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数字经济时代商科创新人才培养模式研究
1
作者 方瑾 朱黎彬 +1 位作者 肖敏 沈绍伟 《教育进展》 2024年第5期1454-1458,共5页
数字经济推动生产、生活、治理方式发生翻天覆地的变革,本文分析数字经济时代背景和新商科内涵的基础上,对国内外商科创新人才培养模式进行对比探究,探索现阶段商科人才的新需求与人才培养的新困境。从改革课程教学体系、构建绩效评价... 数字经济推动生产、生活、治理方式发生翻天覆地的变革,本文分析数字经济时代背景和新商科内涵的基础上,对国内外商科创新人才培养模式进行对比探究,探索现阶段商科人才的新需求与人才培养的新困境。从改革课程教学体系、构建绩效评价方法、优化创新师资队伍以及多元合作等方面对新商科创新人才培养模式提供优化措施,为新商科创新人才培养提供参考。 展开更多
关键词 数字经济 新商科 人才培养模式
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珍稀濒危植物华顶杜鹃叶斑病病原菌的分离与鉴定
2
作者 何佳薇 黄乐琴 +4 位作者 卢振宇 方瑾 雷子阳 张慧娟 蒋明 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期837-845,共9页
华顶杜鹃(Rhododendron huadingense)是浙江省特有的珍稀濒危植物,叶斑病是该植物的重要病害。本研究以华顶杜鹃叶斑病病叶为材料,在病原菌分离纯化、致病性鉴定的基础上,利用形态学和分子生物学手段确定病原菌的种类。结果表明,从病叶... 华顶杜鹃(Rhododendron huadingense)是浙江省特有的珍稀濒危植物,叶斑病是该植物的重要病害。本研究以华顶杜鹃叶斑病病叶为材料,在病原菌分离纯化、致病性鉴定的基础上,利用形态学和分子生物学手段确定病原菌的种类。结果表明,从病叶中分离到1株真菌,命名为HDDJ;柯赫氏法则验证结果表明,该菌能引起叶斑病,病斑特征与野外发病情况一致;HDDJ的菌落起初为白色,后变为灰白色,最后呈黑色,气生菌丝絮状,这些特征与葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)吻合;利用PCR方法克隆HDDJ肌动蛋白和微管蛋白基因片段,系统发育分析结果表明,它们均与葡萄座腔菌聚为一支。根据形态学与分子鉴定结果,确定引起华顶杜鹃叶斑病的病原菌为葡萄座腔菌。华顶杜鹃叶斑病病原菌的分离与鉴定为将来开展该病害的防治奠定了基础。 展开更多
关键词 华顶杜鹃 叶斑病 葡萄座腔菌 分子鉴定
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建筑操作系统的应用与实践
3
作者 方瑾 《建筑科技》 2024年第7期110-115,共6页
建筑操作系统是实现智慧建筑的重要支撑。以建筑操作系统为研究重点,介绍其系统架构、核心能力以及功能场景。以打通数据应用的各关键节点、丰富数据赋能应用场景这一目标为导向,详细阐述ArcOSTM建筑操作系统的“三层架构”“五可能力”... 建筑操作系统是实现智慧建筑的重要支撑。以建筑操作系统为研究重点,介绍其系统架构、核心能力以及功能场景。以打通数据应用的各关键节点、丰富数据赋能应用场景这一目标为导向,详细阐述ArcOSTM建筑操作系统的“三层架构”“五可能力”,并结合实际案例,给出了建筑操作系统落地应用的总体方案及实践成果。建筑操作系统的研究和应用对提升建筑的运营管理效率、用户体验及促进可持续发展具有重要意义。 展开更多
关键词 智慧建筑 建筑操作系统 数字孪生 数字建筑管理系统
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简述土壤重金属污染来源解析与修复技术的研究进展
4
作者 方瑾 郑巨浩 钱佳丽 《皮革制作与环保科技》 2024年第3期100-102,共3页
本研究综述了土壤重金属污染的来源解析与修复技术的研究进展。土壤重金属污染主要来自工业活动、城市化进程、农药和肥料使用等人类活动。针对这种污染,目前研究主要集中在生物修复、化学修复和物理修复等方面。生物修复技术包括植物... 本研究综述了土壤重金属污染的来源解析与修复技术的研究进展。土壤重金属污染主要来自工业活动、城市化进程、农药和肥料使用等人类活动。针对这种污染,目前研究主要集中在生物修复、化学修复和物理修复等方面。生物修复技术包括植物修复、微生物修复和土壤改良等,通过吸附、转运和还原等途径降低土壤中的重金属含量。化学修复技术利用添加剂、络合剂和电化学方法等,降低重金属的毒性和迁移性。物理修复技术则主要采用土壤固化、土壤置换和覆盖等手段,隔离和稳定土壤中的重金属。本文总结了这些修复技术的优缺点,并探讨了未来研究的重点和挑战。 展开更多
