以融合蛋白为抗原的简化Westernblot法诊断囊虫病 被引量：6

1

作者 彭郁葱 陈蕊雯 +2 位作者 孙树汉 戴建新 王俊霞 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期360-363,共4页

目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫ｃＤＮＡ编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果：四个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１... 目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫ｃＤＮＡ编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果：四个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１和ｃＨ１）联合使用，检测１２４例人囊虫病血清中的抗囊尾蚴ＩｇＧ抗体，阳性率达９３．７％，三个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、和ｃＰ１）联合使用，检测３８例猪囊虫病血清中的相应抗体，阳性率达１００％，均高于各克隆融合蛋白单独使用的阳性率，且与其他寄生虫病血清无交叉反应。结论：以融合蛋白为抗原所进行的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析具有高度灵敏性和特异性，且简便易操作。 展开更多

关键词 囊虫病 融合蛋白 免疫诊断 简化 WESTERNBLOT法

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河北汉族人群D17S30位点扩增片段长度多态性 被引量：5

2

作者 彭郁葱 丛斌 +5 位作者 姚玉霞 尤红煜 王俊霞 杨承珠 左敏 谷振勇 《河北医科大学学报》 CAS 1999年第3期129-133,共5页

目的探讨河北省汉族人群Ｄ１７Ｓ３０位点的基因频率分布，为法医的基因认定提供依据。方法用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对河北汉族人群２０１名无关个体Ｄ１７Ｓ３０位点进行扩增，扩增产物采用聚丙烯酰胺凝胶电泳及溴化乙锭染色，依据... 目的探讨河北省汉族人群Ｄ１７Ｓ３０位点的基因频率分布，为法医的基因认定提供依据。方法用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对河北汉族人群２０１名无关个体Ｄ１７Ｓ３０位点进行扩增，扩增产物采用聚丙烯酰胺凝胶电泳及溴化乙锭染色，依据扩增片段长度确定各等位基因，分别使用ＰＯＭＳ软件和自编软件，进行统计学分析和遗传多态性分析，并对１０个家系资料进行了分析。结果共检出１２种等位基因，４５种基因型，基因型分布符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡定律（χ２＝１０．６８７２，Ｐ＝０．７１０４，ｄｆ＝１４）。观测杂合度ｈｏ为７５．１２％，ＤＰ、ＥＰＰ和ＰＩＣ值分别为０．９６１１、０．７２８０和０．８４９３。该位点呈共显性遗传。结论Ｄ１７Ｓ３０位点在河北汉族人群中的基因频率分布具有良好的多态性，适用于该人群的个人识别和亲子鉴定。 展开更多

关键词 D17S30 基因频率 基因扩增 聚合酶链反应 汉族

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猪囊尾蚴可溶性蛋白抗原多态性分析

3

作者 彭郁葱 王俊霞 +1 位作者 王朝霞 孙树汉 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1996年第4期252-253,共2页

猪囊尾蚴可溶性蛋白抗原多态性分析彭郁葱１王俊霞１王朝霞１孙树汉２由于囊虫病给人类带来的极大危害与损失，人们一直在探讨切实可行的诊断方法。目前多种免疫学方法都已应用于囊虫病的诊断，但是结果缺乏一致性，本文拟从猪囊尾蚴虫... 猪囊尾蚴可溶性蛋白抗原多态性分析彭郁葱１王俊霞１王朝霞１孙树汉２由于囊虫病给人类带来的极大危害与损失，人们一直在探讨切实可行的诊断方法。目前多种免疫学方法都已应用于囊虫病的诊断，但是结果缺乏一致性，本文拟从猪囊尾蚴虫体蛋白质的免疫原性及免疫反应性方面... 展开更多

