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KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因联合检测在结直肠癌中的表达
1
作者
杜劲
齐妍
+4 位作者
曾妍
邱瑾
王吉林
庄斯慧
黄政华
《分子诊断与治疗杂志》
2024年第2期216-219,224,共5页
目的探究KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变与结直肠癌(CRC)患者临床病理特征存在的关系,并探讨联合检测对CRC患者预后的预测价值。方法选取湛江中心人民医院病理科收治的CRC患者200例为研究对象,收集其CRC手术切除或穿刺活检标...
目的探究KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变与结直肠癌(CRC)患者临床病理特征存在的关系,并探讨联合检测对CRC患者预后的预测价值。方法选取湛江中心人民医院病理科收治的CRC患者200例为研究对象,收集其CRC手术切除或穿刺活检标本提取DNA,采用人类癌症多基因突变联合检测试剂盒检测KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变状态,分析其与CRC患者临床病理特征的关系,分析KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变状态单一检测及联合检测对CRC复发的预测价值;采用Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank法比较两组患者的生存率,Cox回归综合生存分析影响患者预后的危险因素。结果KRAS、BRAF基因突变与pTNM分期有关(χ^(2)=6.714、5.451,P<0.05);KRAS与BRAF基因突变存在相关性(r=-0.157,P=0.027),KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA与NTRK1单一基因检测与多基因联合检测对预测CRC复发均具有一定价值,其中KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA与NTRK1基因联合检测对CRC复发情况的诊断准确性最高(AUC=0.797),但KRAS、BRAF、PIK3CA与NTRK1联合检测灵敏度最高(0.861),PIK3CA单一检测特异度最高(0.969),KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因未突变的CRC患者第3、5年的总生存率与无瘤生存率均高于基因突变患者,Cox回归综合生存分析结果显示年龄>60岁,KRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变为影响CRC患者总生存时间的独立预测因子(P<0.05)。结论CRC患者KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变无明显相关性,但各基因单一或联合检测对CRC复发情况具有一定价值,可作为患者预后评估的重要指标。
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关键词
结直肠癌
临床病理特征
分子标志物
联合检测
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职称材料
脾多肽改善重症登革热患者免疫功能的观察
被引量:
6
2
作者
黄桢
吴英松
+2 位作者
庄斯慧
潘竞锵
刘天才
《湖北大学学报(自然科学版)》
CAS
2015年第4期330-333,共4页
观察登革热患者外周血T淋巴细胞免疫及体液免疫功能变化的特点,并探讨脾多肽调节剂治疗重症登革热患者的临床疗效.用流式细胞仪检测T淋巴细胞,用免疫比浊法检测体液免疫功能.重症患者、普通患者、正常组进行组间两两比较,对重症患者随...
观察登革热患者外周血T淋巴细胞免疫及体液免疫功能变化的特点,并探讨脾多肽调节剂治疗重症登革热患者的临床疗效.用流式细胞仪检测T淋巴细胞,用免疫比浊法检测体液免疫功能.重症患者、普通患者、正常组进行组间两两比较,对重症患者随机分为治疗组和对照组两组,治疗组用普通对症治疗加脾多肽免疫调节剂,对照组用普通对症治疗,比较治疗前后的免疫功能的变化.重症患者、普通感染患者和正常人T淋巴细胞免疫和体液免疫比较:Ig G、Ig A高于正常人,且病情越严重越高,Ig M、CD4+、CD4+/CD8+都低于正常人,病情越严重越低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+无统计差异(P>0.05);重症患者40例随机分为治疗组和对照组,治疗组为普通对症治疗加脾多肽,对照组用普通对症治疗,两组治疗前免疫各指标无差异,两种治疗前后Ig G、Ig M、CD4+、CD4+/CD8分别有差异(P<0.05).治疗组和对照组治疗后免疫指标比较,治疗组Ig G、CD4+、CD4+/CD8明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).登革热患者病情严重与免疫系统紊乱相关,重症登革热患者通过脾多肽治疗,可以提高、改善患者免疫指标,有利于恢复免疫功能.
