降低FPSO淡水系统出水含盐度的应用研究

1

作者 王文榜 张翼飞 +2 位作者 李靖宏 李孔辉 文立民 《天津科技》 2024年第4期106-109,共4页

阐述海水造淡水机的运行特点和工艺特色,对比降低造淡水机出口淡水含盐度的成分差异,通过清洗矿砂滤器、维修清洗渗透膜、测试造淡水机的压力应用效果,为今后降低造淡水机含盐度提供参考。

关键词 造淡水机 含盐度 矿砂滤器 渗透膜

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糖化酵母糖化酶基因在酿酒酵母中的克隆与表达 被引量：3

2

作者 文立民 于松涛 +1 位作者 李浩 赵大健 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期20-25,共6页

糖化酵母结构基因ＳＴＡ编码分泌到胞外的葡萄糖淀粉酶（α－１，４－葡聚糖－葡糖水解酶，ＥＣ３．２．１．３），俗称糖化酶。通过限制性内切酶Ｓａｕ３Ａ部分酶切糖化酵母染色体，以穿梭质粒ＹＥＰ１３作载体，建立糖化酵母的基因文... 糖化酵母结构基因ＳＴＡ编码分泌到胞外的葡萄糖淀粉酶（α－１，４－葡聚糖－葡糖水解酶，ＥＣ３．２．１．３），俗称糖化酶。通过限制性内切酶Ｓａｕ３Ａ部分酶切糖化酵母染色体，以穿梭质粒ＹＥＰ１３作载体，建立糖化酵母的基因文库，转化ｓｔａ°ｉｎｈ°型酿酒酵母受体菌Ｃ＿２，筛选出三株ｓｔａ￣＋转化子，检测出５．３ｋｂ大小的外源基因片段，继而采用薄层层析、ＫＮＲ染料测酶活性等方法对外源基因产物进行了鉴定并测定了酶活最佳反应条件。 展开更多

关键词 酿酒酵母 克隆 糖化酶基因

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内源性反义RNA在体外抑制乙型肝炎病毒基因表达的研究 被引量：1

3

作者 文立民 汤华 +1 位作者 张灏 任中原 《天津医药》 CAS 1995年第6期323-325,共3页

采用PCR和酶切的方法获得了HBV的两个基因片段,将它们反向插入真核表达载体pMAMneo和pSV_2dhfr构建成针对HBVs基因和e基因的两个反义RNA真核表达载体pAS_1和pAE_1,以磷酸钙-DNA共沉淀法转染人肝癌细胞系2.2.15,通过ELISA方法检测转染后1... 采用PCR和酶切的方法获得了HBV的两个基因片段,将它们反向插入真核表达载体pMAMneo和pSV_2dhfr构建成针对HBVs基因和e基因的两个反义RNA真核表达载体pAS_1和pAE_1,以磷酸钙-DNA共沉淀法转染人肝癌细胞系2.2.15,通过ELISA方法检测转染后1～8天内细胞培养液中s抗原和e抗原的表达水平,证实内源性反义RNA可明显地抑制HBV抗原的表达。 展开更多

关键词 内源性 反义RNA 乙型肝炎病毒 基因表达

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乙型肝炎病毒裸鼠感染动物模型的建立 被引量：2

4

作者 文立民 任中原 《天津医药》 CAS 1997年第4期205-206,共2页

将整合有HBV基因组DNA的人肝癌细胞2.2.15接种于裸鼠皮下,使其在2～3周内长成实体瘤,在裸鼠血清及肿瘤组织中均检出了HBV存在的相应指征。肿瘤组织经体外培养后再次接种另一批裸鼠,仍能产生上述特性。这种HBV裸鼠动物模型,将有助于HBV... 将整合有HBV基因组DNA的人肝癌细胞2.2.15接种于裸鼠皮下,使其在2～3周内长成实体瘤,在裸鼠血清及肿瘤组织中均检出了HBV存在的相应指征。肿瘤组织经体外培养后再次接种另一批裸鼠,仍能产生上述特性。这种HBV裸鼠动物模型,将有助于HBV的体内研究和抗病毒疗效的考核。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 动物模型

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细胞因子体外抗乙型肝炎病毒的研究 被引量：1

5

作者 文立民 任中原 《天津医药》 CAS 1995年第7期421-422,共2页

由于细胞因子能够有效地调节人体的免疫功能,因而越来越受到重视,现已被广泛地应用于临床。为了观察和筛选在体外能有效地抗乙型肝炎病毒(HBV)的细胞因子,本文在Sells等建立的HBVDNA转染细胞株2.2.15的基础上。

关键词 细胞因子 免疫介质 乙型肝炎病毒 体外 实验研究

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荧光素标记的反义寡核苷酸在人肝癌细胞中的时相分布 被引量：1

