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miR-370-3p在绵羊中的表达、生物信息学分析与靶基因预测
1
作者 王丹 张双双 +4 位作者 贾琪 张新玉 付佳棋 张立春 孙福亮 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-230,237,共6页
本研究以新吉细毛羊和小尾寒羊为实验动物,用实时荧光定量PCR检测miR-370-3p在绵羊不同组织中的表达变化;利用Mega11.0对miR-370-3p进行序列分析,并构建进化树;利用miRBase对脊椎动物的miR-370-3p序列进行检索,使用Ensembl数据库对miR-3... 本研究以新吉细毛羊和小尾寒羊为实验动物,用实时荧光定量PCR检测miR-370-3p在绵羊不同组织中的表达变化;利用Mega11.0对miR-370-3p进行序列分析,并构建进化树;利用miRBase对脊椎动物的miR-370-3p序列进行检索,使用Ensembl数据库对miR-370-3p进行定位;利用在线网站预测miR-370-3p的靶基因,并进行GO、KEGG分析。组织表达结果显示,miR-370-3p在2种绵羊1月份和10月份的皮肤组织中均存在显著差异;在2种绵羊同组织间均存在显著差异。miR-370-3p序列主要存在于哺乳动物,且在不同物种间高度保守;miR-370-3p共有315个靶基因;GO分析结果显示靶基因主要富集在蛋白质的自磷酸化、细胞核与细胞质的运输、神经元凋亡过程等方面;KEGG通路分析表明靶基因主要富集到MAPK信号通路、寿命调节通路和细胞内吞作用等,其中多个与毛囊生长发育相关的基因富集到相关通路之上。绵羊miR-370-3p在皮肤组织存在时空表达差异,在各组织间广泛表达,可能通过靶向MAPK信号通路及寿命调节等通路参与调控毛囊的生长发育。 展开更多
关键词 绵羊 miR-370-3p 靶基因 表达分析 生物信息学
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绵羊FecB基因高通量HRM检测方法的建立及准确性评价 被引量：1
2
作者 张立春 李梦姝 +4 位作者 王伟霞 李信涛 佟桂芝 海龙 潘志忠 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期331-336,共6页
为了建立绵羊FecB基因高通量检测HRM方法并对其准确性进行检验,实验首先采用基因组PCR产物直接测序法,分别筛选出BB、B+和++基因型基因组各2份,参照HRM原理分别设计检验引物H1和H2并进行系统检验分析。分析结果发现,使用H1引物扩增效率... 为了建立绵羊FecB基因高通量检测HRM方法并对其准确性进行检验,实验首先采用基因组PCR产物直接测序法,分别筛选出BB、B+和++基因型基因组各2份,参照HRM原理分别设计检验引物H1和H2并进行系统检验分析。分析结果发现,使用H1引物扩增效率及特异性良好,但不能分辨BB基因型,而使用H2引物扩增效率及特异性良好,且能够有效识别3种基因型。扩大检验群体发现,使用H2引物的HRM技术重复性良好。以基因组PCR产物直接测序结果为参考标准,检验HRM方法的准确性发现BB基因型检验敏感度为75%,B+和++基因型敏感性分别为96.2%和100%,总体准确率为96.9%,证实该方法能够满足育种实践对检测技术准确性的要求。绵羊FecB基因HRM检验方法的建立为高繁殖性状肉羊育种提供了新的技术工具。 展开更多
关键词 绵羊 FECB基因 高分辨率溶解曲线法 基因组PCR 测序
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新农科背景下动物解剖学课程“123X”教学模式的创新与实践 被引量：3
3
作者 呼显生 李沐森 +5 位作者 张立春 张恒军 伊淑帅 谢晓飞 周婷 尹柏双 《畜牧兽医杂志》 2023年第4期135-138,共4页
本研究以培养新农科背景下畜牧兽医行业一线急需的应用型人才为目标,结合动物解剖学课程特点,构建了“一中心、二平台、三路径、多环节”(123X)课程教学模式,以学生综合能力培养为中心,利用线上教学平台和线下实验实习平台,采用线上虚... 本研究以培养新农科背景下畜牧兽医行业一线急需的应用型人才为目标,结合动物解剖学课程特点,构建了“一中心、二平台、三路径、多环节”(123X)课程教学模式,以学生综合能力培养为中心,利用线上教学平台和线下实验实习平台,采用线上虚拟仿真项目与课程网络资源结合、线下实体解剖、解剖协会第二课堂三路径,通过思政融入课程、虚拟仿真实验融入实验教学等多环节,激发学生学习积极性和主动性,培养学生综合能力,形成了具有推广示范效应的动物解剖学课程教学典型经验。 展开更多
