目的建立快速检测儿童血流感染常见病原菌的多重聚合酶链反应(PCR)系统。方法在16S r DNA-PCR结合测序鉴定血流感染病原菌的基础上筛选出7种儿童血流感染常见病原菌,针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,用临床常见的15种...目的建立快速检测儿童血流感染常见病原菌的多重聚合酶链反应(PCR)系统。方法在16S r DNA-PCR结合测序鉴定血流感染病原菌的基础上筛选出7种儿童血流感染常见病原菌,针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,用临床常见的15种细菌、4种真菌及人类细胞检测该系统的检测性能,并将该系统与血培养法及16S r DNA-PCR进行比较。结果 180例血液样本中血培养法阳性14例,阳性率为7.8%;16S r DNA-PCR阳性28例,阳性率为15.6%;多重PCR系统阳性25例,阳性率为13.9%。多重PCR系统病原菌检出率高于血培养法(P〈0.05),与16S r DNA-PCR比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论所建立的多重PCR系统能够快速、准确地检测引起儿童血流感染的7种常见病原菌,比常规血培养法提早3~5 d将病原菌鉴定到种,对临床及时合理用药具有指导意义。展开更多
目的探索建立一种可快速鉴定儿童血流感染常见病原菌的多重PCR体系。方法通过16S r DNA-PCR筛选出7种引起血流感染的常见病原菌,并针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,检测该系统的特异性和敏感性;将该体系的检测结果与血...目的探索建立一种可快速鉴定儿童血流感染常见病原菌的多重PCR体系。方法通过16S r DNA-PCR筛选出7种引起血流感染的常见病原菌,并针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,检测该系统的特异性和敏感性;将该体系的检测结果与血培养及16S r DNA-PCR比较。结果该体系可以扩增出7种病原菌的特异性基因片段,病原菌检出率高于血培养且与16S r DNA-PCR差异无统计学意义,敏感性和特异性良好。结论本研究建立的多重PCR方法可快速、准确地鉴定引起儿童血流感染的常见病原菌,可作为快速检测方法在临床实验室中应用。展开更多
目的初步探讨PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测肺炎儿童下呼吸道菌群多样性的作用。方法收集10份培养阳性的患儿肺泡灌洗液2~5 m L,经细菌DNA提取、16S r DNA-PCR后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,对优势条带进行测序。结果经培养1...目的初步探讨PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测肺炎儿童下呼吸道菌群多样性的作用。方法收集10份培养阳性的患儿肺泡灌洗液2~5 m L,经细菌DNA提取、16S r DNA-PCR后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,对优势条带进行测序。结果经培养10份标本中7份鉴定为一种菌感染,3份培养出两种病原菌;经PCR-DGGE分析8份标本出现多条明显条带,2份得到一条条带,共筛选出12个优势条带;DGGE法得到的细菌种类多于培养法。结论 PCR-DGGE可较好地鉴定混合细菌感染性肺炎病原菌并能检测到培养法没有检出的细菌;儿童肺炎主要以肺炎链球菌、大肠埃希菌、草绿色链球菌等病原菌为主。展开更多
文摘目的建立快速检测儿童血流感染常见病原菌的多重聚合酶链反应(PCR)系统。方法在16S r DNA-PCR结合测序鉴定血流感染病原菌的基础上筛选出7种儿童血流感染常见病原菌,针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,用临床常见的15种细菌、4种真菌及人类细胞检测该系统的检测性能,并将该系统与血培养法及16S r DNA-PCR进行比较。结果 180例血液样本中血培养法阳性14例,阳性率为7.8%;16S r DNA-PCR阳性28例,阳性率为15.6%;多重PCR系统阳性25例,阳性率为13.9%。多重PCR系统病原菌检出率高于血培养法(P〈0.05),与16S r DNA-PCR比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论所建立的多重PCR系统能够快速、准确地检测引起儿童血流感染的7种常见病原菌,比常规血培养法提早3~5 d将病原菌鉴定到种,对临床及时合理用药具有指导意义。
文摘目的探索建立一种可快速鉴定儿童血流感染常见病原菌的多重PCR体系。方法通过16S r DNA-PCR筛选出7种引起血流感染的常见病原菌,并针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,检测该系统的特异性和敏感性;将该体系的检测结果与血培养及16S r DNA-PCR比较。结果该体系可以扩增出7种病原菌的特异性基因片段,病原菌检出率高于血培养且与16S r DNA-PCR差异无统计学意义,敏感性和特异性良好。结论本研究建立的多重PCR方法可快速、准确地鉴定引起儿童血流感染的常见病原菌,可作为快速检测方法在临床实验室中应用。
文摘目的初步探讨PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测肺炎儿童下呼吸道菌群多样性的作用。方法收集10份培养阳性的患儿肺泡灌洗液2~5 m L,经细菌DNA提取、16S r DNA-PCR后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,对优势条带进行测序。结果经培养10份标本中7份鉴定为一种菌感染,3份培养出两种病原菌;经PCR-DGGE分析8份标本出现多条明显条带,2份得到一条条带,共筛选出12个优势条带;DGGE法得到的细菌种类多于培养法。结论 PCR-DGGE可较好地鉴定混合细菌感染性肺炎病原菌并能检测到培养法没有检出的细菌;儿童肺炎主要以肺炎链球菌、大肠埃希菌、草绿色链球菌等病原菌为主。