辣木MoGAD基因克隆及表达分析

1

作者 敖冬慧 胡云飞 +4 位作者 向贵生 刘佳 聂石圆 田洋 唐卿雁 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期490-502,共13页

【目的】鉴定辣木中MoGAD基因,并对其进行克隆、生物信息学分析和表达水平分析,为探究辣木MoGAD基因的功能与γ-氨基丁酸(GABA)生物合成的关系奠定基础。【方法】以拟南芥(NP_197235.1)和葡萄(XP_002285268.1)GAD蛋白序列为参考,通过本... 【目的】鉴定辣木中MoGAD基因,并对其进行克隆、生物信息学分析和表达水平分析,为探究辣木MoGAD基因的功能与γ-氨基丁酸(GABA)生物合成的关系奠定基础。【方法】以拟南芥(NP_197235.1)和葡萄(XP_002285268.1)GAD蛋白序列为参考,通过本地BLAST方法,利用TBtools软件在辣木转录组数据中挖掘MoGAD家族基因,采用PCR技术对其进行克隆,并通过生物信息学在线分析网站和分子对接技术分析MoGAD蛋白的理化性质和催化活性位点,采用实时荧光定量RT-qPCR技术分析MoGAD基因在不同组织中的表达水平。【结果】在转录组数据中挖掘到4个MoGAD基因并成功对其进行克隆,测序的CDS区长度分别为:1494、1212、1470和942 bp;MoGAD1、MoGAD3和MoGAD4蛋白不存在跨膜结构域,属于膜外蛋白。其中MoGAD2蛋白序列在第5~27和60~82氨基酸位置存在跨膜结构,此段序列编码蛋白为分泌蛋白;系统发育分析显示MoGAD1基因家族所在分支基因Motif数量最多;分子对接表明4个MoGAD蛋白存在磷酸吡哆醛(PLP)和L-谷氨酸结合位点,且每个蛋白有多个氨基酸残基与PLP,L-谷氨酸形成氢键;荧光定量分析显示MoGAD1和MoGAD2基因在嫩叶、成熟叶和花中的表达量显著高于MoGAD3和MoGAD4基因,但这些基因在茎中表达量较低,推测MoGAD酶主要参与辣木叶部位GABA的生物合成。【结论】本研究成功克隆了辣木的MoGAD基因,并分析其编码蛋白的理化性质及与底物结合的功能活性位点,为进一步研究MoGAD基因的功能提供了理论依据。 展开更多

关键词 辣木 MoGAD Γ-氨基丁酸 基因克隆 生物信息学分析

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海藻精处理对夏黑葡萄品质的影响

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作者 敖冬慧 李永平 +3 位作者 张卉 李富佳 段永华 唐卿雁 《中国南方果树》 北大核心 2024年第3期192-199,共8页

以夏黑葡萄为试验材料,研究海藻精不同喷施次数处理对夏黑葡萄品质的影响,确定海藻精的最佳喷施处理次数,为夏黑葡萄的种植、品质提升提供参考依据。对开始转色的果穗每隔10 d喷施1次0.25%海藻精,共喷施5次,测定单果质量、果形指数、单... 以夏黑葡萄为试验材料,研究海藻精不同喷施次数处理对夏黑葡萄品质的影响,确定海藻精的最佳喷施处理次数,为夏黑葡萄的种植、品质提升提供参考依据。对开始转色的果穗每隔10 d喷施1次0.25%海藻精,共喷施5次,测定单果质量、果形指数、单宁、维生素C、可溶性固形物、可滴定酸、总糖、色差值等指标,并进行单因素方差分析和相关性分析。结果表明,喷施0.25%海藻精后,可溶性固形物含量增加0.56%,总糖含量增加35.71%~74.69%,糖酸比增加31.27%~73.35%。维生素C含量在喷施1次时显著增加了7.03%。当喷施2次时,可滴定酸和单宁含量显著降低了12.90%、86.34%;色泽方面,L*、a*、h°和CIRG值增加,而b*和C*值降低。喷施1次时单果质量增加幅度最大,为4.17%,果形指数降低了2.06%~3.31%,果皮硬度降低了0.77%~18.85%,果肉硬度降低了1.02%~25.51%。横径和纵径在喷施3次时增加的幅度最大,分别为4.23%、1.54%。通过相关性分析显示,单果质量、果形指数、单宁、维生素C、可溶性固形物、可滴定酸、总糖、色差值等指标之间存在一定的相关性。综上所述:采用0.25%海藻精喷施夏黑葡萄1~3次,能提高葡萄果实的营养价值和果实品质,为夏黑葡萄的优质、高产提供了理论依据和技术指导。 展开更多