关键词 犬 乳腺导管 乳头状癌 诊断 治疗
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采用GFP标记筛选抑制多血清型口蹄疫病毒3C基因表达的siRNA
4
作者 张志彬 张健 +3 位作者 贺明 高倍瑶 贾琪 张立春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期1-5,共5页
为筛选出可抑制多种血清型口蹄疫病毒(FMDV)的小干扰RNA(siRNA),本试验通过多血清型口蹄疫病毒序列比对与siRNA设计分析,筛选出潜在抗多血清型siRNA位点;通过体外合成A型、O型和Asia I型病毒部分基因序列,制备绿色荧光蛋白(GPF)基因融... 为筛选出可抑制多种血清型口蹄疫病毒(FMDV)的小干扰RNA(siRNA),本试验通过多血清型口蹄疫病毒序列比对与siRNA设计分析,筛选出潜在抗多血清型siRNA位点;通过体外合成A型、O型和Asia I型病毒部分基因序列,制备绿色荧光蛋白(GPF)基因融合表达载体;将化学合成的siRNA与融合表达载体共转染,通过GFP观察、Western blot和实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)方法检验目标siRNA对融合基因的抑制效率。生物信息分析发现,多血清型口蹄疫病毒3C基因高度保守并存在潜在siRNA作用靶位,GFP-3C融合表达载体成功构建,与化学合成的siRNA1-3C共转染293T细胞,GFP观察发现,siRNA1-3C可有效抑制来源于A型、O型和Asia I型3C基因的GFP-3C荧光信号且持续时间达72 h,Western blot检测证实此结果。qRT-PCR检测发现,siRNA1-3C对3个GFP-3C融合基因转录水平抑制效率超85%,且作用可维持72 h。本试验利用GFP作为筛选标记成功筛选出1个作用于FMDV 3C基因的siRNA,为开发多血清型口蹄疫抑制剂提供参考依据。 展开更多
关键词 小干扰RNA(siRNA) 口蹄疫(FMD) 绿色荧光蛋白(GFP) 多血清型 3C基因
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工业危废焚烧处置的安全管理要点
5
作者 张立春 《化工管理》 2024年第4期84-86,共3页
近年来,随着经济总量的不断提高,中国工业危险废物的产生量也在逐年攀升。焚烧是工业危险废物处置的主要方式之一,运输、接收、贮存、处置等过程极易发生事故,对人体健康构成威胁或对大气、水资源、土壤等造成污染。文章分析中国工业危... 近年来,随着经济总量的不断提高,中国工业危险废物的产生量也在逐年攀升。焚烧是工业危险废物处置的主要方式之一,运输、接收、贮存、处置等过程极易发生事故,对人体健康构成威胁或对大气、水资源、土壤等造成污染。文章分析中国工业危险废物的现状,提出工业危废焚烧处置企业的安全管理重点环节,以期保证中国工业危废焚烧处置企业的长周期安全运行。 展开更多
关键词 工业危废 焚烧 安全 重点
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芦花鸡HDAC9基因CDS区克隆、生物信息学分析及组织表达分析 被引量：2
6
作者 李欣 石一鸣 +6 位作者 于永生 柳俭强 张琪 李文峰 吴伟东 张立春 赵中利 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期158-163,共6页
为探索组蛋白去乙酰化酶9(Histone Deacetylase 9,HDAC9)基因的功能,明确其在芦花鸡不同组织中的表达差异,实验采集芦花鸡各组织,克隆获得HDAC9基因完整CDS区,进行生物信息学分析及组织表达分析。结果显示,芦花鸡HDAC9基因CDS区长度为3 ... 为探索组蛋白去乙酰化酶9(Histone Deacetylase 9,HDAC9)基因的功能,明确其在芦花鸡不同组织中的表达差异,实验采集芦花鸡各组织,克隆获得HDAC9基因完整CDS区,进行生物信息学分析及组织表达分析。结果显示,芦花鸡HDAC9基因CDS区长度为3 210 bp,编码1 069个氨基酸;芦花鸡HDAC9基因氨基酸序列与號鹦鹉、绿头鸭及雉鸡位于一个分支,同源性较高,亲缘关系较近。HDAC9蛋白分子质量约为118.0 ku,分子式为C_(5145)H_(8261)N_(1499)O_(1613)S_(33),理论等电点为6.33,半衰期为30 h,HDAC9蛋白为水溶性蛋白;HDAC9蛋白存在信号肽,为分泌蛋白;共存在67个潜在的磷酸化位点;存在3个N-糖基化潜在位点。HDAC9蛋白二级结构由α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲组成,三级结构预测结果与其一致。实时荧光定量PCR结果显示,HDAC9基因在芦花鸡不同组织中表达水平存在显著差异,其中在胸肌中表达量最高,其次为睾丸。本实验结果为进一步探索HDAC9基因生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 芦花鸡 HDAC9 克隆 表达差异 生物信息学
