检测狂犬病疫苗抗原含量的竞争ELISA的建立及初步应用 被引量：4

1

作者 周志军 孙文 +3 位作者 施金荣 朱华松 陈雪婷 王平 《微生物学免疫学进展》 2007年第4期28-31,共4页

为满足狂犬病疫苗生产质量控制的需要,建立了竞争ELISA检测法,通过标准曲线的确定来计算病毒抗原的相对含量,并与ELISA间接法和双抗体夹心法结果进行比较。该方法方便准确,可对培养中的病毒抗原相对含量进行全程监测,是一种有效的辅助... 为满足狂犬病疫苗生产质量控制的需要,建立了竞争ELISA检测法,通过标准曲线的确定来计算病毒抗原的相对含量,并与ELISA间接法和双抗体夹心法结果进行比较。该方法方便准确,可对培养中的病毒抗原相对含量进行全程监测,是一种有效的辅助检测手段。 展开更多

关键词 竞争ELISA 狂犬病毒 抗原含量

下载PDF 职称材料

H5N1重组禽流感病毒样颗粒免疫原性研究 被引量：3

2

作者 黄晓媛 施金荣 +2 位作者 韩锡鑫 邱阿明 杨晓明 《微生物学免疫学进展》 2013年第1期7-11,共5页

目的对构建的H5N1重组禽流感病毒样颗粒(VLPs)进行初步免疫原性探讨,并与H5N1全病毒灭活疫苗(WIV)进行体液免疫和细胞免疫的比较。方法在0周和3周分别以纯化H5N1重组禽流感病毒样颗粒、H5N1全病毒灭活疫苗及pH7.2 PBS腿部肌肉注射BALB/... 目的对构建的H5N1重组禽流感病毒样颗粒(VLPs)进行初步免疫原性探讨,并与H5N1全病毒灭活疫苗(WIV)进行体液免疫和细胞免疫的比较。方法在0周和3周分别以纯化H5N1重组禽流感病毒样颗粒、H5N1全病毒灭活疫苗及pH7.2 PBS腿部肌肉注射BALB/c小鼠,于不同时间收集血清,以血凝抑制试验(HI)和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)评估体液免疫,CD4+、CD8+T细胞亚群及酶联免疫斑点试验(ELISPOT)评估细胞免疫,并以同型毒株滴鼻攻击,观察小鼠存活率。结果病毒样颗粒各组和全病毒灭活疫苗免疫后小鼠血清ELISA IgG效价均有升高;中和抗体效价除病毒样颗粒120 ng/只免疫剂量外其他免疫小鼠HI效价均达1︰40;小鼠脾CD4+T淋巴细胞亚群分类:全病毒灭活疫苗组(600μg/只)为36.56%;病毒样颗粒组(120 ng/只,600 ng/只,2 500 ng/只)分别为26.58%,32.20%,29.25%;PBS组为26.65%;CD8+T淋巴细胞亚群分类:全病毒灭活疫苗组(600 ng/只)为10.78%;病毒样颗粒组(120 ng/只,600 ng/只,2 500 ng/只)分别为1 3.53%,14.24%,1 3.35%;PBS组为10.69%。ELISPOT试验统计学数据显示,病毒样颗粒和全病毒灭活疫苗的小鼠脾单个核细胞分泌IFN-γ细胞与PBS组有显著性差异;小鼠保护性试验结果显示,除病毒样颗粒120 ng/只免疫剂量小鼠的存活率为87.5%外,其他病毒样颗粒实验组小鼠均为100%,PBS对照组为12.5%。结论 H5N1重组禽流感病毒样颗粒能诱导体液免疫和细胞免疫,并能抵御同型病毒株的攻击,可作为H5N1人用禽流感的候选疫苗。 展开更多