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关键词
登革热患者
细胞免疫
体液免疫
脾多肽
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职称材料
非受体型酪氨酸激酶JAK1基因真核表达质粒的构建与真核表达
3
作者
庄斯慧
郭欣欣
+2 位作者
梁君瑜
吴英松
刘天才
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期18-22,共5页
[目的]构建非受体型酪氨酸激酶JAK1(nonreceptor tyrosine kinase-JAK1)基因真核表达质粒pcDNA4.0-HisJAK1,并转染293T细胞进行真核表达。[方法]从Hela细胞中提取总的RNA,通过RT-PCR获得JAK1基因全长c DNA序列,并将其克隆至真核表达载体...
[目的]构建非受体型酪氨酸激酶JAK1(nonreceptor tyrosine kinase-JAK1)基因真核表达质粒pcDNA4.0-HisJAK1,并转染293T细胞进行真核表达。[方法]从Hela细胞中提取总的RNA,通过RT-PCR获得JAK1基因全长c DNA序列,并将其克隆至真核表达载体pcDNA4.0-His中,构建重组质粒pcDNA4.0-His-JAK1。将真核重组表达质粒转染293T细胞,转染48 h后,在荧光显微镜下观察转染情况。免疫印迹法检测JAK1蛋白转染24 h、36 h与48 h在293T细胞中的表达。[结果]经双酶切与质粒PCR鉴定质粒克隆正确,测序鉴定序列中第2199位碱基A突变为G,为同义突变,不影响氨基酸序列。转染293T细胞48 h后,间接免疫荧光实验显示在293T细胞中检测到绿色荧光。免疫印迹检测可见大小约为133 kDa的目的蛋白。[结论]成功获得JAK1基因全长序列,并成功构建pcDNA4.0-HisJAK1真核重组表达质粒,并在真核细胞293T中获得有效表达,为进一步研究JAK1蛋白质相互作用奠定了基础。
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关键词
非受体型酪氨酸激酶
JAK1基因
293T细胞
真核表达
原文传递
人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定
被引量:
1
4
作者
张佳凤
郝文波
+3 位作者
熊玉锋
徐岚
庄斯慧
罗树红
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期42-47,共6页
[目的]构建含人酪氨酸蛋白激酶Lyn基因的载体并进行真核表达、纯化和研究其对细胞增殖的影响。[方法]提取人Hela细胞总RNA,用RT-PCR方法获得Lyn基因并克隆至pcDNA3.1(-)载体。经双酶切、PCR和测序方法鉴定后,将重组质粒瞬时转染HEK 293...
[目的]构建含人酪氨酸蛋白激酶Lyn基因的载体并进行真核表达、纯化和研究其对细胞增殖的影响。[方法]提取人Hela细胞总RNA,用RT-PCR方法获得Lyn基因并克隆至pcDNA3.1(-)载体。经双酶切、PCR和测序方法鉴定后,将重组质粒瞬时转染HEK 293T细胞表达目的蛋白,应用组氨酸标签镍离子螯合磁珠纯化融合蛋白,通过Western Blot检测蛋白的表达及纯化,并用CCK-8法检测过表达Lyn后细胞增殖能力的变化。[结果]成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)-Lyn并进行瞬时表达和蛋白纯化,CCK-8法检测过表达Lyn的HEK 293T细胞的增殖能力显著性下降(P<0.01)。[结论]Lyn在HEK 293T细胞中成功瞬时表达及纯化,并可以使细胞的增殖能力受到明显抑制,为稳定表达和深入研究其生物学功能及作用机制奠定基础。
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关键词
酪氨酸蛋白激酶Lyn
真核表达
蛋白纯化
细胞增殖
原文传递
题名
KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因联合检测在结直肠癌中的表达
1
作者
杜劲
齐妍
曾妍
邱瑾
王吉林
庄斯慧
黄政华
机构
湛江中心人民医院病理科
湛江中心人民医院精准医学检验实验室
湛江中心人民医院检验科
出处
《分子诊断与治疗杂志》
2024年第2期216-219,224,共5页
基金
湛江市科技计划(210916094540591)。
