H9胚胎干细胞源细胞外囊泡促进子宫内膜损伤修复的研究

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作者 陈芷琪 马靖 +5 位作者 姜咏竹 马官荣 杨邦亚 王斓茜 方廖琼 王智彪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1497-1504,共8页

目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响。方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定。建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜... 目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响。方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定。建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜组织病理学变化、免疫组化法分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。通过EdU法、Western blot法评估EVs对人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖的影响。结果:H9-hESCs-EVs是粒径为(144.7±2.1)nm并且具有膜结构的纳米小体,表达CD63和TSG101特征蛋白。与PBS组相比,EVs实验组子宫内膜组织形态完整、厚度及腺体数量增加,EVs实验组PCNA表达的平均光密度较PBS组显著升高(P<0.05)。EdU、Western blot检测结果显示H9-hESCs-EVs促进hEndoSCs增殖,且与EVs呈现蛋白浓度正相关(P<0.05)。结论:H9-hESCs-EVs通过提高子宫内膜基质细胞增殖促进子宫内膜损伤修复。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 细胞外囊泡 子宫内膜 子宫内膜基质细胞 细胞增殖

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大肠埃希菌外膜囊泡对乳腺癌细胞增殖及荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 被引量：1

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作者 王斓茜 马官荣 +3 位作者 姜咏竹 常秀林 方廖琼 白晋 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1245-1254,共10页

目的·分析大肠埃希菌外膜囊泡(Escherichia coli outer membrane vesicle,E.coli-OMV)在体外对小鼠4T1乳腺癌细胞增殖的影响,在体内对BALB/c-4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法·从E.coli的培养上清液中收集OMV并进行表征... 目的·分析大肠埃希菌外膜囊泡(Escherichia coli outer membrane vesicle,E.coli-OMV)在体外对小鼠4T1乳腺癌细胞增殖的影响,在体内对BALB/c-4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法·从E.coli的培养上清液中收集OMV并进行表征。采用荧光标记追踪法检测E.coli-OMV被4T1细胞摄入的情况。采用CCK-8法测定E.coli-OMV对4T1细胞增殖的影响。采用流式细胞术检测E.coli-OMV对4T1细胞周期的影响。利用皮下接种法建立BALB/c-4T1荷瘤小鼠模型,而后将小鼠分为E.coli-OMV组与对照(Control)组(每组10只);前者于每2 d注射0.25 mg/kg E.coli-OMV,后者则注射等剂量的PBS。观察2组小鼠的体质量、40 d生存率、肿瘤体积及质量变化,采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)评价肿瘤组织的病理学形态,采用免疫组织化学染色法观察肿瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)与细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)的表达情况。结果·E.coli-OMV是粒径为(216.00±18.30) nm的球形膜囊结构,可表达E.coli外膜蛋白A (outer membrane protein A,OmpA)与OmpC。荧光显微镜的观察结果显示4T1细胞可摄入E.coli-OMV。CCK-8法的结果显示,E.coli-OMV对4T1细胞的抑制作用与时间-剂量呈正相关。流式细胞术的结果显示,E.coli-OMV将4T1细胞的生长周期阻滞于G0/G1期。体内实验显示,与Control组相比,E.coli-OMV组小鼠的体质量在初期注射后稍有下降(P=0.031),而后出现回升;其40 d生存率增加(P=0.037);该组小鼠肿瘤的体积、质量的增长量均较少(P=0.041,P=0.004),其肿瘤体积抑制率达29.69%、肿瘤质量抑制率达49.81%。H-E染色的结果显示,E.coli-OMV组小鼠肿瘤组织细胞核分裂象较Control组减少(P=0.038)。免疫组织化学染色的结果显示,E.coli-OMV组小鼠肿瘤组织中的PCNA及CyclinD1阳性表达较Control组减少(P=0.031,P=0.002)。结论·体外研究与体内研究均表明,E.coli-OMV可对4T1细胞的增殖产生明显的抑制作用。 展开更多

关键词 细菌外膜囊泡 乳腺癌 细胞周期 抑瘤作用

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羊胎盘免疫调节因子对^(60)Co-γ射线辐射损伤小鼠免疫功能影响的研究 被引量：10

