体水平。结果相对于佐剂对照组,免疫组小鼠的减虫率为33.4%,减卵率为47.6%;免疫后小鼠产生高水平的特异性IgG(>1:6400);抗体亚类检测结果显示,免疫组小鼠IgG2a、IgG2b、IgG1明显高于免疫前和佐剂对照组。结论日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原能诱导小鼠产生一定的保护性免疫,是潜在的疫苗候选抗原分子。 展开更多
关键词 极低密度脂蛋白 重组抗原 结合蛋白 保护性研究 C57BL/6小鼠 日本血吸虫尾蚴 ELISA测定 次氮基三乙酸 特异性IgG 免疫保护性 亲和层析法 IGG2A IgG2b 保护性免疫 潜在价值 候选疫苗 半乳糖苷 皮下免疫 福氏佐剂 攻击感染
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金标法检测广州管圆线虫特异性IgG抗体的研究 被引量：7
3
作者 干小仙 王越 +2 位作者 杨发柱 张莉莉 Praphathip Eamsobhana 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期345-347,共3页
目的探索简易、快速的金标免疫渗滤法检测广州管圆线虫特异性抗体的诊断价值。方法以广州管圆线虫成虫可溶性抗原点样于固相硝酸纤维素膜上,以胶体金-proteinA为标记物,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中广州管圆线虫特异性IgG抗... 目的探索简易、快速的金标免疫渗滤法检测广州管圆线虫特异性抗体的诊断价值。方法以广州管圆线虫成虫可溶性抗原点样于固相硝酸纤维素膜上,以胶体金-proteinA为标记物,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中广州管圆线虫特异性IgG抗体。结果检测21人份广州管圆线虫病人血清,检出阳性19份,敏感性为90.5%(19/21);100人份健康人群血清2份阳性,假阳性率为2%(2/100);与旋毛虫病人、血吸虫病人血清交叉反应率分别为26.7%(8/30)、3.3%(1/30),未发现与肺吸虫、囊虫、华支睾吸虫、肺结核病人血清有交叉反应。结论金标免疫渗滤法快速检测血清中广州管圆线虫特异性IgG不仅操作简便、快速,结果判读容易,不需特殊仪器设备,而且敏感性高,有较好的辅助诊断价值,与旋毛虫病人血清存在交叉反应。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 抗体 金标免疫渗滤法
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金标渗滤法快速检测血吸虫循环抗原的现场应用研究 被引量：9
4
作者 干小仙 沈丽英 +1 位作者 丁建祖 沈慧英 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期19-20,共2页
将抗重组蛋白SVLBP-IgG用于DIGFA检测2221例血清中血吸虫循环抗原，其中急性血吸虫病人血清70份，慢性血吸虫病人血清307份，循环抗原检出率分别为100％和68．4％。非流行区健康人血清200份，未见阳性反应。除肺吸虫外，与其它寄生虫成... 将抗重组蛋白SVLBP-IgG用于DIGFA检测2221例血清中血吸虫循环抗原，其中急性血吸虫病人血清70份，慢性血吸虫病人血清307份，循环抗原检出率分别为100％和68．4％。非流行区健康人血清200份，未见阳性反应。除肺吸虫外，与其它寄生虫成非寄生虫感染病人血清无明显交叉反应。用DIGFA单盲法检测2批血清，结果显示对急性血吸虫病人的敏感性均为100％；对慢性血吸虫病人的敏感性分别为69．4％和68．9％，非流行区体检人群血清的阴性率为99％和98．9％。检测血吸虫病流行区人群血清508份，阳性检出率为20．9％（106／508）；粪检阳性65例，与粪检符合率为70．8％。上述结果提示，该法用于植测循环抗原具有较高的敏感性和特异性，可用于现场查病和流行病学调查。 展开更多
关键词 血吸虫病 金标渗滤法 循环抗原 快速检测
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重组日本血吸虫极低密度脂结合蛋白的抗原性及诊断价值的研究 被引量：4
5
作者 干小仙 王越 +5 位作者 曾肖芃 丁建祖 沈慧英 沈丽英 Paul Brindley 樊晋江 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期695-697,694,共4页