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绵羊FGF9基因克隆、生物信息学与表达分析 被引量：1
7
作者 贾琪 高倍瑶 +3 位作者 王丹 张双双 夏广军 张立春 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期175-181,共7页
本研究旨在克隆绵羊FGF9基因并对其进行生物信息学分析,同时检测其在小尾寒羊和新吉细毛羊各个组织以及在不同月份皮肤组织中的表达分布。RT-PCR技术克隆绵羊FGF9基因,多种生物软件和在线工具进行生物信息学分析,qRT-PCR技术分析FGF9基... 本研究旨在克隆绵羊FGF9基因并对其进行生物信息学分析,同时检测其在小尾寒羊和新吉细毛羊各个组织以及在不同月份皮肤组织中的表达分布。RT-PCR技术克隆绵羊FGF9基因,多种生物软件和在线工具进行生物信息学分析,qRT-PCR技术分析FGF9基因表达谱。结果表明:本实验成功克隆出绵羊FGF9基因,该基因片段长1 070 bp,含有完整ORF区,编码完整FGF9蛋白序列。蛋白功能预测绵羊FGF9蛋白共208个氨基酸,其分子量为23.38 ku,理论等电点为7.06,为水溶性蛋白;存在21个潜在磷酸化位点,1个N-糖基化潜在位点,亚细胞定位其主要分布于内质网上。进化分析显示绵羊与山羊亲缘性较近,亲缘性最远的是亚洲水牛。FGF9基因在2个品种绵羊各个组织中均有表达,在小尾寒羊肾脏组织中表达量显著高于其他组织,在新吉细毛羊心脏组织中表达量显著高于其他组织。FGF9基因在2个品种绵羊不同月份皮肤组织中表现为相似的表达模式,总体表现为夏季维持较高表达水平。提示FGF9基因可作为进一步研究绵羊羊毛生长发育及性状构成的候选基因。 展开更多
关键词 FGF9 新吉细毛羊 小尾寒羊 基因克隆
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吉林地方鸡H-FABP基因多态性及其与屠宰性能、肉品质的关联分析 被引量：1
8
作者 丛含羽 张俪萍 +4 位作者 李旭 柳俭强 安鼎杰 刘臣 张立春 《中国家禽》 北大核心 2023年第4期1-7,共7页
为研究吉林地方鸡H-FABP基因多态性及其对屠宰性能和肉质性状的影响,试验通过基因组PCR测序鉴定出H-FABP基因部分片段SNP位点,并采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)技术对特定多态位点在吉林芦花鸡、矮脚芦花鸡和吉林黑鸡3个亲本群体及... 为研究吉林地方鸡H-FABP基因多态性及其对屠宰性能和肉质性状的影响,试验通过基因组PCR测序鉴定出H-FABP基因部分片段SNP位点,并采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)技术对特定多态位点在吉林芦花鸡、矮脚芦花鸡和吉林黑鸡3个亲本群体及正反交6个群体多态性进行了检验,最后对上述9个群体的肉品质及屠宰性能进行了相关性分析。结果显示:H-FABP基因后段存在8个单碱基SNP位点和1处碱基插入位点,其中g.2892 C>T位点位于外显子3,并导致编码氨基酸由丝氨酸(TCG)突变为亮氨酸(TTG)。g.3173G>A和g.3234~3254位于外显子4中,但所处区域为基因3′UTR区,其余SNP均位于内含子区。KASP技术对不同群体g.2980G>A位点多态性分析发现不同群体三种基因型频率差异较大,但卡方检验分析发现仅在3个群体(LL,AA和HA)该位点处于Hardy-Weinberg不平衡状态。进一步针对不同群体屠宰性能和肉品质进行相关分析发现,不同群体中该位点对不同屠宰性能和肉品质相关性存在差异。本试验证实吉林地方鸡H-FABP基因存在丰富的遗传多样性,且个别位点与屠宰及肉质性状存在一定的相关性。 展开更多
关键词 吉林芦花鸡 矮脚芦花鸡 吉林黑鸡 H-FABP基因 多态性
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体外诊断的利器:化学发光免疫技术 被引量：3
9
作者 苏彦妮 吕弋 张立春 《大学化学》 CAS 2023年第1期141-148,共8页
