丹芪护肝方对肝纤维化模型大鼠TGF-β/Smad4信号通路的影响

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作者 彭馥芝 徐仪昕 +4 位作者 蒋堃 陈思源 余曦明 张逢 余望贻 《中国医药科学》 2023年第17期21-25,共5页

目的探讨丹芪护肝方通过转化生长因子-β(TGF-β)/信号通路通用调节因子4(Smad4)信号通路对大鼠肝纤维化的保护作用。方法取48只sqrague dawley(SD)大鼠,随机分成正常对照组、模型组、联苯双酯组和丹芪护肝方组,每组12只。腹腔注射40%... 目的探讨丹芪护肝方通过转化生长因子-β(TGF-β)/信号通路通用调节因子4(Smad4)信号通路对大鼠肝纤维化的保护作用。方法取48只sqrague dawley(SD)大鼠,随机分成正常对照组、模型组、联苯双酯组和丹芪护肝方组,每组12只。腹腔注射40%四氯化碳大豆油溶液(1 ml/kg)建立大鼠肝纤维化模型。造模的同时,联苯双酯组(50 mg/kg)和丹芪护肝方组(9.14 g/kg)灌胃给药,正常对照组与模型组给予等体积生理盐水。8周后,全自动生化分析仪检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(T-BiL)、直接胆红素(D-BiL);逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)测定平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad4的信使核糖核酸(mRNA)及蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、T-BiL、D-BiL水平均升高,差异有显著统计学意义(P<0.01),肝组织内α-SMA、TGF-β1及Smad4 mRNA和蛋白表达均升高差异有显著统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,丹芪护肝方干预后,大鼠血清中ALT、AST、T-BiL、D-BiL水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);肝脏组织中的α-SMA、TGF-β1和Smad4 mRNA和蛋白表达均降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论丹芪护肝方能抑制大鼠肝纤维化程度,其机制可能与TGF-β/Smad4信号通路有关。 展开更多

关键词 丹芪护肝方 肝纤维化 转化生长因子Β1 信号通路通用调节因子4

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基于TLR4/NF-κB信号通路探讨乙肝宁颗粒对肝纤维化模型大鼠的作用机制

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作者 陈思源 彭馥芝 +3 位作者 刘建军 朱健芳 余望贻 刘旺华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第10期1771-1778,共8页

目的从Toll样受体-4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路观察乙肝宁颗粒对肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)模型大鼠的治疗作用及相关的作用机制。方法将64只SD随机分为空白组(12只)和造模组(52只)... 目的从Toll样受体-4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路观察乙肝宁颗粒对肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)模型大鼠的治疗作用及相关的作用机制。方法将64只SD随机分为空白组(12只)和造模组(52只),造模组采用四氯化碳皮下注射联合慢性夹尾应激的方法建立HF模型,造模成功的48只大鼠随机分为模型组(12只)、联苯双酯组(50 mg/kg,12只)、乙肝宁颗粒高剂量组(9.18 g/kg,12只,以下简称高剂量组)、乙肝宁颗粒低剂量组(4.59 g/kg,12只,以下简称低剂量组)。治疗组连续灌胃给药治疗4周。治疗结束后,比较各组大鼠肝功能指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总蛋白(total protein,TPO,TP)、白蛋白(albumin,ALB)的水平;HE和Masson染色观察大鼠肝组织纤维化情况,免疫组织化学法和Western blot实验检测肝组织TLR4、NF-κB蛋白表达情况。结果(1)与空白组比较,模型组ALB、TP含量降低(P<0.05),肝组织存在细胞排列紊乱、变性肿胀坏死、脂肪空泡形成、炎性浸润等病理现象;高剂量组肝组织损伤程度均有明显改善,脂肪空泡明显减少,胶原纤维沉积程度减轻;低剂量组改善情况低于高剂量组;联苯双酯组与高剂量组之间无明显差异(P>0.05)。(2)与空白组相比,模型组大鼠肝脏指数、AST、ALT含量明显升高(P<0.05),与模型组比较,高剂量组肝脏指数、AST、ALT含量降低(P<0.05),低剂量组上述指标情况高于高剂量组(P<0.05),联苯双酯组与高剂量组之间无明显差异(P>0.05)。(3)与空白组相比,模型组大鼠肝脏组织中TLR4、NF-κB、TGF-β、Smad3蛋白表达增加(P<0.05);与模型组相比,高剂量组大鼠肝脏组织中TLR4、NF-κB、TGF-β、Smad3蛋白表达水平降低(P<0.05),高剂量组降低的程度高于低剂量组(P<0.01);与联苯双酯组相比,高剂量组上述蛋白的表达水平无明显差异(P>0.05)。结论乙肝宁颗粒可改善HF模型大鼠肝脏指数、肝脏病理表现,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB、TGF-β、Smad3的表达有关,且高剂量组疗效优于低剂量组。 展开更多