目的　探讨重组日本血吸虫特异性极低密度脂结合蛋白 (SVLBP)的抗原性及其诊断价值。方法　SVLBP基因亚克隆入pQE - 30表达载体 ,克隆菌在IPTG诱导下表达重组蛋白 ;非变性条件下制备克隆菌裂解液 ,用亲和层析法纯化重组蛋白 ;用Westernb... 目的　探讨重组日本血吸虫特异性极低密度脂结合蛋白 (SVLBP)的抗原性及其诊断价值。方法　SVLBP基因亚克隆入pQE - 30表达载体 ,克隆菌在IPTG诱导下表达重组蛋白 ;非变性条件下制备克隆菌裂解液 ,用亲和层析法纯化重组蛋白 ;用Westernblot鉴定其抗原性 ;纯化SVLBP重组蛋白免疫家兔获得抗血清 ;以SVLBP重组蛋白为抗原 ,ELISA法检测血吸虫感染者血清及健康人血清。结果　克隆菌在IPTG诱导下高表达SVLBP重组蛋白 ;该重组蛋白诱导家兔产生单特异抗体 ,抗体滴度为 1∶6 4 0 0 ;SVLBP重组蛋白与血吸虫病人血清有较强的反应 ;以该蛋白为抗原检测 36人份血吸虫感染者血清 ,阳性率为 83.3% ,5 0人份健康人血清 ,假阳性率为 2 % (1/5 0 ) ,10人份肺吸虫病人血清 ,1例阳性 ,交叉反应率为 10 % (1/10 )。结论　SVLBP重组蛋白有较好的抗原性 ,以该重组蛋白为抗原检测日本血吸虫病患者血清中特异性抗体 ,敏感性和特异性均较高 ,具有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 极低密度脂结合蛋白 抗原性 诊断
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金标渗滤法测定囊虫特异性抗体试剂盒的研制 被引量：6
6
作者 干小仙 王越 +2 位作者 郭建勋 朱建奎 施晓华 《热带医学杂志》 CAS 2006年第1期17-19,共3页
目的研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒,并对其诊断价值进行考核评价。方法以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原,以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为探针,采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法(DIGEA)检测试剂盒。检测不... 目的研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒,并对其诊断价值进行考核评价。方法以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原,以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为探针,采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法(DIGEA)检测试剂盒。检测不同病人血清中囊虫特异性IgG抗体,并以囊虫IgG抗体 ELISA检测试剂盒考核其敏感性和特异性。结果用金标试剂盒检测58人份囊虫病患者血清和100人份健康者血清,其敏感性为98．3％(57/58);特异性为100％(100/100)。用该试剂盒检测25人份包虫病患者血清,6份呈弱阳性,交叉反应率为24％;检测30人份血吸虫病人血清,10人份肺吸虫病人血清,10人份肠道线虫病人血清,均无交叉反应。与ELISA试剂盒检测结果比较,符合率为98．7％,无显著性差异(X2=0．0545,P>0．05)。结论金标渗滤法快速检测囊虫特异性抗体试剂盒敏感性高、特异性强,可与ELISA法相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,特别适合临床检测和现场查病。 展开更多
关键词 囊虫病 IgG 金标免疫渗滤法 免疫诊断
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双夹心DIGFA检测血吸虫循环抗原的应用研究 被引量：3
7
作者 干小仙 樊晋江 +3 位作者 丁建祖 沈慧英 叶选怡 沈丽英 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第2期142-143,共2页
以日本血吸虫重组极低密度脂蛋白 ( SVL BP)制备的多抗为捕捉抗体 ,胶体金标记血吸虫虫卵多克隆抗体为覆盖抗体 ,采用双夹心金标免疫渗滤法 ( DIGFA)检测血吸虫病病人血清中循环抗原。结果 70份急性血吸虫病病人血清的阳性率为 10 0 % ,... 以日本血吸虫重组极低密度脂蛋白 ( SVL BP)制备的多抗为捕捉抗体 ,胶体金标记血吸虫虫卵多克隆抗体为覆盖抗体 ,采用双夹心金标免疫渗滤法 ( DIGFA)检测血吸虫病病人血清中循环抗原。结果 70份急性血吸虫病病人血清的阳性率为 10 0 % ,15 9份慢性血吸虫病病人血清的阳性检出率为 6 2 .3% ;12 0份流行区健康人群血清检测均阴性 ;10 0份非流行区健康人群血清 ,2份呈阳性反应 ,假阳性率为 2 %。与肺吸虫病病人血清的交叉反应率为4.0 % ( 1/ 2 5 ) ;与华支睾吸虫病病人血清未见交叉反应。提示该法具有较高的敏感性和特异性 ,判断结果比较客观 ,且简便、快速 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 循环抗原 金标免疫渗滤法
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伊维菌素甲苯咪唑阿苯达唑对猪鞭虫驱虫效果的比较 被引量：1
