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广东地区地中海贫血筛检者的基因检测和类型分析 被引量：39
1
作者 徐韫健 廖颖茵 +1 位作者 高俊 林卫虹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期285-289,293,共6页
目的分析2016-2017年广东地区地中海贫血(地贫)的基因检测情况及少见地贫基因型病例,为临床诊断地贫及可疑病例提供理论参考。方法对1 814例在广州医科大学第一附属医院就诊的和PCR反向点杂交技术检测α珠蛋白的变异基因,应用PCR反向点... 目的分析2016-2017年广东地区地中海贫血(地贫)的基因检测情况及少见地贫基因型病例,为临床诊断地贫及可疑病例提供理论参考。方法对1 814例在广州医科大学第一附属医院就诊的和PCR反向点杂交技术检测α珠蛋白的变异基因,应用PCR反向点杂交技术检测β-珠蛋白的17种常见突变基因,同时联合分析部分患者的血常规和血红蛋白电泳检测数据,对疑似地贫但基因检测阴性的样本进一步采用测序技术或Gap-PCR技术进行检测分析。结果共检出地贫基因阳性496例,总阳性率27.34%,其中α地贫353例,阳性率19.46%,β地贫127例,阳性率7.00%,α+β地贫16例,阳性率0.88%。1814例中出现23例表型和基因型不一致的病例,进一步检测分析发现7例少见地贫基因型,分别为少见β地贫(CD54-58)1例、中国型Gγ+(Aγδβ)0缺失2例、东南亚型缺失1例,α地贫不确定基因型1例和香港型地贫基因2例。结论本地区α地贫阳性率高于β地贫;临床工作中应注意少见基因型地贫的出现,结合表型与基因型诊断疑难病例,必要时用基因测序和Gap-PCR等技术检测,以防漏检。 展开更多
关键词 地中海贫血 红细胞参数 基因测序
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ARMS法在检测肺癌晚期患者肿瘤组织和血浆表皮生长因子受体基因突变中的应用 被引量：6
2
作者 徐韫健 高俊 +2 位作者 林勇平 黄晓彬 黄养松 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第14期2157-2159,共3页
目的 应用探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应（ARMS-PCR）检测晚期肺癌患者血清游离DNA和肿瘤组织中表皮生长因子受体（EGFR）基因突变,探索两者间的一致性。方法 同时收集53例未经治疗的肺癌Ⅲb～Ⅳ期患者的原发灶肿瘤组织和外周血,分... 目的 应用探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应（ARMS-PCR）检测晚期肺癌患者血清游离DNA和肿瘤组织中表皮生长因子受体（EGFR）基因突变,探索两者间的一致性。方法 同时收集53例未经治疗的肺癌Ⅲb～Ⅳ期患者的原发灶肿瘤组织和外周血,分别提取DNA,采用ARMS-PCR扩增EGFR基因的第18、19、20和21外显子突变,对结果不一致的标本用微滴式数字PCR法对外周血标本进行验证。结果 血浆EGFR基因突变检测的灵敏度为51.4%（17/33）,特异度为100%;血浆EGFR基因的突变率为29.4%;16例血浆和组织结果不一致的标本,数字PCR检测的结果与血浆游离DNA检测的结果一致。结论 血浆游离DNA为监测Ⅲb～Ⅳ期肺癌患者原发肿瘤中EGFR基因突变提供了新的来源,ARMS法是检测血浆游离DNA中EGFR基因突变的可靠有效方法。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 突变 游离DNA 探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应
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性别对华南地区汉族人群细胞色素P450酶2C19基因遗传多态性的影响 被引量：5
3
作者 徐韫健 王慧 宋金龙 《山东医药》 CAS 2013年第12期63-65,共3页
目的研究华南地区汉族人群细胞色素P450酶(CYP)2C19基因遗传多态性。方法应用基因芯片法对359例来院就诊的心血管疾病患者进行CYP2C19基因检测,按性别分类进行遗传多态性分析。以22例健康人作为对照组。结果基因型为野生型*1/*1型占42.3... 目的研究华南地区汉族人群细胞色素P450酶(CYP)2C19基因遗传多态性。方法应用基因芯片法对359例来院就诊的心血管疾病患者进行CYP2C19基因检测,按性别分类进行遗传多态性分析。以22例健康人作为对照组。结果基因型为野生型*1/*1型占42.3%(152/359),突变型*1/*2型占45.7%(164/359)、*1/*3型占7.8%(28/359)、*2/*2型占10.3%(37/359)、*2/*3型占1.4%(5/359)、*3/*3型占0.6%(2/359)。男性中基因型为*1/*1型占41.2%(91/221)、*1/*2型占37.1%(82/221)、*1/*3型占7.2%(16/221)、*2/*2型占12.7%(28/221)、*2/*3型占1.4%(3/221)、*3/*3型为0,女性中基因型为*1/*1型占44.2%(61/138)、*1/*2型占37.7%(52/138)、*1/*3型占8.7%(12/138)、*2/*2型占6.5%(9/138)、*2/*3型占1.4%(2/138)、*3/*3型占1.4%(2/138),男性和女性中各类基因型的发生率均无统计学差别(P>0.05)。结论性别对华南地区汉族人群CYP2C19基因遗传多态性无影响。 展开更多
