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两类不孕女性行IVF/ICSI-ET术后妊娠结局的影响因素
1
作者 赵慧敏 王聪 +2 位作者 李世军 罗罡 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第10期1498-1505,共8页
目的探讨输卵管性不孕(TFI)与多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)-胚胎移植(ET)后妊娠结局的相关影响因素。方法选取行IVF/ICSI助孕的TFI和PCOS不孕症患者77例为研究对象,分为TFI组(n=45)和PCOS组... 目的探讨输卵管性不孕(TFI)与多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)-胚胎移植(ET)后妊娠结局的相关影响因素。方法选取行IVF/ICSI助孕的TFI和PCOS不孕症患者77例为研究对象,分为TFI组(n=45)和PCOS组(n=32),根据是否发生妊娠分为TFI组妊娠者(n=21)和未妊娠者(n=24)、PCOS组妊娠者(n=10)及未妊娠者(n=22),收集各组不孕症患者的一般临床资料[年龄、文化水平、体质量指数(BMI)、月经周期、既往阴道炎史、不孕类型、不孕年限及既往孕产史];采集各组不孕症患者月经第2~3天静脉血,检测血清中抗苗勒氏管激素(AMH)及基础性激素水平[促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)及睾酮(T)],并计算FSH/LH;收集各组患者进入IVF/ICSI周期后的促排卵资料[控制性超促排卵(COH)方案、促性腺激素(Gn)总剂量、Gn总天数]及注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)日血清FSH、LH、E2、P水平;各组不孕症患者卵泡成熟后取卵,收集实验室相关资料(总获卵数、成熟卵数、受精方式及优质卵数)及移植情况(移植胚胎数量、移植胚胎类型及移植日子宫内膜厚度),并计算成熟卵数占卵子总数比例;行IVF/ICSI助孕4~6周,收集各组ET后的妊娠结局,采用单因素和多因素logistic回归分析影响两类患者妊娠结局的因素。结果PCOS组不孕症患者年龄、Gn总剂量低于TFI组(P<0.05),月经稀发、原发性不孕、孕产史、异位妊娠史、总获卵数及成熟卵数高于TFI组(P<0.05);TFI组不孕症患者中未妊娠者基础P水平低于妊娠者(P<0.05),Gn总剂量、Gn总天数及卵裂期ET比例高于妊娠者(P<0.05);PCOS组不孕症患者中妊娠者的年龄、月经周期正常比例低于TFI妊娠者(P<0.05),基础FSH激素水平、总获卵数及成熟卵数高于TFI组妊娠者(P<0.05);PCOS组不孕症患者中未妊娠者月经周期正常、继发性不孕患者比例低于TFI组未妊娠者(P<0.05),基础LH激素水平、Gn总剂量、注射HCG日LH水平、总获卵数及成熟卵数高于TFI组未妊娠者(P<0.05);TFI组不孕症患者妊娠结局的logistic回归分析结果未筛选出有统计学意义的指标。结论一般临床资料、血清激素水平、促排卵及卵细胞实验室培养情况等指标未对行IVF/ICSI-ET的TFI及PCOS不孕症患者妊娠结局产生影响。 展开更多
关键词 体外受精 胚胎移植 多囊卵巢综合征 妊娠结局 不孕症 卵胞浆内单精子注射 输卵管性不孕
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阿尔茨海默病合并深部感染患者的病原菌分布规律及耐药性特点
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作者 姚昌昊 唐琴 +1 位作者 周晓明 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第3期397-402,416,共7页
目的探讨阿尔茨海默病(AD)合并深部感染住院患者的病原菌分布规律及耐药性特点。方法选取AD合并深部感染患者350例为研究对象,收集患者的痰液(n=244)、尿液(n=83)、血液(n=20)及其它分泌物(n=3)标本350份分离培养得纯菌落,采用全自动微... 目的探讨阿尔茨海默病(AD)合并深部感染住院患者的病原菌分布规律及耐药性特点。方法选取AD合并深部感染患者350例为研究对象,收集患者的痰液(n=244)、尿液(n=83)、血液(n=20)及其它分泌物(n=3)标本350份分离培养得纯菌落,采用全自动微生物鉴定系统对纯菌落进行菌种鉴定;收集164例临床体征表现典型的AD合并肺部感染患者的痰标本进行分离培养得纯菌落,采用全自动微生物鉴定系统对纯菌落进行菌种鉴定,并对该164例患者的基础疾病和死亡情况进行统计;选取AD合并肺部感染排名前5的155株主要菌株进行药物敏感试验;同时收集上述菌株来源患者的肺部影像学资料。