关键词 乙肝宁颗粒 肝郁 肝纤维化 TOLL样受体-4 核因子ΚB

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类风湿关节炎实验性动物模型研究进展 被引量：15

3

作者 李利青 张逢 +3 位作者 彭馥芝 罗前颖 李鑫 刘良 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1492-1497,共6页

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的慢性自身免疫性疾病,不仅影响关节的活动和健康,还累及全身多个组织器官。RA目前尚无特效药治疗,是国内外研究的热点和难点,构建与人类RA相似度高的动物模型对研究该疾病的发病... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的慢性自身免疫性疾病,不仅影响关节的活动和健康,还累及全身多个组织器官。RA目前尚无特效药治疗,是国内外研究的热点和难点,构建与人类RA相似度高的动物模型对研究该疾病的发病机制及药物治疗至关重要。该文就目前常用RA动物模型的构建方法、发病机制及病理特征等展开论述,以期为合理选择实验动物模型作为RA的基础研究与药物筛选提供依据和参考。 展开更多

关键词 自身免疫性疾病 类风湿关节炎 动物模型 发病机制 病理特征 药物筛选

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猪睾丸组织定量PCR分析中内参基因的选择 被引量：6

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作者 彭馥芝 冉茂良 +3 位作者 翁波 李智 董莲花 陈斌 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期3033-3041,共9页

【目的】采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)对基因表达进行分析时,选择适当的内参基因是获得准确分析结果的关键。在猪睾丸分子生物学研究中,表达稳定的蛋白编码内参基因和micro RNA(miRNA)内参基因均有哪些目前尚不清楚。本研究旨在筛... 【目的】采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)对基因表达进行分析时,选择适当的内参基因是获得准确分析结果的关键。在猪睾丸分子生物学研究中,表达稳定的蛋白编码内参基因和micro RNA(miRNA)内参基因均有哪些目前尚不清楚。本研究旨在筛选出合适的内参基因,为准确定量不同时期猪睾丸组织中目的基因的表达提供可靠依据。【方法】选用8个不同发育时期(E 90、D 1、D 30、D 60、D 90、D 120、D 150、DM)的猪睾丸组织为材料,采用Trizol裂解法提取各样品的总RNA,利用Nan Drop ND-2000分光光度计检测总RNA的浓度和纯度。设计并合成已报道的猪其他组织中表达相对稳定的5个编码内参基因(GAPDH、TBP、β-actin、SDHA和B2M)以及5个miRNA内参基因(U6、ssc-miR-17-5p、ssc-miR-26a、ssc-miR-27a和ssc-miR-103)的特异性引物序列,逆转录得到cDNA模板后,按1:10梯度稀释为7个浓度梯度进行qRT-PCR反应以构建标准曲线。并对10个候选内参基因在各时期睾丸组织中的表达情况进行实时荧光定量全面检测,采用Ge Norm法对定量结果进行综合分析,最后根据内参基因稳定性值(M值)的大小筛选出最稳定的参考基因;M值越小,表明内参基因的稳定性越好,反之则越差。【结果】对GAPDH、TBP、β-actin、SDHA、B2M、U6、ssc-miR-17-5p、ssc-miR-26a、ssc-miR-27a和ssc-miR-103 10个候选内参基因的熔解曲线进行分析发现,均无非特异扩增及引物二聚体,说明各内参基因特异性良好,qRT-PCR反应的专一性高;以Ct值为纵坐标,相对拷贝数的对数为横坐标进行标准曲线分析可知,各内参基因在系列稀释的浓度梯度内具有良好的线性关系;通过对10个候选内参基因在不同时期猪睾丸组织中的表达稳定性分析发现,蛋白编码基因中,最稳定的为TBP,最不稳定的是GAPDH;miRNA候选内参中,最稳定的为U6,最不稳定的是ssc-miR-26a。【结论】成功筛选出猪睾丸组织基因表达分析中稳定表达的内参基因TBP和U6,可作为猪睾丸组织基因表达研究中最佳内参基因候选者。 展开更多