关键词 酶制剂 细胞色素P450酶 CYP2C19 基因多态性
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907例非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变分析 被引量：3
4
作者 徐韫健 王慧 林勇平 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期3252-3254,共3页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变特点及与临床特征的关系。方法收集907例NSCLC肿瘤组织,分别提取DNA,采用探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应(ARMS-PCR)扩增EGFR基因29种突变。结果 907例NSCLC中,359例(39.6%... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变特点及与临床特征的关系。方法收集907例NSCLC肿瘤组织,分别提取DNA,采用探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应(ARMS-PCR)扩增EGFR基因29种突变。结果 907例NSCLC中,359例(39.6%)EGFR基因有突变,其中18、19、20、21外显子单独突变分别为6例(0.7%)、152例(16.8%)、8例(0.9%)、170例(18.7%),共见突变类型7种;热点突变类型为19外显子缺失(构成比42.3%)和21外显子L858R突变(构成比45.1%)。女性患者突变率高于男性患者(56.9%vs 25.7%,P<0.05),腺癌患者突变率高于鳞癌患者(49.0%vs 10.0%,P<0.05),未发现EGFR基因突变率与标本来源、年龄和肿瘤细胞比例相关。结论 NSCLC患者EGFR基因突变以19、21外显子突变为主,突变率以腺癌患者和女性较高。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 突变 探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应
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氨基糖苷类高水平耐药肠球菌的耐药及分子机制的研究 被引量：10
5
作者 徐韫健 梁权辉 刘长连 《中国实验诊断学》 2013年第10期1845-1849,共5页
目的分析氨基糖苷类高水平耐药(High Level Aminoglyeoside Resistant,HLAR)肠球菌的耐药性与耐药基因,并研究其耐药分子机制。方法采用VITEK-2全自动鉴定仪法测定53株氨基糖苷类高水平耐药肠球菌对11种抗菌药物的最小抑菌浓度,用聚合... 目的分析氨基糖苷类高水平耐药(High Level Aminoglyeoside Resistant,HLAR)肠球菌的耐药性与耐药基因,并研究其耐药分子机制。方法采用VITEK-2全自动鉴定仪法测定53株氨基糖苷类高水平耐药肠球菌对11种抗菌药物的最小抑菌浓度,用聚合酶链反应(PCR)检测肠球菌转座子Tn917和Tnl546/Tn916、红霉素耐药基因ermB、毒力岛基因mefA、I类整合酶IntI1、氯霉素耐药基cat、表面蛋白基因esp,并对万古霉素耐药肠球菌(Vancomycin-resistant Enterococc,VRE)进行基因分型(vanA、vanB、vanC)。结果 53株肠球菌检出含ermB 26株,占49.0%;含mefA 9株,占17.0%;含Tnl546/Tn916 19株,占35.8%;含Tn917 11株,占20.8%;含IntI1 26株,占49.1%;含esp 15株,占28.3%;未检出cat。53株肠球菌对复方新诺明全部耐药,对红霉素耐药高达94.3%,对高水平庆大霉素、高水平链霉素、环丙沙星、四环素和氨苄西林的耐药率分别为75.5%、73.6%、75.5%、66.0%、62.3%;对利奈唑胺和替考拉宁的敏感率高达98.1%;1株耐万古霉素,其基因和表型均为VanA。结论 HLAR肠球菌可携带多种耐药基因,耐药基因与肠球菌耐药性密切相关,可能在多重耐药机制中起重要作用。 展开更多
关键词 肠球菌 耐药基因 分子机制