人体的血液、体液和组织等样本具有丰富的信息,通过对其中的相关指标进行检测可以了解人体的患病或机体情况,这种手段被称为“体外诊断”。免疫诊断在体外诊断中占据重要的地位,而化学发光免疫分析法是免疫诊断的主流技术之一,基于抗体... 人体的血液、体液和组织等样本具有丰富的信息,通过对其中的相关指标进行检测可以了解人体的患病或机体情况,这种手段被称为“体外诊断”。免疫诊断在体外诊断中占据重要的地位,而化学发光免疫分析法是免疫诊断的主流技术之一,基于抗体抗原的特异性结合原理,化学发光免疫分析法具有较好的特异性和灵敏度,在临床上不断普及,同时在食品和环境安全等领域也有应用。本文简要介绍了几大体外诊断技术,重点综述了化学发光免疫分析法的原理、分类、应用领域和发展趋势。 展开更多
关键词 体外诊断 免疫分析 化学发光免疫分析法 原理 分类 应用
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绵羊SMAD 4基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究
10
作者 王丹 张新玉 +5 位作者 付佳棋 贾琪 张双双 崔成都 张立春 孙福亮 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4783-4792,共10页
【目的】克隆绵羊SMAD同源物4(SMAD4)基因并探究其在绵羊中的生物学功能,为研究SMAD 4基因在毛囊生长发育过程中的调控作用提供依据。【方法】以小尾寒羊皮肤组织cDNA为模板,PCR扩增SMAD 4基因CDS区并克隆测序,对其进行生物信息学分析;... 【目的】克隆绵羊SMAD同源物4(SMAD4)基因并探究其在绵羊中的生物学功能,为研究SMAD 4基因在毛囊生长发育过程中的调控作用提供依据。【方法】以小尾寒羊皮肤组织cDNA为模板,PCR扩增SMAD 4基因CDS区并克隆测序,对其进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR检测SMAD 4基因在小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、皮肤和肌肉中的表达量。【结果】试验成功克隆小尾寒羊SMAD 4基因CDS区,长1662 bp,编码553个氨基酸。系统进化树分析显示,绵羊SMAD 4基因核苷酸序列与山羊和牦牛的亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。生物信息学分析发现,SMAD4蛋白为不含信号肽的非跨膜蛋白,存在磷酸化和糖基化位点,属于亲水性蛋白,主要存在于细胞核中;SMAD4蛋白二级结构以无规则卷曲为主,与三级结构预测结果一致;蛋白互作分析显示,SMAD4蛋白与SMAD2、SMAD1、TGFBR1、TGFBR2、SMAD3等蛋白存在相互作用。实时荧光定量PCR结果显示,SMAD 4基因在绵羊中广泛表达;与新吉细毛羊相比,小尾寒羊心脏、脾脏和皮肤中SMAD 4基因表达量均显著上升(P<0.05),而肺脏和肌肉中SMAD 4基因表达量均显著下降(P<0.05)。【结论】试验成功克隆绵羊SMAD 4基因CDS区,该基因在绵羊各组织中均有表达,且在小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、脾脏、皮肤、肺脏和肌肉中存在显著差异。试验结果为进一步探究绵羊SMAD 4基因调控毛囊发育提供理论依据。 展开更多
关键词 绵羊 SMAD 4基因 克隆 生物信息学 表达
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新吉细毛羊和小尾寒羊差异表达miRNAs筛选与调控网络分析
11
作者 张新玉 王丹 +4 位作者 杨霞 付佳棋 曹阳 张立春 孙福亮 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3480-3489,共10页