结果350份AD合并深部感染患者的标本中培养出病原菌397株,数量最多的细菌是铜绿假单胞菌(23.93%),数量最多的真菌是白念珠菌(5.04%);AD合并肺部感染的患者常常伴有多种基础疾病,伴有糖尿病的患者占比居首位(53.66%),其次是伴有高血压病的患者占比(47.56%);药敏检测结果显示,鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦耐药率最高(47.36%),大肠埃希菌对环丙沙星耐药率最高(44.44%),铜绿假单胞菌对庆大霉素耐药率最高(59.25%),金黄色葡萄球菌对头孢吡肟耐药率最高(70.58%),肺炎克雷伯菌对头孢吡肟耐药率最高(38.29%);对AD合并肺部感染患者的常见影像学表现以小叶性肺炎居多,间质性肺炎及肺脓肿情况少见。结论AD合并深部感染患者的病原菌以革兰阴性菌居多,感染部位以肺部感染最高,菌株对环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、头孢吡肟及庆大霉素耐药率较高。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 深部感染 病原菌 种类 构成比 耐药性
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贵阳市2018-2021年83株临床分离非结核分枝杆菌的菌种分布及流行情况
3
作者 周路路 曹荷清 +6 位作者 欧维正 秦万 王海洁 李世军 赵亮 罗罡 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第10期1464-1470,共7页
目的了解贵阳市临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布及流行情况。方法收集2018-2021年鉴定为NTM感染的菌株83株,经罗氏培养基分离培养后采用16S rRNA基因测序方法进行菌种鉴定;应用Excel 2016与SPSS 26.0软件对数据进行整理分析,利... 目的了解贵阳市临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布及流行情况。方法收集2018-2021年鉴定为NTM感染的菌株83株,经罗氏培养基分离培养后采用16S rRNA基因测序方法进行菌种鉴定;应用Excel 2016与SPSS 26.0软件对数据进行整理分析,利用非参数检验与卡方检验对NTM菌种来源、菌种分布、感染患者性别及年龄等特征进行分析。结果83株菌株样本来源主要以痰液为主,感染疾病前3的分别为结核感染(38.55%)、肺部感染(30.12%)及肺部阴影(6.02%);分离培养及16SrRNA测序鉴定出17种NTM,主要以脓肿分枝杆菌(44.58%)为主、其次为鸟分枝杆菌(8.43%);发现三重分枝杆菌、外来分枝杆菌、败素分枝杆菌等6株不同于贵州省以往报道过的NTM。感染NTM患者男女比例为1.5∶1,感染高峰年龄段为45~<60岁,不同年龄NTM感染患者菌种分布差异有统计学意义(χ^(2)=133.926,P<0.05);女性患者脓肿分枝杆菌的感染率大于男性,差异有统计学意义(χ^(2)=8.053,P<0.05)。结论2018-2021年贵阳市NTM感染主要为中老年人群、男性居多;NTM感染菌株以脓肿分枝杆菌为主,女性感染率高于男性,发现6株不同于之前报道的新NTM菌株。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 菌种分布 16S rRNA基因测序 脓肿分枝杆菌 疾病类型
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病原菌血流感染对阿尔茨海默病小鼠记忆力和海马锥体细胞的影响
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作者 姚昌昊 周晓明 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期205-212,共8页
目的 探讨病原菌血流感染对阿尔茨海默病(AD)小鼠记忆力和海马锥体细胞的影响。方法 50只C57BL/6J雄性小鼠腹壁皮下注射D-半乳糖液[200 mg/(kg·d)]连续8周构建AD模型并于造模期间每周观测小鼠的一般状态及体质量;造模结束后均分为... 目的 探讨病原菌血流感染对阿尔茨海默病(AD)小鼠记忆力和海马锥体细胞的影响。方法 50只C57BL/6J雄性小鼠腹壁皮下注射D-半乳糖液[200 mg/(kg·d)]连续8周构建AD模型并于造模期间每周观测小鼠的一般状态及体质量;造模结束后均分为生理盐水(对照)组、大肠埃希菌组、铜绿假单胞菌组、肺炎克雷伯杆菌组、金黄色葡萄球菌组及白念珠菌组,对照组小鼠尾静脉注射生理盐水,其余病原菌感染组小鼠尾静脉注射低(1.5×107CFU/L)、中(1.5×108CFU/L)及高(1.5×109CFU/L)浓度的对应病原菌菌液,观察14 d,分别于注射后第1、2、3天及第1、2周测定各组小鼠的体质量及体温;观察结束后,于第15天采用Morris水迷宫实验检测各组小鼠逃逸潜伏期、游泳速度及穿越平台次数,水迷宫实验共进行6 d;实验结束后处死各组小鼠,取海马组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察海马组织学的改变。结果 小鼠于第8周体质量开始下降,且精神状况较造模初期明显下降;部分病原菌感染组小鼠逃避潜伏期较对照组延长(P<0.05),第5天肺炎克雷伯菌高浓度组小鼠水迷宫实验游泳速度较对照组下降(P<0.05);对照组小鼠海马CA1和CA3区神经细胞及皮层未见明显异常,白念珠菌组小鼠海马组织中发现少量凋亡细胞,肺炎克雷伯菌组、金黄色葡萄球菌组小鼠海马神经细胞轻度排列紊乱。结论 AD患者来源的病原菌经尾静脉血流感染可导致AD小鼠记忆力下降及海马锥体细胞的形态改变。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 小鼠 记忆 海马 血流感染 病原菌 水迷宫 苏木精-伊红染色