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CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶的序列分析与原核表达 被引量：2
6
作者 徐韫健 廖伟娇 江洁华 《中国热带医学》 CAS 2007年第12期2180-2183,共4页
目的对肺炎克雷伯菌所产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性。方法以产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌49号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-3,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再... 目的对肺炎克雷伯菌所产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性。方法以产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌49号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-3,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再将CTX-M-3基因克隆到pBV220/DH5α系统进行重组,重组菌经42℃热诱导,SDS-PAGE电泳鉴定酶蛋白的表达。结果PCR扩增出大小为876bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%。大肠杆菌DH5α转化pBV220/CTX-M-3重组质粒后,ESBLs试验为阳性,药敏试验结果与原菌株相比耐药性下降。此基因能在大肠埃希菌中大量表达,SDS-PAGE电泳显示,蛋白分子质量大约为31KD。结论成功表达重组的CTX-M-3型酶,为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定基础。 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 CTX-M-3 克隆 表达
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白假丝酵母菌耐吡咯类药物的ERG11基因分析 被引量：2
7
作者 徐韫健 谭皓妍 +1 位作者 李倩珺 岑志炜 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第4期36-39,42,共5页
目的 研究白假丝酵母菌耐吡咯类药物的ERG11的变异情况.方法 将93例诊断为真菌性阴道炎的患者的阴道分泌物标本进行真菌培养,筛选白假丝酵母菌菌株,利用纸片扩散法进行氟康唑、酮康唑、咪康唑药敏试验,用加热裂解法提取菌株DNA,扩增ERG1... 目的 研究白假丝酵母菌耐吡咯类药物的ERG11的变异情况.方法 将93例诊断为真菌性阴道炎的患者的阴道分泌物标本进行真菌培养,筛选白假丝酵母菌菌株,利用纸片扩散法进行氟康唑、酮康唑、咪康唑药敏试验,用加热裂解法提取菌株DNA,扩增ERG11基因,扩增后的PCR产物进行双向测序,测序结果与GenBank中的标准序列（SC5314）比较分析.结果 93例均培养出假丝酵母菌,包括60株白假丝酵母菌,19株热带假丝酵母菌,9株克柔假丝酵母菌和5株光滑假丝酵母菌;白假丝酵母菌对氟康唑、酮康唑、咪康唑耐药率分别为13.33%,20.00％和51.67％;对白假丝酵母菌的ERG11基因测序发现存在25个碱基突变位点,其中13个同义突变,12个错义突变,其中有6个是新变异：V36F,V51L,T123I,E194K,Y257H和K344N.结论 耐吡咯类药物白假丝酵母菌ERG11基因有多个错义突变位点,其中某些位点突变导致的氨基酸变异可能与其耐药性产生有关. 展开更多
关键词 白假丝酵母菌 ERG11基因 吡咯类药物 突变
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Sysmex xs-1000i血细胞分析仪的应用评价 被引量：3
8
作者 徐韫健 江洁华 +1 位作者 张东梅 张丽梅 《国际医药卫生导报》 2007年第16期118-122,共5页
目的评价Sysmex xs-1000i血细胞分析仪的性能。方法用Sysmex xs-1000i血细胞分析仪和贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪检测临床血液标本，同时手工血细胞涂片法分类对照。结果批内、批间精密度和总重复性CV值均小于5．0％；携带互... 目的评价Sysmex xs-1000i血细胞分析仪的性能。方法用Sysmex xs-1000i血细胞分析仪和贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪检测临床血液标本，同时手工血细胞涂片法分类对照。结果批内、批间精密度和总重复性CV值均小于5．0％；携带互染率小于1．0％；对白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板测定结果，与LH750全自动血细胞分析仪密切相关，，均〉0．99；与人工白细胞分类比较具有相关性，r值在0．6187～0．9551之间；对异常形态细胞的筛查，特异性为91．2％。结论Sysmex xs-1000i血细胞分析仪性能良好，是一种快速、有效筛检标本的血细胞分析仪。 展开更多