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作者 方廖琼 何成明 +2 位作者 牛荣 钟英英 魏泓 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期210-212,共3页

目的:研究羊胎盘免疫调节因子对60Co-γ射线辐射损伤小鼠免疫功能的影响。方法:采用60Co-γ射线辐射致免疫损伤模型,MTT法检测羊胎盘免疫调节因子对ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖效应,耳廓增重法检测迟发超敏反应(delayedtypehyperse... 目的:研究羊胎盘免疫调节因子对60Co-γ射线辐射损伤小鼠免疫功能的影响。方法:采用60Co-γ射线辐射致免疫损伤模型,MTT法检测羊胎盘免疫调节因子对ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖效应,耳廓增重法检测迟发超敏反应(delayedtypehypersensitivity,DTH),酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedsorbentassay,ELISA)法检测血清IgG的生成能力。结果:羊胎盘免疫调节因子可显著促进脾淋巴细胞的增殖,提高小鼠DTH反应和血清IgG的生成。结论:羊胎盘免疫调节因子促进免疫损伤小鼠特异性免疫功能的恢复,提高小鼠抗辐射损伤的能力。 展开更多

关键词 羊胎盘免疫调节因子 辐射损伤 特异性免疫

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羊胎粉与灵芝多糖抗辐射功能协同效应的实验研究 被引量：5

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作者 方廖琼 魏泓 +1 位作者 苏晔 韩学峰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第7期118-120,共3页

研究结果表明,经口给予60Co-γ射线致死剂量8Gy辐射小鼠羊胎冻干粉可显著延长受辐射小鼠的平均存活时间(p<0.01),降低小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率(p<0.01);给予60Co-γ射线半致死剂量5Gy辐照小鼠羊胎粉,可显著促进受损外周血白细... 研究结果表明,经口给予60Co-γ射线致死剂量8Gy辐射小鼠羊胎冻干粉可显著延长受辐射小鼠的平均存活时间(p<0.01),降低小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率(p<0.01);给予60Co-γ射线半致死剂量5Gy辐照小鼠羊胎粉,可显著促进受损外周血白细胞的恢复(p<0.01)。与羊胎冻干粉和灵芝多糖相比较,由冻干羊胎粉和灵芝多糖配方而成的羊胎灵芝多糖复合物能显著延长受照小鼠的平均存活时间(p<0.05),显著降低小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的产生(p<0.01或p<0.05),显著增加外周血白细胞总数(p<0.01或p<0.05)。结果提示:羊胎粉具有抗辐射功能,并且与灵芝多糖具有抗辐射功能的协同效应。 展开更多

关键词 羊胎粉 灵芝多糖 抗辐射功能 协同效应 复合物 动物实验 保健食品

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羊胎盘免疫调节因子对小鼠体液免疫的影响 被引量：8

5

作者 方廖琼 钟英英 +2 位作者 张华 牛荣 魏泓 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期356-358,共3页

目的:探讨羊胎盘免疫调节因子对机体的体液免疫调节作用。方法:BALB/c小鼠为实验对象,MTT法测定脾B淋巴细胞的增殖,溶血空斑实验(PFC)测定IgM,酶联免疫吸附法(ELISA)测定体外培养B淋巴细胞培养上清IgG、体内血清抗体IgG。结果:羊胎盘免... 目的:探讨羊胎盘免疫调节因子对机体的体液免疫调节作用。方法:BALB/c小鼠为实验对象,MTT法测定脾B淋巴细胞的增殖,溶血空斑实验(PFC)测定IgM,酶联免疫吸附法(ELISA)测定体外培养B淋巴细胞培养上清IgG、体内血清抗体IgG。结果:羊胎盘免疫调节因子对免疫抑制小鼠分泌抗体能力具有显著改善(P<0.01),并具有剂量效应(P<0.01);直接作用于脾淋巴细胞,可显著促进细菌脂多糖诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖,显著提高脾B淋巴细胞产生抗体的能力(P<0.01),剂量效应不显著。结论:羊胎盘免疫调节因子能增强小鼠体液免疫功能,可促进免疫抑制小鼠的体液免疫能力恢复。 展开更多

