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重组Nkx2.5腺病毒的构建及心肌细胞感染实验
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作者 张勤 应湾湾 +2 位作者 葛丹婷 房跃群 李涛 《浙江师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第1期101-107,共7页
利用AdEasy腺病毒表达系统构建了Nkx2.5重组腺病毒.Nkx2.5基因克隆入pAdTrackcmv质粒,pAdTtrackcmv-Nkx2.5经PmeⅠ线性化后转化含pAdEasy-1的BJ5183菌进行同源重组,以构建pAdEsay-Nkx2.5重组质粒.pAdEsay-Nkx2.5转染293A细胞进行病毒包... 利用AdEasy腺病毒表达系统构建了Nkx2.5重组腺病毒.Nkx2.5基因克隆入pAdTrackcmv质粒,pAdTtrackcmv-Nkx2.5经PmeⅠ线性化后转化含pAdEasy-1的BJ5183菌进行同源重组,以构建pAdEsay-Nkx2.5重组质粒.pAdEsay-Nkx2.5转染293A细胞进行病毒包装.以Ad-Nkx2.5重组腺病毒感染Hela及乳鼠心肌细胞,检测了Nkx2.5蛋白表达及对下游ANF和β-MHC基因的表达调控;并采用感染病毒的H9c2心肌细胞经H2O2处理建立细胞凋亡模型,采用噻唑蓝法和荧光染色法检测了细胞存活率和凋亡细胞的形态变化.结果显示,Nkx2.5过表达能抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡. 展开更多
关键词 NKX2.5 重组腺病毒 心肌细胞 H9C2细胞 凋亡
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