关键词 血细胞分析仪 性能 评价
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临床教师带教医学生参与科研的体会 被引量：1
9
作者 徐韫健 李乃健 易建云 《检验医学与临床》 CAS 2011年第3期372-373,共2页
随着医学科技发展和素质教育的推进,如何培养大学生创新意识与科研能力,是新时期高等医学教育的重要任务。处于基础阶段的本科生无论是在思维能力以及动手能力上均存在一定的局限性,医学本科生的科研水平不高,科研意识不强,成为科研能... 随着医学科技发展和素质教育的推进,如何培养大学生创新意识与科研能力,是新时期高等医学教育的重要任务。处于基础阶段的本科生无论是在思维能力以及动手能力上均存在一定的局限性,医学本科生的科研水平不高,科研意识不强,成为科研能力培养的一个薄弱环节。 展开更多
关键词 临床教师 医学生 科研能力
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2009-2011年我院优势细菌的药敏分析 被引量：1
10
作者 徐韫健 易建云 +1 位作者 范慎薇 王慧 《国外医药（抗生素分册）》 CAS 2013年第1期21-26,共6页
目的了解常见临床分离菌株的药敏状况并为临床合理用药提供依据,以减少耐药菌的产生。方法使用VITEK-2微生物全自动鉴定系统,对临床分离的阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验,并使用WHONET5.4进行统计分析。结果共收集病原菌10166株,其中... 目的了解常见临床分离菌株的药敏状况并为临床合理用药提供依据,以减少耐药菌的产生。方法使用VITEK-2微生物全自动鉴定系统,对临床分离的阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验,并使用WHONET5.4进行统计分析。结果共收集病原菌10166株,其中革兰阳性菌株占27%,革兰阴性菌株占73%,分离率居前5位者分别为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林表皮葡萄球菌分别占59%和75%,未发现万古霉素耐药株;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶的发生率分别为53%、41%和9%,耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌三年的总分离率分别达到2%和4%;鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌多重耐药现象严重,对亚胺培南的敏感率达仅为51%和72%;粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素耐药率分别为0和1%,屎肠球菌耐药程度比粪肠球菌高。结论本院常见病原菌耐药情况严峻,三年来变化不大,临床应根据细菌对抗生素的耐药特点,科学合理选用抗生素。 展开更多
关键词 细菌 药物敏感性 Β-内酰胺酶
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形成性评价在检验医师规范化培训临床分子诊断学专业中的探索 被引量：1
11
作者 徐韫健 林勇平 +1 位作者 向波 刘忠民 《广州医科大学学报》 2022年第1期105-108,共4页
检验医师规范化培训是检验医师人才队伍建设的重要组成部分,而临床分子诊断学专业是检验医学中前沿而复杂的学科,我们在该专业的检验医师规范化培训中尝试引入形成性培训教学评价的综合评价理念,改革传统的总结性测验评估方法,构建检验... 检验医师规范化培训是检验医师人才队伍建设的重要组成部分,而临床分子诊断学专业是检验医学中前沿而复杂的学科,我们在该专业的检验医师规范化培训中尝试引入形成性培训教学评价的综合评价理念,改革传统的总结性测验评估方法,构建检验医师规培质量评价体系和应用实施方案,对促进检验医师规培的创新发展具有重要意义。 展开更多
关键词 形成性评价 检验医师 临床分子诊断 规范化培训
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胶体金免疫层析法在检测粪便血红蛋白中的应用 被引量：5
12
作者 徐韫健 江洁华 廖伟娇 《现代临床医学生物工程学杂志》 2005年第6期531-533,共3页
胶体金免疫层析技术是把免疫层析技术与胶体金标记技术结合而建立的一种新的免疫学方法,具有灵敏度高,特异性强,简便、快速等特点,有广阔的应用前景.本文就胶体金免疫层析技术的基本原理及其在检测粪便血红蛋白中的应用进行综述.