关键词 猪睾丸组织 内参基因 QRT-PCR MIRNA

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miR-362靶向ZNF644基因调控猪未成熟支持细胞的增殖和凋亡 被引量：4

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作者 冉茂良 董莲花 +5 位作者 翁波 曹蓉 彭馥芝 高虎 罗荟 陈斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期578-590,共13页

睾丸组织中未成熟支持细胞的增殖能力决定成熟支持细胞的数量,进而制约成年雄性动物的精子生成能力。研究表明microRNA(miRNA)参与调控猪未成熟支持细胞的增殖和凋亡,但大部分鉴定出的miRNA功能仍不明确。本文基于前期RNA-seq数据筛选结... 睾丸组织中未成熟支持细胞的增殖能力决定成熟支持细胞的数量,进而制约成年雄性动物的精子生成能力。研究表明microRNA(miRNA)参与调控猪未成熟支持细胞的增殖和凋亡,但大部分鉴定出的miRNA功能仍不明确。本文基于前期RNA-seq数据筛选结果,研究了miR-362对猪未成熟支持细胞增殖和凋亡的调控作用。首先利用生物信息学方法预测miR-362的靶基因,通过qRT-PCR技术检测miR-362和ZNF644基因在不同发育阶段的猪睾丸组织中的表达水平以及在猪未成熟支持细胞中过表达或抑制表达miR-362后ZNF644基因的表达水平,采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-362与ZNF644基因之间的靶向关系。结果显示,miR-362与ZNF644基因3′UTR具有一个潜在的结合位点,miR-362和ZNF644基因在猪睾丸组织中的mRNA表达水平显著负相关(r=-0.723,P<0.01),miR-362和psi CHECK2-ZNF644-WT 3′UTR共转染组的双荧光活性显著降低,且miR-362显著调节ZNF644基因的表达水平,表明miR-362靶向ZNF644基因并抑制其表达水平。为进一步检测过表达miR-362或抑制表达ZNF644基因对猪未成熟支持细胞增殖和凋亡的影响,通过流式细胞术检测细胞周期,CCK8和EdU试剂盒检测细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI方法和qRT-PCR技术检测细胞凋亡情况及凋亡相关基因的表达水平。结果表明,过表达miR-362后,猪未成熟支持细胞周期被阻滞在G_1期,抑制表达ZNF644基因后,猪未成熟支持细胞被阻滞在G2期,细胞增殖能力显著减弱,细胞凋亡率显著提高,细胞凋亡相关基因呈促进凋亡的差异表达。本研究结果证实miR-362靶向ZNF644基因抑制猪未成熟支持细胞的增殖而促进其凋亡,为深入研究miR-362在猪精子生成过程中的生物学功能提供了理论基础。 展开更多

关键词 miR-362 ZNF644 猪 未成熟支持细胞 增殖 凋亡

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miR-24基因家族进化及其在猪睾丸组织中的表达变化分析 被引量：3

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作者 翁波 彭馥芝 +2 位作者 冉茂良 董莲花 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2017年第2期106-111,共6页

通过miRBase数据库检索miR-24基因家族序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-24家族在不同物种中的基因组定位,采用MEGA 5.0构建miR-24基因家族的系统进化树,并利用RT-qPCR检测miR-24-1及miR-24-2在沙子岭猪睾丸组织不同发育期(E90、D1、... 通过miRBase数据库检索miR-24基因家族序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-24家族在不同物种中的基因组定位,采用MEGA 5.0构建miR-24基因家族的系统进化树,并利用RT-qPCR检测miR-24-1及miR-24-2在沙子岭猪睾丸组织不同发育期(E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180)的表达变化。在miRBase数据库检索32个物种共66条序列,且各序列均具有高度保守性。基因组定位显示大部分物种的miR-24基因位于常染色体上。RT-qPCR结果显示,miR-24基因家族2个成员(miR-24-1、miR-24-2)在沙子岭猪睾丸不同发育阶段呈现出协同表达的规律。本研究对miR-24基因家族进行系统进化分析并检测其在沙子岭猪睾丸组织中表达变化规律,为进一步探明miR-24基因家族的功能及作用机制奠定基础。 展开更多