8
作者 干小仙 丁建祖 +5 位作者 沈慧英 沈丽英 华伟东 翁经强 沈志强 徐步高 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第9期42-42,共1页
伊维菌素（Ｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎ，ＩＶ）是一种广谱高效、低毒的驱虫药物。Ｃａｍｐｂｅｌ，Ｗ．Ｃ．等［２］报道只需很小剂量（０．２０～３．０ｍｇ／ｋｇ）对多种寄生线虫有高效。国内，夏昭华［３］、王正仪［４］等报道该药对人... 伊维菌素（Ｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎ，ＩＶ）是一种广谱高效、低毒的驱虫药物。Ｃａｍｐｂｅｌ，Ｗ．Ｃ．等［２］报道只需很小剂量（０．２０～３．０ｍｇ／ｋｇ）对多种寄生线虫有高效。国内，夏昭华［３］、王正仪［４］等报道该药对人肠道蛔虫、鞭虫和动物钩虫有明显的效... 展开更多
关键词 猪病 鞭虫 伊维菌素 驱虫效果
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三种抗原检测抗幽门螺杆菌抗体的临床意义评价
9
作者 干小仙 丁建祖 +2 位作者 沈慧英 沈丽英 陈一平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期68-70,共3页
目的：寻求敏感性高、特异性强的ＨＰ抗原和简便、可靠的检测ＨＰ抗体的方法，用于诊断ＨＰ感染。方法：分别以ＨＰ尿素酶、全菌破碎物、培养上清液为抗原。采用斑点金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测ＨＰ培养、病理组织学检查、尿素酶... 目的：寻求敏感性高、特异性强的ＨＰ抗原和简便、可靠的检测ＨＰ抗体的方法，用于诊断ＨＰ感染。方法：分别以ＨＰ尿素酶、全菌破碎物、培养上清液为抗原。采用斑点金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测ＨＰ培养、病理组织学检查、尿素酶试验均阳性和均阴性的血清各５０份；胃镜检查各类胃病患者血清２５８份，并以ＥＬＩＳＡ试剂盒做平行检测对照。结果：三种抗原的敏感性分别为１００％、９６％和７６％；５０份阴性血清的阴性符合率分别为９８％、９２％和６４％；２５８份各类胃病的抗体检出率分别为６１％、６２％和５２％；与ＥＬＩＳＡ符合率各为９８８％、９６５％和５８９％。将抗原浓度稀释至００５ｍｇ／ｍｌ时，尿素酶抗原和全菌破碎物抗原的特异性抗体检出率仍达８５％和７５％。培养上清液抗原的敏感性和特异性明显低于前二种抗原（Ｐ＜００１）。尿素酶抗原和全菌破碎抗原的敏感性和特异性明显低于前二种抗原（Ｐ＞００５）。结论：提示该全菌破碎物抗原用于ＤＩＧＦＡ检测ＨＰ抗体、敏感性高、特异性强，且简便、快速、无需任何仪器设备。适合于临床和流行病学调查应用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 抗原 DIGFA法
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弓形虫DNA的提纯及其性质的研究
10
作者 干小仙 沈丽英 +2 位作者 袁行政 丁建祖 宋昌存 《中国兽医科技》 CSCD 1991年第7期37-38,共2页
为建立提取弓形虫DNA的简便方法,我们于1989～1990年进行了本项研究。(一)材料和方法1.虫株:弓形虫(Toxoplasma gondii)ZA株,从浙江病猪体分离所得,由本所传代保存。2.弓形虫滋养体的纯化:取含滋养体的小鼠腹腔液,离心沉淀,经PBS洗涤2～... 为建立提取弓形虫DNA的简便方法,我们于1989～1990年进行了本项研究。(一)材料和方法1.虫株:弓形虫(Toxoplasma gondii)ZA株,从浙江病猪体分离所得,由本所传代保存。2.弓形虫滋养体的纯化:取含滋养体的小鼠腹腔液,离心沉淀,经PBS洗涤2～3次后,加30～40倍体积的0.25％胰蛋白酶磷酸盐缓冲液,37℃水浴中消化20分钟;再用PBS离心洗涤4～5次,以除去胰蛋白酶液。最后在沉淀物中加少量PBS稀释,取少许涂片镜检纯化效果。3.弓形虫DNA的提取:将纯化的弓形虫滋养体悬液稀释至一定密度(OD值约为2.0)后,加入SDS使成2％终末浓度,混匀,置40℃水浴中作用1小时,充分裂解虫体。按Myers,W.T.等(1980) 展开更多
关键词 弓形体 DNA 提纯
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日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原的免疫保护性研究
11
作者 干小仙 曾肖芃 +6 位作者 王越 丁建祖 沈慧英 沈丽英 DonaldPMcManus PaulJBrindley 樊晋江 《浙江省医学科学院学报》 2004年第3期1-5,共5页