关键词 免疫层析 胶体金 粪便潜血试验
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耐头孢西丁革兰阴性杆菌产AmpC酶情况与耐药性研究
13
作者 徐韫健 孙慧冰 +4 位作者 李乃健 张丽梅 廖伟娇 张东梅 谭惠明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第16期3035-3037,共3页
目的:了解耐头孢西丁(FOX)革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及基因型分布和耐药性。方法:对108株无重复耐FOX革兰阴性杆菌,用酶提取物三维试验检测AmpC酶;MIC法检测产酶株的药物敏感性;PCR扩增AmpC酶基因及其序列测定。结果:高产AmpC酶的... 目的:了解耐头孢西丁(FOX)革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及基因型分布和耐药性。方法:对108株无重复耐FOX革兰阴性杆菌,用酶提取物三维试验检测AmpC酶;MIC法检测产酶株的药物敏感性;PCR扩增AmpC酶基因及其序列测定。结果:高产AmpC酶的发生率为25.9%;AmpC酶基因ACT、CMY-G2、FOX、CIT、CMY-G1、DHA和MOX的检出率为13.9%、12.0%、4.6%、1.9%、0.9%、0.9%和0;产AmpC酶菌株呈多重耐药,对头孢替坦和头孢唑啉全部耐药,对亚胺培南、丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较好。结论:加强耐FOX革兰阴性杆菌高产AmpC酶的监测,治疗相关菌感染以亚胺培南为首选。 展开更多
关键词 AMPC酶 革兰阴性杆菌 基因 耐药性
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尿液红细胞检测和隐血试验的临床应用及影响因素 被引量：21
14
作者 张丽梅 徐韫健 +2 位作者 廖伟娇 张东梅 谭惠明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第12期2223-2224,共2页
目的:对比四种不同方法检测尿液红细胞和血红蛋白的结果,以分析其影响因素和临床价值。方法:采用UF-100尿沉渣分析仪、尿沉渣显微镜检查尿红细胞、干化学法、胶体金单克隆抗体法隐血试验对167份尿液联合检查,对四种检测结果进行对比。结... 目的:对比四种不同方法检测尿液红细胞和血红蛋白的结果,以分析其影响因素和临床价值。方法:采用UF-100尿沉渣分析仪、尿沉渣显微镜检查尿红细胞、干化学法、胶体金单克隆抗体法隐血试验对167份尿液联合检查,对四种检测结果进行对比。结果:以镜检法为标准UF-100尿沉渣分析法红细胞准确度为86.2%,干化学法红细胞准确度为85.0%。尿隐血试验中,干化学敏感性为300μg/L,单克隆抗体隐血为200μg/L,干化学与胶体金单克隆抗体隐血指标(金标准)对比,干化学隐血法的敏感度为80.7%,特异性为84.3%。结论:四种检测方法的联合应用更能提高尿液检查的质量,对疾病的诊断、治疗及病程中动态观察有重要的参考价值。 展开更多
关键词 尿 红细胞 尿干化学法 隐血试验 尿沉渣分析法 显微镜检查
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多重耐药革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶的表型及基因型研究 被引量：25
15
作者 江洁华 廖伟娇 +2 位作者 徐军 易建云 徐韫健 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期492-495,共4页
目的了解革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶表型及基因分型,并分析其耐药特性。方法以纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、MBL的协同试验了解β-内酰胺酶的表型,用PCR技术进行扩增并进行DNA测序;药敏试验采用K-B法,分析其耐药特性... 目的了解革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶表型及基因分型,并分析其耐药特性。方法以纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、MBL的协同试验了解β-内酰胺酶的表型,用PCR技术进行扩增并进行DNA测序;药敏试验采用K-B法,分析其耐药特性。结果多重耐药革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为26.49%,主要由产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)引起,占16.56%;其次为ESBLs+头霉素酶(AmpC)引起,占6.62%;ESBLs+AmpC+金属酶(MOL)引起,占1.66%,单独由AmpC引起的仅占0.66%,有3株未能定型0.99%;β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.83%,单产ESBLs的多重耐药革兰阴性杆菌株占17.55%,同时产ESBLs与AmpC的菌株占6.95%,产ESBLs、MBL与AmpC的菌株占0.33%,单产AmpC的菌株占0.33%;多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物的总体耐药率最低为阿米卡星(18.75%)、最高为氨苄西林(97.50%),大部分细菌呈多重耐药性。结论多重耐药革兰阴性杆菌携带多种β-内酰胺酶,具有多重耐药性。 展开更多