【目的】筛选新吉细毛羊和小尾寒羊体内差异微小RNAs(microRNAs,miRNAs),研究miRNAs和靶基因对羊毛纤维机制表达的调控模式。【方法】选取两种毛细度存在显著差异的新吉细毛羊(XFWS)和小尾寒羊(SXW),采集血浆中外泌体进行转录组测序,构... 【目的】筛选新吉细毛羊和小尾寒羊体内差异微小RNAs(microRNAs,miRNAs),研究miRNAs和靶基因对羊毛纤维机制表达的调控模式。【方法】选取两种毛细度存在显著差异的新吉细毛羊(XFWS)和小尾寒羊(SXW),采集血浆中外泌体进行转录组测序,构建文库并鉴定miRNAs,使用edgeR包对miRNAs进行差异表达分析,使用miRanda和Targetscan软件预测miRNAs的靶基因,对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,对差异miRNAs靶基因进行miRNAs-mRNA互作调控网络分析,使用实时荧光定量PCR对转录组数据中miRNAs进行验证。【结果】新吉细毛羊和小尾寒羊血浆外泌体中存在1019个miRNAs,其中已知miRNAs 112个,新预测miRNAs 907个,经筛选存在差异表达miRNAs 364个,其中与羊毛细度呈正相关性基因62个,呈负相关性基因302个。经多数据库比对获得靶基因的注释信息18996个,GO功能富集分析显示,17193个注释靶基因富集到6608个条目中;KEGG通路分析显示其富集在276个通路之中,经蛋白互作分析找到与羊毛纤维机制表达相关miRNAs 5个及靶基因42个。实时荧光定量PCR验证差异miRNAs结果显示,oar-miR-218a、oar-miR-370-3p、oar-miR-133、oar-miR-29a、oar-miR-27a、oar-miR-485-3p、oar-miR-22-3p、oar-miR-23a、oar-miR-148a、oar-miR-412-3p在新吉细毛羊体内表达量均显著高于小尾寒羊(P<0.05),oar-miR-26a、oar-miR-29b、oar-miR-329b-3p、oar-miR-409-3p、oar-miR-30a-3p在小尾寒羊体内表达量均显著高于新吉细毛羊(P<0.05),与转录组测序结果一致。【结论】新吉细毛羊和小尾寒羊体内存在oar-miR-218a、oar-miR-370-3p、oar-miR-133等364个差异miRNAs,其中oar-miR-133、oar-miR-150、oar-miR-127、oar-miR-23a、oar-miR-370-3p与其42个靶基因共同参与羊毛纤维机制表达,FGFR2、NOTCH1、SHH参与多通路调节,在联级调节中起重要作用。 展开更多
关键词 新吉细毛羊 小尾寒羊 血浆 外泌体 MIRNAS
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绵羊卷曲受体1基因克隆、表达谱与多态性分析
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作者 张双双 贾琪 +4 位作者 王丹 王卓 柳俭强 张立春 戢爽 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4805-4815,共11页
【目的】获得绵羊卷曲受体1(frizzled 1,FZD1)基因CDS序列,确定其生物学功能,探索其多态性并明确其在不同品种不同组织中的表达差异。【方法】采集小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和皮肤组织,提取总RNA并反转录... 【目的】获得绵羊卷曲受体1(frizzled 1,FZD1)基因CDS序列,确定其生物学功能,探索其多态性并明确其在不同品种不同组织中的表达差异。【方法】采集小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和皮肤组织,提取总RNA并反转录成cDNA。依据NCBI数据库中绵羊FZD 1基因预测序列(登录号:XM_027968435.2)设计引物,以小尾寒羊皮肤组织cDNA为模板,采用TA克隆获得目的基因序列,并对序列进行生物信息学分析,预测其可能编码的蛋白质结构和功能;利用实时荧光定量PCR检测FZD 1基因在小尾寒羊和新吉细毛羊不同组织中的表达差异;采用测序和高分辨熔解曲线(high resolution melting analysis,HRM)进行多态性检测,确定可能存在的单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphisms,SNP)位点。【结果】成功克隆出绵羊FZD 1基因CDS区,序列全长为1941 bp,编码646个氨基酸。绵羊FZD1氨基酸序列与山羊相似性最高,为99.5%,与人的相似性最低,为96.7%;系统进化树结果显示,绵羊FZD1与山羊亲缘关系最近,与人亲缘关系最远。FZD1蛋白含有7个跨膜结构域,42个磷酸化位点和2个N-糖基化位点,主要分布在细胞膜上。FZD1蛋白二级结构预测结果显示,无规则卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角分别占48.30%、35.15%、15.02%和1.55%,与预测的三级结构一致。实时荧光定量PCR结果显示,小尾寒羊FZD 1基因在肌肉和皮肤组织中的表达量显著高于新吉细毛羊,在心脏和肺脏中的表达量显著低于新吉细毛羊(P<0.05)。