关键词 夏黑葡萄 海藻精 品质

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石斛花含片的研制及品质分析

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作者 张卉 李顺平 +3 位作者 敖冬慧 陈军文 赵明 唐卿雁 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2023年第22期38-44,共7页

该文以鼓槌石斛花为主要原料,通过粉碎制粒加入甜味剂、填充剂、黏合剂、崩解剂等,制备鼓槌石斛花含片。以感官评分为评价指标,经单因素试验和响应面优化含片配方,并对产品进行理化指标测定和微生物检验。结果表明鼓槌石斛花含片的最佳... 该文以鼓槌石斛花为主要原料,通过粉碎制粒加入甜味剂、填充剂、黏合剂、崩解剂等,制备鼓槌石斛花含片。以感官评分为评价指标,经单因素试验和响应面优化含片配方,并对产品进行理化指标测定和微生物检验。结果表明鼓槌石斛花含片的最佳配方为鼓槌石斛花粉添加量44%、甘露醇31%、三氯蔗糖1.50%、羧甲基淀粉钠6%、聚维酮K30(15%)、薄荷脑0.5%、硬脂酸镁2%。理化指标测定结果显示:含片崩解时间为16.3 min、硬度43.57 kgf、脆碎度为0.93%、片重为(0.38±0.01)g。微生物检测结果为菌落总数≤85 CFU/g,大肠菌群≤10 MPN/100 g,致病菌未检出。研制出的鼓槌石斛花含片呈浅黄色,表面有光泽,且有浓郁的鼓槌石斛花的独特口味和适宜的甜味,口感较好、风味独特,符合食品安全卫生标准。 展开更多

关键词 石斛花 含片 直接压片法 配方优化 品质分析

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多发性硬化抗原特异性调节性T细胞的免疫活性 被引量：4

4

作者 姜红 刘广志 +4 位作者 周建华 杨亭亭 向雅娟 敖冬慧 高旭光 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期180-182,共3页

多发性硬化（multiple sclerosis, MS）是一种发生于中枢神经系统的炎性脱髓鞘疾病，致残率很高，严重影响患者的生存质量[1]。其发病机制迄今尚未完全明确，多认为由于基因和环境的相互作用有关[2]。多个研究发现MS患者外周血CD4^＋CD2... 多发性硬化（multiple sclerosis, MS）是一种发生于中枢神经系统的炎性脱髓鞘疾病，致残率很高，严重影响患者的生存质量[1]。其发病机制迄今尚未完全明确，多认为由于基因和环境的相互作用有关[2]。多个研究发现MS患者外周血CD4^＋CD25high Treg的效应功能较正常对照下降[3]。动物实验中，经静脉注射给予EAE鼠CD4^＋CD25^＋Treg可明显缓解其临床病情[4]。获取足量功能改善的Treg并自体回输无疑会为MS治疗提供一个安全有效新途径。 展开更多

关键词 多发性硬化 CD4^+CD25^+调节性T细胞 白介素 转化生长因子

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水通道蛋白4抗体阳性多发性硬化临床特点分析 被引量：2

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作者 何洋 杨亭亭 +4 位作者 姜红 向雅娟 敖冬慧 高旭光 刘广志 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2015年第3期229-234,共6页