文摘
目的探究KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变与结直肠癌(CRC)患者临床病理特征存在的关系,并探讨联合检测对CRC患者预后的预测价值。方法选取湛江中心人民医院病理科收治的CRC患者200例为研究对象,收集其CRC手术切除或穿刺活检标本提取DNA,采用人类癌症多基因突变联合检测试剂盒检测KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变状态,分析其与CRC患者临床病理特征的关系,分析KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变状态单一检测及联合检测对CRC复发的预测价值;采用Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank法比较两组患者的生存率,Cox回归综合生存分析影响患者预后的危险因素。结果KRAS、BRAF基因突变与pTNM分期有关(χ^(2)=6.714、5.451,P<0.05);KRAS与BRAF基因突变存在相关性(r=-0.157,P=0.027),KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA与NTRK1单一基因检测与多基因联合检测对预测CRC复发均具有一定价值,其中KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA与NTRK1基因联合检测对CRC复发情况的诊断准确性最高(AUC=0.797),但KRAS、BRAF、PIK3CA与NTRK1联合检测灵敏度最高(0.861),PIK3CA单一检测特异度最高(0.969),KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因未突变的CRC患者第3、5年的总生存率与无瘤生存率均高于基因突变患者,Cox回归综合生存分析结果显示年龄>60岁,KRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变为影响CRC患者总生存时间的独立预测因子(P<0.05)。结论CRC患者KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因突变无明显相关性,但各基因单一或联合检测对CRC复发情况具有一定价值,可作为患者预后评估的重要指标。
关键词
结直肠癌
临床病理特征
分子标志物
联合检测
Keywords
Colorectal cancer
Clinicopathological features
Molecular markers
Joint detection
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
脾多肽改善重症登革热患者免疫功能的观察
被引量:
6
2
作者
黄桢
吴英松
庄斯慧
潘竞锵
刘天才
机构
南方医科大学生物技术学院
广州市中医医院
广州市中医中药研究所
出处
《湖北大学学报(自然科学版)》
CAS
2015年第4期330-333,共4页
基金
南方医科大学引进人才科研启动基金(2009)资助
文摘
观察登革热患者外周血T淋巴细胞免疫及体液免疫功能变化的特点,并探讨脾多肽调节剂治疗重症登革热患者的临床疗效.用流式细胞仪检测T淋巴细胞,用免疫比浊法检测体液免疫功能.重症患者、普通患者、正常组进行组间两两比较,对重症患者随机分为治疗组和对照组两组,治疗组用普通对症治疗加脾多肽免疫调节剂,对照组用普通对症治疗,比较治疗前后的免疫功能的变化.重症患者、普通感染患者和正常人T淋巴细胞免疫和体液免疫比较:Ig G、Ig A高于正常人,且病情越严重越高,Ig M、CD4+、CD4+/CD8+都低于正常人,病情越严重越低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+无统计差异(P>0.05);重症患者40例随机分为治疗组和对照组,治疗组为普通对症治疗加脾多肽,对照组用普通对症治疗,两组治疗前免疫各指标无差异,两种治疗前后Ig G、Ig M、CD4+、CD4+/CD8分别有差异(P<0.05).治疗组和对照组治疗后免疫指标比较,治疗组Ig G、CD4+、CD4+/CD8明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).登革热患者病情严重与免疫系统紊乱相关,重症登革热患者通过脾多肽治疗,可以提高、改善患者免疫指标,有利于恢复免疫功能.