关键词 羊胎盘免疫调节因子 体液免疫 B淋巴细胞

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中华鳖出血性肠炎病病理组织学研究 被引量：9

6

作者 方廖琼 陈昌琼 何成明 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1998年第2期7-11,共5页

中华鳖出血性肠炎病病理组织学研究方廖琼陈昌琼何成明（四川畜牧兽医学院水产系，重庆６３２４６０）本文作者对中华鳖出血性肠炎病部分组织器官作病理分析，以期对鳖出血性肠炎症的防治提供理论依据。１材料与方法实验室水族箱饲养稚... 中华鳖出血性肠炎病病理组织学研究方廖琼陈昌琼何成明（四川畜牧兽医学院水产系，重庆６３２４６０）本文作者对中华鳖出血性肠炎病部分组织器官作病理分析，以期对鳖出血性肠炎症的防治提供理论依据。１材料与方法实验室水族箱饲养稚鳖，体重５０—７５克，共４只，３雄... 展开更多

关键词 中华鳖 出血性 肠炎 病理组织学

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卵细胞受精相关胞质钙离子波、钙离子震荡信号特征及其形成机制 被引量：2

7

作者 方廖琼 王智彪 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期358-361,共4页

胞质[Ca2+]i震荡的动力学变化在哺乳动物早期胚胎发育中发挥重要作用。卵母细胞的成熟伴随间断的、快速的[Ca2+]i震荡的时空表达;在受精过程中精子因子诱导的反复[Ca2+]i震荡的振幅和持续时间是卵细胞最有效的激活信号,这种信号形成自... 胞质[Ca2+]i震荡的动力学变化在哺乳动物早期胚胎发育中发挥重要作用。卵母细胞的成熟伴随间断的、快速的[Ca2+]i震荡的时空表达;在受精过程中精子因子诱导的反复[Ca2+]i震荡的振幅和持续时间是卵细胞最有效的激活信号,这种信号形成自然连续的受精[Ca2+]i波,并以长时持续[Ca2+]i震荡形式在受精卵空间传递并持续数小时,直至受精完成;受精卵内源性的Ca2+释放所引起的[Ca2+]i震荡形成第一次卵裂信号,启动早期胚胎的发育。精子PLCζ和cPKCs是形成受精卵[Ca2+]波、[Ca2+]震荡的重要因素。 展开更多

关键词 卵细胞 胞质钙波 胞质钙震荡 钙离子信号

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草鱼细菌性败血症乳酸脱氢同工酶的研究 被引量：5

8

作者 方廖琼 何成明 刘宁 《水产养殖》 CAS 1997年第6期11-11,共1页

本试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳．研究了正常草鱼和患细菌性败血症草鱼的肝脏、肾脏、心脏、鳃及血清的乳酸脱氢酶（LDH）同工酶。研究结果表明．患病草鱼和正常草鱼的LDH同工酶带有明显差异．其酶谱变化具有组织、器官的特异性... 本试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳．研究了正常草鱼和患细菌性败血症草鱼的肝脏、肾脏、心脏、鳃及血清的乳酸脱氢酶（LDH）同工酶。研究结果表明．患病草鱼和正常草鱼的LDH同工酶带有明显差异．其酶谱变化具有组织、器官的特异性。LDH同工酶可以作为草鱼患细菌性败血症的生理、病理指标。 展开更多

关键词 草鱼 细菌性败血症 乳酸脱氢酶同工酶

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小鼠囊胚胞外囊泡对子宫内膜上皮细胞E-cadherin和vimentin表达的影响 被引量：2

9

作者 刘颖 段乳侠 +1 位作者 张浩栋 方廖琼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期345-351,共7页

