TLR-4介导的鹅β-防御素1抗肠炎沙门菌感染的信号传导机制初探 被引量：1

1

作者 张名岳 张可心 +5 位作者 辛胜男 韩宗玺 邵昱昊 刘晓丽 刘胜旺 马得莹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1938-1948,共11页

为研究鹅β-防御素1(AvBD1)的生物学特性以及初步尝试探寻其抗肠炎沙门菌的作用机理,利用RT-PCR方法从鹅骨髓组织中扩增到鹅AvBD1基因片段,并将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-g... 为研究鹅β-防御素1(AvBD1)的生物学特性以及初步尝试探寻其抗肠炎沙门菌的作用机理,利用RT-PCR方法从鹅骨髓组织中扩增到鹅AvBD1基因片段,并将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-goose AvBD1。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鹅AvBD1蛋白在原核高效表达(相对分子质量约31ku)。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性。结果显示,鹅AvBD1基因cDNA片段大小为198bp,编码65个氨基酸残基。经相似性分析发现鹅AvBD1氨基酸序列与鸵鸟AvBD1氨基酸序列相似性最高,为77.1%,而且重组鹅AvBD1蛋白具有广谱的抗菌活性,对12种细菌(包括革兰阳性菌和革兰阴性菌)均具有抑菌作用。高盐离子浓度显著降低重组鹅AvBD1蛋白的抗菌活性,且该重组蛋白的溶血活性极低。试验表明,肠炎沙门菌确实会诱导鹅AvBD1基因在鹅骨髓组织中的表达,说明鹅AvBD1起到了抗肠炎沙门菌感染的作用,而这种作用有可能与TLR4介导的信号转导有关。 展开更多

关键词 鹅β-防御素1 重组蛋白 抗菌活性 TOLL样受体4 诱导表达

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鹅β-防御素10基因的分离、鉴定与表达 被引量：2

2

作者 周财源 张名岳 +3 位作者 韩宗玺 邵昱昊 刘胜旺 马得莹 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期999-1009,共11页

【目的】从鹅的组织中克隆鹅β-防御素10(avianβ-defensin 10,AvBD10)基因,通过大肠杆菌进行原核表达,检测重组鹅AvBD10蛋白的生物学特性。【方法】采用RT-PCR方法,从鹅的肾脏组织中扩增鹅AvBD10基因。根据已发现的禽β-防御素和部分... 【目的】从鹅的组织中克隆鹅β-防御素10(avianβ-defensin 10,AvBD10)基因,通过大肠杆菌进行原核表达,检测重组鹅AvBD10蛋白的生物学特性。【方法】采用RT-PCR方法,从鹅的肾脏组织中扩增鹅AvBD10基因。根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素的氨基酸序列构建系统进化树,进行遗传进化分析;并应用荧光定量的方法对该基因的组织表达水平进行鉴定。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,并对该重组蛋白进行纯化,测定体外生物学活性。【结果】从鹅肾脏组织中克隆出了鹅AvBD10基因,该基因的cDNA大小为207 bp,编码68个氨基酸。经遗传进化分析表明,该基因推导的氨基酸序列与鸭AvBD10的同源性最高,达92.7%。通过对重组蛋白抗菌活性的检测发现,该蛋白对12种致病性细菌均具有较强抑菌作用,但在高盐离子浓度下活性减弱。并且重组蛋白不具有溶血的特性。【结论】成功克隆并表达了鹅AvBD10基因,原核表达产物具有广谱的抗菌活性且不具有溶血特性。 展开更多

关键词 鹅AvBD10 克隆 遗传进化分析 组织表达 抗菌活性

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鸭β-防御素16的分离、鉴定及其抗病毒机制 被引量：1

3

作者 张可心 张名岳 +4 位作者 辛胜男 韩宗玺 邵昱昊 刘胜旺 马得莹 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第18期3873-3882,共10页