6

作者 文立民 任中原 《天津医药》 CAS 1997年第2期87-89,共3页

观察荧光素(FITC)标记的硫代磷酸反义寡核苷酸经阳离子脂质体(Lipofectin)介导后,在完整的人肝癌细胞(2.2.15细胞)中的时相分布。结果显示,荧光素标记的反义寡核苷酸在加入30分钟后,大多进入细胞质,而且在10分钟以后,大部分迅速聚积于... 观察荧光素(FITC)标记的硫代磷酸反义寡核苷酸经阳离子脂质体(Lipofectin)介导后,在完整的人肝癌细胞(2.2.15细胞)中的时相分布。结果显示,荧光素标记的反义寡核苷酸在加入30分钟后,大多进入细胞质,而且在10分钟以后,大部分迅速聚积于细胞核中,它们在细胞核及细胞质中可稳定存在12小时以上。研究结果为探讨反义寡核苷酸在完整细胞中的作用机理以及设计更有效的反义寡核苷酸提供了一定的线索。 展开更多

关键词 荧光素 反义寡核苷酸 细胞内分布 肝肿瘤

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疱疹病毒对抗病毒药物抗性的回顾 被引量：3

7

作者 文立民 《国外医学（微生物学分册）》 北大核心 1995年第1期14-16,26,共4页

本文就单纯疤疹病毒(HSV)、水痘带状疱疹病毒(VZV)、人巨细胞病毒(HCMV)、EB病毒(EBV)等疱疹病毒的抗病毒药物,产生抗性的机理和抗病毒治疗的策略等方面进行了回顾。

关键词 疱疹病毒 抗病毒药 抗药性 HSV VZV HCMV EBV

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DNA疫苗用于癌症的治疗 被引量：3

8

作者 文立民 《国外医学（免疫学分册）》 北大核心 1996年第3期159-160,共2页

近来发现注入编码各种蛋白的质粒可在体内产生相应的ＣＴＬ和抗体，使接种质粒成为一种新的特异性免疫方法，它可引起ＭＨＣ－Ｉ和ＭＮＣ－Ⅱ介导的免疫应答，使之可能成为发展肿瘤疫苗的理想方法。根据癌变的遗传学，用质粒可有效地构... 近来发现注入编码各种蛋白的质粒可在体内产生相应的ＣＴＬ和抗体，使接种质粒成为一种新的特异性免疫方法，它可引起ＭＨＣ－Ｉ和ＭＮＣ－Ⅱ介导的免疫应答，使之可能成为发展肿瘤疫苗的理想方法。根据癌变的遗传学，用质粒可有效地构建亚单位和多亚单位疫苗，ＤＮＡ编码的肿瘤特异性蛋白质片断作为新的抗原可打破免疫耐受，产生肿瘤特异性免疫应答。 展开更多

关键词 DNA疫苗 免疫疗法 肿瘤

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培养HepG2细胞的几点体会 被引量：4

9

作者 文立民 任中原 《天津医学院学报》 1994年第3期27-28,共2页

ＨｅｐＧ２细胞系是一种不易培养的用于ＨＢＶ研究的肝癌细胞。本文通过调整某些培养条件，提高了ＨｅｐＧ２细胞的增殖速率，同时也降低了细胞的培养成本，为ＨＢＶ的研究提供了方便的受体细胞。

关键词 HEPG2细胞系 细胞培养 培养条件

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反义寡聚脱氧核苷酸的合成与纯化

10

作者 文立民 张灏 任中原 《天津医药》 CAS 1994年第8期488-489,共2页

近年兴起的反义技术为开发抗病毒药物带来了新的希望,其中反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotidc,as ODN)抗人乙型肝炎病毒(HBV)的研究是其热点之一。通过互补于HBV基因或其mRNA的人工合成的asODN可达到抗HBV的目的。为了... 近年兴起的反义技术为开发抗病毒药物带来了新的希望,其中反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotidc,as ODN)抗人乙型肝炎病毒(HBV)的研究是其热点之一。通过互补于HBV基因或其mRNA的人工合成的asODN可达到抗HBV的目的。为了增强抗病毒效果,本文设计了针对HBV2.1KbmRNA起始区、表面抗原基因起始区、e抗原基因起始区的三个硫代磷酸反义寡聚脱氧核苷酸片段。根据固相亚磷酸酰胺合成法,利用DNA合成仪,合成了均为18个碱基长度的三个as ODN片段。经过从固相载体上的切下、去保护基和变性聚丙稀酰胺凝胶电泳的纯化与鉴定,采用浸泡法最终回收到了所需的as ODN片段并测定了其DNA含量。 展开更多