目的:探讨小鼠囊胚细胞外囊泡(EVs)对小鼠子宫内膜上皮细胞(mEECs)上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响。方法:以孕4.5 d的BABL/c小鼠囊胚为材料,利用超高速离心分离纯化小鼠囊胚EVs,粒度仪分析粒径,透射电子显微镜... 目的:探讨小鼠囊胚细胞外囊泡(EVs)对小鼠子宫内膜上皮细胞(mEECs)上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响。方法:以孕4.5 d的BABL/c小鼠囊胚为材料,利用超高速离心分离纯化小鼠囊胚EVs,粒度仪分析粒径,透射电子显微镜观察形态,Western blot分析Tsg101和CD63的表达;酶消化结合差速贴壁筛选法制备原代mEECs,流式细胞术分析细胞角蛋白8(CK8)的阳性率鉴定mEECs纯度。建立囊胚EVs与mEECs共培养模型,共聚焦显微镜观察PKH26标记的囊胚EVs进入mEECs的形态过程,Western blot和细胞免疫化学法分析共培养中mEECs中E-cadherin和vimentin表达的变化。结果:(1)小鼠囊胚EVs平均粒径(226.6±3.8) nm,表现囊泡超微形态,表达Tsg101和CD63蛋白标志物。(2)原代mEECs形态均匀,CK8阳性细胞率80%以上。(3)与0 h相比,mEECs与囊胚EVs共培养48和96 h时E-cadherin表达水平显著降低(P<0.01),vimentin表达水平显著升高(P<0.01)。结论:小鼠囊胚EVs可下调E-cadherin表达,上调vimentin表达,诱导mEECs发生上皮-间充质转化。 展开更多

关键词 囊胚 细胞外囊泡 子宫内膜上皮细胞 上皮-间充质转化

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GPIF对免疫损伤小鼠T淋巴细胞膜表面共刺激分子表达的影响

10

作者 方廖琼 傅晓岚 +2 位作者 牛荣 纪贤文 魏泓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1845-1849,共5页

目的:分析羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对BALB/c小鼠T淋巴细胞共刺激表面抗原分子表达及其细胞因子分泌的影响,探讨羊胎盘免疫调节因子免疫促进作用机理。方法:60Coγ-ray辐射所致免疫抑制小鼠连续7 d腹腔注射GPIF,流式细胞分析术分析BALB/... 目的:分析羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对BALB/c小鼠T淋巴细胞共刺激表面抗原分子表达及其细胞因子分泌的影响,探讨羊胎盘免疫调节因子免疫促进作用机理。方法:60Coγ-ray辐射所致免疫抑制小鼠连续7 d腹腔注射GPIF,流式细胞分析术分析BALB/c小鼠脾细胞表达CD28+、CD152+单阳性细胞百分率,表达CD4+CD28+、CD8+CD28+、CD4+CD152+、CD8+CD152+双阳性细胞百分率;ELISA法检测小鼠血清IL-2、IFN-γ分泌水平。结果:羊胎盘免疫调节因子显著提高免疫损伤小鼠脾淋巴细胞CD28+、CD4+CD28+、CD8+CD28+阳性细胞百分率(P<0.05,P<0.01),降低CD152+、CD4+CD152+阳性细胞百分率(P<0.05,P<0.01),提高小鼠血清IL-2、IFN-γ分泌水平(P<0.01)。结论:羊胎盘免疫调节因子的免疫促进作用与其调节T淋巴细胞CD28、CD152共刺激分子通路的活化信号传递,降低T淋巴细胞的功能抑制,促进T淋巴细胞的活化有关。活化的T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IFN-γ,参与细胞因子介导的免疫网络调节。 展开更多

关键词 胎盘 免疫调节因子 T淋巴细胞 细胞因子类

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电疗“关元穴”对自然围绝经期大鼠卵巢功能影响的研究 被引量：12

11

作者 欧洪琼 方廖琼 +2 位作者 翟蓓 白晋 刁庆春 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期300-302,共3页