目的分析水通道蛋白4(AQP4)抗体阳性多发性硬化的临床特征。方法共18例多发性硬化患者,均符合Mc Donald诊断标准(2010年版),分为AQP4抗体阳性组(5例)和AQP4抗体阴性组(13例),并门诊随访。结果 5例AQP4抗体阳性多发性硬化患者,男性2例、... 目的分析水通道蛋白4(AQP4)抗体阳性多发性硬化的临床特征。方法共18例多发性硬化患者,均符合Mc Donald诊断标准(2010年版),分为AQP4抗体阳性组(5例)和AQP4抗体阴性组(13例),并门诊随访。结果 5例AQP4抗体阳性多发性硬化患者,男性2例、女性3例,中位发病年龄43岁,中位病程4个月;脊髓病变和视神经受累常见;MRI显示脑组织广泛多发性长T1、长T2异常信号伴颈胸髓长T1、长T2异常信号(3/5例)或单纯颈胸髓多发性长T1、长T2异常信号(2/5例);脑脊液Ig G指数(4/4例)、24 h Ig G鞘内合成率(3/4例)升高,寡克隆区带阳性(3/4例);血清抗核抗体阳性(2/5例)或合并干燥综合征(1/5例)。结论 AQP4抗体阳性多发性硬化有其特异性,发病机制可能与经典多发性硬化不同,在临床诊断与治疗时需加以重视并区别处理。 展开更多

关键词 多发性硬化 水孔蛋白质类

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炎性反应与脑小血管发病机制研究进展 被引量：3

6

作者 敖冬慧 朱以诚 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期318-320,共3页

随着全球人口预期寿命的增加,老年群体患脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)较为广泛。CSVD是老年人日常生活能力下降的主要病因之一,并且在卒中、痴呆等发生发展中起重要作用。目前研究认为,CSVD 由多种机制引起,其中炎... 随着全球人口预期寿命的增加,老年群体患脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)较为广泛。CSVD是老年人日常生活能力下降的主要病因之一,并且在卒中、痴呆等发生发展中起重要作用。目前研究认为,CSVD 由多种机制引起,其中炎性反应参与CSVD 的发生。关于炎性反应和CSVD 发病机制的研究,往往从以下3个角度进行阐述:首先,从血管角度,即炎性反应是否会参与衰老相关脑小血管损伤,成为小动脉硬化性CSVD发病机制中的一个环节;其次,从脑组织损伤角度,即脑小血管内皮损伤导致血-脑屏障受损,进而造成脑组织损伤,这一因CSVD 继发的脑组织损伤是否有炎性反应参与;第三,由CSVD 引起的脑卒中是否会因脑组织坏死激活炎性反应,导致急性及慢性脑组织损伤。 展开更多

关键词 炎性反应 脑小血管病 发病机制 研究进展

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脑深髓静脉相关神经系统疾病 被引量：2

7

作者 敖冬慧 朱以诚 《临床内科杂志》 CAS 2020年第6期403-405,共3页

脑深髓静脉是位于脑深部白质内的脑小静脉,负责引流深部脑白质的血液至室管膜下静脉。应用磁敏感加权成像技术(SWI)对脑小静脉成像后发现脑深髓静脉与多种神经系统疾病相关。因此,本文对脑深髓静脉相关神经系统疾病的研究进展进行综述,... 脑深髓静脉是位于脑深部白质内的脑小静脉,负责引流深部脑白质的血液至室管膜下静脉。应用磁敏感加权成像技术(SWI)对脑小静脉成像后发现脑深髓静脉与多种神经系统疾病相关。因此,本文对脑深髓静脉相关神经系统疾病的研究进展进行综述,以期提高临床医生对脑深髓静脉相关神经系统疾病的认识及诊治。 展开更多

关键词 脑深髓静脉 神经系统疾病

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头晕恶心睡眠增多2月余伴精神行为异常1个月

8

作者 敖冬慧 姚明 +2 位作者 任海涛 倪俊 崔丽英 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2018年第2期148-152,共5页

