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羊布鲁杆菌脂蛋白OMP19单克隆抗体制备与鉴定 被引量：6
1
作者 廖卿宇 胡飞环 +3 位作者 吴静波 罗佩芳 王文敬 黎诚耀 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期899-902,913,共5页
目的制备与鉴定羊布鲁杆菌脂蛋白OMP19单克隆抗体,用于布菌感染免疫机制研究。方法将OMP19基因连接入pET-30a(+)表达载体中,构建pET-30a(+)/OMP19质粒,转化入大肠埃希氏菌BL21(E3),以不同浓度异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达... 目的制备与鉴定羊布鲁杆菌脂蛋白OMP19单克隆抗体,用于布菌感染免疫机制研究。方法将OMP19基因连接入pET-30a(+)表达载体中,构建pET-30a(+)/OMP19质粒,转化入大肠埃希氏菌BL21(E3),以不同浓度异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,采用镍金属螯合亲和层析(NI-NTA)纯化;以布菌阳性血清检测重组蛋白免疫反应性,并利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,以天然OMP19蛋白及布菌外膜蛋白提取物(NMP)对制备的单克隆抗体进行Western Blot及酶免疫染色试验(IEST)鉴定。结果表达了OMP19蛋白,分子量约19kDa,通过纯化纯度可达95%,Western Blot分析显示蛋白具有良好的抗原性,并制备了OMP19抗原23株鼠源性单克隆抗体,鉴定结果显示22(95.65%)株能与天然OMP19蛋白反应,18(78.26%)株能与NMP反应,其中IgG1(k)亚型占91.30%;4株能与羊种布鲁氏菌菌涂片反应。结论成功制备具有良好抗原性的重组OMP19蛋白,筛选出识别天然蛋白的单克隆抗体,已初步应用于布菌的检测,为OMP19抗原B细胞表位的筛选奠定基础。 展开更多
关键词 布鲁杆菌 OMP19 蛋白表达 单克隆抗体
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布鲁杆菌优势抗原OMP31和BP26的B细胞表位筛选
2
作者 吴静波 丘金浪 +3 位作者 翁云层 廖卿宇 王文敬 黎诚耀 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第S1期70-70,共1页
目的筛选BP26和OMP31蛋白的B淋巴细胞线性表位,并探索该表位及其抗体在布病检测中的价值。方法构建BP26和OMP31蛋白的原核表达系统,表达、纯化重组BP26(rBP26)和OMP31蛋白(rOMP31),并以rBP26和rOMP31分别免疫BALB/c小鼠,制备能特异性结... 目的筛选BP26和OMP31蛋白的B淋巴细胞线性表位,并探索该表位及其抗体在布病检测中的价值。方法构建BP26和OMP31蛋白的原核表达系统,表达、纯化重组BP26(rBP26)和OMP31蛋白(rOMP31),并以rBP26和rOMP31分别免疫BALB/c小鼠,制备能特异性结合天然OMP31和BP26蛋白的单克隆抗体;合成BP26和OMP31蛋白的重叠16肽作为抗原,多肽ELISA测定单抗;与KLH偶联的16肽作为ELISA检测抗原,检测羊的血清。结果获得纯度90%以上的rBP26和rOMP31,并制备28株能稳定分泌抗rBP26单抗,5株稳定分泌抗rOMP31单抗的杂交瘤细胞株,其中分别有11株和1株能与多肽结合, 展开更多
关键词 OMP31 BP26 布鲁杆菌 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 优势抗原 原核表达系统 布病 线性表 特异性
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韶关地区1例羊布鲁氏菌感染及文献回顾
3
作者 廖卿宇 胡雪梅 黄丽芳 《检验医学与临床》 CAS 2021年第14期2134-2136,共3页
布鲁菌病是布鲁氏菌引起的急性或慢性传染病,属于全国乙类传染病,是目前世界范围,尤其是发展中国家流行最广、危害最大的人兽共患传染病之一。导致人布鲁氏菌感染的致病菌有5种,即羊种、牛种、猪种、犬种和海洋种。羊种布鲁氏菌是绵羊... 布鲁菌病是布鲁氏菌引起的急性或慢性传染病,属于全国乙类传染病,是目前世界范围,尤其是发展中国家流行最广、危害最大的人兽共患传染病之一。导致人布鲁氏菌感染的致病菌有5种,即羊种、牛种、猪种、犬种和海洋种。羊种布鲁氏菌是绵羊和山羊共同的致病菌,是对人毒力最强、危害最大的亚种,占感染总量的80%,而牛种和猪种感染分别仅占10%、1%,感染以上种系布鲁氏菌的病畜是我国人畜布鲁氏菌感染的主要感染源[1]。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 布鲁氏菌病 实验室诊断