目的探讨电疗"关元穴"对围绝经期大鼠卵巢功能的影响。方法阴道涂片法筛选围绝经期综合征雌性SD大鼠。选择频率2.5 Hz,强度2 V,连续波,给予大鼠"关元穴"经皮电刺激。采用电化学发光免疫分析法检测大鼠血清雌激素水... 目的探讨电疗"关元穴"对围绝经期大鼠卵巢功能的影响。方法阴道涂片法筛选围绝经期综合征雌性SD大鼠。选择频率2.5 Hz,强度2 V,连续波,给予大鼠"关元穴"经皮电刺激。采用电化学发光免疫分析法检测大鼠血清雌激素水平,组织学方法观察卵巢组织学结构变化,计数各级卵泡数。结果与对照组比较,电疗"关元穴"(30 min/d或20 min/d),连续刺激10d,能显著提高围绝经期大鼠血清雌激素水平(P<0.05),促进卵巢初级卵泡数量增加(P<0.05)。结论电疗"关元穴"能改变围绝经期综合征大鼠分泌雌激素的功能,影响卵巢卵泡发育。 展开更多

关键词 电疗 围绝经期综合征 卵巢组织 阴道涂片 自然围绝经期大鼠

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低强度超声促进剖宫产术后子宫复旧的研究 被引量：21

12

作者 王丹 张懿 +6 位作者 敬李 何伟 唐枭栩 孙江川 方廖琼 王智彪 漆洪波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期276-278,共3页

目的观察低强度超声对剖宫产术后子宫复旧的影响。方法随机选择122例剖宫产术后患者,其中67例为治疗组、55例为对照组,治疗组于剖宫产术后24 h用低强度超声治疗仪对患者子宫覆盖区进行治疗,1次/d,30 min/次,连续3 d;对照组自然恢复,临... 目的观察低强度超声对剖宫产术后子宫复旧的影响。方法随机选择122例剖宫产术后患者,其中67例为治疗组、55例为对照组,治疗组于剖宫产术后24 h用低强度超声治疗仪对患者子宫覆盖区进行治疗,1次/d,30 min/次,连续3 d;对照组自然恢复,临床观察两组患者治疗前后宫底下降程度、恶露情况。结果治疗组宫底下降高度明显优于对照组(P<0.05),产后30 d阴道流血干净比率明显高于对照组(P<0.05),子宫复旧不良的发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论低强度超声治疗可促进剖宫产术后子宫康复。 展开更多

关键词 低强度超声 剖宫产 子宫复旧

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羊胎免疫调节因子生物活性的研究 被引量：7

13

作者 高利臣 刘宇 +4 位作者 梁鑫 王琳 苏晔 方廖琼 魏泓 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第2期72-74,共3页

目的探讨不同相对分子质量 (Mr)及不同工艺方法获得的山羊羊胎免疫调节因子 (GEIF)生物活性效果。方法运用Ea玫瑰花环试验和T淋巴细胞转化试验进行对比分析。结果超滤法提取GEIF ,不同Mr(30 0 0、5 0 0 0和 10 0 0 0 )Ea玫瑰花环恢复率... 目的探讨不同相对分子质量 (Mr)及不同工艺方法获得的山羊羊胎免疫调节因子 (GEIF)生物活性效果。方法运用Ea玫瑰花环试验和T淋巴细胞转化试验进行对比分析。结果超滤法提取GEIF ,不同Mr(30 0 0、5 0 0 0和 10 0 0 0 )Ea玫瑰花环恢复率和T淋巴细胞转化率之间没有明显差异 ;超滤法提取GEIF ,Ea玫瑰花环恢复率和T淋巴细胞转化率均高于透析法。结论采用超滤法提取GEIF生物活性优于透析法 ,不同Mr 提取GEIF生物活性无明显差异。 展开更多

关键词 山羊羊胎免疫调节因子 Ea玫瑰花环 T淋巴细胞转化 生物活性

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羊胎盘免疫活性小分子肽的分离纯化 被引量：6

14

作者 刘隆兴 任兴宏 +3 位作者 汤禾静 唐照勇 何成明 方廖琼 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第22期273-276,共4页