病历摘要 患者女性,62岁,因头晕、恶心、睡眠增多2月余伴精神行为异常1个月,于2017年8月10日入院。患者2月余前（2017年5月25日）乘坐汽车途中出现头晕,恶心,呕吐胃内容物2次,自觉双下肢无力,持续不缓解,但自主行走不受影响;此后逐渐... 病历摘要 患者女性,62岁,因头晕、恶心、睡眠增多2月余伴精神行为异常1个月,于2017年8月10日入院。患者2月余前（2017年5月25日）乘坐汽车途中出现头晕,恶心,呕吐胃内容物2次,自觉双下肢无力,持续不缓解,但自主行走不受影响;此后逐渐出现精神较差,睡眠增多,自发言语减少。当地医院行头部CT检查未见明显异常,临床诊断为＂脑供血不足＂,予氯吡格雷静脉滴注（具体剂量不详）, 展开更多

关键词 脑炎 受体 N-甲基-D-天冬氨酸 视神经脊髓炎 病例报告

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椎基底动脉延长扩张症二例

9

作者 敖冬慧 何洋 +3 位作者 向雅娟 姜红 高旭光 刘广志 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2015年第12期1320-1321,共2页

1临床资料病例1：患者男性,62岁,因＂言语不清20d＂于2014年3月收入院。患者入院20d前无明确诱因出现言语含糊、吐词不清,但无词语理解及表达障碍,1周后家人发现其口角左歪,讲话和进食时流涎,无头晕头痛、恶心呕吐、饮水呛咳、吞咽困难... 1临床资料病例1：患者男性,62岁,因＂言语不清20d＂于2014年3月收入院。患者入院20d前无明确诱因出现言语含糊、吐词不清,但无词语理解及表达障碍,1周后家人发现其口角左歪,讲话和进食时流涎,无头晕头痛、恶心呕吐、饮水呛咳、吞咽困难、耳聋耳鸣,亦无肢体无力、麻木、行走不稳等症状,遂来就诊。既往体健,吸烟多年,个人史及家族史无特殊。内科系统体检未见异常。神经系统体检：意识清晰, 展开更多

关键词 基底动脉 个人史 言语含糊 耳聋耳鸣 内科系统 言语不清 左歪 吞咽困难 动脉纡曲 左侧椎动脉

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青年男性亚急性小脑性共济失调的罕见病因

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作者 敖冬慧 刘昕超 +3 位作者 彭斌 朱以诚 崔丽英 姚明 《协和医学杂志》 CSCD 2021年第1期110-113,共4页

亚急性小脑性共济失调多见于非典型感染、自身免疫性疾病和副肿瘤性小脑变性。本文报道1例表现为亚急性小脑性共济失调患者,其病因罕见。该患者男性,31岁,亚急性起病,临床表现为小脑性共济失调,严重免疫抑制状态,经筛查发现人类免疫缺... 亚急性小脑性共济失调多见于非典型感染、自身免疫性疾病和副肿瘤性小脑变性。本文报道1例表现为亚急性小脑性共济失调患者,其病因罕见。该患者男性,31岁,亚急性起病,临床表现为小脑性共济失调,严重免疫抑制状态,经筛查发现人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体及核酸均阳性、脑脊液JC病毒DNA阳性,临床诊断为JC病毒小脑颗粒细胞神经元病,经抗逆转录病毒治疗后共济失调症状好转,3个月后随访症状稳定。JC病毒小脑颗粒细胞神经元病是一种JC病毒感染引起的新型临床症候,目前报道较少,本例为国内首次报道。本病例提示HIV感染免疫抑制患者出现共济失调时需筛查JC病毒,免疫功能的恢复有助于控制JC病毒小脑颗粒细胞神经元病症状进展。 展开更多

关键词 小脑性共济失调 JC病毒 人类免疫缺陷病毒 小脑颗粒细胞神经元病

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水通道蛋白4基因多态性与多发性硬化、视神经脊髓炎的相关性 被引量：2

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作者 杨亭亭 何洋 +10 位作者 方丽波 贾玫 何湘君 张旗 李珊珊 向雅娟 姜红 敖冬慧 张星虎 高旭光 刘广志 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期861-867,共7页