关键词 土壤重金属污染 来源解析 修复技术
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国家重大科技基础设施平台用户管理与服务研究 被引量：1
5
作者 江芳 薛妍妍 +1 位作者 方瑾 姚南针 《科技和产业》 2023年第13期157-163,共7页
国家重大科技基础设施平台能够搜集与反馈科研需求与发展等信息,助力科技发展,充分释放科研仪器设备服务潜能,保障科研工作顺利开展。国家重大科技基础设施平台的用户管理与服务对于平台作用的发挥极为重要。为此,从用户管理与服务工作... 国家重大科技基础设施平台能够搜集与反馈科研需求与发展等信息,助力科技发展,充分释放科研仪器设备服务潜能,保障科研工作顺利开展。国家重大科技基础设施平台的用户管理与服务对于平台作用的发挥极为重要。为此,从用户管理与服务工作的意义、职责入手,分析胜任用户管理和服务工作的能力要求,针对工作人员素质能力,探讨培养途径。 展开更多
关键词 重大科技基础设施 用户管理与服务 能力与素质
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面神经减压术治疗周围性面瘫15例临床分析 被引量：14
6
作者 方瑾 潘军燕 +7 位作者 陈晓红 周水洪 柴亮 杨雪明 王媚 鲍洋洋 钱林荣 李海同 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第2期296-299,共4页
目的：探讨不同面神经疾病致周围性面瘫行面神经减压手术的疗效。方法对9例外伤性面瘫、3例贝尔氏面瘫及3例中耳胆脂瘤所致的周围性面瘫，经乳突-颞下迷路上隐窝进路面神经显微减压手术，术后随访0.5～2年，按面瘫H-B分级法评估面神经... 目的：探讨不同面神经疾病致周围性面瘫行面神经减压手术的疗效。方法对9例外伤性面瘫、3例贝尔氏面瘫及3例中耳胆脂瘤所致的周围性面瘫，经乳突-颞下迷路上隐窝进路面神经显微减压手术，术后随访0.5～2年，按面瘫H-B分级法评估面神经功能恢复程度。结果9例颞骨骨折面瘫（Ⅳ级2例，V级6例，Ⅵ级1例），伤后2～4周手术5例，术后面神经功能恢复I级4例，Ⅱ级1例；伤后5～8周手术3例，面神经功能恢复Ⅱ级2例，Ⅲ级1例；伤后9～12周手术1例，恢复Ⅳ级。3例贝尔面瘫（Ⅳ级1例，V级2例）,9～12周手术2例，均Ⅱ级恢复，12周后手术1例，为Ⅲ级恢复；3例中耳胆脂瘤（Ⅲ级2例，Ⅳ1例）在1～2周内手术，均I级恢复。结论对于不同原因所致周围性面瘫患者，选择合适的时机行面神经减压术，多能取得良好疗效。 展开更多
关键词 面神经 减压 面神经麻痹 颞骨骨折 中耳胆脂瘤
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大肠癌免疫脂质体导向紫杉醇的实验研究 被引量：21
7
作者 方瑾 王芸庆 宋今丹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期198-200,共3页
采用新型偶联剂ＳＡＴＡ，将抗人体大肠癌的单克隆抗体与载有紫杉醇的脂质体偶联制成免疫脂质体。检测结果显示，脂质体稳定性良好，４℃存放１０ｄ，内含物无明显渗漏。制成免疫脂质体后，单抗免疫活性不丧失。体外细胞毒实验结果显示... 采用新型偶联剂ＳＡＴＡ，将抗人体大肠癌的单克隆抗体与载有紫杉醇的脂质体偶联制成免疫脂质体。检测结果显示，脂质体稳定性良好，４℃存放１０ｄ，内含物无明显渗漏。制成免疫脂质体后，单抗免疫活性不丧失。体外细胞毒实验结果显示，紫杉醇免疫脂质体对细胞生长的抑制作用有明显的靶向专一性，对人大肠癌细胞的体外细胞毒作用优于普通脂质体和游离药物，ＩＣ５０分别为两者的６．７０和８８．７倍。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 免疫脂质体 紫杉醇 药物疗法
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口服甲状腺素联合甲状腺内注射地塞米松治疗伴临床甲减的桥本甲状腺炎 被引量：6
8
作者 方瑾 顾明君 +3 位作者 彭丽 刘颖 陈向芳 李翔 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1340-1343,共4页
