呼吸道合胞病毒实时荧光定量PCR检测 被引量：8

1

作者 张其威 游上游 +3 位作者 孙继民 吴旗 余春华 张楚瑜 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第7期847-852,共6页

目的建立一种快速、准确诊断人呼吸道合胞病毒(hRSV)早期感染的实时荧光定量PCR检测方法。方法以hRSV最保守的N基因序列为参考,设计两对特异的引物和一条TaqMan荧光探针,在LightCycler定量PCR检测仪上对93例下呼吸道感染患儿进行hRSVRN... 目的建立一种快速、准确诊断人呼吸道合胞病毒(hRSV)早期感染的实时荧光定量PCR检测方法。方法以hRSV最保守的N基因序列为参考,设计两对特异的引物和一条TaqMan荧光探针,在LightCycler定量PCR检测仪上对93例下呼吸道感染患儿进行hRSVRNA检测,并与病毒分离培养、常规PCR、巢式PCR方法和ELISA法相比较。结果以PCR模板浓度来定义,该方法线形范围为1×102￣1×107cDNAcopies/μl,灵敏度达1×102cDNAcopies/μl,和巢式PCR相同,比常规PCR高10倍。用人脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、柯萨奇病毒2型、甲型、乙型流感病毒、腺病毒7型作对照,均无预期扩增产物和荧光的产生;该方法在LightCycler和Rotor-Gene两种仪器上的定量结果具有一致性;采用该法对93例患儿行FQ-PCR检测出阳性44例(43.9%),ELISA方法检测阳性4例(4.3%),两者相关性不高。hRSV浓度的高低与患儿临床症状之间的关系不是很明显。结论该方法可快速、灵敏、特异、定量检测hRSV,在hRSV感染的早期诊断和疗效监测方面具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 实时监测 灾光定量PCR TAQMAN

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抗病毒中药研究的最新进展 被引量：74

2

作者 张其威 张楚瑜 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期116-119,共4页

关键词 抗病毒 中药 研究进展

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人3型腺病毒GZ13株的分离鉴定及六邻体蛋白的分子进化研究 被引量：3

3

作者 张其威 赵素慧 +5 位作者 王长兵 朱冰 朱利 赵卫 李凌 万成松 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1198-1201,共4页

目的分离鉴定1株引起儿童急性支气管肺炎的腺病毒及分析其主要中和抗原六邻体蛋白的分子进化趋势。方法采用荧光定量PCR方法,对1例引起严重支气管肺炎的患儿咽拭子进行检测,并从中分离得到1株腺病毒(命名为GZ13)。利用型特异性引物PCR... 目的分离鉴定1株引起儿童急性支气管肺炎的腺病毒及分析其主要中和抗原六邻体蛋白的分子进化趋势。方法采用荧光定量PCR方法,对1例引起严重支气管肺炎的患儿咽拭子进行检测,并从中分离得到1株腺病毒(命名为GZ13)。利用型特异性引物PCR进行初步亚型鉴定;克隆该株腺病毒完整的六邻体蛋白基因,测序和序列比对,确定其型别;同时与GenBank上人3型腺病毒的六邻体蛋白进行同源性比对,分析预测六邻体蛋白的分子进化趋势。结果该临床标本经荧光定量PCR鉴定为腺病毒强阳性,型特异性引物PCR初步鉴定为3型;完整六邻体基因比对最终确定为人3型腺病毒;GZ13株与我们先前分离的GZ01、GZ02株及台湾地区分离株核苷酸及氨基酸的同源性均大于99%。结论引起该例儿童急性支气管肺炎的病原体为人3型腺病毒,目前在广州以及台湾地区流行的3型腺病毒仍属同一流行株,其主要中和性抗原六邻体蛋白未出现明显变异,这对今后开发研究人3型腺病毒疫苗及药物具有重要指导意义。 展开更多