关键词
登革热患者
细胞免疫
体液免疫
脾多肽
Keywords
dengue patients
cellular immunity
humoral immune
spleen polypeptides
分类号
R365 [医药卫生—病理学]
R967 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
非受体型酪氨酸激酶JAK1基因真核表达质粒的构建与真核表达
3
作者
庄斯慧
郭欣欣
梁君瑜
吴英松
刘天才
机构
南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期18-22,共5页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目("蛋白质相互作用均相发光分析仪器和配套试剂研究"
No.2014AA020904)资助
文摘
[目的]构建非受体型酪氨酸激酶JAK1(nonreceptor tyrosine kinase-JAK1)基因真核表达质粒pcDNA4.0-HisJAK1,并转染293T细胞进行真核表达。[方法]从Hela细胞中提取总的RNA,通过RT-PCR获得JAK1基因全长c DNA序列,并将其克隆至真核表达载体pcDNA4.0-His中,构建重组质粒pcDNA4.0-His-JAK1。将真核重组表达质粒转染293T细胞,转染48 h后,在荧光显微镜下观察转染情况。免疫印迹法检测JAK1蛋白转染24 h、36 h与48 h在293T细胞中的表达。[结果]经双酶切与质粒PCR鉴定质粒克隆正确,测序鉴定序列中第2199位碱基A突变为G,为同义突变,不影响氨基酸序列。转染293T细胞48 h后,间接免疫荧光实验显示在293T细胞中检测到绿色荧光。免疫印迹检测可见大小约为133 kDa的目的蛋白。[结论]成功获得JAK1基因全长序列,并成功构建pcDNA4.0-HisJAK1真核重组表达质粒,并在真核细胞293T中获得有效表达,为进一步研究JAK1蛋白质相互作用奠定了基础。
关键词
非受体型酪氨酸激酶
JAK1基因
293T细胞
真核表达
Keywords
Nonreceptor tyrosine kinase,JAK1 gene,293T cells, eukaryotic expression
分类号
Q343.1 [生物学—遗传学]
原文传递
题名
人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定
被引量:
1
4
作者
张佳凤
郝文波
熊玉锋
徐岚
庄斯慧
罗树红
机构
南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期42-47,共6页
基金
国家高技术研究发展技术(863)计划项目("蛋白质测序新技术新装备及配套试剂国产化"
No.2014AA020904)资助
文摘
[目的]构建含人酪氨酸蛋白激酶Lyn基因的载体并进行真核表达、纯化和研究其对细胞增殖的影响。[方法]提取人Hela细胞总RNA,用RT-PCR方法获得Lyn基因并克隆至pcDNA3.1(-)载体。经双酶切、PCR和测序方法鉴定后,将重组质粒瞬时转染HEK 293T细胞表达目的蛋白,应用组氨酸标签镍离子螯合磁珠纯化融合蛋白,通过Western Blot检测蛋白的表达及纯化,并用CCK-8法检测过表达Lyn后细胞增殖能力的变化。[结果]成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)-Lyn并进行瞬时表达和蛋白纯化,CCK-8法检测过表达Lyn的HEK 293T细胞的增殖能力显著性下降(P<0.01)。[结论]Lyn在HEK 293T细胞中成功瞬时表达及纯化,并可以使细胞的增殖能力受到明显抑制,为稳定表达和深入研究其生物学功能及作用机制奠定基础。
关键词
酪氨酸蛋白激酶Lyn
真核表达
蛋白纯化
细胞增殖
Keywords
tyrosine - protein kinase Lyn, eukaryotic expression, protein purification, cell proliferation
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK1基因联合检测在结直肠癌中的表达
杜劲
齐妍
曾妍
邱瑾
王吉林
庄斯慧
黄政华
《分子诊断与治疗杂志》
2024
0
下载PDF
职称材料
2
脾多肽改善重症登革热患者免疫功能的观察
黄桢
吴英松
庄斯慧
潘竞锵
刘天才
《湖北大学学报(自然科学版)》
CAS
2015
6
下载PDF
职称材料
3
非受体型酪氨酸激酶JAK1基因真核表达质粒的构建与真核表达
庄斯慧
郭欣欣
梁君瑜
吴英松
刘天才
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
原文传递
4
人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定
张佳凤
郝文波
熊玉锋
徐岚
庄斯慧
罗树红
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
原文传递
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