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幽门螺杆菌katA基因功能及其在耐受氧化损伤中的作用分析
5
作者 王鑫鑫 管玉祝 +6 位作者 李晓苇 洪伟 吴道艳 康颖倩 刘永畅 陈峥宏 崔古贞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期310-320,共11页
【目的】过氧化氢酶(KatA)是幽门螺杆菌编码的重要毒力因子,在抵抗宿主免疫杀伤和疫苗研发等方面具有重要功能。为了鉴定幽门螺杆菌KatA的酶学特性,并分析其在幽门螺杆菌氧化耐受中的功能。【方法】首先,从幽门螺杆菌临床耐药菌株Hp_G27... 【目的】过氧化氢酶(KatA)是幽门螺杆菌编码的重要毒力因子,在抵抗宿主免疫杀伤和疫苗研发等方面具有重要功能。为了鉴定幽门螺杆菌KatA的酶学特性,并分析其在幽门螺杆菌氧化耐受中的功能。【方法】首先,从幽门螺杆菌临床耐药菌株Hp_G272基因组中分离katA基因,并在大肠杆菌中克隆表达、分离纯化KatA^(G272)蛋白;然后,利用CAT检测试剂盒体外分析KatA^(G272)的过氧化氢酶活性;其次,利用同源重组技术构建katA基因工程菌株,包括敲除菌株和回补菌株;最后,通过比较野生菌株与工程菌株生长表型差异、分解过氧化氢能力差异及耐受过氧化氢能力差异,阐述katA基因的功能及其在幽门螺杆菌耐受氧化损伤中的作用。【结果】在大肠杆菌中成功克隆表达并分离纯化KatA^(G272),体外酶学分析表明,KatA^(G272)是一类嗜酸性过氧化氢酶,基因敲除分析表明,敲除该基因幽门螺杆菌丧失分解和耐受过氧化氢的能力,而回补该基因幽门螺杆菌回复分解和耐受过氧化氢的能力。【结论】katA基因是幽门螺杆菌分解和耐受过氧化氢的唯一功能基因,在幽门螺杆菌氧化耐受中具有重要功能。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 过氧化氢酶 KATA 耐受性 克隆表达 基因敲除
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3种中药纳米乳剂对耳念珠菌深部感染小鼠的抗菌效果
6
作者 陈春屹 余曦晨 +3 位作者 王迪 廖万清 罗罡 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第9期1269-1275,共7页
目的比较3种中药纳米乳剂对耳念珠菌感染小鼠深部感染的效果。方法取茶树精油(TTO)、艾纳香油(BBO)、余甘子、白芨、白茯苓、白芷及柠檬酸,采用高压均质法及超声波法制备中药纳米乳剂(简称纳米剂)1(TTO、BBO及水相全部药物组成)、纳米... 目的比较3种中药纳米乳剂对耳念珠菌感染小鼠深部感染的效果。方法取茶树精油(TTO)、艾纳香油(BBO)、余甘子、白芨、白茯苓、白芷及柠檬酸,采用高压均质法及超声波法制备中药纳米乳剂(简称纳米剂)1(TTO、BBO及水相全部药物组成)、纳米剂2(油相仅有TTO、水相由全部药物组成)及纳米剂3(无油相、水相正常载药);取耳念珠菌CBS12766单克隆菌落制备耳念珠菌菌悬液,采用微量稀释法和平板涂布法检测3种中药纳米乳剂对耳念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);40只BALB/c小鼠尾静脉注射5×10^(10) CFU/L菌悬液制作深部感染模型后均分为阳性对照组、异常行为1组、异常行为2组及异常行为3组,3种中药纳米乳化剂分别按照20μg/g剂量每天1次腹腔注射3 d,观察各组小鼠21 d内异常行为的发生情况;20只Balb/c小鼠随机分为阳性对照组、纳米剂1组、纳米剂2组、纳米剂3组尾静脉注射5×10^(10) CFU/L菌悬液造模,3种中药纳米乳化剂分别按照20μg/g剂量每天1次腹腔注射3 d,取肝、肾、心脏及脾脏匀浆检测载菌量、白细胞介素-6(IL-6)及IL-1β水平。结果3种中药纳米乳剂对耳念珠菌的MIC与MBC均具有体外抑菌作用;小鼠异常行为曲线表明,与阳性对照组相比,3种中药纳米乳剂能够缓解小鼠病理状态(P<0.05);与阳性对照组相比,纳米乳剂1~3组小鼠靶器官载菌量均降低(P<0.05);与纳米剂2、3组相比,纳米剂1组杀菌效果更好(P<0.05);与阳性对照组相比,小鼠靶器官促炎因子IL-6、IL-1β表达均下降(P<0.05);与纳米剂2、3组对比,纳米剂1促炎因子释放量显著下降(P<0.05)。结论3种中药纳米乳剂对耳念珠菌深部感染均具有较好的抗菌效果,且纳米剂1效果比2、3更好。 展开更多