目的观察口服左旋甲状腺素(LT4)联合甲状腺内注射地塞米松(Dex)治疗伴临床甲减(OH)的桥本甲状腺炎(HT)的疗效。方法356例伴OH的HT患者随机分为2组,每组178例。左旋甲状腺素组(LT组)口服LT4维持血清游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲腺原氨... 目的观察口服左旋甲状腺素(LT4)联合甲状腺内注射地塞米松(Dex)治疗伴临床甲减(OH)的桥本甲状腺炎(HT)的疗效。方法356例伴OH的HT患者随机分为2组,每组178例。左旋甲状腺素组(LT组)口服LT4维持血清游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)及超敏促甲状腺素(STSH)在正常范围共12个月;地塞米松组(DX组)除同LT组处理外,治疗第3个月加用甲状腺内注射Dex[(每次5mg;开始每周1次,8次,以后每2周1次,4次,最后每4周1次,4次)。2组于治疗前、治疗12个月末分别检查血清FT3、FT4、STSH、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、皮质醇(cortisol)、促肾上腺皮质激素(ACTH),并检查症状、体征。研究期间定期检测FT4、STSH。停止治疗后随访中OH重现为研究终点,恢复LT4补充,否则继续停药观察,至16周末进行评定。结果LT组178例中,4例退出,至停止治疗16周时垂体甲状腺功能正常12例(7%),亚临床甲减(SCH)21例(12%),OH141例(81%);DX组178例中,3例退出,至停止治疗16周时正常35例(20%),SCH32例(18%),OH108例(62%)。与LT组比较,DX组HT患者由OH逆转至SCH或正常绝对获益增加率分别为6%和13%,逆转1例OH至SCH或正常需治疗人数分别为17和8。DX组在缩小甲状腺肿,降低甲状腺自身抗体滴度方面均优于LT组(P<0.001)。两组均未出现严重药物不良反应。结论口服LT4联合甲状腺内注射Dex治疗使HT患者由OH逆转至SCH或正常的效果优于单用LT4。 展开更多
关键词 甲状腺炎 自身免疫性 甲状腺功能减退症 甲状腺素 地塞米松
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格列齐特缓释片对2型糖尿病患者血管功能的影响 被引量：9
9
作者 方瑾 顾明君 +3 位作者 彭丽 许臻 姜虹 刘颍 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期97-99,共3页
目的观察格列齐特缓释片对2型糖尿病(T2DM)患者血管功能的影响。方法72例T2DM患者随机均分为对照组(口服格列齐特片,80 mg／次,每日2次)和试验组(口服格列齐特缓释片,60 mg／次,每日1次),疗程为12周。采用高分辨率超声测定肱动脉内皮依... 目的观察格列齐特缓释片对2型糖尿病(T2DM)患者血管功能的影响。方法72例T2DM患者随机均分为对照组(口服格列齐特片,80 mg／次,每日2次)和试验组(口服格列齐特缓释片,60 mg／次,每日1次),疗程为12周。采用高分辨率超声测定肱动脉内皮依赖性血管舒张功能(FMD)和硝酸甘油介导的非内皮依赖性血管舒张功能(GNTMD)的变化,并测定血清一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)的水平。同时选择40名年龄和性别相匹配的健康志愿者(正常组)作为基线对照。结果与正常组比较,治疗前试验组和对照组的血清ET-1水平显著升高(P值均<0.01),血清NO水平及GNTMD、FMD值显著下降(P值均<0．01)。与治疗前比较,治疗12周后试验组和对照组血清ET-1水平显著降低(P值均<0．01),NO水平和GNTMD、FMD值显著上升(P值均<0．01)。试验组和对照组均能有效降低空腹和餐后2 h血糖及糖化血红蛋白水平,差异均有统计学意义(P值分别<0．05、0．01)。结论格列齐特缓释片和普通片可在有效降低T2DM患者血糖的同时,改善血管内皮功能。 展开更多
关键词 2型糖尿病 格列齐特缓释片 内皮功能
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甲状腺内注射地塞米松对桥本甲状腺炎患者垂体-肾上腺轴功能的影响 被引量：4
10