关键词 猪 miR-24 进化 定量表达

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miR-221/222基因家族进化分析及其在猪睾丸组织中的表达变化 被引量：3

7

作者 彭馥芝 冉茂良 +2 位作者 翁波 董莲花 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2017年第1期33-40,共8页

运用生物信息学方法在miRBase中搜索动物miR-221/222基因家族的序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-221/222在基因组中的位置,采用MEGA 5.0构建miR-221/222系统进化树;并利用RT-qPCR技术定量检测猪睾丸组织中不同发育时期miR-221/222的... 运用生物信息学方法在miRBase中搜索动物miR-221/222基因家族的序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-221/222在基因组中的位置,采用MEGA 5.0构建miR-221/222系统进化树;并利用RT-qPCR技术定量检测猪睾丸组织中不同发育时期miR-221/222的表达变化。结果表明:在34种动物中共搜索到59条miR-221/222序列,所有的miR-221/222基因都存在于基因间隔区。进化分析表明,各物种miR-221/222基因家族可能以不同的方式和速度进化而来。RT-qPCR检测结果显示,miR-221/222在猪睾丸组织中不同发育时期表现出相同趋势的表达规律,即出生后其表达水平先升高,生长发育时期降低,随着性成熟又呈现升高趋势。研究结果为深入理解miR-221/222基因家族的作用机制奠定基础,也为后续研究提供参考。 展开更多

关键词 猪 miR-221/222 进化 定量表达

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沙子岭猪GSG1基因克隆、生物信息学分析及组织表达 被引量：1

8

作者 冉茂良 翁波 +3 位作者 贺长青 董莲花 彭馥芝 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2017年第1期16-22,28,共8页

采用RACE技术克隆猪GSG1(Germ Cell-specific gene 1)基因cDNA1全长并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR对GSG1基因在沙子岭猪睾丸组织8个不同发育阶段(E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150和D180)和30日龄时9个不同组织(睾丸、... 采用RACE技术克隆猪GSG1(Germ Cell-specific gene 1)基因cDNA1全长并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR对GSG1基因在沙子岭猪睾丸组织8个不同发育阶段(E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150和D180)和30日龄时9个不同组织(睾丸、肌肉、小肠、肺、心脏、肾脏、肝脏、脾脏和脂肪)的表达量。结果表明:GSG1基因cDNA全长为1 257 bp,含1个长993 bp的开放阅读框,编码330个氨基酸。实时荧光定量PCR结果显示,GSG1基因在睾丸组织中的表达量最高,显著高于其余8个组织(P<0.05),且其在肌肉、小肠、肺脏、心脏、肾脏和脂肪中的表达水平极低;GSG1基因在睾丸组织的E90、D1、D30和D60这4个发育时期的表达量较低,显著低于D90、D120、D150和D180这4个时期(P<0.01)。本试验首次克隆了猪GSG1基因cDNA全长并检测了其在不同组织和不同发育阶段睾丸组织的表达,为进一步研究其调控猪睾丸发育和精子生成的机制奠定了理论基础。 展开更多

关键词 GSG1基因 CDNA克隆 基因表达 猪

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泛素-蛋白酶体途径在生殖细胞减数分裂过程中的作用及机制 被引量：1

9

作者 彭馥芝 董莲花 +2 位作者 冉茂良 翁波 陈斌 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期66-74,共9页

泛素-蛋白酶体途径(UPP)是真核细胞蛋白质主要降解途径,在调节蛋白质相互作用、蛋白质活性、信号转导、细胞周期进程等各生物过程中发挥重要作用。研究表明,UPP在人和动物配子生成的减数分裂同源重组、性染色体失活、减数分裂恢复及第... 泛素-蛋白酶体途径(UPP)是真核细胞蛋白质主要降解途径,在调节蛋白质相互作用、蛋白质活性、信号转导、细胞周期进程等各生物过程中发挥重要作用。研究表明,UPP在人和动物配子生成的减数分裂同源重组、性染色体失活、减数分裂恢复及第一极体排出等过程中也起着关键的调控作用。本文综述了UPP在动物生殖细胞减数分裂过程及配子生成中的信号传导及调节机制,以期为后续相关研究提供参考。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体途径 泛素化 生殖细胞 减数分裂