目的 探讨日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法 用IPTG诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原，以Ni-NTA亲和层析法纯化制备SVLBP重组抗原；将纯化的重组抗原加佛氏佐剂经皮下免疫C57BL/6小鼠，每... 目的 探讨日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法 用IPTG诱导克隆菌大量表达SVLBP重组抗原，以Ni-NTA亲和层析法纯化制备SVLBP重组抗原；将纯化的重组抗原加佛氏佐剂经皮下免疫C57BL/6小鼠，每隔2周免疫1次，在第3次免疫后10d，经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴35±1条，感染后45d剖杀，计数检获虫数和克肝虫卵数。小鼠在免疫前和攻击感染后分别采眶窦血，用ELISA测定特异性IgC及其亚群抗体水平。结果 相对于佐剂对照组，免疫组小鼠的减虫率为33．39％。减卵率为47．55％；免疫后小鼠产生高水平的特异性IgG(>1：6400)；抗体亚群检测结果显示，免疫组小鼠IgG2a、IgG2b、IgC1明显高于免疫前和佐剂对照组。结论 日本血吸虫皮层蛋白SVLBP重组抗原能诱导小鼠产生一定的保护性免疫，是潜在的疫苗候选抗原分子。 展开更多
关键词 重组抗原 蛋白S 小鼠 日本血吸虫 皮层 免疫后 对照组 免疫保护性 佐剂 虫卵
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刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)不同地理株对钴^(60)丙线敏感性的比较研究
12
作者 干小仙 沈丽英 +2 位作者 袁行政 丁建祖 宋昌存 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第5期17-19,共3页
对中国NT株弓形虫和美国的ME—49株及TS—2株弓形虫的包囊进行了抗丙线耐受性的比较，试验采用上述三株弓形虫包囊为材料，分设0．4、0．5、0．6、0．7、1．OKGy丙线剂量组和不经照射处理的对照组。通过感染小鼠和幼猫的生物学检测，求... 对中国NT株弓形虫和美国的ME—49株及TS—2株弓形虫的包囊进行了抗丙线耐受性的比较，试验采用上述三株弓形虫包囊为材料，分设0．4、0．5、0．6、0．7、1．OKGy丙线剂量组和不经照射处理的对照组。通过感染小鼠和幼猫的生物学检测，求得使包囊丧失感染性的丙线剂量，得出不同株包囊对丙线的敏感性。结果表明：丙线控制中国NT株的最小有效剂量为0．55KGy，控制ME—49株和TS—2株的感染性的最小有效剂量为0．60KGy。两者接近，提示这三个地理株的弓形虫包囊对钴60丙线的敏感性虽略有差异，但其差异并不明显。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 辐照 丙线敏感性 钴60
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曼氏迭宫绦虫成虫和裂头蚴合并感染1例 被引量：9
13
作者 王衡 汤益 +6 位作者 杨洋 徐卫民 王佳 金行一 朱素娟 黄阳梅 干小仙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期40-40,共1页
患者，男，53岁，杭州市郊区居民。2010年7月14日，因发热在当地卫生院就诊，抗感染治疗无效。2010年8月2日入住杭州市某医院，此后反复发热2周余，
关键词 曼氏迭宫绦虫 合并感染 裂头蚴 成虫 反复发热 抗感染治疗 郊区居民 杭州市
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一种新发现的人体寄生虫病徐氏拟裸茎吸虫病的研究进展
14
作者 干小仙 宋昌存 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期81-82,共2页
　　徐氏拟裸茎吸虫(Gymnophalloides seoi Lee,Chai and Hong,1993)(复殖目:拟裸茎科)于1988年首次在韩国一例诊断为急性胰腺炎的妇女中被发现,此后对该虫的形态、生活史、病理等进行大量研究,现将研究进展综述如下.……
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SVLBP重组抗原用于日本血吸虫病免疫诊断的研究 被引量：9
15
作者 王越 干小仙 +4 位作者 曾肖芃 沈慧英 丁建祖 沈丽英 樊晋江 《热带医学杂志》 CAS 2004年第5期518-520,527,共4页