作者 方瑾 方园 +2 位作者 顾明君 彭丽 李翔 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期823-824,共2页
关键词 垂体-肾上腺轴功能 甲状腺内注射 桥本甲状腺炎 地塞米松 亚临床甲状腺功能减退 自身免疫性疾病 糖皮质激素 人工合成
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水体微塑料污染的高效检测与监控方法研究
11
作者 钱佳丽 方瑾 郑巨浩 《皮革制作与环保科技》 2024年第2期13-15,共3页
本研究旨在开发一种高效的水体微塑料污染监测方法。通过综合运用先进技术和分析手段,建立了高效、准确的微塑料颗粒检测体系。方法包括样品采集、颗粒提取与富集、表征与鉴定等步骤,并优化了仪器参数。基于机器学习算法建立了分类模型... 本研究旨在开发一种高效的水体微塑料污染监测方法。通过综合运用先进技术和分析手段,建立了高效、准确的微塑料颗粒检测体系。方法包括样品采集、颗粒提取与富集、表征与鉴定等步骤,并优化了仪器参数。基于机器学习算法建立了分类模型,实现了快速可靠的微塑料污染监控。验证结果显示:该方法具有高灵敏度、选择性和稳定性,在微塑料颗粒鉴定与监测方面表现出良好性能。 展开更多
关键词 水体微塑料污染 检测方法 监控 先进技术 机器学习
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定性建模、仿真和控制 被引量：13
12
作者 方瑾 白方周 邵晨曦 《系统仿真学报》 EI CAS CSCD 2000年第6期584-591,共8页
概括介绍了定性建模、仿真和定性控制的产生和发展，以及理论研究现状， 并说明了在国外的应用情况，最后对该领域的发展前景作出评述。
关键词 定性模型 定性仿真 定性控制
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新型环境污染物监测技术及其在源解析中的应用研究
13
作者 郑巨浩 钱佳丽 方瑾 《大众标准化》 2024年第11期140-142,共3页
传统监测方法存在一系列限制,如时空分辨率不足、高成本和繁琐的数据处理,因此新型监测技术的崭露头角至关重要。这些新技术包括大气模型、遥感技术、气溶胶质谱仪、毒气监测系统、生物监测和生态学方法,以及化学示踪物。它们以其高时... 传统监测方法存在一系列限制,如时空分辨率不足、高成本和繁琐的数据处理,因此新型监测技术的崭露头角至关重要。这些新技术包括大气模型、遥感技术、气溶胶质谱仪、毒气监测系统、生物监测和生态学方法,以及化学示踪物。它们以其高时空分辨率、实时性、高精确性和非侵入性等优势,为源解析和环境保护提供了全新工具。源解析在多领域中具有关键作用,包括问题定位、有针对性环境保护、生态系统维护、健康风险评估、政策制定和科学研究。 展开更多
关键词 新型环境污染物监测技术 源解析 监测技术
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重金属检测技术在水环境检测中的应用分析
14
作者 高瑶 方瑾 陈韵 《皮革制作与环保科技》 2024年第19期130-132,共3页
重金属在自然状态下具有高密度的化学活性和迁移性,并且会对生态系统及人类健康造成危害。通常情况下,重金属元素以化合物形式存在于各种环境介质中,但当浓度过高时,其可通过多种途径进入人体内,引起一系列毒性反应,导致神经系统损伤、... 重金属在自然状态下具有高密度的化学活性和迁移性,并且会对生态系统及人类健康造成危害。通常情况下,重金属元素以化合物形式存在于各种环境介质中,但当浓度过高时,其可通过多种途径进入人体内,引起一系列毒性反应,导致神经系统损伤、血液系统损伤以及癌症等。重金属污染已成为全球关注的环境问题之一,受到了世界各国政府的高度重视。随着科学技术的不断发展和进步,越来越多的新型检测技术被开发出来,并成功应用于实际工作中,极大地提高了检测效率和准确性,为水环境监测提供了有力保障。本文主要对重金属检测技术在水环境检测中的应用进行分析,以期为水环境中的重金属检测提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 重金属检测技术 水环境检查 检测应用
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抗人大肠癌单链抗体的构建、表达及其体内外生物学活性的检测 被引量：5
15