FZD 1基因在2个品种羊的肺脏和皮肤中的表达量均最高,且显著高于其他组织(P<0.05)。测序结果及HRM验证显示,FZD 1基因第1273和1276 bp位点处存在2个SNPs(g.9443455和g.9443458),这2个SNPs为完全连锁不平衡状态,仅存在2种单倍型,2个SNPs位点均为中度多态。【结论】FZD 1基因CDS全长1941 bp,编码646个氨基酸。FZD1蛋白作为位于细胞膜上的七跨膜受体蛋白,存在42个可能的磷酸化位点,推测FZD1的信号传导是通过磷酸化和去磷酸化进行的;FZD 1基因在小尾寒羊的皮肤组织中表达量最高,提示FZD 1基因可能参与毛囊发育的调控。 展开更多
关键词 小尾寒羊 FZD 1基因 生物信息学 组织表达 SNP
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人工智能助力学生良好行为习惯培养的实践研究
13
作者 王瑞 张立春 《华夏教师》 2024年第1期27-29,共3页
本文以大数据时代背景下人工智能在学生行为习惯培养中的应用为研究方向,阐述了运用人工智能助力培养学生良好习惯的具体措施、人工智能助力学生良好习惯的实践意义,为学生行为习惯培养融入人工智能发展提供理论依据。
关键词 人工智能 行为习惯 智慧德育平台
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小尾寒羊与新吉细毛羊羊毛及毛囊性状比较研究 被引量：11
14
作者 张立春 孙福亮 +4 位作者 金海国 曹阳 魏天 朴庆林 张明新 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2017年第9期52-56,共5页
为进一步验证小尾寒羊与新吉细毛羊毛用性状与毛囊性状差异。本研究选择9月龄小尾寒羊与新吉细毛羊母羊各8只,在相同饲养环境下测定毛用性状及毛囊性状并分析两者间的差异,最后用定量PCR方法检测不同月份2个品种绵羊毛囊周期分子的表达... 为进一步验证小尾寒羊与新吉细毛羊毛用性状与毛囊性状差异。本研究选择9月龄小尾寒羊与新吉细毛羊母羊各8只,在相同饲养环境下测定毛用性状及毛囊性状并分析两者间的差异,最后用定量PCR方法检测不同月份2个品种绵羊毛囊周期分子的表达变化趋势。结果表明:小尾寒羊在主要毛用性状,包括产毛量(GFW)、毛细度(FD)、拉伸长度(SL)、卷曲度及油脂率等大部分指标均极显著低于新吉细毛羊(P<0.01);组织切片法测定小尾寒羊与新吉细毛羊毛囊制表显示,小尾寒羊毛囊密度、S/P值等极显著低于新吉细毛羊(P<0.01),但在皮肤厚度、初级毛囊、次级毛囊毛乳头直径等显著高于新吉细毛羊;毛囊周期标记分子定量PCR显示,不同季节小尾寒羊与新吉细毛羊LEF1和TGF-β1基因总体变化趋势相同,但小尾寒羊变化更为剧烈,说明气候等外界因素对小尾寒羊毛囊周期影响大于新吉细毛羊。本研究证明小尾寒羊与新吉细毛羊的毛用性状、毛囊性状存在极显著差异,TGF-β1为进一步探讨小尾寒羊与新吉细毛羊毛用性状表型差异分子遗传基础研究奠定基础。 展开更多
关键词 新吉细毛羊 小尾寒羊 羊毛性状 毛囊性状
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在化学综合创新实验教学中引入科学研究的探索 被引量：21
15
作者 张立春 吕弋 +1 位作者 衣晓凤 宋红杰 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2019年第12期191-196,共6页
从培养学生综合素质角度出发,结合科研与实验教学工作,设计了兼具综合性与设计性的大学化学创新实验“挥发性有机化合物催化发光气体传感器及分析方法”。本实验涉及化学、材料和环境等多个学科的相关知识点,内容相互交叉渗透,既更新了... 从培养学生综合素质角度出发,结合科研与实验教学工作,设计了兼具综合性与设计性的大学化学创新实验“挥发性有机化合物催化发光气体传感器及分析方法”。本实验涉及化学、材料和环境等多个学科的相关知识点,内容相互交叉渗透,既更新了现有的教学内容,又有利于提高学生实验动手、科学思维、创新和解决实际问题等方面的能力。 展开更多
关键词 综合设计实验 纳米材料 催化发光 气体传感器 挥发性有机化合物
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绵羊VEGF-C基因可变剪切体克隆与序列分析 被引量：5
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作者 张立春 李梦姝 +4 位作者 曹阳 孙福亮 朴庆林 金海国 张明新 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期89-92,共4页