关键词 人3型腺病毒 六邻体蛋白 分子进化

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壁压法用于高速风洞洞壁干扰修正 被引量：3

4

作者 张其威 《南京航空学院学报》 CSCD 1992年第5期496-505,共10页

本文介绍用壁压信息法对高速风洞模型试验进行洞壁干扰修正的方法。这种方法使用风洞壁附近壁压分布测量数据和模型受力数据进行洞壁干扰修正计算,不涉及风洞壁的通气特性,可用于各种通气壁或实壁高速风洞。用本法计算了各种模型在多种... 本文介绍用壁压信息法对高速风洞模型试验进行洞壁干扰修正的方法。这种方法使用风洞壁附近壁压分布测量数据和模型受力数据进行洞壁干扰修正计算,不涉及风洞壁的通气特性,可用于各种通气壁或实壁高速风洞。用本法计算了各种模型在多种风洞试验段(实壁、柔壁、孔壁、缝壁)中的数百种试验状态。试验马赫数范围是0.5到0.9,试验雷诺数范围是2×10~6～1×10~7。计算结果和国外最新修正方法及无洞壁干扰N-S方程计算结果进行了比较,证实了本文方法的正确性和实用性。 展开更多

关键词 风洞试验 洞壁干扰 跨音速流动

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从师生角度浅谈医学生课外科研活动 被引量：2

5

作者 张其威 赵素慧 +2 位作者 钮红岺 韩桂圆 万成松 《卫生职业教育》 2012年第17期8-10,共3页

课外科研活动是培养大学生成为创新型人才,启发其创新思维,培养其科研能力的重要途径。本文从学生和教师两个不同的角度,探讨医学本科生参加课外科研活动的特点及存在的共性问题,并结合实例,分别提出相应对策,以期今后对医学生及指导教... 课外科研活动是培养大学生成为创新型人才,启发其创新思维,培养其科研能力的重要途径。本文从学生和教师两个不同的角度,探讨医学本科生参加课外科研活动的特点及存在的共性问题,并结合实例,分别提出相应对策,以期今后对医学生及指导教师有所借鉴。 展开更多

关键词 教师 医学生 课外科研活动

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浅谈大学生课外科研活动对指导教师的要求 被引量：2

6

作者 张其威 赵素慧 +2 位作者 钮红岺 韩桂圆 万成松 《南昌教育学院学报》 2012年第5期67-,69,共2页

大学生课外科研活动是运用实践教学,提高大学生实践能力的一种非常有效的方法。教师在开展这项活动的过程中如何做一名合格称职的导师显得至关重要,这需要从提高导师自身素质做起,同时对学生要悉心引导,并进行及时有效的沟通,从而真正... 大学生课外科研活动是运用实践教学,提高大学生实践能力的一种非常有效的方法。教师在开展这项活动的过程中如何做一名合格称职的导师显得至关重要,这需要从提高导师自身素质做起,同时对学生要悉心引导,并进行及时有效的沟通,从而真正培养出具备创新能力、实践能力和创新精神的后备人高素质人才。 展开更多

关键词 课外科研活动 大学生 导师

原文传递

人呼吸道合胞病毒感染的SPC-A1细胞相关基因zzz171con的电子克隆与分析

7

作者 张其威 李蕾 +4 位作者 赵东赤 张楚瑜 李乐 游上游 黄静宁 《氨基酸和生物资源》 CAS 2005年第2期58-63,共6页

采用mRNA差异显示RT-PCR方法克隆到人呼吸道合胞病毒感染的SPC-A1细胞中相关的50个表达序列标签,其中一个片段g17-1在HRSV感染的细胞中高表达。利用生物信息学的方法对g17-1进行分析鉴定,推测是一个新基因。利用电子克隆,得到一全长210... 采用mRNA差异显示RT-PCR方法克隆到人呼吸道合胞病毒感染的SPC-A1细胞中相关的50个表达序列标签,其中一个片段g17-1在HRSV感染的细胞中高表达。利用生物信息学的方法对g17-1进行分析鉴定,推测是一个新基因。利用电子克隆,得到一全长2101bp的cDNA,对其ORF、启动子、电子表达谱、染色体定位以及所编码的蛋白进行分析,结果表明,该cDNA含有1个ORF,与人类假定蛋白XP_097121同源性达90%,定位于人17号染色体,在肿瘤细胞、腺癌细胞、扁桃体初级B细胞中表达,其编码的蛋白预测定位于细胞核内,推测其与细胞抗病毒感染有一定的关系。 展开更多