作者 方瑾 宋今丹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期611-613,共3页
目的　将抗人大肠癌单克隆抗体ND 1(mAb)的VH和VL 基因进行重组 ,构建和表达ND 1scFv ,并对其在体内外的生物学活性进行检测。方法　采用RT PCR技术 ,从能够分泌mAbND 1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH 和VL 基因 ,通过重叠延伸拼接PCR在VH 和VL... 目的　将抗人大肠癌单克隆抗体ND 1(mAb)的VH和VL 基因进行重组 ,构建和表达ND 1scFv ,并对其在体内外的生物学活性进行检测。方法　采用RT PCR技术 ,从能够分泌mAbND 1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH 和VL 基因 ,通过重叠延伸拼接PCR在VH 和VL 基因间引入连接短肽 ,体外构建ND 1scFv基因 ,并在大肠杆菌中表达。采用间接免疫荧光 (IFA)及ELISA法测定ND 1scFv的免疫学活性。用99Tcm 标记ND 1scFv后 ,将偶联物给予荷瘤裸鼠 ,观察其在动物体内的显像及生物学分布。结果　SDS PAGE显示 ,重组蛋白Mr 为 30 0 0 0 ,同预期结果一致。IFA及ELISA检测表明 ,ND 1scFv保留了与亲本抗体相近的免疫学活性 ,对表达相应抗原的靶细胞具有特异结合活性。体内放射免疫实验显示 ,99Tcm ND 1scFv在荷瘤小鼠体内的生物学分布 ,呈明显的肿瘤积聚趋向 ,注入体内 1h血中T/NT即达2 .6 1。结论　获得免疫学活性良好的ND 1scFv ,对荷瘤动物体内肿瘤的定位快速、准确 。 展开更多
关键词 大肠癌 单链抗体 生物学活性 肿瘤诊断 ^99TC^M
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正交试验考查MTT方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素 被引量：5
16
作者 方瑾 宋今丹 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第6期459-460,共2页
正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报... 正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报道的具体做法各不相同，且实验结果受... 展开更多
关键词 大肠肿瘤 正交试验 MTT法 药敏实验
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地黄绒毡层二型性的超微结构研究 被引量：3
17
作者 方瑾 王建红 +1 位作者 鲁国庆 周固 《武汉植物学研究》 CSCD 1994年第4期289-294,共6页
地黄Ｒｅｈｍａｎｎｉａｇｌｕｔｉｎｏｓａ（Ｇａｅｒｔｎ．）Ｌｉｂｏｓｃｈ的花药绒毡层具二型性，来源于初生壁细胞的ｐ－绒毡层，细胞较小，为分泌型绒毡层，在小孢子阶段产生乌氏体，于两细胞花粉阶段解体。来源于药隔的ｃ－绒毡... 地黄Ｒｅｈｍａｎｎｉａｇｌｕｔｉｎｏｓａ（Ｇａｅｒｔｎ．）Ｌｉｂｏｓｃｈ的花药绒毡层具二型性，来源于初生壁细胞的ｐ－绒毡层，细胞较小，为分泌型绒毡层，在小孢子阶段产生乌氏体，于两细胞花粉阶段解体。来源于药隔的ｃ－绒毡层细胞较大，解体的时间早于ｐ－绒毡层，不同药室的ｃ－绒毡层解体的起始时间不一致，可始于小孢子母细胞减数分裂、四分体或小孢子阶段；其径向壁与面向药室的壁也较早地开始解体，细胞质碎片与细胞器流入药室，分散在小孢子之间。较早解体的ｃ－绒毡层细胞不产生原乌氏体与乌氏体，部分解体较晚的ｃ－绒毡层细胞能产生原乌氏体，但极少形成乌氏体。 展开更多
关键词 地黄 绒毡层 超微结构 二型性
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周围性面瘫电生理检查与预后相关分析 被引量：7
18
作者 方瑾 潘军燕 +3 位作者 陈晓红 李海同 杨雪明 胡乐明 《中国眼耳鼻喉科杂志》 2014年第6期391-395,共5页