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本地区妊娠晚期妇女B族链球菌带菌率及相关因素分析 被引量：8
4
作者 吴丽娜 黄丽芳 +1 位作者 黄翠梅 廖卿宇 《中国医学创新》 CAS 2019年第24期149-152,共4页
目的:探明本地区妊娠晚期妇女B族链球菌(GBS)带菌率及相关因素分析。方法:将本院2017年11月-2018年10月入住或检查的病患进行统计,筛选出1308例妊娠晚期(34~37周)孕妇为研究对象,均给予荧光定量PCR技术判定GBS带菌率,采用多因素Logisti... 目的:探明本地区妊娠晚期妇女B族链球菌(GBS)带菌率及相关因素分析。方法:将本院2017年11月-2018年10月入住或检查的病患进行统计,筛选出1308例妊娠晚期(34~37周)孕妇为研究对象,均给予荧光定量PCR技术判定GBS带菌率,采用多因素Logistic回归对影响因素进行分析。比较不同年龄、体重指数(BMI)、文化程度、高血压、有无念珠菌性阴道炎(VVC)、有无妊娠期糖尿病(GDM)、有无妊娠晚期性生活和分娩相关因素(流产史、分娩史、阴道分娩史)妊娠晚期孕妇GBS带菌率,并进行危险因素分析,对比检测结果的差异性。结果:经统计,本地区1 308例妊娠晚期孕妇的GBS带菌率为8.7%,35~39岁年龄段的带菌率(12.6%)最高,但不同年龄段的妊娠晚期孕妇带菌率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同年龄、文化程度、高血压妊娠晚期孕妇带菌率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同BMI、有无GDM、VVC、妊娠晚期性生活、流产史、分娩史、阴道分娩史妊娠晚期孕妇带菌率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。BMI、GDM、VVC、妊娠晚期性生活、分娩史、阴道分娩史、流产史均是妊娠晚期孕妇GBS带菌率的独立危险因素(P<0.05)结论:年龄及高血压等与带菌率的相关性较小,妊娠晚期孕妇感染B族链球菌危险因素有BMI、GDM、VVC、流产史、阴道分娩史、妊娠晚期性生活等,可通过采取相应的预防措施来降低病发率。 展开更多
关键词 妊娠晚期 B族链球菌 带菌率 相关因素
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降钙素原联合超敏C反应蛋白检测在妊娠晚期B族链球菌感染中的意义
5
作者 吴丽娜 黄丽芳 +5 位作者 黄翠梅 赖玉玲 胡雪梅 邓常春 廖卿宇 王英 《中国医学创新》 CAS 2020年第27期28-31,共4页
目的:分析探究血清降钙素原(PCT)联合超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平检测在妊娠晚期B族链球菌(GBS)感染中的预测价值和临床意义。方法:收集2019年1-12月在本院分娩的妊娠晚期GBS阳性孕妇103例的临床资料设为GBS组,另选取妊娠晚期正常孕妇40... 目的:分析探究血清降钙素原(PCT)联合超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平检测在妊娠晚期B族链球菌(GBS)感染中的预测价值和临床意义。方法:收集2019年1-12月在本院分娩的妊娠晚期GBS阳性孕妇103例的临床资料设为GBS组,另选取妊娠晚期正常孕妇40例设为对照组。抽取各组孕妇外周静脉血,取上层清液,应用免疫色谱法、免疫比浊法分别检测PCT和hs-CRP水平,根据检查结果对GBS组研究对象进一步完成分组,主要分为GBS带菌组、GBS亚临床感染组与绒毛膜羊膜炎组。比较各组孕妇血清PCT、hs-CRP水平,分析PCT联合hs-CRP检测诊断效能。结果:GBS组孕妇PCT、hs-CRP水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。GBS带菌组、GBS亚临床感染组、绒毛膜羊膜炎组患者PCT、hs-CRP水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。绒毛膜羊膜炎组PCT、hs-CRP水平均高于GBS带菌组和GBS亚临床感染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PCT联合hs-CRP检测诊断GBS感染的阳性预测值、灵敏度、特异度均高于各单项检测方法。结论:妊娠晚期GBS感染孕妇血清PCT、hs-CRP水平均显著升高,联合检测PCT与hs-CRP对预测宫内感染有重要诊断价值和临床指导意义。 展开更多
关键词 降钙素原 超敏C反应蛋白 妊娠晚期 B族链球菌 宫内感染
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