关键词 多重耐药革兰阴性杆菌 Β-内酰胺酶 表型 基因型
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非小细胞肺癌患者KRAS基因突变情况分析 被引量：18
16
作者 罗炜 王慧 +2 位作者 徐韫健 林云恩 欧雅文 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期2025-2028,共4页
目的探讨非小细胞肺癌患者KRAS基因突变情况与临床特征间的相关性。方法收集经病理确诊的454例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织,采用突变扩增阻滞系统(ARMS)技术检测组织标本中KRAS基因外显子2第12、13位密码子突变状态,分析基因突变与临床... 目的探讨非小细胞肺癌患者KRAS基因突变情况与临床特征间的相关性。方法收集经病理确诊的454例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织,采用突变扩增阻滞系统(ARMS)技术检测组织标本中KRAS基因外显子2第12、13位密码子突变状态,分析基因突变与临床特征间的相关性。结果 454例非小细胞肺癌患者中有17例(3.7%)存在KRAS突变,第12位密码子共检出5种突变类型,分别是G12A(1.1%,5/454)、G12C(1.1%,5/454)、G12D(0.4%,2/454)、G12V(0.4%,2/454)、G12S(0.2%,1/454);第13位密码子检出1种突变类型,为G13D(0.4%,2/454)。KRAS基因突变率男性(6.2%,17/273)高于女性(0,0/181),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论非小细胞肺癌KRAS基因突变与患者性别有关,与年龄、病理组织类型、标本类型无关。ARMS技术操作简便,可以快速进行KRAS基因突变检测,有利于指导患者的个体化分子靶向治疗。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 KRAS基因 突变扩增阻滞系统
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多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因分析与同源性分析 被引量：15
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作者 余琳 苏丹虹 +2 位作者 江凤茹 卢鉴财 徐韫健 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第12期2018-2021,共4页
目的:对本院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)耐药及介导耐药基因进行检测分析,对分离自呼吸重症监护病房(RICU)的菌株基因同源性进行流行病学分析。方法:收集2009年1月至2010年12月期间分离的85株多重耐药鲍曼不动杆菌,用K-B法进行... 目的:对本院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)耐药及介导耐药基因进行检测分析,对分离自呼吸重症监护病房(RICU)的菌株基因同源性进行流行病学分析。方法:收集2009年1月至2010年12月期间分离的85株多重耐药鲍曼不动杆菌,用K-B法进行药敏实验,用PCR方法检测OXA-23、OXA-58,qacE△1、IMP,VIM基因,并利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离自呼吸监护病区的14株菌株进行基因同源性分析。结果:85株耐药菌中OXA-23、qacE△1基因的阳性率依次为55.3%、81.2%,未检测到OXA-58,VIM和IMP基因。用PFGE技术将分离自呼吸监护病区的14株MDRAB分为5型,以A和B型为主。结论:本院分离的MDRAB对临床常用的抗生素耐药性比较严重,其中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)情况更甚;14株RICU菌株中有A型6株(均为CRAB),分离于2010年7-9月,提示CRAB在2010年第三季度于RICU有小范围的暴发流行。 展开更多
关键词 多重耐药鲍曼不动杆菌 基因型 同源性
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结直肠癌KRAS基因突变状态的检测分析 被引量：9
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作者 王慧 徐韫健 +2 位作者 林云恩 宋金龙 欧雅文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第17期2890-2893,共4页