关键词 念珠菌属 感染 耳念珠菌 中药纳米乳剂 微量稀释法 促炎因子 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度
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41株戈登菌的系统发育学分析及其基因组功能的挖掘
7
作者 郭鑫瑶 季晶焱 +7 位作者 程敏 赵亮 曹荷清 王丰 李小兵 廖万清 李文均 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第9期1003-1012,共10页
目的探讨41株戈登菌的系统发育学及其基因组中含碳水化合物活性酶、次级代谢产物生物合成基因簇的种类及多样性。方法以公开发表的41株戈登菌全基因组数据为研究对象,利用原核生物泛基因组学分析的自动化软件对泛基因组特征进行分析,结... 目的探讨41株戈登菌的系统发育学及其基因组中含碳水化合物活性酶、次级代谢产物生物合成基因簇的种类及多样性。方法以公开发表的41株戈登菌全基因组数据为研究对象,利用原核生物泛基因组学分析的自动化软件对泛基因组特征进行分析,结合直系同源蛋白分组对数据库、碳水化合物活性酶数据库和基因组次级代谢产物分析工具对基因组进行预测;提取19株戈登菌基因组DNA,采用16S小亚基核糖体RNA(16S rRNA)通用引物进行PCR扩增,并构建系统发育树。结果戈登菌基因组平均大小为4941636.42 bp,预测的基因数均数4370.46,G+C平均含量为67.25%,蛋白质编码区平均为4445.60;平均核苷酸多态性、DNA-DNA杂交值和16S rRNA基因序列分析表明戈登菌分类地位明确;戈登菌具有开放型泛基因组,核心基因组基因数目会稳定在1036个左右;所有菌株基因序列中含有丰富的糖基转移酶和糖苷水解酶;聚酮合酶、非核糖体肽合成酶和萜烯类生物合成基因簇在戈登菌属中占比较高,且土壤来源的菌株含生物合成基因簇最长。结论戈登菌基因组具有多样性,含丰富的碳水化合物活性酶,能产生多种抗菌和抗肿瘤的次级代谢产物。 展开更多
关键词 基因组 戈登菌属 16S小亚基核糖体RNA 比较基因组 功能预测 次级代谢产物 碳水化合物活性酶
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MLMT与MLST在新生隐球菌基因分型中的应用研究
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作者 朱键 曹佳非 +2 位作者 康颖倩 三上襄 Wieland Meyer 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第1期84-89,共6页
目的 探讨多位点微卫星灶分型(MLMT)和多位点序列分型(MLST)在新生隐球菌(C.neoformans)基因分型中的应用。方法 提取22株来源于国内及日本已明确为新生隐球菌的菌株DNA,经MLMT及MLST相应位点的引物进行扩增、测序;计算各微卫星灶(CNG1... 目的 探讨多位点微卫星灶分型(MLMT)和多位点序列分型(MLST)在新生隐球菌(C.neoformans)基因分型中的应用。方法 提取22株来源于国内及日本已明确为新生隐球菌的菌株DNA,经MLMT及MLST相应位点的引物进行扩增、测序;计算各微卫星灶(CNG1、CNG2及CNG3)序列中简单重复序列的重复数,确定菌株MLMT的基因型;将本研究菌株的MLST中各位点序列和网上数据库相应序列进行对比,获取该菌株的MLST基因型;比较两种方法在分型中分辨能力。结果 在22株菌中,有16株的基因型为MLMT17/MLST5(16/22,72.73%),MLMT将所有菌株分为7型,而MLST分为4型;根据MLST分型,MLMT17、16、34及39的菌株为MLST5;MLMT2、14、29相对应MLST66、32及31;两种方法的分型分辨能力比较,差异无统计学意义(P=0.488)。结论 MLMT-17/MLST 5是我国和日本的新生隐球菌常见基因型,包含CNG1、CNG2及CNG3位点的MLMT可作为MLST的替代或补充。 展开更多
关键词 新生隐球菌 多位点微卫星灶分型 多位点序列分型
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不同毒力差异基因型的新生隐球菌MLST分型及交配型鉴定研究 被引量：2
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作者 康颖倩 陈玉如 +4 位作者 王梅竹 赵亮 李小玲 金方 刘涛华 《中国真菌学杂志》 CSCD 2014年第5期264-267,共4页