关键词 生物信息学 人呼吸道合胞病毒 电子克隆

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壁压法用于高速风洞大迎角实验力和力矩修正

8

作者 张其威 陈震 《航空学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1996年第3期337-340,共4页

用改进的壁压法 ,对 Ma≤ 0 .9时飞机的大堵塞比模型、大迎角风洞实验数据进行了洞壁干扰修正计算。修正中考虑了洞壁干扰修正量分布不均匀的影响 ,初步解决了大迎角实验洞壁干扰修正中最困难的力矩修正问题。

关键词 风洞实验 风洞壁 干扰 数据处理

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一种高速风洞三维洞壁干扰壁压信息修正法

9

作者 张其威 《航空学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1993年第8期B350-B355,共6页

给出以壁压信息法为基础的高速风洞三维模型试验洞壁干扰修正方法。该方法要求洞壁附近为亚音速流动,但允许模型附近出现超音速区及激波。方法可用于各种通气壁或实壁风洞的亚跨音速试验。最后对四个模型在三种试验段中的二十多种试验... 给出以壁压信息法为基础的高速风洞三维模型试验洞壁干扰修正方法。该方法要求洞壁附近为亚音速流动,但允许模型附近出现超音速区及激波。方法可用于各种通气壁或实壁风洞的亚跨音速试验。最后对四个模型在三种试验段中的二十多种试验进行了修正,其结果和NASA非线性修正方法的结果吻合得很好。 展开更多

关键词 风洞试验 洞壁干扰 跨音速流

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高速风洞洞壁干扰减小与修正研究

10

作者 张其威 黄奕裔 《气动实验与测量控制》 CSCD 1993年第4期17-27,共11页

亚跨声速风洞试验的洞壁干扰问题是影响风洞试验结果准确度的一个重要因素。南京航空学院 NH-1高速风洞首先使用了两种可变开闭比风洞壁来减小洞壁干扰,然后发展了一系列用壁压信息法对剩余洞壁干扰效应进行修正的方法。对国内外大量高... 亚跨声速风洞试验的洞壁干扰问题是影响风洞试验结果准确度的一个重要因素。南京航空学院 NH-1高速风洞首先使用了两种可变开闭比风洞壁来减小洞壁干扰,然后发展了一系列用壁压信息法对剩余洞壁干扰效应进行修正的方法。对国内外大量高速风洞实验数据进行了洞壁干扰修正,将降修正结果和 NASA 的非线性修正法结果、自修正风洞(近似无洞壁干扰)实验结果及无洞壁干扰的 N-S 方程计算结果进行了比较。结果表明,本文的修正方法结果正确,而计算量远远小于非线性修正方法的计算量。 展开更多

关键词 风洞试验 洞壁干扰 跨声速流动

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侧向喷流的气动增益特性研究 被引量：4

11

作者 程克明 伍贻兆 +1 位作者 吕英伟 张其威 《空气动力学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期432-438,共7页

本文实验研究了一种弹翼身组合体构型在亚、跨、超声速,不同动量比以及不同喷口布局条件下的侧向喷流气动增益情况。给出了来流马赫数、喷流动量比、喷口布局等对增益特性的影响。结果表明,马赫数和喷口布局对增益特性均有显著影响,但... 本文实验研究了一种弹翼身组合体构型在亚、跨、超声速,不同动量比以及不同喷口布局条件下的侧向喷流气动增益情况。给出了来流马赫数、喷流动量比、喷口布局等对增益特性的影响。结果表明,马赫数和喷口布局对增益特性均有显著影响,但本文定义的增益因子却基本与动量比无关。此外,对比分析了单独体构型和翼身组合体构型增益特性的差异,进一步揭示了主流、喷流在二者相互作用中的地位和影响。本文结果对认识侧向喷流干扰特性、气动增益、开发高效喷流姿态控制技术等有一定参考意义。 展开更多

关键词 侧向喷流 气动增益 导弹 翼身组合体

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TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测土拉弗朗西斯菌 被引量：3