关键词 猪囊尾蚴 可溶性蛋白 抗原 多态性

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STR基因座特性及其多态性

4

作者 彭郁葱 丛斌 姚玉霞 《中国法医学杂志》 CSCD 2000年第4期245-249,共5页

关键词 STR基因 短串联重复序列 多态性 法医学鉴定

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囊虫病诊断用抗原编码cDNA的分子克隆 被引量：62

5

作者 孙树汉 王俊霞 +3 位作者 陈蕊雯 陆惠萍 彭郁葱 王朝霞 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期15-20,共6页

目的 :克隆与分析囊虫病诊断用抗原及其编码基因。方法 :采用基因重组技术 ,构建来源于猪囊尾蚴 m RNA的 c DNA文库。以囊虫病患者、囊虫病病猪的血清为探针从 c DNA文库中筛选出目的克隆。结果 :获得人、猪共同抗原 2个 (分子量分别为 ... 目的 :克隆与分析囊虫病诊断用抗原及其编码基因。方法 :采用基因重组技术 ,构建来源于猪囊尾蚴 m RNA的 c DNA文库。以囊虫病患者、囊虫病病猪的血清为探针从 c DNA文库中筛选出目的克隆。结果 :获得人、猪共同抗原 2个 (分子量分别为 2 8k Da和 18k Da) ,人特异性抗原和猪特异性抗原各 1个 (分子量为 34 k Da、 14k Da)。这些抗原的编码克隆分别命名为λc C1、λc C2、λc H1及 λc P1。c C1c DNA含有编码 2 8k Da的人、猪共同抗原的完整基因 ,全长 10 70 bp,起始密码 ( ATG)从自 2 2 bp,终止密码 ( TGA)结于 74 7bp,长为 74 7bp的开放阅读框架编码由 2 4 9个氨基酸组成的多肽 ,其理论推导分子量为 2 7.36k Da。结论 :以 c C1等融合蛋白为诊断用抗原 ,具有高度的特异性和较理想的敏感性。 展开更多

关键词 囊尾蚴病 猪囊尾蚴 抗原多肽 分子克隆

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猪囊尾蚴特异性抗原编码cDNA的阶段特异性表达 被引量：16

6

作者 王俊霞 彭郁葱 +1 位作者 姚玉霞 孙树汉 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期89-93,共5页

目的：分析猪囊尾蚴特异性抗原编码ｃＤＮＡ的阶段特异性表达机制。方法：用猪囊尾蚴特异性抗原编码ｃＤＮＡ（λｃＣ２８）及抗λｃＣ２８单表位抗体作探针，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎ... 目的：分析猪囊尾蚴特异性抗原编码ｃＤＮＡ的阶段特异性表达机制。方法：用猪囊尾蚴特异性抗原编码ｃＤＮＡ（λｃＣ２８）及抗λｃＣ２８单表位抗体作探针，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交技术分析了λｃＣ２８编码ｃＤＮＡ在猪带绦虫各发育阶段的特异性表达。结果：猪囊尾蚴和成虫不同节片抗原蛋白具有阶段特异性，λｃＣ２８ｃＤＮＡ编码的２８ｋＤａ抗原蛋白只在囊尾蚴阶段表达，成虫幼节、成节、孕节都不表达。结论：猪囊尾蚴阶段特异性抗原的编码基因存在于囊尾蚴阶段和成虫的幼节中，但仅有囊尾蚴阶段的ｍＲＮＡ表达２８ｋＤａ抗原蛋白。 展开更多

关键词 猪囊尾蚴 基因 阶段特异性 表达

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用改进的MVR-PCR方法检测河北地区汉族人群D7S21基因座多态性 被引量：1

7

作者 丛斌 柴羊城 +4 位作者 郭晓青 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期242-246,共5页