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miR-450基因家族进化分析及其在沙子岭猪睾丸组织表达量分析

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作者 彭馥芝 董莲花 +2 位作者 冉茂良 翁波 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2018年第1期10-16,共7页

为探明miR-450基因家族(miR-450s)的系统进化历程及其在沙子岭猪睾丸组织不同发育时期表达规律。通过miRBase数据库检索miR-450s序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-450s在不同物种中的基因组定位,采用MEGA 6.0构建miR-450基因家族的系... 为探明miR-450基因家族(miR-450s)的系统进化历程及其在沙子岭猪睾丸组织不同发育时期表达规律。通过miRBase数据库检索miR-450s序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-450s在不同物种中的基因组定位,采用MEGA 6.0构建miR-450基因家族的系统进化树,并利用RT-q PCR检测miR-450s在沙子岭猪睾丸组织不同发育期(E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180)的表达变化。miRBase数据库共检索15个物种36条miR-450s序列,且miR-450s序列具有高度保守性。基因组定位显示miR-450s位于X染色体上,均位于基因间隔区(Intergenic region,IGR),且miR-450基因家族成员在进化过程中紧密相连,可能由于串联重复所致。RT-q PCR结果显示,miR-450s在胚胎期中表达量显著高于出生后表达量(P<0.01),且miR-450基因家族3个成员(miR-450a、miR-450b、miR-450c)在沙子岭猪睾丸不同发育阶段呈现出协同表达的特性。miR-450基因家族可能在猪睾丸组织发育过程中发挥重要调控作用。 展开更多

关键词 沙子岭猪 miR-450 进化 定量表达

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沙子岭猪跨膜与卷曲螺旋域2(TMCO2)基因克隆、生物信息学及组织差异表达分析

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作者 彭馥芝 翁波 +2 位作者 冉茂良 董莲花 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2016年第4期219-226,共8页

利用RACE法克隆沙子岭猪TMCO2基因cDNA全长并进行生物信息学分析,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对TMCO2基因在沙子岭猪D30时期8个不同组织(睾丸、肌肉、肺、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、脂肪)及睾丸组织8个不同发育阶段(E90、D1、D30、D60... 利用RACE法克隆沙子岭猪TMCO2基因cDNA全长并进行生物信息学分析,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对TMCO2基因在沙子岭猪D30时期8个不同组织(睾丸、肌肉、肺、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、脂肪)及睾丸组织8个不同发育阶段(E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180)进行差异表达分析。结果表明:TMCO2基因克隆所得片段长740 bp,其中ORF区为546 bp,编码181个氨基酸。qRT-PCR结果显示,沙子岭猪D30时期TMCO2 mRNA在睾丸组织中表达量最高,其次为脾脏组织,而在其他组织中表达量极低,其中睾丸组织与其他组织表达量差异均为显著(P<0.05);睾丸组织不同发育时期中,TMCO2 mRNA在D180时期表达量达到最高,在D1和D150时期表达量略有下降,其中D180与其他时期的差异均为极显著(P<0.01),E90、D1、D30、D60 4个生长发育期时期表达量差异不显著(P>0.05)。本试验首次克隆了沙子岭猪TMCO2基因cDNA全长并检测了其在猪不同组织及睾丸组织不同发育阶段表达量,为进一步研究TMCO2基因功能奠定基础。 展开更多

关键词 TMCO2基因 克隆 基因表达 猪

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巴克夏母猪繁殖性能测定及相关分析 被引量：4

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作者 彭馥芝 李玉莲 陈斌 《猪业科学》 2016年第5期116-117,共2页

该研究通过测定39头巴克夏母猪的8个主要繁殖性状(产仔数、产活仔数、初生重、初生窝重、21日龄窝重、断奶仔猪头数、断奶个体重、断奶窝重),用SAS软件进行了相关及通径分析。研究结果表明巴克夏母猪的平均产仔数为7.97头,仔猪初生重为1... 该研究通过测定39头巴克夏母猪的8个主要繁殖性状(产仔数、产活仔数、初生重、初生窝重、21日龄窝重、断奶仔猪头数、断奶个体重、断奶窝重),用SAS软件进行了相关及通径分析。研究结果表明巴克夏母猪的平均产仔数为7.97头,仔猪初生重为1.29 kg。经通径分析可知,在所分析的8个性状中,初生个体重的通径系数最高。因此,要提高巴克夏母猪繁殖性能,除了通过选育提高母猪的繁殖力外,还要采取措施改善巴克夏猪的饲养管理条件,以提高仔猪初生个体重。 展开更多

