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免疫杀手细胞的体外扩增方法及其对肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用
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作者 王生育 罗芳洪 +4 位作者 倪二茹 吕海燕 支黎明 颜江华 张顺浪 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2012年第2期121-124,128,共5页
目的:探讨免疫杀手细胞(immune-killer cells,IKCs)的体外扩增方法及其对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用。方法:改良自然杀伤细胞培养扩增法扩增IKCs细胞,流式细胞仪分析IKCs表型,台盼蓝染色计数法观察细胞增殖状况,AlamarBlue法观察IKC... 目的:探讨免疫杀手细胞(immune-killer cells,IKCs)的体外扩增方法及其对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用。方法:改良自然杀伤细胞培养扩增法扩增IKCs细胞,流式细胞仪分析IKCs表型,台盼蓝染色计数法观察细胞增殖状况,AlamarBlue法观察IKCs细胞对BEL-7402细胞的杀伤作用,用BALB/c裸鼠模型检测IKCs细胞对肝癌动物模型的治疗作用。结果:IKCs细胞培养14 d的细胞总数扩增300倍以上,主要由CD3^+CD56^+、CD3^-CD56^+和CD8^+细胞亚群组成,CD3^+CD56^+和CD3^-CD56^+比例达85%以上,CD8^+比例达到77%以上。IKCs细胞对肝癌BEL-7402细胞的杀伤实验显示,当效靶比为25:1时和100:1时,其杀伤活性分别为66.5%和97.8%(P<0.01)。裸鼠肝瘤模型治疗实验显示,IKCs细胞对早期和晚期人肝癌BEL-7402细胞裸鼠模型均有显著的治疗作用,与对照组比较,其抑瘤率达69%以上(P<0.01)。结论:本实验建立的肿瘤免疫杀手细胞IKCs的培养扩增方法是可行的、有效的,有望成为一种新的肿瘤免疫细胞治疗方法。 展开更多
关键词 免疫杀手细胞 肝癌 杀伤
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双特异抗体CD3xAFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的杀伤应用 被引量：1
2
作者 支黎明 车莹 +5 位作者 颜江华 张顺浪 王生育 马飞剑 张琼 许健 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期297-301,共5页
目的建立双特异抗体anti-CD3xanti-AFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤。方法利用anti-CD3抗体联合细胞因子IL-2活化人外周血淋巴细胞扩增CIK细胞,流式细胞仪分析细胞表型。柠檬酸三钠还原法制备金溶胶,物理吸附制备载荷anti-CD... 目的建立双特异抗体anti-CD3xanti-AFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤。方法利用anti-CD3抗体联合细胞因子IL-2活化人外周血淋巴细胞扩增CIK细胞,流式细胞仪分析细胞表型。柠檬酸三钠还原法制备金溶胶,物理吸附制备载荷anti-CD3和anti-AFP两种单抗的胶体金制剂,光镜检测抗体活性。AlarmaBlue法检测双特异抗体介导CIK细胞对肝癌细胞HepG-2和宫颈癌细胞Hela的杀伤活性。结果 14 d活化后的人外周血淋巴细胞鉴定为CIK细胞。抗体活性检测证实纳米金制剂保持了anti-CD3xanti-AFP的双特异抗体活性,在其介导下,CIK对特异靶细胞HepG-2杀伤效率为42%,提高11.4%(P<0.05),而对非特异靶细胞Hela杀伤无明显变化。结论金标双特异抗体anti-CD3xanti-AFP可以加强CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 CIK细胞 肝癌细胞 双特异抗体 胶体金 AFP
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