目的了解及比较两组毒力差异明显的新生隐球菌格鲁比变种的多位点序列分型(MLST)的特点并进行交配型鉴定。方法采用多位点序列分型(MLST)的方法,设计7个看家基因(CAP59,GPD1,LAC1,PLB1,SOD1,URA5和IGS1)的引物,扩增并分析来源分别为环... 目的了解及比较两组毒力差异明显的新生隐球菌格鲁比变种的多位点序列分型(MLST)的特点并进行交配型鉴定。方法采用多位点序列分型(MLST)的方法,设计7个看家基因(CAP59,GPD1,LAC1,PLB1,SOD1,URA5和IGS1)的引物,扩增并分析来源分别为环境和临床的各10株新生隐球菌格鲁比变种的基因型,并鉴定实验菌株交配型,与多位点微卫星分型(MLMT)结果对比,比较不同基因分型方法在分类中的稳定性和可靠性。结果在微卫星分型中为MLMT-36的10株环境分离株,MLST分型为ST-15,而在微卫星分型中为MLMT-13型的10株临床分离株,MLST分型为ST-32,所有菌株交配型均为MAT-α。结论 MLST分型结果与MLMT分型结果高度一致,提示以上两种分子分型技术在真菌分类鉴定研究中可显示对于其分离背景及进化来源的高分辨率及稳定性。 展开更多
关键词 新生隐球菌 MLST分型 MLMT分型 交配型鉴定
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一株放线菌发酵液的抗菌活性及稳定性研究 被引量：2
10
作者 康颖倩 金方 +5 位作者 刘涛华 牟丽丽 吕倩 王颜颜 曾佳 胡晓霞 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第5期625-629,共5页
目的：研究放线菌菌株GYM39-2发酵液对临床常见病原性细菌及真菌的抗菌活性,同时观察温度、光照、pH值及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响.方法：利用纸片扩散法测定放线菌株GYM39-2发酵液对临床病原菌的抗菌谱,观察改变温度、光照... 目的：研究放线菌菌株GYM39-2发酵液对临床常见病原性细菌及真菌的抗菌活性,同时观察温度、光照、pH值及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响.方法：利用纸片扩散法测定放线菌株GYM39-2发酵液对临床病原菌的抗菌谱,观察改变温度、光照、pH及紫外线等理化因素时对发酵液的抗菌活性及稳定性的影响.结果：菌株GYM39-2对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、白念珠菌及新生隐球菌均有抗菌活性,发酵液对温度、光照的改变及紫外线的照射均有较好的稳定性,pH在5～7之间发酵液抗菌活性最强.结论：菌株GYM39-2发酵液具有良好的抗菌活性及稳定性,能为相关研究提供菌株资源. 展开更多
关键词 放线菌 发酵液 微生物敏感性试验 抗菌活性 稳定性
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云贵地区淡水湖中类蛭弧菌多样性分析 被引量：1
11
作者 康颖倩 刘涛华 +5 位作者 曾佳 王梅竹 金方 牟丽丽 吕倩 王颜颜 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第5期621-624,629,共5页
目的:对贵州阿哈湖、百花湖及云南滇池不同深度湖水中分离的类蛭弧菌进行分类鉴定,了解云贵地区淡水中类蛭弧菌多样性。方法:培养云贵地区3个湖泊中分离的类蛭弧菌,进行16S rRNA基因测序分析,用MEGA 6.0软件以邻接法构建3个湖泊中类蛭弧... 目的:对贵州阿哈湖、百花湖及云南滇池不同深度湖水中分离的类蛭弧菌进行分类鉴定,了解云贵地区淡水中类蛭弧菌多样性。方法:培养云贵地区3个湖泊中分离的类蛭弧菌,进行16S rRNA基因测序分析,用MEGA 6.0软件以邻接法构建3个湖泊中类蛭弧菌16S rRNA序列的系统发育树,并以最大似然法(PHYLIP3.1软件)加以验证。结果:从阿哈湖、百花湖及滇池不同深度湖水中分离的类蛭弧菌覆盖率C值为75%,根据类蛭弧菌16S rRNA构建发育树,本研究所得的类蛭弧菌分属3个簇群,γ-Proteobacteria(8.3%)、δ-Proteobacteria(50.0%)及Sphingobacteria(41.7%);在百花湖中分离得到1株路德维希肠杆菌,分离自贵州阿哈湖的6株菌株与噬菌弧菌属的Bacteriovorax sp.EPA同源性较高,分离于滇池的5株菌株的序列为不可培养细菌序列。结论:云贵地区阿哈湖、百花湖及滇池不同深度湖水中的类蛭弧菌具有较高多样性,推测在云南滇池区域存在着尚未开发的新型类蛭弧菌资源。 展开更多
关键词 贵州 云南 水蛭弧菌 基因 rRNA 16S 系统发育树 淡水
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新生儿肠炎粪肠球菌16S rRNA鉴定分析 被引量：1
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作者 康颖倩 牟丽丽 +4 位作者 周晓明 王颜颜 刘涛华 金方 吕倩 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第6期805-808,共4页