12

作者 赵素慧 王春晖 +6 位作者 周莹 韦耀 韩桂圆 钮红岺 赵卫 张其威 万成松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期602-606,共5页

目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制... 目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制作定量标准曲线,并以合成fopA基因为模板,PF、PR为引物,研究其灵敏度、特异性和准确性。结果构建了含fopA基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在103～107拷贝数之间有较好的线性关系。灵敏度试验表明,该方法可检测到30.6个拷贝数的重组质粒,比普通PCR灵敏度高;特异性试验表明,能选择性检测土拉弗朗西斯菌,而与其他病原菌无交叉反应,与普通菌落PCR结果一致;重复性试验表明,拷贝数为3.06×106样品5次平行试验,标准差为0.201,变异系数为0.88%。结论本研究建立了TaqMan探针QF-PCR快速检测技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可用于快速、实时、定量检测土拉弗朗西斯菌,为快速检测生物战剂级微生物建立了一种人工合成特异基因TaqMan探针实时荧光定量PCR新方法。 展开更多

关键词 土拉弗朗西斯菌 TAQMAN探针 fopA基因 荧光定量PCR

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侧向喷流的一种直接实验模拟 被引量：4

13

作者 程克明 吕英伟 +1 位作者 张其威 程朴人 《流体力学实验与测量》 CSCD 北大核心 2002年第2期36-41,共6页

研究了侧向喷流的一种直接实验模拟技术,旨在探讨喷流力直接作用在天平上时,侧向喷流对气动载荷的影响及其增益情况。本文的直接模拟是通过一种通气式应变天平实现的。研究中分析了有关模拟原则,妥善处理了诸如高压气体密封、天平变形... 研究了侧向喷流的一种直接实验模拟技术,旨在探讨喷流力直接作用在天平上时,侧向喷流对气动载荷的影响及其增益情况。本文的直接模拟是通过一种通气式应变天平实现的。研究中分析了有关模拟原则,妥善处理了诸如高压气体密封、天平变形引发的漂移、干扰等相关技术问题,并在一尖拱柱构型上实现了多种条件下的直接模拟,给出了来流条件和喷口参数条件对法向力、俯仰力矩增益因子的影响。最后,就实验结果进行了适当讨论和评述。 展开更多

关键词 侧向喷流 实验模拟 风洞试验 喷流模拟 旋成体 气动载荷 飞行器

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跨音速风洞试验的Re数修正 被引量：1

14

作者 程克明 张其威 +1 位作者 黄奕裔 吕英伟 《航空学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1994年第11期1383-1385,共3页

根据跨音速摄动理论和边界层方程，就二维翼型跨音速试验中由尺度引发的Ｒｅ数效应提出了一种修正方法．该方法能将Ｒｅ数为１０￣６量级下得到的试验数据外推至Ｒｅ数为１０￣７量级的情况。与直接在高Ｒｅ数设备中得到的数据对比，结... 根据跨音速摄动理论和边界层方程，就二维翼型跨音速试验中由尺度引发的Ｒｅ数效应提出了一种修正方法．该方法能将Ｒｅ数为１０￣６量级下得到的试验数据外推至Ｒｅ数为１０￣７量级的情况。与直接在高Ｒｅ数设备中得到的数据对比，结果令人满意。 展开更多

关键词 跨音速流动 风洞试验 雷诺数

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WINDOWS环境下的风洞测量、控制、处理与管理系统 被引量：1

15

作者 韩珠凤 张其威 吕英玮 《流体力学实验与测量》 CSCD 1999年第4期67-73,共7页

用PC- 586 微机取代PDP系列机实现NEFF720 模拟和数字量数据采集及处理系统、风洞控制系统、PSI780B 电子扫描测压系统的全部功能。自行开发了32 位代码软件,使用标准WINDOWS风格的人机交互界面,中文显示,操作简便。引入虚拟仪器概念,... 用PC- 586 微机取代PDP系列机实现NEFF720 模拟和数字量数据采集及处理系统、风洞控制系统、PSI780B 电子扫描测压系统的全部功能。自行开发了32 位代码软件,使用标准WINDOWS风格的人机交互界面,中文显示,操作简便。引入虚拟仪器概念,适时图形显示实验进程及实验数据,可扩展成多媒体的风洞实验数据采集、马赫数控制、迎角控制、数据处理及风洞管理。 展开更多

