将Ⅰ型鸭肝炎鸡胚化弱毒MY株进行纯粹检验；以100ELD50 0．2mL／枚（含病毒3．0×10^5个拷贝）剂量经鸡胚尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚，每隔12h观察并采集鸡胚胚体和尿囊液样本，运用自行建立的检测DHV-1的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT...将Ⅰ型鸭肝炎鸡胚化弱毒MY株进行纯粹检验；以100ELD50 0．2mL／枚（含病毒3．0×10^5个拷贝）剂量经鸡胚尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚，每隔12h观察并采集鸡胚胚体和尿囊液样本，运用自行建立的检测DHV-1的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法检测MY株弱毒的鸡胚增殖规律．结果表明，该毒种符合我国的兽用生物制品规程，毒种纯粹；病毒接种后，鸡胚死亡时间主要集中在48-53h；病毒在感染后的12h，24h，36h，48h和53h时段，鸡胚尿囊液中病毒拷贝数为：3．28×10^2、5．28×10^3、7．01×10^3、3．31×10^5和4.42×10^5；鸡胚胚体病毒拷贝数为：8．46×10^3、1．91×10^6、3．41×10^6、1．36×10^7和1．03×10^7;显示，MY株弱毒经鸡胚尿囊腔接种鸡胚，病毒在胚体中的拷贝数在各时间均高于尿囊液中的拷贝数，且在48-53h达到高峰（1．36×10^7-1．03×10^7）．因此，用鸡胚繁殖MY株弱毒，应以收获鸡胚胚体为主要毒源，收毒时间以鸡胚尿囊腔接种后48～53h为佳．为运用MY株生产Ⅰ型鸭病毒性肝炎弱毒疫苗奠定了基础．展开更多
文摘将Ⅰ型鸭肝炎鸡胚化弱毒MY株进行纯粹检验；以100ELD50 0．2mL／枚（含病毒3．0×10^5个拷贝）剂量经鸡胚尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚，每隔12h观察并采集鸡胚胚体和尿囊液样本，运用自行建立的检测DHV-1的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法检测MY株弱毒的鸡胚增殖规律．结果表明，该毒种符合我国的兽用生物制品规程，毒种纯粹；病毒接种后，鸡胚死亡时间主要集中在48-53h；病毒在感染后的12h，24h，36h，48h和53h时段，鸡胚尿囊液中病毒拷贝数为：3．28×10^2、5．28×10^3、7．01×10^3、3．31×10^5和4.42×10^5；鸡胚胚体病毒拷贝数为：8．46×10^3、1．91×10^6、3．41×10^6、1．36×10^7和1．03×10^7;显示，MY株弱毒经鸡胚尿囊腔接种鸡胚，病毒在胚体中的拷贝数在各时间均高于尿囊液中的拷贝数，且在48-53h达到高峰（1．36×10^7-1．03×10^7）．因此，用鸡胚繁殖MY株弱毒，应以收获鸡胚胚体为主要毒源，收毒时间以鸡胚尿囊腔接种后48～53h为佳．为运用MY株生产Ⅰ型鸭病毒性肝炎弱毒疫苗奠定了基础．