为克隆不同品种绵羊血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因,探寻该基因与绵羊毛囊发育及毛用性状形成的内在关系,本实验利用RT-PCR方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出VEGF-C基因mRNA并进行生物信息学分析。以皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR... 为克隆不同品种绵羊血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因,探寻该基因与绵羊毛囊发育及毛用性状形成的内在关系,本实验利用RT-PCR方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出VEGF-C基因mRNA并进行生物信息学分析。以皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR扩增显示存在多个扩增条带,克隆测序结果发现所有条带均为VEGF-C基因序列。除最长片段为全长VEGF-C基因外,其他均为VEGF-C异构体,片段长度依次为1 318、1 298、1 197、890、732、604 bp。所有异构体均表现为序列中间部位的缺失,分析显示各异构体由不同类型的可变剪切方式组合加工产生。氨基酸分析发现大部分异构体造成移码突变,编码类VEGF-C蛋白小肽,推测可能参与VEGF-C蛋白成熟或功能调节。本研究首次证明VEGF-C基因在绵羊皮肤组织存在复杂的转录后加工过程,为进一步研究VEGF家族在绵羊皮肤组织中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子C 新吉细毛羊 小尾寒羊 基因克隆 可变剪切
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不同慢性阻塞性肺疾病综合分组间的焦虑抑郁调查 被引量：9
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作者 张立春 汪伟 +1 位作者 李艳斐 高峰 《医学研究杂志》 2014年第10期148-150,共3页
目的探讨不同慢性阻塞性肺疾病(COPD)综合分组间的焦虑、抑郁发生率。方法对147例住院患者进行基本信息登记、COPD综合分组及焦虑抑郁自评量表(SDS、SAS)问卷调查。结果 147例COPD住院患者中,焦虑发生率为68.02%(100/147),抑郁发生率为5... 目的探讨不同慢性阻塞性肺疾病(COPD)综合分组间的焦虑、抑郁发生率。方法对147例住院患者进行基本信息登记、COPD综合分组及焦虑抑郁自评量表(SDS、SAS)问卷调查。结果 147例COPD住院患者中,焦虑发生率为68.02%(100/147),抑郁发生率为59.86%(88/147)。COPD综合分组中,D组患者的SDS、SAS得分最高,焦虑、抑郁的发生率最高,与其他3组比较有统计学差异(P<0.01)。Logistic多因素回归分析,COPD综合分组越差的患者越易出现焦虑、抑郁(OR值分别为2.879,3.379。结论不同COPD综合分组间的焦虑抑郁发生率比较有统计学差异。应早期识别和及时治疗COPD患者的心理疾病,提高治疗效果。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 抑郁 焦虑 焦虑自评量表 抑郁自评量表
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绵羊FGF5基因Exon 3多态性对毛用性状的影响 被引量：6
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作者 张立春 尹峰 +6 位作者 柳俭强 李梦姝 王春昕 曹阳 朴庆林 金海国 张明新 《中国草食动物科学》 CAS 2018年第6期1-5,共5页