目的:从羊胎盘中分离纯化出具有免疫活性的小分子肽。方法:采用常规方法制备羊胎盘超滤液,利用反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)对羊胎盘提取液进行分离纯化及纯度分析,并利用E-玫瑰花环实验对各组分进行免疫活性评价,利用Edman降解法对其... 目的:从羊胎盘中分离纯化出具有免疫活性的小分子肽。方法:采用常规方法制备羊胎盘超滤液,利用反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)对羊胎盘提取液进行分离纯化及纯度分析,并利用E-玫瑰花环实验对各组分进行免疫活性评价,利用Edman降解法对其组分进行N端测序。结果:利用RP-HPLC工艺成功分离出纯度较高的3种小分子肽,并确定其中两者具有免疫活性;对活性较强的肽进行测序、检索,结果表明为未知组分。结论:RP-HPLC是分离、分析活性肽类较理想的手段之一,并证实了羊胎盘含有具有免疫活性的小分子肽。 展开更多

关键词 羊胎盘小分子肽 反相高效液相色谱 E-玫瑰花环

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护肝胶囊对乙醇诱发大鼠急性肝损伤的保护作用 被引量：4

15

作者 梁鑫 武向伟 +2 位作者 方廖琼 吴开平 魏泓 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期820-820,824,共2页

关键词 护肝胶囊 乙醇 大鼠 急性肝损伤 保护作用 中药制剂

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羊胎盘免疫调节因子对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响 被引量：9

16

作者 张华 钟英英 +1 位作者 方廖琼 魏泓 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2005年第2期70-72,共3页

目的探讨羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法采用巨噬细胞体外培养的方法。分3个实验组,对腹腔巨噬细胞分别给予0 .0 5 ,0 .1和0 .5mg/mlGPIF进行体外培养,培养结束后,测定腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力... 目的探讨羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法采用巨噬细胞体外培养的方法。分3个实验组,对腹腔巨噬细胞分别给予0 .0 5 ,0 .1和0 .5mg/mlGPIF进行体外培养,培养结束后,测定腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力、对溴化四唑蓝(MTT)的还原能力,以及分泌一氧化氮(NO)和白细胞介素 1(IL-1)的量。结果与对照组比较,各浓度GPIF均有促进腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力作用,且能显著提高腹腔巨噬细胞对MTT的还原能力,增加NO和IL-1的分泌量(P <0 .0 5 )。 展开更多

关键词 羊胎盘免疫调节因子 巨噬细胞 免疫增强

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电压敏感染料DiBAC4(3)用于检测胚胎细胞膜电位变化的研究 被引量：4

17

作者 丁晓燕 方廖琼 +2 位作者 张弘 乔海 王智彪 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期32-33,78,98,共4页

目的:探讨电压敏感染料DiBAC4(3)用于检测胚胎细胞膜电位变化的可行性。方法:分别取单细胞期胚胎、二细胞期胚胎、囊胚期胚胎,用M16孵育0.5 h后加入终浓度5μmol/L的DiBAC4(3)溶液,每隔10min在荧光显微镜下或激光共聚焦显微镜下观察胚... 目的:探讨电压敏感染料DiBAC4(3)用于检测胚胎细胞膜电位变化的可行性。方法:分别取单细胞期胚胎、二细胞期胚胎、囊胚期胚胎,用M16孵育0.5 h后加入终浓度5μmol/L的DiBAC4(3)溶液,每隔10min在荧光显微镜下或激光共聚焦显微镜下观察胚胎细胞荧光强度变化,0.5 h后实验组加入终浓度100mmol/L的KCL溶液,对照组加入与KCL溶液等量的M16,每隔5 min观察胚胎细胞荧光强度变化。结果:每个时期的胚胎细胞都可以被DiBAC4(3)染色,没加KCL前半小时荧光强度随时间缓慢增强,加KCL后即刻荧光强度显著增强,且在15 min内荧光强度随时间增强。结论:电压敏感染料DiBAC4(3)可以用于胚胎细胞膜电位变化的检测。 展开更多

关键词 电压敏感染料 胚胎细胞 膜电位 去极化

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小鼠成纤维细胞饲养层的制备及C57BL/6小鼠胚胎干细胞系的建立 被引量：2

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作者 张小梅 方廖琼 王智彪 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1081-1085,I0011,I0012,共7页