【研究目的】旨在克隆与表达鸭β-防御素16(AvBD16)基因及测定其生物学特性,监测了鸭肝炎病毒感染后麻鸭不同组织AvBD16与TLR-7的动态变化。【方法】采用RT-PCR方法,从鸭骨髓组织中扩增到鸭AvBD16,并将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-... 【研究目的】旨在克隆与表达鸭β-防御素16(AvBD16)基因及测定其生物学特性,监测了鸭肝炎病毒感染后麻鸭不同组织AvBD16与TLR-7的动态变化。【方法】采用RT-PCR方法,从鸭骨髓组织中扩增到鸭AvBD16,并将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对其重组和合成蛋白进行生物学活性测定。采用荧光定量PCR方法,分别检测了鸭肝炎病毒对鸭AvBD16和TLR-7在不同组织中表达量的影响。【结果】鸭AvBD16 cDNA大小为155bp,编码50个氨基酸残基,与鸡AvBD3氨基酸同源性最高,为62%。重组和合成鸭AvBD16蛋白对12种细菌均有不同程度的抑制作用,高盐浓度对其抗菌活性有一定影响,且溶血活性极低。重组AvBD16蛋白具有体外抗病毒活性。经鸭肝炎病毒诱导后,鸭AvBD16在肝脏及其他组织中被诱导表达或表达量显著上调,且与TLR7的表达量呈正相关。【结论】成功克隆并表达了鸭AvBD16基因,重组和合成AvBD16蛋白具有广谱的抗菌活性且不具有溶血特性。重组AvBD16蛋白具有抗鸭肝炎病毒的活性,体内抗病毒作用可能受TLR-7通路调节。 展开更多

关键词 鸭AvBD16 抗菌活性 抗病毒活性 信号传导

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数字化背景下企业品牌形象的传播策略 被引量：1

4

作者 张名岳 《鞋类工艺与设计》 2024年第11期150-152,共3页

在数字化时代,企业面临着如何在竞争日益激烈的市场中有效传播其品牌形象的挑战。随着信息技术的快速发展,传统的品牌传播策略已无法完全满足当前的市场需求,品牌必须采用创新的方法来增强其知名度、塑造独特的品牌特性,并提升其市场竞... 在数字化时代,企业面临着如何在竞争日益激烈的市场中有效传播其品牌形象的挑战。随着信息技术的快速发展,传统的品牌传播策略已无法完全满足当前的市场需求,品牌必须采用创新的方法来增强其知名度、塑造独特的品牌特性,并提升其市场竞争地位。本文详细探讨了数字化背景下品牌形象传播的3个主要策略:整合传播渠道以发挥协同效应,利用数据分析实现精准的受众定位,以及统一品牌形象以强化其管理连贯性,旨在有效应对信息泛滥、受众多样化,以及保持跨渠道一致性的挑战,从而提升其市场竞争力。 展开更多

关键词 品牌形象 数字化传播 跨渠道协同 数据分析 统一品牌管理

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死亡时间对雌性仔猪脑海马组织影响

5

作者 包军 张名岳 +5 位作者 李想 刘洪贵 李剑虹 高利 张晓卉 王博 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期42-49,共8页

为研究母猪脑海马死亡后变化情况,试验以同一遗传背景(杜×长×大)、体重及出生日龄相近的健康雌性仔猪作研究对象,采用核磁共振成像检测及光镜技术,检测母猪麻醉状态与死后10 min、1、2、3、6和10 h时段左侧、右侧海马体积,观... 为研究母猪脑海马死亡后变化情况,试验以同一遗传背景(杜×长×大)、体重及出生日龄相近的健康雌性仔猪作研究对象,采用核磁共振成像检测及光镜技术,检测母猪麻醉状态与死后10 min、1、2、3、6和10 h时段左侧、右侧海马体积,观察两侧海马齿状回区颗粒细胞形态,建立母猪死后海马形态学变化模型,为长期处于应激状态下妊娠母猪心理疾病的核磁共振诊断提供理论依据。核磁检测结果表明,仔猪死亡10 h内,与活体对照组海马体积比较,左侧海马体积无显著变化(P=0.901);右侧及总海马体积在死亡3 h内无显著性变化(右侧P=0.078;总P=0.104),但从死亡6 h开始显著变小(右侧P<0.01;总P<0.05);光镜观察表明,仔猪死亡3 h内,左侧及右侧海马齿状回区颗粒细胞形态与活体对照组相比,均未发生严重损害。死亡3 h内,仔猪脑海马组织无显著生理变化。 展开更多

