目的研究沉默TIPE(tumor necrosis factor⁃α⁃induced protein 8,TNFAIP8)基因下调Wnt/β⁃catenin信号对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法通过构建shRNA⁃TIPE慢病毒载体转染人非小细胞肺癌细胞系A549,利用Real time PCR、Western...目的研究沉默TIPE(tumor necrosis factor⁃α⁃induced protein 8,TNFAIP8)基因下调Wnt/β⁃catenin信号对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法通过构建shRNA⁃TIPE慢病毒载体转染人非小细胞肺癌细胞系A549,利用Real time PCR、Western blot检测A549内TIPE、β⁃catenin的表达水平,细胞克隆形成实验、CCK8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果shRNA⁃TIPE慢病毒转染非小细胞肺癌细胞系A549后:(1)TIPE和β⁃catenin的mRNA、蛋白表达水平均低于阴性对照组和空白对照组;(2)TIPE基因沉默后,A549细胞克隆形成能力显著下降(F=17.48,P=0.0003),生长曲线实验检测A549细胞增殖能力下降;(3)shRNA⁃TIPE慢病毒转染后,A549细胞凋亡率(18.4±4.5)%明显高于阴性对照(12.7±3.6)%和空白对照组(11.5±3.4)%,差异有统计学意义(F=4.4844,P=0.0351)。结论TIPE可能通过激活Wnt/β⁃catenin信号通路促进非小细胞肺癌细胞系A549细胞增殖,抑制凋亡。展开更多
文摘目的研究沉默TIPE(tumor necrosis factor⁃α⁃induced protein 8,TNFAIP8)基因下调Wnt/β⁃catenin信号对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法通过构建shRNA⁃TIPE慢病毒载体转染人非小细胞肺癌细胞系A549,利用Real time PCR、Western blot检测A549内TIPE、β⁃catenin的表达水平,细胞克隆形成实验、CCK8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果shRNA⁃TIPE慢病毒转染非小细胞肺癌细胞系A549后:(1)TIPE和β⁃catenin的mRNA、蛋白表达水平均低于阴性对照组和空白对照组;(2)TIPE基因沉默后,A549细胞克隆形成能力显著下降(F=17.48,P=0.0003),生长曲线实验检测A549细胞增殖能力下降;(3)shRNA⁃TIPE慢病毒转染后,A549细胞凋亡率(18.4±4.5)%明显高于阴性对照(12.7±3.6)%和空白对照组(11.5±3.4)%,差异有统计学意义(F=4.4844,P=0.0351)。结论TIPE可能通过激活Wnt/β⁃catenin信号通路促进非小细胞肺癌细胞系A549细胞增殖,抑制凋亡。