目的:制备小鼠成纤维细胞饲养层并建立C57BL/6小鼠胚胎干细胞(ESC)系,为进一步建立人ESC系提供依据。方法:取妊娠12.5～14.5d的胎鼠,组织消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF);收集C57BL/6小鼠3.5d的囊胚培养于小鼠制作的饲养层上;分... 目的:制备小鼠成纤维细胞饲养层并建立C57BL/6小鼠胚胎干细胞(ESC)系,为进一步建立人ESC系提供依据。方法:取妊娠12.5～14.5d的胎鼠,组织消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF);收集C57BL/6小鼠3.5d的囊胚培养于小鼠制作的饲养层上;分离内细胞团(ICM),扩增传代40代以上。观察ESC集落的生长情况。采用碱性磷酸酶(AKP)染色、免疫组织化学早期胚胎特异性表面抗原(SSEA-1)、八聚体结合转录因子4(OCT-4)染色和体内分化实验对ESC集落进行鉴定。结果:分离培养后得到的ESC可稳定传代至40代以上,且均呈集落样生长。经AKP、SSEA-1和OCT-4染色后ESC均呈红褐色阳性表达,接种于裸鼠均可形成畸胎瘤;HE染色,有3个胚层组织成分。结论:成功建立了C57BL/6小鼠ESC系。 展开更多

关键词 胚胎成纤维细胞 C57BL 6小鼠 胚胎干细胞 碱性磷酸酶

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不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响 被引量：1

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作者 丁雅明 方廖琼 +3 位作者 周兰 张弘 白晋 王智彪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1136-1139,共4页

目的观察不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响。方法用孕11、13、15 d和17 d的KM小鼠羊水-RPMI1640培养基培养H22细胞(培养液中羊水终浓度为10%),RPMI1640培养基培养的H22细胞作为对照组,采用MTT法检测细胞的增殖能力;An... 目的观察不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响。方法用孕11、13、15 d和17 d的KM小鼠羊水-RPMI1640培养基培养H22细胞(培养液中羊水终浓度为10%),RPMI1640培养基培养的H22细胞作为对照组,采用MTT法检测细胞的增殖能力;Annexin V-FITC法检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态;S-P免疫荧光染色法经激光共聚焦显微镜分析H22细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和p53的表达。结果羊水能明显抑制H22细胞的体外增殖和PCNA的表达,随孕期的延长而增高(P<0.05);并能促进p53的表达以及诱导H22细胞凋亡,随孕期的延长而降低(P<0.05)。同时,PCNA和p53的表达强度具有明显的负相关性(r=-0.808,P<0.01)。结论孕11、13、15、17 d的小鼠羊水能抑制H22细胞增殖,诱导其凋亡,可能与PCNA和p53的表达有关,并且孕期越早、干预时间越长,效果越显著。 展开更多

关键词 H22细胞 羊水 凋亡 增殖细胞核抗原 P53

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超声刺激关元穴对自然围绝经期大鼠卵泡发育的影响 被引量：1

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作者 欧洪琼 方廖琼 +2 位作者 白晋 刁庆春 翟蓓 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期937-939,共3页

目的探讨超声刺激"关元穴"对围绝经期大鼠卵泡发育的影响。方法采用阴道涂片法筛选围绝经期雌性SD大鼠。选用输出声功率0.1 W,工作频率9 MHz,焦距4.5～5 mm,给予大鼠关元穴超声刺激。采用电化学发光免疫分析法检测大鼠血清雌... 目的探讨超声刺激"关元穴"对围绝经期大鼠卵泡发育的影响。方法采用阴道涂片法筛选围绝经期雌性SD大鼠。选用输出声功率0.1 W,工作频率9 MHz,焦距4.5～5 mm,给予大鼠关元穴超声刺激。采用电化学发光免疫分析法检测大鼠血清雌激素(E)水平,组织学方法观察卵巢组织学结构变化,计数卵巢各级卵泡数。结果与对照组比较,超声刺激关元10 min/d、5min/d连续刺激10 d后显著提高围绝经期大鼠血中E水平(P<0.05),卵巢初级卵泡数、次级卵泡数增多,闭锁卵泡数减少(P<0.05)。结论超声刺激关元能改变围绝经期大鼠分泌雌激素的功能,影响卵巢卵泡发育。 展开更多

关键词 超声 关元穴 围绝经期 大鼠 卵泡

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