关键词 核磁共振成像 雌性仔猪 海马体积 颗粒细胞 死亡时间

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视觉传达平面设计在构建品牌识别度中的作用研究

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作者 张名岳 《鞋类工艺与设计》 2024年第10期46-48,共3页

当今快速变化的市场环境中,视觉传达平面设计对于构建品牌识别度扮演着至关重要的角色。品牌识别度关系到消费者感知和记忆品牌,还直接影响品牌的市场竞争力和长期发展。随着市场竞争的日益激烈以及消费者偏好的快速变化,传统的视觉设... 当今快速变化的市场环境中,视觉传达平面设计对于构建品牌识别度扮演着至关重要的角色。品牌识别度关系到消费者感知和记忆品牌,还直接影响品牌的市场竞争力和长期发展。随着市场竞争的日益激烈以及消费者偏好的快速变化,传统的视觉设计方法已经无法完全满足企业的需求。因此,探索通过视觉传达平面设计有效提升品牌识别度以及面对市场挑战时调整设计策略,成为品牌管理和市场营销研究中的重要课题。本文将系统分析视觉传达平面设计在提升品牌识别度中的作用,探讨当前设计实践中面临的主要问题,并提出相应的策略,旨在为企业提供科学的设计指导和建议,以更好地适应市场变化,优化品牌形象。 展开更多

关键词 视觉传达 平面设计 品牌识别度

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新媒体时代下视觉传达设计发展对策 被引量：2

7

作者 张名岳 《鞋类工艺与设计》 2023年第24期67-69,共3页

新媒体时代背景下,大众的审美要求和视觉文化欣赏水平不断提高,对视觉传达设计创新提出新要求。当前,媒介载体不断增多,艺术语言和视觉信息元素日渐丰富,能够为人们带来更加优质和完整的体验,满足人们的个性化需求。基于此,聚焦新媒体... 新媒体时代背景下,大众的审美要求和视觉文化欣赏水平不断提高,对视觉传达设计创新提出新要求。当前,媒介载体不断增多,艺术语言和视觉信息元素日渐丰富,能够为人们带来更加优质和完整的体验,满足人们的个性化需求。基于此,聚焦新媒体时代下视觉传达设计的薄弱环节,针对主要存在的不足,从设计理念、表现形式、作品内容等方面展开创新探索,提出具体的优化策略,推动视觉传达设计的全面更新。 展开更多

关键词 新媒体时代 视觉传达设计 视觉元素

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育幼经历对圈养成年雌性大熊猫尿液皮质醇含量的影响 被引量：2