为研究D7S2 1基因座在河北汉族人群分布的多态性 ,应用MVR -PCR (MinisatelliteVariantRepeat -PolymeraseChainReaction)方法和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对 12 4名河北汉人无关个体D7S2 1基因座进行了快速检测 ,并进行数字编码。... 为研究D7S2 1基因座在河北汉族人群分布的多态性 ,应用MVR -PCR (MinisatelliteVariantRepeat -PolymeraseChainReaction)方法和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对 12 4名河北汉人无关个体D7S2 1基因座进行了快速检测 ,并进行数字编码。每一个体平均得到 36个数字编码 ,未发现任何两个无关个体所有编码相同 ,两无关个体 36个编码相同的概率为 3.48× 10 -18。三种重复单位a型、t型和 0型出现的概率分别为 :48.5 %、49.4%和 2 .1%。该基因座杂合度为 0 .9876 ,非父排除率为 0 .9746 ,多态性信息含量为 0 .9872。研究表明 ,D7S2 1基因座在河北汉族人群中具有高度的多态性 ,聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法简便、快速 ,具有一定的实用价值。 展开更多

关键词 改进 MVR-PCR方法 检测 河北地区 汉族人群 D7S21基因座多态性 数字编码

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河北汉族人群3个基因座的遗传多态性 被引量：1

8

作者 丛斌 彭郁葱 +4 位作者 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 马春玲 闫玉仙 《中国法医学杂志》 CSCD 2002年第2期102-104,共3页

D16S310、D11S2010基因座遗传多态性目前在国内尚未见报道,D3S1358基因座在河北汉族人群中也未见报道.本文作者采用PCR技术和变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳技术和银染方法,分别对中国河北汉族200余名健康无关个体进行了调查,同时对10个家... D16S310、D11S2010基因座遗传多态性目前在国内尚未见报道,D3S1358基因座在河北汉族人群中也未见报道.本文作者采用PCR技术和变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳技术和银染方法,分别对中国河北汉族200余名健康无关个体进行了调查,同时对10个家系两代人进行上述3个基因座的遗传学分析. 展开更多

关键词 基因座 STR 检出 2010 遗传多态性 基因多态性 汉族人群 河北

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湖南优质工业材用毛竹评价指标体系的建立 被引量：3

9

作者 艾文胜 李典军 +2 位作者 杨明 彭郁葱 伍雄辉 《经济林研究》 2009年第1期23-28,共6页

为给优质工业材用毛竹的选育及营建提供理论依据,采用样地调查法进行湖南毛竹林分结构调查,采用标准竹解析法测定毛竹林分立竹秆型结构和生物量,参照GB/T 15780-1995标准采集竹材材性测试样品并采取实验室测试分析法测定竹材的物理、力... 为给优质工业材用毛竹的选育及营建提供理论依据,采用样地调查法进行湖南毛竹林分结构调查,采用标准竹解析法测定毛竹林分立竹秆型结构和生物量,参照GB/T 15780-1995标准采集竹材材性测试样品并采取实验室测试分析法测定竹材的物理、力学与化学性质指标。在系统研究调查数据的基础上,结合专家意见,确定了胸径、胸高竹壁厚、材质、全高、秆质量、秆型和尖削度等7个一级指标及对应的21个二级指标,建立了优质工业材用毛竹评价指标体系,并运用层次分析法(AHP)确定了各指标的权重。经一致性检验可知,其结果具有满意一致性。 展开更多

关键词 经济林学 优质毛竹 评价指标体系 层次分析法

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应用MVR-PCR和银染法分析河北汉族人群D1S8基因座DNA结构多态性 被引量：1

10

作者 丛斌 郭晓青 +6 位作者 谷振勇 左敏 张国忠 姚玉霞 彭郁葱 王俊霞 尤红煜 《中国法医学杂志》 CSCD 1999年第4期193-196,共4页

研究D1S8基因座重复序列内部的变异，并进行数字编码。应用MVR－PCR和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对240名河北汉人无关个体进行检测。结果每个个体得到约30个数字编码，未发现任何两无关个体所有编码相同，30个编码完全相同的概率为3... 研究D1S8基因座重复序列内部的变异，并进行数字编码。应用MVR－PCR和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对240名河北汉人无关个体进行检测。结果每个个体得到约30个数字编码，未发现任何两无关个体所有编码相同，30个编码完全相同的概率为3．55×10－11。3种重复单位a-型、t-型、o-型出现的频率分别为54.77％、42．54％、2．69％。为小卫星变异重复序列的研究及其在法医实践中的应用提供了一种新方法。 展开更多