目的 探讨水通道蛋白4（AQP-4）基因的常见基因多态性与中国北方汉族人多发性硬化（MS）、视神经脊髓炎（NMO）的相关性.方法 收集2002-2013年于北京大学人民医院、首都医科大学附属北京天坛医院和首都医科大学附属复兴医院神经内科住... 目的 探讨水通道蛋白4（AQP-4）基因的常见基因多态性与中国北方汉族人多发性硬化（MS）、视神经脊髓炎（NMO）的相关性.方法 收集2002-2013年于北京大学人民医院、首都医科大学附属北京天坛医院和首都医科大学附属复兴医院神经内科住院和门诊的MS（n =93）、NMO（n=32）、视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD,n=35）、临床孤立综合征（CIS,n=14）患者,并收集2011-2013年来自北京大学人民医院的健康医护人员作为健康对照组（n=109）,通过高分辨率熔解曲线法进行6个选定AQP-4单核苷酸多态性（SNP）的基因分型.利用x2检验比较上述各组之间SNP的等位基因及基因型频率,经Bonferroni法行校正分析,并进一步据NMO组的血清AQP-4抗体进行分层分析.结果 与健康对照组[98/206 （47.6％）]相比,MS[68/186 （36.6％）]、NMOSD组[23/68（33.8％）]rs162007位点的A等位基因频率明显降低（OR=0.635,95％ CI0.424 ～0.952,P=0.028;OR=0.563,95％ CI0.318 ～0.998,P=0.048）,经Bonferroni校正后,差异无统计学意义.与健康对照组[74/200（37.0％）]比较,CIS组[16/28（57.1％）]rs3763043位点的T等位基因频率明显升高（OR=2.270,95％CI1.018 ～5.061,P=0.041）,经Bonferroni校正后,差异无统计学意义.经分层分析亦未发现NMO组AQP-4抗体阳性者与阴性者之间的差异.结论 AQP-4基因的常见基因多态性与中国北方汉族人MS和NMO无明显相关性,且与NMO中AQP-4抗体阳性者无关,提示AQP-4的常见基因多态性与NMO等疾病的遗传易患性无关. 展开更多

关键词 多发性硬化 视神经脊髓炎 水通道蛋白质4 多态性 单核苷酸

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吗替麦考酚酯治疗多发性硬化和视神经脊髓炎的疗效观察 被引量：3

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作者 向雅娟 何洋 +5 位作者 杨亭亭 敖冬慧 姜红 王阳阳 高旭光 刘广志 《中国医师进修杂志》 2016年第9期779-782,共4页

目的：观察吗替麦考酚酯（MMF）治疗多发性硬化（MS）和视神经脊髓炎（NMO）的有效性和安全性。方法选取MS和NMO患者27例，根据治疗方案分为两组：MMF联合激素组（MMF组，10例），MS 5例，NMO 5例；单用激素组（激素组，17例）MS 13例，... 目的：观察吗替麦考酚酯（MMF）治疗多发性硬化（MS）和视神经脊髓炎（NMO）的有效性和安全性。方法选取MS和NMO患者27例，根据治疗方案分为两组：MMF联合激素组（MMF组，10例），MS 5例，NMO 5例；单用激素组（激素组，17例）MS 13例，NMO 4例。对比治疗后6个月的有效率、治疗前和治疗后6个月扩展的残疾状况量表（EDSS）评分和年复发率（ARR）；并观察其安全性。结果 MMF组和激素组治疗后6个月有效率分别为9/10和11/17，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。MMF 组和激素组治疗后6个月 EDSS 评分明显低于治疗前[（2.05±2.41）分比（3.40±2.05）分和（1.17±0.92）分比（2.38±1.28）分]，差异有统计学意义（P＜0.05），而且以MS患者为著；MMF组治疗后6个月ARR明显少于治疗前（0次/年比0.75次/年），差异有统计学意义（P＜0.05）；MMF 组治疗前后 ARR 差值明显高于激素组（0.75次/年比-0.46次/年），差异有统计学意义（P＜0.01），而且以MS患者为著。1例患者服用较大剂量MMF时出现肌痛，减量后症状缓解。结论 MMF可有效治疗MS和NMO，能改善MS患者的神经功能且减少疾病复发，其安全性较高。 展开更多

关键词 多发性硬化 视神经脊髓炎 糖皮质类激素 吗替麦考酚酯 回顾性研究

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