8

作者 张晓卉 张名岳 +4 位作者 张萍 黄祥明 吴孔菊 兰景超 侯蓉 《四川动物》 北大核心 2022年第1期52-57,共6页

为研究育幼期不同的育幼方式对圈养成年雌性大熊猫Ailuropoda melanoleuca福利状况的影响情况,了解圈养育幼模式可能引发成年雌性大熊猫的应激问题,完善育幼期大熊猫的饲养管理和兽舍参数设计,提高育幼过程中圈养大熊猫福利状况,选择成... 为研究育幼期不同的育幼方式对圈养成年雌性大熊猫Ailuropoda melanoleuca福利状况的影响情况,了解圈养育幼模式可能引发成年雌性大熊猫的应激问题,完善育幼期大熊猫的饲养管理和兽舍参数设计,提高育幼过程中圈养大熊猫福利状况,选择成都大熊猫繁育研究基地育幼期采取不同育幼方式管理的成年雌性大熊猫为研究对象,利用酶联免疫吸附测定法对成年雌性大熊猫育幼前期(1~3个月)尿液皮质醇的含量进行检测。结果显示:育幼前期,采取人工辅助育幼方式的成年雌性大熊猫尿液中皮质醇的含量显著高于采取全母乳育幼方式,经产圈养成年雌性大熊猫尿液皮质醇的含量显著低于初产。这表明在当前圈养环境下,采取全母乳育幼的方式是对圈养成年雌性大熊猫应激较小且福利的育幼方式。 展开更多

关键词 圈养成年雌性大熊猫 育幼经历 尿液皮质醇 福利

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大熊猫白血病抑制因子RNAi干扰载体的构建及应用

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作者 李非平 刘玉良 +7 位作者 王神飞 张梦诗 胡贤彪 安俊辉 王东辉 张名岳 侯蓉 蔡开来 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2023年第6期609-615,共7页

旨在构建大熊猫白血病抑制因子(LIF)RNAi重组质粒,以期进一步研究LIF对大熊猫骨髓间充质干细胞(PDBM-MSCs)的调控作用.试验设计3组大熊猫LIF shRNA慢病毒pLKO.1 puro-LIF-down干扰载体,通过慢病毒的方式感染PDBM-MSCs,经q-PCR鉴定重组质... 旨在构建大熊猫白血病抑制因子(LIF)RNAi重组质粒,以期进一步研究LIF对大熊猫骨髓间充质干细胞(PDBM-MSCs)的调控作用.试验设计3组大熊猫LIF shRNA慢病毒pLKO.1 puro-LIF-down干扰载体,通过慢病毒的方式感染PDBM-MSCs,经q-PCR鉴定重组质粒pLKO.1 puro-LIF-down-1抑制效果最显著.pLKO.1 puro-LIF-down-1实验组和空质粒对照组比较发现,LIF mRNA表达水平抑制后能够显著下调细胞周期调控基因CDK2、CCNB2、CCND3的mRNA表达水平(P<0.05);显著上调凋亡基因P53、P16、P27、caspase3的mRNA表达水平(P<0.05);显著下调干性基因KLF4、SOX2的mRNA表达水平(P<0.05).以上结果表明,此次研究成功构建出大熊猫LIF RNAi干扰载体,LIF对PDBM-MSCs的生长和干性维持具有重要的调控作用,为大熊猫干细胞的体外培养及干性机制的研究奠定基础. 展开更多

关键词 大熊猫 LIF 骨髓间充质干细胞

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鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物的生物学特性 被引量：4

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作者 张名岳 周财源 +3 位作者 韩宗玺 邵昙昊 刘胜旺 马得莹 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1711-1721,共11页

为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因,并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白,进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性,利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段,其cDNA片段大小为182 bp,编码60个氨基酸残基。经同源性分析发现鹅AvBD... 为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因,并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白,进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性,利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段,其cDNA片段大小为182 bp,编码60个氨基酸残基。经同源性分析发现鹅AvBD3氨基酸序列与鸡AvBD3氨基酸序列同源性最高,为100%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的BamHⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-goose AvBD3。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鹅AvBD3蛋白在原核高效表达(分子量约31 kDa)。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性,结果显示,重组鹅AvBD3蛋白具有广谱的抗菌活性,对12种细菌,包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用。高盐离子浓度显著降低重组鹅AvBD3蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白的溶血活性极低,并对酸碱度具有较高的稳定性。 展开更多

关键词 鹅AvBD3 β一防御素3基因 分离 鉴定 表达产物 生物学特性

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鸽β-防御素5基因克隆及其抗菌活性 被引量：5

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作者 辛胜男 张可心 +5 位作者 张名岳 韩宗玺 邵昱昊 刘晓丽 刘胜旺 马得莹 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1294-1305,共12页