关键词 WINDOWS 风洞实验 测量 控制 处理 管理

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液晶膜流动显示技术的试验研究

16

作者 赵宗辅 张其威 程朴人 《流体力学实验与测量》 CSCD 1997年第1期77-82,共6页

简要地介绍了一种新型的液晶膜流动显示技术，并且较全面地介绍在低紊流度风洞、低速风洞和高速风洞中，进行应用试验研究的情况。

关键词 流动显示 边界层转捩 液晶 风洞实验

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肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析 被引量：2

17

作者 韩朋 孙琦 +2 位作者 赵素慧 张其威 万成松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期904-908,共5页

目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46... 目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pKD46介导的Red重组系统,通过同源重组替换EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和测序验证;通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。 展开更多

关键词 EHEC O157 H7 ppk基因 RED重组系统 基因突变

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肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espF基因缺失株和回补株的构建 被引量：1

18

作者 华颖 孙琦 +5 位作者 王湘雨 杜艳丽 邵娜 张其威 赵卫 万成松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1546-1551,共6页

目的利用Red同源重组系统敲除肠出血型大肠埃希菌的esp F基因及其核苷酸片段;建立以p BAD 33质粒为载体的esp F基因回补实验平台。方法设计1对同源臂引物扩增卡那霉素抗性打靶片段,将抗性打靶片段电转入含有PKD46质粒的EDL933w,在PKD 4... 目的利用Red同源重组系统敲除肠出血型大肠埃希菌的esp F基因及其核苷酸片段;建立以p BAD 33质粒为载体的esp F基因回补实验平台。方法设计1对同源臂引物扩增卡那霉素抗性打靶片段,将抗性打靶片段电转入含有PKD46质粒的EDL933w,在PKD 46介导的重组系统帮助下,打靶片段和菌体esp F基因发生同源重组,PCR和测序验证;PCR扩增esp F及其核苷酸片段的整个ORF区序列,将其克隆入p BAD33质粒,分别将重组质粒转入相应的缺失株,以构建出相应的回补突变株。采用RT-PCR的方法验证在相应的回补突变株中esp F及其核苷酸片段是否转录。结果构建了esp F基因及其核苷酸片段缺失的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株和相应的回补株,且esp F基因及其核苷酸片段在回补株中均发生转录。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 esp F基因缺失株,并建立以p BAD33质粒为载体的EHEC O157:H7基因回补方法,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中esp F基因的调控机制奠定了基础。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 espF基因 同源重组 突变株 基因回补

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高速风洞大迎角壁压修正法的实验验证

19

作者 张其威 陈震 《气动研究与实验》 1995年第1期36-45,共10页

本文介绍一种改进的高速风洞大迎角壁压法，本法不仅计算风洞干扰速度分量在模型区内的分布及平均值，而且进行了模型气动力和力矩的修正。在力和力矩修中考虑了洞壁干扰量分布不均匀的影响。用本法对Ｍ〈０．９的实际飞机大堵塞化模型... 本文介绍一种改进的高速风洞大迎角壁压法，本法不仅计算风洞干扰速度分量在模型区内的分布及平均值，而且进行了模型气动力和力矩的修正。在力和力矩修中考虑了洞壁干扰量分布不均匀的影响。用本法对Ｍ〈０．９的实际飞机大堵塞化模型大迎角风洞实验数据进行了洞壁干扰修正计算，修正结果令人满意，初步解决了迎角风洞实验洞壁干扰修正中最困难的力矩正问题，由于使用壁压数据进行修正，本法可用于各种透气壁或实壁风洞。 展开更多

关键词 风洞试验 洞壁干扰 数据处理 大迎角壁压

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由尺度引发的Reymolds数效应修正的理论研究

20

作者 程克明 张其威 《气动研究与实验》 1994年第2期28-38,共11页

关键词 REYNOLDS数 飞行相关性 跨声速流动

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