关键词 H5N1禽流感病毒 病毒样颗粒 免疫原性

下载PDF 职称材料

抗牛血清IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 被引量：2

3

作者 王平 周志军 +2 位作者 施金荣 朱华松 余模松 《微生物学免疫学进展》 2011年第3期18-23,共6页

用牛血清IgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用含山羊血清的培养基培养细胞,上清用间接ELISA法筛选。获得4株能稳定分泌抗牛血清IgG的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为1G5、2A8、3F5、4C5。其中2A8为IgG2a,... 用牛血清IgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用含山羊血清的培养基培养细胞,上清用间接ELISA法筛选。获得4株能稳定分泌抗牛血清IgG的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为1G5、2A8、3F5、4C5。其中2A8为IgG2a,其余3株为IgG1;腹水单抗的ELISA滴度均超过10-5;除3F5株单抗与山羊血清有交叉反应外,1G5、2A8、4C5株与人、马、猪、羊、兔、豚鼠等血清均不发生交叉反应;4株单抗与制备病毒性疫苗的基质液呈阴性反应;4株单抗识别分子量为160kD的牛血清IgG的两个不同抗原表位;4株单抗相对亲和力大小依次为4C5>2A8>1G5>3F5,相对敏感度依次为2A8>4C5>3F5>1G5;4株杂交瘤细胞株的染色体计数均大于90条,连续培养三个月以及冷冻保存半年后复苏,细胞生长良好。使用这些单抗建立的双抗体夹心法检测生物制品中的残留牛血清IgG。 展开更多

关键词 牛血清IgG 筛选 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验

下载PDF 职称材料

牛血清白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

4

作者 余健 周志军 +3 位作者 彭祥兵 朱华松 施金荣 余模松 《微生物学免疫学进展》 2007年第1期30-34,共5页

用牛血清白蛋白(BSA)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,培养上清经过双抗体夹心法检测初步筛选分泌鼠IgG的杂交瘤细胞,将此种杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水用间接ELISA法筛选,获得4株能稳定分泌抗BSA单克隆抗体... 用牛血清白蛋白(BSA)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,培养上清经过双抗体夹心法检测初步筛选分泌鼠IgG的杂交瘤细胞,将此种杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水用间接ELISA法筛选,获得4株能稳定分泌抗BSA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A5、3A3、3G6、4A8。鉴定结果显示,2A5细胞分泌IgG2a/κ,其余3株细胞分泌IgG1/κ;纯化后4株腹水单抗的纯度达90%以上,对BSA的ELISA滴度均可达到1∶100000以上;4株单抗均不与人以及马、猪、羊、兔、豚鼠等血清发生交叉反应;W estern B lotting试验证明4株单抗均识别分子量为68000的BSA;用间接ELISA法测定4株单抗相对亲和力及相对敏感度大小依次为3A3>2A5>3G6>4A8;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存半年后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。 展开更多

关键词 牛血清白蛋白 筛选 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验

下载PDF 职称材料

GE Lightspeed VCT球管灯丝开路故障和球管更换

5

作者 施金荣 钱德军 唐从森 《中国医疗设备》 2012年第9期145-145,147,共2页

本文分析了GE Lightspeed VCT球管灯丝开路的故障现象,并介绍了故障排除的过程。

关键词 CT机 球管更换 故障排除

下载PDF 职称材料

建立停工集约控制机制的思考

6

作者 施金荣 《煤炭经济研究》 北大核心 1991年第5期10-12,共3页

停工是企业在生产活动中,由于各部门、各生产服务环节造成的各种影响生产事故的综合反映,是一项应予挖掘利用的潜力。据统计,某矿务局1989年停工总数为17.7万工日,相当于725个采掘工人一年没有生产。因此,从改革停工管理入手,通过建立... 停工是企业在生产活动中,由于各部门、各生产服务环节造成的各种影响生产事故的综合反映,是一项应予挖掘利用的潜力。据统计,某矿务局1989年停工总数为17.7万工日,相当于725个采掘工人一年没有生产。因此,从改革停工管理入手,通过建立停工集约控制机制,把停工影响减少到最低限度,是煤炭企业深化改革必须采取的管理手段。 展开更多

关键词 中国煤炭企业 生产管理 停工集约控制机制

下载PDF 职称材料

城市地下综合管线信息系统数据更新模式探讨

7

作者 施金荣 王宏伟 《测绘与空间地理信息》 2017年第S1期107-110,共4页

城市地下综合管线数据库是管线信息系统的重要组成部分,及时、准确、权威的综合管线数据成果是管线信息系统能够有效应用、确保城市运行安全的前提和基础.本文以芜湖市城市建设地下管线管理探索为例,参考美国811管线管理与服务模式,结... 城市地下综合管线数据库是管线信息系统的重要组成部分,及时、准确、权威的综合管线数据成果是管线信息系统能够有效应用、确保城市运行安全的前提和基础.本文以芜湖市城市建设地下管线管理探索为例,参考美国811管线管理与服务模式,结合城市地下管线探测与管理相关法律法规和标准规范,从机制体制和信息技术角度阐述如何利用新建(改建、扩建)工程电子报批竣工验收归档的管线相关数据成果.通过管线数据质量检查、数据融合处理与建库、二三维一体化建模,达到及时同步更新综合管线数据库、对历史数据进行有效管理、支持管线成果服务应用、提高行业管理水平、保障城市运行安全的目的,为各类基础和综合管线系统更好地发挥其应用价值提供良好的数据服务支撑. 展开更多