目的:分离和鉴定新生儿肠炎患儿便血中的病原菌,结合临床诊断,分析新生儿肠炎病因。方法:对2例新生儿肠炎病例的便血标本进行研究,(1)直接涂片镜检观察鉴定;(2)菌株纯化筛选;(3)采用CTAB提取法提取菌株的DNA,并通过PCR扩增菌株16S rRNA... 目的:分离和鉴定新生儿肠炎患儿便血中的病原菌,结合临床诊断,分析新生儿肠炎病因。方法:对2例新生儿肠炎病例的便血标本进行研究,(1)直接涂片镜检观察鉴定;(2)菌株纯化筛选;(3)采用CTAB提取法提取菌株的DNA,并通过PCR扩增菌株16S rRNA序列,将所获得的序列与Gen Bank数据库进行BLAST比对;(4)采用Kirby-Bauey纸片扩散法进行药物敏感试验。结果:(1)便血标本共分离纯化2株可疑菌株;(2)通过16S rRNA序列与Gen Bank数据库进行BLAST比对,两株菌株的序列与粪肠球菌的相似度达(99%);(3)分离的粪肠球菌对氨苄西林敏感性较高。结论:新生儿肠炎是由粪肠球菌感染引起,标本直接镜检与药敏试验有利于早期诊断及抗生素的合理应用。 展开更多
关键词 肠炎 粪肠球菌 婴儿 新生 鉴定分析
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伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌体蛋白质的双向电泳分析与研究
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作者 康颖倩 王和 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期838-840,共3页
了解伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌株的菌体蛋白质组成特点，探讨伤寒沙门菌粗糙型变异的遗传学基础。分离提取伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌株的菌体蛋白质，聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（2D-PAGE）和考马斯亮蓝染色，计算机分析与比较两菌株... 了解伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌株的菌体蛋白质组成特点，探讨伤寒沙门菌粗糙型变异的遗传学基础。分离提取伤寒沙门菌野生型与粗糙型菌株的菌体蛋白质，聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（2D-PAGE）和考马斯亮蓝染色，计算机分析与比较两菌株的蛋白质组成特点及其相关性。伤寒沙门菌野生型与粗糙型具有相似的蛋白质电泳图谱，相似系数为78％。多数蛋白质斑点分布于pH3．0～6．4之间，并且分子量小于30kDa。两菌株的蛋白质电泳图谱之间的主要差异共计36处，多数差异蛋白质的分子量小于20kDa。伤寒沙门菌粗糙型与野生型菌体蛋白质组成的差异显示，粗糙型变异绝不仅仅是O抗原多糖的缺失，也可发生菌体蛋白质组成的改变与缺失。伤寒沙门菌粗糙型保留了同其亲代野生型菌株一致的绝大多数菌体蛋白质组成，在2D-PAGE中形成伤寒沙门菌特征性的基本蛋白质图谱，有助于对粗糙型菌株进行蛋白质分子同源性与变异性的分析与鉴别。 展开更多
关键词 2D-PAGE 伤寒沙门菌 粗糙型 蛋白质图谱
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新生隐球菌ITS与IGS2基因的分类比较研究
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作者 康颖倩 王和 《贵州医药》 CAS 2009年第11期973-975,共3页
目的探讨ITS及IGS2基因片段对新生隐球菌各变种及基因型分类与鉴定的应用价值。方法根据本课题前期研究结果及GenBank发表的基因序列资料,研究新生隐球菌3个变种的ITS和IGS2基因片段信息,用CLUSTERW软件构建以上两种基因的系统发育进化... 目的探讨ITS及IGS2基因片段对新生隐球菌各变种及基因型分类与鉴定的应用价值。方法根据本课题前期研究结果及GenBank发表的基因序列资料,研究新生隐球菌3个变种的ITS和IGS2基因片段信息,用CLUSTERW软件构建以上两种基因的系统发育进化树并进行分析,了解其亲缘关系。结果对新生隐球菌各菌株ITS基因型的IGS2区域片段分析结果显示,IGS2基因片断具有丰富的变异和信息位点。同ITS基因序列比较显示,IGS2基因在亚种内也具有同步进化和变异的特征。结论IGS2基因序列分析可作为新生隐球菌种间及种内基因分类鉴定有效的分子生物学方法;多种基因分类鉴定方法的联合应用,可更有效和准确地鉴定新生隐球菌并揭示其种内不同基因亚型间的遗传进化关系。 展开更多
关键词 新生隐球菌 基因分类 IGS2 ITS
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基础医学实验教学中心“多元立体式”人才培养体系的探索与实践 被引量：11
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作者 吴宁 吴遵秋 +3 位作者 康颖倩 修江帆 张金娟 曾柱 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2021年第5期214-217,共4页