关键词 ODN 抗病毒药 乙型肝炎病毒

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浅谈美国对生物工程的管理

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作者 文立民 张兆山 +1 位作者 王锦梅 黄翠芬 《生物技术通讯》 CAS 1997年第1期47-48,共2页

生物技术是一项切实可行的技术,它已在基础研究、工业和商业的许多方面得到了广泛的应用,因此,不同部门之间的协调管理实属必要。1986年,美国政府在生物工程领域的协调大纲(Coordinated Framework)的出台标志着管理政策的开始。 协调大... 生物技术是一项切实可行的技术,它已在基础研究、工业和商业的许多方面得到了广泛的应用,因此,不同部门之间的协调管理实属必要。1986年,美国政府在生物工程领域的协调大纲(Coordinated Framework)的出台标志着管理政策的开始。 协调大纲是一项广泛而复杂的协调政策,它解释了现存的对生物工程管理政策的使用。 展开更多

关键词 生物工程产品 管理政策 OFFICE 管理措施 协调管理 基因治疗 食品与药品管理局 食品添加剂 医学科学院 重组DNA技术

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人肝细胞靶向性DNA载体系统的建立

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作者 文立民 任中原 《天津医药》 CAS 1997年第3期164-165,共2页

近年来,随着在细胞分子水平上对疾病发病机理认识的深入,基因治疗已成为目前医学生物学领域中最重要的研究课题之一。其中,如何将外源性基因特异地导入靶细胞是基因治疗的一个关键因素。为了建立具肝细胞靶向性的反义药物运载系统,本文... 近年来,随着在细胞分子水平上对疾病发病机理认识的深入,基因治疗已成为目前医学生物学领域中最重要的研究课题之一。其中,如何将外源性基因特异地导入靶细胞是基因治疗的一个关键因素。为了建立具肝细胞靶向性的反义药物运载系统,本文采用异源双功能交联剂(SPDP)将以半乳糖为末端的唾液糖蛋白(asialoorosomucoid,ASOR) 展开更多

关键词 肝细胞 靶向性 DNA 载体系统 基因疗法

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发现蛋白质相互作用的新途径——酵母双杂交系统及其应用

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作者 文立民 张兆山 黄翠芬 《生物技术通讯》 CAS 1996年第1期32-35,共4页

生命中无时无刻不存在生物大分子之间的相互作用,其中包括核酸之间、核酸与蛋白质之间以及蛋白质之间的相互作用。以往研究蛋白质之间的相互作用通常采用生化技术,如偶联、免疫共沉淀等方法。1989年,Fields和Song创立了一种崭新的遗传... 生命中无时无刻不存在生物大分子之间的相互作用,其中包括核酸之间、核酸与蛋白质之间以及蛋白质之间的相互作用。以往研究蛋白质之间的相互作用通常采用生化技术,如偶联、免疫共沉淀等方法。1989年,Fields和Song创立了一种崭新的遗传学方法用于研究蛋白质之间的相互作用。 展开更多

关键词 酵母双杂交系统 蛋白质相互作用 报告基因 转录激活 杂交蛋白 细胞周期 信号传导途径 癌基因蛋白 结构域 操纵基因

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内皮素A型受体胞内区cDNA的克隆及序列分析

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作者 文立民 张兆山 +1 位作者 李淑琴 黄翠芬 《生物技术通讯》 CAS 1997年第2期57-59,共3页

为研究内皮素受体在细胞内的信号传导途径,通过聚合酶链反应(PCR)的方法获得了480bp的内皮素A型受体胞内区cDNA片段,将其克隆进载体pUC19进行核苷酸序列分析,结果表明克隆的cDNA片段与报道的内皮素A型受体cDNA序列只有一个碱基的不同且... 为研究内皮素受体在细胞内的信号传导途径,通过聚合酶链反应(PCR)的方法获得了480bp的内皮素A型受体胞内区cDNA片段,将其克隆进载体pUC19进行核苷酸序列分析,结果表明克隆的cDNA片段与报道的内皮素A型受体cDNA序列只有一个碱基的不同且为同义突变。最后,将克隆的cDNA片段定向克隆进酵母双杂交系统中的引诱蛋白表达载体pGBT9,为探寻与内皮素A型受体相互作用的蛋白质打下了基础。 展开更多

关键词 内皮素A型受体 克隆 序列分析

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肝细胞靶向性脂质体介导的硫代磷酸反义寡核苷酸在体内外抑制乙型肝炎病毒的研究

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作者 文立民 任中原 《生物技术通讯》 CAS 1998年第2期91-94,共4页