关键词 巴克夏母猪 繁殖性能 相关系数 通径分析

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泛素?蛋白酶体途径在精子生成中的作用 被引量：8

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作者 董莲花 冉茂良 +2 位作者 李智 彭馥芝 陈斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期791-800,共10页

泛素?蛋白酶体途径(Ubiquitin–proteasome pathway,UPP)是真核细胞内蛋白质主要降解途径,通过调节蛋白质相互作用、蛋白活性、蛋白定位及信号转导,进而在细胞周期进程、细胞凋亡、应激反应及机体生长发育等过程发挥重要作用。研究表明,... 泛素?蛋白酶体途径(Ubiquitin–proteasome pathway,UPP)是真核细胞内蛋白质主要降解途径,通过调节蛋白质相互作用、蛋白活性、蛋白定位及信号转导,进而在细胞周期进程、细胞凋亡、应激反应及机体生长发育等过程发挥重要作用。研究表明,UPP在人和动物精子生成中的顶体生物合成及精子尾部形成过程起着关键的调控作用,精子变态过程中UPP调控异常导致精子畸形及精子活力降低,并引发少精子症、不育及睾丸肿瘤等生殖系统疾病。本文综述了UPP在动物精子生成过程中的信号传导及调节机制,以期为后续相关研究提供参考。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体途径 泛素化 精子发生

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沙子岭猪ASB17基因克隆、生物信息学分析及组织差异表达研究 被引量：1

14

作者 董莲花 冉茂良 +3 位作者 翁波 李智 彭馥芝 陈斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期2811-2819,共9页

本研究利用RACE法克隆沙子岭猪ASB17基因cDNA全长并进行生物信息学分析,应用实时荧光定量PCR对ASB17基因在沙子岭猪D30时期9个不同组织(睾丸、肌肉、小肠、肺脏、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、脂肪)及睾丸组织8个不同发育阶段(E90、D1、D30... 本研究利用RACE法克隆沙子岭猪ASB17基因cDNA全长并进行生物信息学分析,应用实时荧光定量PCR对ASB17基因在沙子岭猪D30时期9个不同组织(睾丸、肌肉、小肠、肺脏、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、脂肪)及睾丸组织8个不同发育阶段(E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180)进行差异表达分析。结果显示,ASB17基因克隆所得片段长1 135bp,其中ORF区为888bp,编码295个氨基酸。实时荧光定量PCR结果显示沙子岭猪D30时期ASB17mRNA在睾丸中表达量最高,其次为脂肪及脾脏,而在肌肉及小肠中表达量最低,其中睾丸与肌肉、小肠及肺脏中表达量差异显著(P<0.05);睾丸组织不同发育时期中,ASB17mRNA在D120、D150时期表达量达到最高,在D180时期表达量略有下降,其中E90、D1、D30、D60与D90、D120、D150、D180时期差异极显著(P<0.01);D90与D180时期差异不显著(P>0.05),与其余时期均差异极显著(P<0.01);沙子岭猪性成熟期D120、D150、D180 3个时期表达量差异不显著(P>0.05)。本试验成功克隆了沙子岭猪ASB17基因cDNA全长并检测了其在猪不同组织及睾丸组织不同发育阶段表达量,为进一步研究ASB17基因功能奠定基础。 展开更多

关键词 沙子岭猪 ASB17基因 克隆 基因表达

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miR-23基因家族进化分析及其在猪睾丸组织中的表达变化 被引量：1

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作者 罗荟 冉茂良 +3 位作者 翁波 彭馥芝 高虎 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2019年第1期36-43,共8页