基于创新型人才培养目标,贵州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心从人才培养环境、培养内容、培养方式、评价体系等方面进行系列改革。强调多学科知识与技能融会贯通,坚持理论与实践、基础与临床、教学与科研、教学与思政、教学与... 基于创新型人才培养目标,贵州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心从人才培养环境、培养内容、培养方式、评价体系等方面进行系列改革。强调多学科知识与技能融会贯通,坚持理论与实践、基础与临床、教学与科研、教学与思政、教学与竞赛相结合的5结合原则,构建具有自身特色的"多元立体式"实验教学创新人才培养体系,并运用于实践中。努力实现对医学生强化基础、提高综合、训练实践、拓展思维、启发创新的多元化、立体式培养。 展开更多
关键词 基础医学 实验教学 多元立体式 人才培养体系 探索与实践
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贵州地区土壤中需氧放线菌的分离鉴定 被引量：9
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作者 金方 刘涛华 +3 位作者 牟丽丽 吕倩 王颜颜 康颖倩 《贵州农业科学》 CAS 2015年第3期114-117,共4页
为了解贵州土壤需氧放线菌的分布特点、系统发育和物种多样性,采集贵州贵阳、遵义、安顺、铜仁、毕节、黔南、六盘水、黔东南、黔西南9个区域的农耕地、湿地、森林3个类型土壤标本进行需氧放线菌的分离纯化,扩增其16SrDNA基因序列后在Ge... 为了解贵州土壤需氧放线菌的分布特点、系统发育和物种多样性,采集贵州贵阳、遵义、安顺、铜仁、毕节、黔南、六盘水、黔东南、黔西南9个区域的农耕地、湿地、森林3个类型土壤标本进行需氧放线菌的分离纯化,扩增其16SrDNA基因序列后在GenBank中进行Blast比对分析,并以邻接法构建系统发育树。结果表明:在贵州9个区域108份土壤中分离出173株需氧放线菌,其中链霉菌属(Streptomyces)165株、北里孢菌属(Kitasatospora.)5株、诺卡氏菌属(Nocardioides)2株,在遵义农耕地土壤中分离出链霉菌属潜在新种1株(GYM8-3)。贵州土壤需氧放线菌主要为链霉菌属,在种间水平上存在分类多样性和地域差异性。 展开更多
关键词 需氧放线菌 链霉菌 土壤 贵州
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16SrRNA和secA1基因构建临床诺卡菌的系统发育树比较 被引量：5
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作者 王颜颜 夏茂宁 +6 位作者 欧维正 黄劲 明春艳 刘涛华 吕倩 周兵 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第4期409-415,共7页
目的:比较16S rRNA和secA1基因构建诺卡菌分属Nocardia wallacei、Nocardia farcinica、Nocardia cyriacigeorgica及Nocardia otitidiscaviarum4个种系统发育树的多样性。方法:将8株临床分离的诺卡菌菌株分别接种于脑心浸出液琼脂培养... 目的:比较16S rRNA和secA1基因构建诺卡菌分属Nocardia wallacei、Nocardia farcinica、Nocardia cyriacigeorgica及Nocardia otitidiscaviarum4个种系统发育树的多样性。方法:将8株临床分离的诺卡菌菌株分别接种于脑心浸出液琼脂培养基分离培养,观察其生长情况;提取细菌DNA,采用聚合酶链式反应扩增其16S rRNA和secA1基因序列并测序,所获序列与NCBI数据库进行BLAST比对,鉴定其菌种名;选取本研究鉴定的4个属共有的40个有效发表种及本研究分离的8株诺卡菌菌株的种,通过邻接法、最大似然法分别构建16S rRNA和secA1基因序列的系统发育树并比较。结果:本研究所收集的诺卡菌分属Nocardia wallacei、Nocardia farcinica、Nocardia cyriacigeorgica及Nocardia otitidiscaviarum 4个种,且Nocardia wallacei、Nocardia farcinica及Nocardia cyriacigeorgica基于secA1基因构建的系统发育树较16S rRNA在种内菌株亲缘关系的分化差异程度高及分类多样性多(P<0.05),而Nocardia otitidiscaviarum的分化程度和分类多样性在16S rRNA和secA1基因构建的系统发育树间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:secA1基因用于诺卡菌种群的系统发育分析和分子进化的研究,较16S rRNA具有高度分辨率的优势。 展开更多
关键词 基因 结构 细菌 放线菌属 发育生物学 诺卡菌 16S RRNA基因 sec A1基因 聚合酶链反应
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浅谈转氨基作用实验中异常黄斑的形成