关键词 D1S8基因座 数字编码 个人识别 MVR 法医学

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球虫病疫苗研究进展 被引量：1

11

作者 彭郁葱 孙树汉 王俊霞 《医学动物防制》 1994年第1期56-59,共4页

球虫病是由球虫引起的家禽、野生动物和人体的寄生性原虫病。球虫指顶复门的艾美耳球虫亚目的种类,包含10个科43个属,1,771种球虫,能引起家禽、野生动物和人体的球虫病,随着对这类寄生虫的深入研究和认识,其重要性日益显示出来。畜、禽... 球虫病是由球虫引起的家禽、野生动物和人体的寄生性原虫病。球虫指顶复门的艾美耳球虫亚目的种类,包含10个科43个属,1,771种球虫,能引起家禽、野生动物和人体的球虫病,随着对这类寄生虫的深入研究和认识,其重要性日益显示出来。畜、禽特别是鸡、兔、牛和羊的球虫病对畜禽养殖业危害性极大,造成巨大的经济损失。人体球虫病包括弓形虫病、隐孢子虫病。 展开更多

关键词 球虫病 疫苗 研究

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胆囊收缩素-A及B受体mRNA在SD大鼠肺组织中的表达 被引量：3

12

作者 丛斌 凌亦凌 +5 位作者 谷振勇 黄善生 左敏 王俊霞 姚玉霞 彭郁葱 《中国实验动物学杂志》 1999年第2期73-77,共5页

本文采用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对１０只ＳＤ大鼠肺组织中ＣＣＫ－Ａ及ＣＣＫ－Ｂ受体ｍＲＮＡ表达情况进行的研究表明，上述两种受体ｍＲＮＡ在ＳＤ大鼠肺组织中均有表达。为进一步确证ＲＴ－ＰＣＲ产物的特异性，对... 本文采用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对１０只ＳＤ大鼠肺组织中ＣＣＫ－Ａ及ＣＣＫ－Ｂ受体ｍＲＮＡ表达情况进行的研究表明，上述两种受体ｍＲＮＡ在ＳＤ大鼠肺组织中均有表达。为进一步确证ＲＴ－ＰＣＲ产物的特异性，对其行二次ＰＣＲ扩增及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，结果显示，ＣＣＫ－Ａ受体ｍＲＮＡ扩增片段为１３５ｋｂ左右，ＣＣＫ－Ｂ受体ｍＲＮＡ扩增片段为０．４８ｋｂ左右。本文研究结果有助于在分子水平研究内毒素休克时ＣＣＫ－８对肺损伤的保护机制。 展开更多

关键词 受体MRNA 肺组织 SD大鼠 表达 胆囊收缩素 RT-PCR CCK 扩增片段 杂交 PCR扩增

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中国汉族人群D2S1328基因座的遗传多态性研究

13

作者 闫玉仙 丛斌 +4 位作者 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 马春玲 《中国法医学杂志》 CSCD 2001年第4期227-228,共2页

关键词 D2S1328基因座 遗传多态性 PAG垂直电泳技术 法医学

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河北汉族人群D11S2010基因座的遗传多态性研究

14

作者 闫玉仙 丛斌 +3 位作者 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 《河北医科大学学报》 CAS 2001年第1期29-29,共1页

关键词 多态性 聚合酶链反应 DNA 河北 汉族人群

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河北汉族人群D3S1358基因座的遗传多态性研究

15

作者 闫玉仙 丛斌 +3 位作者 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 《河北医科大学学报》 CAS 2001年第5期286-286,共1页

关键词 短串联重复力 汉族人群 D3S1358基因座 遗传多态性 河北

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河北汉族人群D2S1328基因座的遗传多态性研究

16

作者 闫玉仙 丛斌 +3 位作者 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 《河北医科大学学报》 CAS 2001年第1期28-28,共1页