运用生物信息学方法在miRBase数据库检索到miR-23基因家族的序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-23在基因组的位置,采用MEGA5.0构建miR-23系统进化树,再利用RT-q PCR技术定量检测其在沙子岭猪睾丸组织中7个不同发育时期(D1、D30、D60、... 运用生物信息学方法在miRBase数据库检索到miR-23基因家族的序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-23在基因组的位置,采用MEGA5.0构建miR-23系统进化树,再利用RT-q PCR技术定量检测其在沙子岭猪睾丸组织中7个不同发育时期(D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180)的表达变化。结果表明:在37种物种中共搜索到82条序列,且各序列具有高度保守性,大部分位于基因间隔区。进化分析表明:各物种miR-23基因家族可能以不同的方式和速度进化而来。RT-q PCR检测结果显示,miR-23基因家族在猪睾丸组织中不同发育时期表现出相同趋势的表达规律,即出生后其表达水平有所降低,到性成熟期又呈现升高趋势。本研究对miR-23基因家族进行系统进化分析并检测其在沙子岭猪睾丸组织中表达变化规律,为进一步探明miR-23基因家族的功能及作用机制奠定基础。 展开更多

关键词 猪 miR-23a/23b 进化 定量表达

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miR-125a/125b基因家族进化分析及其在猪睾丸组织中的表达变化 被引量：1

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作者 高虎 冉茂良 +3 位作者 翁波 彭馥芝 罗荟 陈斌 《经济动物学报》 CAS 2019年第2期94-101,106,共9页

采用生物学信息方法在miRBase中搜索动物miR-125a/125b基因家族序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-125a/125b在基因组中的位置,采用MEGA 5.0构建miR-125a/125b家族的系统进化树,并利用qRT-PCR检测miR-125a和miR-125b在沙子岭猪睾丸组... 采用生物学信息方法在miRBase中搜索动物miR-125a/125b基因家族序列,利用Ensembl数据库信息确定miR-125a/125b在基因组中的位置,采用MEGA 5.0构建miR-125a/125b家族的系统进化树,并利用qRT-PCR检测miR-125a和miR-125b在沙子岭猪睾丸组织不同发育时期(D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180)的表达变化。结果在miRBase数据库检索29个物种共58条miR-125家族序列,分布广泛,且有高度的保守性,除一个位于内含子区,两个位于外显子区,其余miR-125a/125b位于基因间隔区,在进化过程中,同种物种的进化方向具有高度的一致性,进化速度也有所不同。qRT-PCR检测结果显示,miR-125a/125b在沙子岭猪睾丸组织中不同发育时期的具有相同的趋势,即出生后其表达水平缓慢升高,保育期开始降低,性成熟期又开始呈现升高趋势,随着体成熟表达量开始降低。本研究结果为进一步探明miR-125a/125b基因家族在猪睾丸组织中的功能及作用机制奠定基础。 展开更多

关键词 猪 miR-125a/125b 进化 定量表达

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调控睾丸支持细胞增殖和分化的信号通路研究进展 被引量：4

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作者 彭馥芝 冉茂良 +2 位作者 李智 董莲花 陈斌 《生命科学》 CSCD 2016年第11期1391-1397,共7页

支持细胞是睾丸内的一类重要细胞,能为生精过程提供转运蛋白、调节蛋白、生长因子等数十种细胞因子,参与生精细胞成熟分化的调控,对睾丸内各级生殖细胞的迁移、增殖和分化具有重要的支持作用。研究表明,在Wnt/β-catenin信号通路中,关... 支持细胞是睾丸内的一类重要细胞,能为生精过程提供转运蛋白、调节蛋白、生长因子等数十种细胞因子,参与生精细胞成熟分化的调控,对睾丸内各级生殖细胞的迁移、增殖和分化具有重要的支持作用。研究表明,在Wnt/β-catenin信号通路中,关键蛋白β-catenin的适度激活能促进睾丸支持细胞的增殖、分化;在mTOR信号通路中,mTOR基因的缺失导致睾丸支持细胞的数量减少;在TGF-β信号通路中,不同浓度的TGF-β细胞因子影响睾丸支持细胞的增殖、分化。由此可见,Wnt/β-catenin信号通路、mTOR信号通路和TGF-β信号通路在睾丸支持细胞的增殖和分化中均具有重要的调控作用。对这三条信号通路调节支持细胞增殖分化的机制以及它们之间的相互作用作一综述,旨在为深入研究调控睾丸支持细胞增殖的信号机制提供理论依据,从而进一步为雄性生育的调控及生殖方面的疾病治疗提供新思路和新方法。 展开更多

关键词 支持细胞 增殖 分化 信号通路

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