目的研究日本血吸虫极低密度脂结合蛋白重组抗原(reSVLBP)在血吸虫病诊断中的应用价值及现场推广前景。方法以reSVLBP为抗原建立reSVLBP-ELISA,检测血吸虫病人及其它寄生虫感染者血清中特异性抗体,并与常规SEA-ELISA进行平行检测和比较... 目的研究日本血吸虫极低密度脂结合蛋白重组抗原(reSVLBP)在血吸虫病诊断中的应用价值及现场推广前景。方法以reSVLBP为抗原建立reSVLBP-ELISA,检测血吸虫病人及其它寄生虫感染者血清中特异性抗体,并与常规SEA-ELISA进行平行检测和比较。结果reSVLBP抗原和SEA对血吸虫的敏感性分别为90.5%和97.3%(P>0.05),两者对血吸虫的特异性分别为100%和77.0%(P<0.05);reSVLBP与肺吸虫、姜片虫血清未见交叉反应,与华支睾吸虫、蛔虫、鞭虫感染者血清的交叉反应率分别为20.0%、20.0%、10.0%。SEA对肺吸虫和姜片虫病人血清的交叉反应率分别为29.4%和16.7%,与华支睾吸虫、蛔虫、鞭虫感染者血清的交叉反应率分别为26.7%、30.0%、20.0%。结论reSVLBP作为诊断抗原具有很高的特异性,与其它寄生虫的交叉反应少,敏感性与SEA相近,在血吸虫病诊断中具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 日本血吸虫 极低密度脂结合蛋白 SVLBP 重组蛋白 ELISA 诊断
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肺吸虫特异性IgG4快速检测方法的建立与应用 被引量：11
16
作者 马安 施晓华 +1 位作者 王越 干小仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期353-355,共3页
目的创建简易、快速、准确的肺吸虫病免疫诊断方法。方法用卫氏并殖吸虫成虫粗提液为抗原,以胶体金标记抗人IgG4单抗为检测探针,采用自行设计的垂直流渗滤装置,创建快速检测人血清肺吸虫特异性IgG4方法(P-IgG4-DIGFA),平行检测IgG作比... 目的创建简易、快速、准确的肺吸虫病免疫诊断方法。方法用卫氏并殖吸虫成虫粗提液为抗原,以胶体金标记抗人IgG4单抗为检测探针,采用自行设计的垂直流渗滤装置,创建快速检测人血清肺吸虫特异性IgG4方法(P-IgG4-DIGFA),平行检测IgG作比较分析;以经典ELISA为对照,评价其诊断价值,应用P-IgG4-DIGFA检测有效治疗后病人血清,评价其疗效考核价值。结果P-IgG4-DIGFA检测人血清中肺吸虫特异性IgG4的敏感性和特异性分别为95.2%(40/42)、100%(50/50),与血吸虫病患者血清的交叉反应率仅为2%(1/50),未发现与华支睾吸虫病有交叉反应。P-IgG4-DIGFA的敏感性和特异性略高于经典ELISA,差异无统计学意义(χ2=0.25,P>0.05);应用P-IgG4-DIGFA检测有效治疗后3个月、6个月和12个月病人血清特异性IgG4,阴转率分别为0%、16.7%(1/6)和100%。结论金标渗滤法快速检测肺吸虫特异性IgG4,不仅操作简便、快速,而且敏感性高、特异性强,适用于临床检验和现场查病,对治疗后1年病人具有疗效考核价值,有待进一步开发应用。 展开更多
关键词 肺吸虫病 IGG4 金标免疫渗滤法 诊断
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曼氏裂头蚴可溶性抗原DIGFA法快速检测特异性抗体的潜在诊断价值 被引量：12
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作者 王越 叶丽萍 +2 位作者 孙亚维 鲁锋 干小仙 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第4期260-262,共3页
目的探索曼氏裂头蚴可溶性抗原金标免疫渗滤法快速检测曼氏裂头蚴特异性抗体的免疫诊断价值。方法从自然感染的青蛙中分离出曼氏裂头蚴,经口感染小鼠;于感染后第7周剖杀小鼠,收集鼠血清和虫体并计数。以曼氏裂头蚴可溶性抗原(PSA)为探... 目的探索曼氏裂头蚴可溶性抗原金标免疫渗滤法快速检测曼氏裂头蚴特异性抗体的免疫诊断价值。方法从自然感染的青蛙中分离出曼氏裂头蚴,经口感染小鼠;于感染后第7周剖杀小鼠,收集鼠血清和虫体并计数。以曼氏裂头蚴可溶性抗原(PSA)为探针建立PSA-DIGFA,分别检测曼氏裂头蚴感染小鼠、健康小鼠、健康人群及其他寄生虫感染者血清中特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较。结果DIGFA法检测感染小鼠血清中特异性抗体的敏感性为100%(49/49)、特异性为100%(30/30),与ELISA法检测结果相同;不同虫荷数感染鼠间抗体水平差异无显著性(P>0.05),感染鼠与正常鼠之间抗体水平差异有显著性(P<0.01)。PSA-DIGFA检测健康人群血清100人份均为阴性,检测囊虫、包虫、旋毛虫、肺吸虫、华支睾吸虫病病人血清的阳性率分别为42.5%(17/40)、10.0%(2/20)、20.0%(5/25),80.0%(8/10)、8.0%(2/25)。结论用曼氏裂头蚴粗抗原检测感染动物血清中特异性抗体具有较好的敏感性和特异性,但与其他蠕虫感染存在较高的交叉反应。不同虫荷数感染鼠均产生较高水平抗体,组间差异无显著性。DIGFA法与ELISA法检测的敏感性和特异性相同,但前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合寄生虫病的临床检验和流行病学调查。若能进一步纯化检测用抗原,减少与其他蠕虫间的交叉反应,有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 曼氏裂头蚴病 免疫诊断 IgG 斑点金免疫渗滤法(DIGFA)