关键词 多态性 聚合酶链反应 DNA 河北 汉族人群

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河北汉族人群D16S310基因座的遗传多态性研究

17

作者 闫玉仙 丛斌 +3 位作者 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 《河北医科大学学报》 CAS 2001年第3期157-157,共1页

关键词 D16S310基因座 遗传多态性 微卫生DAN 汉族人群 聚合酶链反应

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抗猪囊尾蚴融合蛋白单表位抗体的抗原识别分析

18

作者 王俊霞 彭郁葱 孙树汉 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1996年第4期254-255,共2页

抗猪囊尾蚴融合蛋白单表位抗体的抗原识别分析王俊霞１彭郁葱１孙树汉２本文采用抗原表位筛选法制备了抗猪囊尾蚴融合蛋白的单表位抗体，并用蛋白质转移技术分析了抗猪囊尾蚴融合蛋白单表位抗体特异性抗原，确定了具特异性的抗原。材料... 抗猪囊尾蚴融合蛋白单表位抗体的抗原识别分析王俊霞１彭郁葱１孙树汉２本文采用抗原表位筛选法制备了抗猪囊尾蚴融合蛋白的单表位抗体，并用蛋白质转移技术分析了抗猪囊尾蚴融合蛋白单表位抗体特异性抗原，确定了具特异性的抗原。材料和方法一、猪囊尾蚴抗原取自然感染的... 展开更多

关键词 猪囊尾蚴 融合蛋白 单位体抗 抗原识别 制备

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逆转录-聚合酶链反应检测鼠肝炎病毒方法的建立 被引量：4

19

作者 姚玉霞 丛斌 +2 位作者 彭郁葱 尤红煜 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第2期13-17,共5页

建立特异、灵敏的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术，结合碱性磷酸酶标记的探针杂交检测鼠肝炎病毒（MHV），采用MHV－3，MHV－A59病毒株感染DBT细胞，37℃培养，待细胞出现病变时收集提取病毒RNA。依据MHV基因序列设计一对高度保守... 建立特异、灵敏的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术，结合碱性磷酸酶标记的探针杂交检测鼠肝炎病毒（MHV），采用MHV－3，MHV－A59病毒株感染DBT细胞，37℃培养，待细胞出现病变时收集提取病毒RNA。依据MHV基因序列设计一对高度保守区特异性引物，进行RT－PCR扩增，结果可见147bp的鼠肝炎病毒产物特异扩增带。敏感性实验检测到10pg的鼠肝炎病毒RNA，同时用ELISA方法对照。结果提示应用RT—PCR技术结合探针杂交检测鼠肝炎病毒。具有简便、快速、灵敏等优势。本研究在国内尚未见报道。 展开更多

关键词 鼠肝 肝炎病毒 探针杂交 逆转录-聚合酶链反应 RT-PCR 扩增 RNA 特异性引物 病毒株 病变

全文增补中

小鼠中单核细胞增生李斯特氏菌的分离鉴定

20

作者 王俊霞 彭郁葱 +6 位作者 姚玉霞 张东明 赵文政 蒋观成 李红 黄澜 郑晶晶 《中国比较医学杂志》 CAS 1992年第Z2期67-70,共4页

开放饲养的普通昆明小鼠的回盲部内容物中分离出的单核细胞增生李斯特氏菌(分离率5%)。本实验对分离株做了多项生化特性的测定及药物敏感性试验,并进行了实验感染,用24h肉汤培养物注射家兔24h后单核细胞可达24%。接种清洁级的ICR小鼠24-... 开放饲养的普通昆明小鼠的回盲部内容物中分离出的单核细胞增生李斯特氏菌(分离率5%)。本实验对分离株做了多项生化特性的测定及药物敏感性试验,并进行了实验感染,用24h肉汤培养物注射家兔24h后单核细胞可达24%。接种清洁级的ICR小鼠24-96h单核细胞增多平均达10%。 展开更多

关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 小鼠分离

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