在体外细胞培养系统和裸鼠动物体内,观察了人肝细胞靶向性脂质体介导的部分硫代型和全部硫代型反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒的抑制作用。结果显示,针对HBVe基因翻译起始区的18聚体的硫代磷酸反义寡核苷酸在体内、外对HBV DNA、HBV mRNA及... 在体外细胞培养系统和裸鼠动物体内,观察了人肝细胞靶向性脂质体介导的部分硫代型和全部硫代型反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒的抑制作用。结果显示,针对HBVe基因翻译起始区的18聚体的硫代磷酸反义寡核苷酸在体内、外对HBV DNA、HBV mRNA及HBsAg、HBeAg均有不同程度的抑制作用。研究说明,反义寡核苷酸是抗HBV有效的基因治疗候选药物。 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 乙型肝炎病毒 靶向性脂质体 人肝癌细胞 抑制作用

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发现蛋白质相互作用的新途径──酵母双杂交系统 被引量：1

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作者 文立民 《国外医学（遗传学分册）》 1997年第2期61-64,共4页

酵母双杂交系统又称相互作用陷阱，是研究蛋白质相互作用，发现新基因的新兴的分子遗传学技术。文中介绍了该技术的基本原理、操作程序和应用前景。

关键词 蛋白质 相互作用 酵母双杂交系统

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反义寡核苷酸抗病毒研究中的科学思维方式

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作者 文立民 《医学与哲学》 1993年第11期38-39,共2页

病毒在自然界分布非常广泛,对人类健康及社会经济均有很大影响,如流行性感冒病毒、肝炎病毒、爱滋病病毒等都是某些严重传染病大流行的罪魁祸首。病毒还是引起先天性畸形的重要因素之一,如风疹病毒、巨细胞病毒等。另外,病毒与癌症的发... 病毒在自然界分布非常广泛,对人类健康及社会经济均有很大影响,如流行性感冒病毒、肝炎病毒、爱滋病病毒等都是某些严重传染病大流行的罪魁祸首。病毒还是引起先天性畸形的重要因素之一,如风疹病毒、巨细胞病毒等。另外,病毒与癌症的发生有着密切的关系,如EB病毒、 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 抗病毒 研究

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抑瘤素-M(OSM)在GST融合表达系统中的表达、纯化和活性测定 被引量：2

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作者 曹勇 张兆山 +1 位作者 文立民 李淑琴 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期333-333,共1页

抑瘤素Ｍ是一种具有多种生物活性的细胞因子，具有重要的研究价值和潜在的应用前景。基于ＧＳＴ融合表达载体，构建了一个ＯＳＭ的高效表达系统，诱导表达后融合蛋白占全菌蛋白的５０％以上，在低温诱导的条件下，可溶性蛋白中融合蛋... 抑瘤素Ｍ是一种具有多种生物活性的细胞因子，具有重要的研究价值和潜在的应用前景。基于ＧＳＴ融合表达载体，构建了一个ＯＳＭ的高效表达系统，诱导表达后融合蛋白占全菌蛋白的５０％以上，在低温诱导的条件下，可溶性蛋白中融合蛋白的含量可达１５％。在对包涵体形式的融合蛋白变复性的基础上，通过亲和层析一步纯化达到９０％左右的纯度。对融合蛋白进行了活性测定，结果提示了Ｎ端的头两个氨基酸对ＯＳＭ的生物活性是重要的。 展开更多

关键词 抑瘤素-M 高效表达 活性测定 GST 融合表达系统

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反义寡核苷酸的抗病毒作用及其研究进展

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作者 李黎 蔡宏荣 文立民 《国外医学（微生物学分册）》 北大核心 1994年第1期5-8,4,共5页

根据靶核酸序列设计的具有一定长度的反义寡核苷酸可与靶核酸特异结合,从而发挥调节基因表达的功能。本文涉及反义寡核苷酸及其类似物的抗病毒特性、抗病毒机理、反义寡核苷酸的毒性和药物动力学以及未来的发展前景。

关键词 反义寡核苷酸 抗病毒

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天然药物在体外抗HBV的研究 被引量：9

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作者 文立民 李冬田 +1 位作者 马海伦 任中原 《天津医科大学学报》 1996年第2期15-17,共3页

以乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ转染细胞株２．２．１５细胞培养上清液中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ滴度作为天然药物抗ＨＢＶ效果的评价指标，对板蓝根、苦味叶下株和４种中药混合物的抗ＨＢＶ作用进行了比较。同时，应用四甲基偶氮唑盐... 以乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ转染细胞株２．２．１５细胞培养上清液中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ滴度作为天然药物抗ＨＢＶ效果的评价指标，对板蓝根、苦味叶下株和４种中药混合物的抗ＨＢＶ作用进行了比较。同时，应用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法检测药物的细胞毒性。结果显示，苦味叶下株与４种中药的混合物抗ＨＢＶ的作用较强，可望成为有潜力的抗ＨＢＶ药物。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 天然药物 抗病毒剂 中药 药理学

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