从鸽的骨髓和肝组织中扩增到2个禽β-防御素(AvBD)基因,在大肠杆菌中高效表达,检测其重组蛋白的抗菌活性。应用RT-PCR方法从鸽的骨髓和肝脏组织中扩增AvBD5基因,根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-5的氨基酸序列构建系... 从鸽的骨髓和肝组织中扩增到2个禽β-防御素(AvBD)基因,在大肠杆菌中高效表达,检测其重组蛋白的抗菌活性。应用RT-PCR方法从鸽的骨髓和肝脏组织中扩增AvBD5基因,根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-5的氨基酸序列构建系统进化树,将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对该重组蛋白进行纯化,测定体外抗菌活性与理化特性。测序得到这2个基因的cDNA大小均为201 bp,编码66个氨基酸残基,内含6个位置保守的半胱氨酸残基。经遗传进化分析发现,该基因推导的两组氨基酸序列与鸭AvBD5的同源性最高,分别为87.9%和78.8%,这两组氨基酸序列的同源性为83.3%。因此,将其分别命名为鸽AvBD5α(骨髓)和鸽AvBD5β(肝脏)。进一步将这两个基因分别亚克隆到大肠杆菌pGEX-6p-1载体中进行原核表达。两个重组融合蛋白经纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响,及其融合蛋白的溶血活性。结果表明,重组鸽AvBD 5α、AvBD 5β融合蛋白的分子量约为32 kDa。具有明显的抗菌活性,对12种细菌均有不同程度的抑制作用,高盐浓度对其抗菌活性显著影响。此外,这两个重组蛋白对红细胞无显著溶血活性。 展开更多

关键词 鸽β-防御素5 重组蛋白 抗菌活性

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小熊猫精原干细胞的分选与培养

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作者 封同英 刘玉良 +7 位作者 陈依娇 史可瑜 蔡志刚 王东辉 张名岳 李博琦 侯蓉 安俊辉 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期897-904,共8页

野生动物的保护手段主要包括就地保护、易地保护与离体保护。精原干细胞(SSCs)是雄性动物维持生殖能力的根本,既能通过自我更新产生新细胞,也能通过分化产生精子,在小熊猫(Ailurus fulgens)离体保护方面具有广阔的应用前景。动物睾丸中... 野生动物的保护手段主要包括就地保护、易地保护与离体保护。精原干细胞(SSCs)是雄性动物维持生殖能力的根本,既能通过自我更新产生新细胞,也能通过分化产生精子,在小熊猫(Ailurus fulgens)离体保护方面具有广阔的应用前景。动物睾丸中精原干细胞数量极少,分离纯化与体外培养对于其研究和应用至关重要。本研究选择整合素α6(ITGA6)蛋白作为精原干细胞分子标记,采用免疫磁珠分选(MACS)技术富集了3月龄小熊猫睾丸中的ITGA6阳性细胞。流式细胞术检测发现分选后ITGA6阳性细胞纯度可达74.27%±8.73%,显著高于分选前(32.60%±3.06%)。将分选后的细胞接种到层粘连蛋白包被的细胞培养板中,用含胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、表皮细胞生长因子(EGF)与成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养基进行体外培养。培养10 d后,在显微镜下可观察到典型的精原干细胞集落,结合逆转录PCR(RT-PCR)和细胞免疫荧光染色发现这些细胞集落特异性表达精原干细胞分子标记蛋白ITGA6、早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)和胸腺细胞分化抗原1(THY1),同时也表达生殖细胞标记蛋白VASA和DAZL。本研究结果证实,ITGA6可作为小熊猫精原干细胞的分子标记用于细胞分选富集,同时初步建立的培养体系也为小熊猫精子发生机制与应用研究提供材料。 展开更多

关键词 小熊猫 精原干细胞 免疫磁珠分选 细胞培养

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