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作者 康颖倩 《中华医学写作杂志》 2001年第18期2089-2091,共3页
目的：探讨转氨基作用实验中异常黄斑的形成机制及其克服。方法：采用增加碘乙酸用量的实验方法。结果：增加碘乙酸后异常黄斑消失，紫色色斑显色效果佳。结论：碘乙酸可抑制肝脏中催化谷氨酸生成脯氨酸过程中的一系列酶活性，如谷氨酸... 目的：探讨转氨基作用实验中异常黄斑的形成机制及其克服。方法：采用增加碘乙酸用量的实验方法。结果：增加碘乙酸后异常黄斑消失，紫色色斑显色效果佳。结论：碘乙酸可抑制肝脏中催化谷氨酸生成脯氨酸过程中的一系列酶活性，如谷氨酸激酶等。 展开更多
关键词 转氨基作用 黄斑 脯氨酸 碘乙酸
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11株临床诺卡菌16S rRNA及药敏分析 被引量：7
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作者 刘涛华 王颜颜 +4 位作者 牟丽丽 吕倩 陈燕 张荣庆 康颖倩 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第3期268-271,共4页
目的:探讨应用11株临床诺卡菌16S rRNA序列鉴定该菌菌种名,同时观察该菌的药敏情况。方法:将11株临床分离的诺卡菌菌株分别接种于脑心浸液琼脂培养基分离培养,观察其生长情况;提取菌株DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增其16S rRNA序列,并测... 目的:探讨应用11株临床诺卡菌16S rRNA序列鉴定该菌菌种名,同时观察该菌的药敏情况。方法:将11株临床分离的诺卡菌菌株分别接种于脑心浸液琼脂培养基分离培养,观察其生长情况;提取菌株DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增其16S rRNA序列,并测定其基因序列,所获序列与Gen Bank数据库进行BLAST比对,鉴别其菌种名;采用Kirby-Bauey纸片扩散法检测11株菌株药敏情况。结果:11株临床诺卡菌在脑心浸液琼脂培养基上生长迅速;PCR扩增菌株16S rRNA基因序列经BLAST比对,结果与Gen Bank中已知的诺卡.菌同源性>98%,分离的菌株分别为Nocardia otitidiscaviarum 4株、Nocardia cyriacigeorgica 3株、Nocrdia wallacei1株及Nocardia farcinica3株;药敏实验结果显示11株诺卡菌均对阿米卡星敏感,对亚胺培南耐药,其中Nocardia cyriacigeorgica对氨苄西林、环丙沙星、克拉霉素及阿莫西林的药物敏感性结果与其它菌株截然不同。结论:测定16S rRNA序列能够快速、简便、准确地鉴定诺卡菌菌种,各菌株均对阿米卡星敏感,对亚胺培南耐药。 展开更多
关键词 诺卡菌 放线菌 16S RRNA 聚合酶链式反应 序列分析 DNA 药敏试验
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中国南方地区马尔尼菲青霉分子流行病学初步研究 被引量：3
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作者 赵亮 唐秀文 +6 位作者 王梅竹 曹煜 牟丽丽 金方 李小玲 陈玉如 康颖倩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期36-39,11,共5页
目的分离及鉴定贵州、广西、广东各地临床分离的马尔尼菲青霉(Penicillium marneffei,PM),通过微卫星基因多态性分析进行分子流行病学初步研究。方法从贵州、广西、广东地区临床病人标本中分离马尔尼菲青霉,通过形态学及ITS序列进行鉴定... 目的分离及鉴定贵州、广西、广东各地临床分离的马尔尼菲青霉(Penicillium marneffei,PM),通过微卫星基因多态性分析进行分子流行病学初步研究。方法从贵州、广西、广东地区临床病人标本中分离马尔尼菲青霉,通过形态学及ITS序列进行鉴定,运用多位点微卫星分型法(multilocus microsatellite typing,MLMT)和SPSS18.0软件对分离的马尔尼菲青霉进行基因多态性及其相关性分析。结果贵州、广西和广东共收集鉴定马尔尼菲青霉临床株50株,3个微卫星位点PMMI、PMMII、PMMIII分别检测到29、9和8种等位基因,50株菌共分为47个微卫星型(PMMT);聚类分析将贵州及广西、广东地区马尔尼菲青霉分为6大类(Cluster1-Cluster 6)。结论贵州、广西、广东地区的马尔尼菲青霉具有较高的基因多态性,我国南方地区相邻省份马尔尼菲青霉的种群基因结构与地域分布之间存在着一定的相关性。 展开更多
关键词 马尔尼菲青霉菌 多位点微卫星基因分型 分子流行病学
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