目的:探讨结直肠癌患者KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系。方法:采用突变扩增阻滞系统技术(amplification refractory mutation system,ARMS)检测151例经手术或活检证实的结直肠癌患者石蜡包埋肿瘤组织中KRAS基因第12、13密码子突... 目的:探讨结直肠癌患者KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系。方法:采用突变扩增阻滞系统技术(amplification refractory mutation system,ARMS)检测151例经手术或活检证实的结直肠癌患者石蜡包埋肿瘤组织中KRAS基因第12、13密码子突变。结果:151例结直肠癌患者中有63例(41.7%)患者存在KRAS基因突变;第12密码子突变53例,突变检出率为35.1%(53/151),共检出6种突变类型,其中以Gly12Asp突变率(29/151,19.2%)最高;第13密码子检出1种突变类型(Gly13Asp)10例,突变检出率为6.6%(10/151)。经统计学分析,未发现KRAS基因突变与性别、年龄、肿瘤部位、分化程度以及标本类型有相关性(P>0.05)。结论:结直肠癌中KRAS基因突变的发生率较高,其突变率与性别、年龄、肿瘤部位、分化程度以及标本类型无相关性。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 KRAS基因 基因突变
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多重耐药菌中β-内酰胺酶的基因型研究 被引量：9
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作者 陈定强 彭玉婷 +3 位作者 罗毓婷 徐韫健 林勇平 杨羚 《检验医学与临床》 CAS 2013年第1期1-3,共3页
目的调查β-内酰胺酶在临床分离的多重耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯菌中的流行状况,并分析不同基因型的分布特征。方法针对2009～2010年间收集的59株多重耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测大肠杆菌和肺炎克雷伯... 目的调查β-内酰胺酶在临床分离的多重耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯菌中的流行状况,并分析不同基因型的分布特征。方法针对2009～2010年间收集的59株多重耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测大肠杆菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性。用煮沸法提取菌株的总DNA,并用多重聚合酶链反应(PCR)对21种β-内酰胺酶基因进行检测。结果 59株多重耐药菌对青霉素类、头孢菌素类和喹诺酮类抗菌药物耐药性非常严重,耐药率均达90%以上。多重PCR共检出含TEM基因菌株32株,CTX-M-G9基因31株,SHV基因27株,CTX-M-G1基因19株,CTX-M-G2基因14株,DHA基因4株,MOX基因2株,CMY基因、OXA-1基因和ACT基因各1株。未检测到含GES、VEB、IMP、VIM、KPC、CTX-M-G8/25、ACC、FOX、PER、OXA-48等基因的菌株,多个菌株发现携带两种以上耐药基因。结论多重耐药菌中β-内酰胺酶种类分布非常广泛,其中以TEM、CTX-M和SHV基因最为常见,某些菌株同时携带多种β-内酰胺酶基因,临床进行抗菌治疗时应引起重点关注。 展开更多
关键词 多重耐药菌 Β-内酰胺酶 基因型
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多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子的检测 被引量：9
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作者 廖伟娇 江洁华 +2 位作者 易建云 徐韫健 潘思争 《热带医学杂志》 CAS 2006年第6期666-668,671,共4页
目的研究整合子在多重耐药革兰阴性菌中的分布和所起的作用。方法用Kirby-Bauer(K-B)药敏法分析80株多重耐药革兰阴性菌的耐药性,再用可变引物与兼并引物进行聚合酶链反应(PCR),分别扩增革兰阴性菌整合子。结果用兼并引物可检出50株革... 目的研究整合子在多重耐药革兰阴性菌中的分布和所起的作用。方法用Kirby-Bauer(K-B)药敏法分析80株多重耐药革兰阴性菌的耐药性,再用可变引物与兼并引物进行聚合酶链反应(PCR),分别扩增革兰阴性菌整合子。结果用兼并引物可检出50株革兰阴性菌携带有整合子,有21.2%的菌株同时对10种抗生素都耐药,依次为氨苄西林(72.5%)、头孢曲松(62.5%)、头孢唑啉(61.2%)、头孢他啶(56.2%)、哌拉西林(55.0%)、复方磺胺嘧啶(51.2%)、环丙沙星(50%)、庆大霉素(48.8%)、头孢吡肟(48.8%)、头孢西丁(33.8%),显著高于整合子阴性的菌株。用可变引物检出29株携带有Ⅰ类整合子,可扩增出1000bp,1450bp,1600bp,1700bp,1850bp,1900bp,大于2000bp等6种不同长度的脱氧核苷酸(DNA)片段,相同菌属可携带有不同长度的耐药基因片段,不同细菌种属间携带有相同长度的耐药基因片段。结论Ⅰ类整合子广泛分布于革兰阴性杆菌中,在多重耐药机制中起着重要的作用。 展开更多
关键词 整合子 Β-内酰胺酶 耐药基因盒
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