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曼氏裂头蚴病诊断研究进展 被引量：33
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作者 王越 干小仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期942-944,共3页
关键词 曼氏裂头蚴病 曼氏迭宫绦虫 诊断 中间宿主 局部贴敷 转续宿主 饮用生水 皮下结节
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日本血吸虫不同抗原检测家兔感染及治疗前后IgG/IgM抗体动态 被引量：5
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作者 汤益 王越 +2 位作者 施晓华 徐卫民 干小仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期650-652,共3页
目的探索特异性抗体检测在日本血吸虫病诊断和疗效考核中的潜在应用价值。方法ELISA方法采用可溶性虫卵抗原(SEA)、成虫抗原(AWA)检测人工感染家兔治疗前后血清中特异性IgGI、gM抗体,评价特异性抗体检测的诊断和疗效考核价值。结果用SE... 目的探索特异性抗体检测在日本血吸虫病诊断和疗效考核中的潜在应用价值。方法ELISA方法采用可溶性虫卵抗原(SEA)、成虫抗原(AWA)检测人工感染家兔治疗前后血清中特异性IgGI、gM抗体,评价特异性抗体检测的诊断和疗效考核价值。结果用SEA抗原检测IgM抗体,发现感染后7周不管治疗与否,抗体水平均快速下降。与SEA相比,感染后AWA特异性IgM抗体上升时间早,且治疗后5个月仍为阳性。SEA特异性IgG抗体水平最高,但治疗后5个月仍为阳性。结论采用SEA抗原检测IgG用于血吸虫病诊断效果较好;对早期感染的诊断可以考虑SEA抗原检测IgM抗体作辅助。AWA抗原检测IgM,对急、慢性血吸虫感染均有较好诊断效果。采用这两种抗原检测IgG和IgM,均无考核疗效意义。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗原 抗体 IGG IGM 疗效考核
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金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究 被引量：22
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作者 沈丽英 干小仙 +2 位作者 丁建祖 沈慧英 樊晋江 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期12-14,共3页
目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上，以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体，金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧ... 目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上，以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体，金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧＦＡ。结果　用该法检测了急性血吸病人血清３０ 人份和慢性血吸病人血清３８ 人份，其阳性检出率分别为１００ ％ 和５２－６ ％ ；１２０ 人份流行区健康人血清全为阴性；１００ 人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为１００％ ，与１０ 例华支睾病人血清无交叉反应；１５ 例肺吸虫病人血清有１ 例阳性，交叉反应率为６－７ ％ ；与双夹心ＥＬＩＳＡ的符合率为９７－４％ ，经χ２ 检验表明两法检测效果无显著性差异。结论　用ＤＩＧＦＡ检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备，有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 血吸虫病 循环抗原 金标免疫渗滤法
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