目的 评价面神经电图（ENoG）、F波和瞬目反射（BR）等电生理检查在早期周围性面瘫预后判断中的价值及相关性.方法 对发病3周内行ENoG、F波和BR检测的31例周围性面瘫患者的恢复情况进行随访,时间6个月～2年,分别以F波、BR异常与否以及E... 目的 评价面神经电图（ENoG）、F波和瞬目反射（BR）等电生理检查在早期周围性面瘫预后判断中的价值及相关性.方法 对发病3周内行ENoG、F波和BR检测的31例周围性面瘫患者的恢复情况进行随访,时间6个月～2年,分别以F波、BR异常与否以及ENoG是否≥90％作为诊断界值,比较3种诊断方法判断预后的准确度以及三者间的相关性.结果 3种方法均能准确判断周围性面瘫的预后,ENoG≥ 90％、F波和BR异常均预示预后差.Pearson相关性分析显示,F波和BR结果之间（r=0.674,P＜0.01）、ENoG与BR间（r =0.445,P＜ 0.05）具有一定的相关性,ENoG与F波的无相关性（r=0.251,P＞0.05）.结论 结合多项适当的电生理检查全面综合分析,对周围性面瘫早期预后判断起重要作用. 展开更多
关键词 面瘫 面神经电图 F波 瞬目反射 电生理 预后
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抗人大肠癌单链抗体基因的克隆与表达 被引量：3
19
作者 方瑾 宋今丹 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第7期740-744,共5页
背景与目的:单链抗体相对于完整抗体具有免疫源性低、对肿瘤组织穿透力强的特点,日益成为肿瘤诊断和治疗的良好导向载体。本研究的目的是将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1的重链可变区VH和轻链可变区VL基因借助一短肽序列(Gly4Ser)3进行重组... 背景与目的:单链抗体相对于完整抗体具有免疫源性低、对肿瘤组织穿透力强的特点,日益成为肿瘤诊断和治疗的良好导向载体。本研究的目的是将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1的重链可变区VH和轻链可变区VL基因借助一短肽序列(Gly4Ser)3进行重组,构建单链抗体基因ND-1scFv,并使其在大肠杆菌中表达。方法:采用RT-PCR技术从能够分泌ND-1单抗的鼠杂交瘤细胞中扩增VH和VL基因,通过重叠延伸拼接PCR在VH和VL基因间引入连接短肽,体外构建ND-1scFv基因,经过常规转化和筛选,将其克隆至PET-28a(+)表达载体,由IPTG诱导在大肠杆菌BL21中表达为ND-1scFv与His-Tag的融合蛋白。表达产物用Ni-NTAresin亲和层析方法纯化,并采用ELISA方法检测其免疫活性。结果:序列分析表明,ND-1scFv基因全长732bp,VH354bp位于上游;VL330bp位于下游。SDS-PAGE显示,重组蛋白相对分子量30kDa,与预期结果一致。scFv表达产物以不溶性包涵体形式存在,经亲和层析纯化后蛋白纯度达94%。ELISA结果显示scFv保留了与亲本抗体ND-1相似的免疫活性,结论:成功地构建了抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv,并在大肠杆菌中获得了较高水平的功能性表达。 展开更多
关键词 克隆 单链抗体 大肠肿瘤 基因表达
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化脓性中耳炎伴真菌感染5例 被引量：3
20
作者 方瑾 钱林荣 +1 位作者 潘军燕 陈晓红 《中国眼耳鼻喉科杂志》 2011年第1期49-49,72,共2页
我科收治慢性化脓性中耳炎伴真菌感染患者5例，报告如下。 1 资料与方法 1．1 资料2004年1月至2008年12月，我科收治的慢性化脓性中耳炎伴真菌感染患者5例，其中男性2例、女性3例；年龄23-68岁。5例均有耳流脓史，脓液有臭味，带血。4... 我科收治慢性化脓性中耳炎伴真菌感染患者5例，报告如下。 1 资料与方法 1．1 资料2004年1月至2008年12月，我科收治的慢性化脓性中耳炎伴真菌感染患者5例，其中男性2例、女性3例；年龄23-68岁。5例均有耳流脓史，脓液有臭味，带血。4例有耳闷胀。5例均有不同程度的听力下降，其中1例全聋；1例轻度传导性聋，平均气骨导差为15dB；2例中度混合性聋；1例重度混合性聋，气骨导差为25-35dB。 展开更多
关键词 慢性化脓性中耳炎 真菌感染 感染患者 气骨导差 听力下降 传导性聋 混合性 耳流脓
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