为探寻不同细毛羊品种FGF5基因多态性及其对毛用性状的影响,采用PCR-SSCP方法对苏博美利奴羊和东北细毛羊两个群体的FGF5基因Exon 3区进行了多态性分析,并在苏博美利奴羊群体中对不同基因型个体与其毛用性状进行了差异显著性分析。结果... 为探寻不同细毛羊品种FGF5基因多态性及其对毛用性状的影响,采用PCR-SSCP方法对苏博美利奴羊和东北细毛羊两个群体的FGF5基因Exon 3区进行了多态性分析,并在苏博美利奴羊群体中对不同基因型个体与其毛用性状进行了差异显著性分析。结果表明:苏博美利奴羊群体FGF5基因Exon 3区存在5种基因型,分别是DD、EE、FF、DE和EF,而东北细毛羊群体只存在DD、EE和DE三种基因型;苏博美利奴羊F等位基因由CDs区c.618和c.733多态位点构成,其中c.733位点C->G突变导致E等位基因型个体氨基酸L->V变异。苏博美利奴羊群体只有FF基因型个体在产毛量指标上显著高于DD基因型个体(P<0.05)。不同毛用绵羊品种FGF5基因多态性及其与毛用性状相关性的研究可为利用FGF5基因进行毛用性状选育奠定基础。 展开更多
关键词 苏博美利奴羊 东北细毛羊 FGF5 羊毛性状 基因多态性
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具有HI活性的抗H5亚型流感病毒特异性单克隆抗体的研制 被引量：4
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作者 张立春 邓国华 +3 位作者 刘振勇 田国彬 于康震 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期329-332,共4页
以H5N1亚型禽流感病毒分离株A/Duck/Zhejiang/11/00(H5N1)(DZJ/1100)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑制(HI)方法进行检测,阳性细胞株经三代克隆纯化后,获得三株... 以H5N1亚型禽流感病毒分离株A/Duck/Zhejiang/11/00(H5N1)(DZJ/1100)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑制(HI)方法进行检测,阳性细胞株经三代克隆纯化后,获得三株能稳定分泌抗血凝素特异性HI单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为DD7、FG10、CG12。三株杂交瘤细胞株产生的小鼠腹水和细胞培养液上清的HI滴度分别是213、215、211和278、、23。与其他具有血凝活性的禽类病毒以及其他14个HA亚型的禽流感病毒的交叉HI试验表明:这三株单抗具有良好的禽流感病毒亚型特异性;与其他H5亚型流感病毒分离株的HI试验和中和试验证实这三株单抗具有良好的交叉性(分别为7/8、8/8、8/8)和中和活性(6/8、8/8、8/8)。该亚型特异性单克隆抗体的研制成功为H5亚型禽流感病毒的疫情病原学快速诊断提供了坚实的物质保障。 展开更多
关键词 禽流感 血凝抑制试验 单克隆抗体
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尿中百草枯半定量试验对急性百草枯中毒患者的预后评估 被引量：4
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作者 张立春 刘伟 +1 位作者 刘振宁 王煜 《实用药物与临床》 CAS 2017年第6期683-686,共4页
目的研究尿中百草枯(Paraquat,PQ)半定量试验对急性PQ中毒严重程度评估的意义。方法依据尿中PQ半定量试验结果,将186例PQ中毒病例分为+组(37例)、++组(25例)、+++组(27例)和++++组(97例),比较四组病例的临床特征、肝肾损害及呼吸衰竭的... 目的研究尿中百草枯(Paraquat,PQ)半定量试验对急性PQ中毒严重程度评估的意义。方法依据尿中PQ半定量试验结果,将186例PQ中毒病例分为+组(37例)、++组(25例)、+++组(27例)和++++组(97例),比较四组病例的临床特征、肝肾损害及呼吸衰竭的情况,用Kaplan-Meier法进行生存率分析。结果 186例PQ中毒患者死亡92例,病死率为49.46%。+组病例无严重并发症,++++组病例急性呼吸、肝肾衰竭发生率明显高于其他组,差异均有统计学意义(P<0.05)。尿中PQ浓度和肝、肾功能异常显著相关(r肾脏功能=0.756,r肝功能=0.574,P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析显示,++++组病死率(78.35%)明显高于+++组(55.56%)、++组(4.0%)和+组(0%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿PQ半定量试验可较好判断急性PQ中毒的严重程度,可对急性PQ中毒患者指导治疗,预测预后。 展开更多
关键词 百草枯 中毒 百草枯半定量试验 预后评价
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