关键词 信息系统 地下管线 数据更新 管线审批 竣工验收 管线数据共享服务平台

下载PDF 职称材料

借助信息化手段,改善城市人居环境——芜湖市城市污水管理信息系统概述

8

作者 施金荣 《中国建设信息化》 2016年第19期46-49,共4页

城市化,是工业化进程中一个重要的社会、经济现象,是衡量一个国家社会经济进步状况和生产力水平高低的一个重要标志。随着芜湖城市化进程的加快和人口的增加,城市建设中的排水和污水处理问题,受到了市委和市政府的高度重视,从2011年7月... 城市化,是工业化进程中一个重要的社会、经济现象,是衡量一个国家社会经济进步状况和生产力水平高低的一个重要标志。随着芜湖城市化进程的加快和人口的增加,城市建设中的排水和污水处理问题,受到了市委和市政府的高度重视,从2011年7月,在全市开展了为期三年的城市雨污水管网普查和雨污分流工程, 展开更多

关键词 污水处理问题 城市污水 城市人居环境 雨污分流 管理信息 城市建设 经济进步 张图 水质监测点 辅助决策

下载PDF 职称材料

芜湖:充分利用物联网技术

9

作者 施金荣 《中国建设信息化》 2017年第3期23-25,共3页

基于物联网技术的城市地下管线管理系统，是解决现阶段城市地下管线规划、建设、管理、维护等可行和有发展前景的综合技术手段，为管网精细化管理提供了一条新技术之路。

关键词 联网技术 城市地下管线 芜湖 管理系统 精细化管理 管线规划 发展前景 管网

下载PDF 职称材料

高产种公鸡管理要点

10

作者 施金荣 《家禽辑要》 1991年第2期24-24,共1页

关键词 公鸡 饲养 管理 鸡 种鸡

原文传递

地质矿物样品中硅酸盐的化学分析

11

作者 施金荣 徐马亮 《中文科技期刊数据库（文摘版）工程技术》 2022年第1期0121-0124,共4页

硅酸盐是一类化学物品,一般出现在地球各种矿石之中,是组成各类矿石的核心物质,在硅酸盐厂业之中有着不可替代的巨大作用。制成品和有关原料,以及各类厂业、科学探究在人们的生活之中占据着较为重要的地位。而地质样本之中的硅酸盐的化... 硅酸盐是一类化学物品,一般出现在地球各种矿石之中,是组成各类矿石的核心物质,在硅酸盐厂业之中有着不可替代的巨大作用。制成品和有关原料,以及各类厂业、科学探究在人们的生活之中占据着较为重要的地位。而地质样本之中的硅酸盐的化学解析,是促进硅酸盐在现实作业之中运用的主要环节。强化对于硅酸盐的探究势在必行。因此文章充分与显示相结合,对于岩石矿物硅酸盐的组成状况开展解析的基础上,进一步运用微波消解的方式对其开展进一步的化学解析,这类方式的运用使硅酸盐化学解析作业进程进一步加快,对于该科技的进步也具备相当显著的推动作用。 展开更多

关键词 地质样本 矿物成分 硅酸盐

下载PDF 职称材料

过热蒸汽品质对余热发电量影响因素的实验与生产控制

12

作者 徐马亮 施金荣 《中国科技期刊数据库 工业A》 2022年第1期0182-0184,共3页

近年来,随着人们物质生活水平的提高,人们的精神文化需求也在不断提高,越来越多的国家提倡环境保护、节能减排。世界各国在不断研发新能源,如新能源汽车,可燃冰等。尽管新能源的开发和利用使得一次能源应用的比率有所下降,但在未来一段... 近年来,随着人们物质生活水平的提高,人们的精神文化需求也在不断提高,越来越多的国家提倡环境保护、节能减排。世界各国在不断研发新能源,如新能源汽车,可燃冰等。尽管新能源的开发和利用使得一次能源应用的比率有所下降,但在未来一段时间,一次能源仍然是主体。在一次能源中应用最广泛的是煤炭。因此合理地利用煤炭至关重要。燃煤锅炉主要是以煤炭为原料进行燃烧,广泛应用于电力、机械、化工、医疗、食品加工、造纸等行业。 展开更多

关键词 余热发电 汽轮机 蒸汽品质 发电量

下载PDF 职称材料

应用2种标准差计算方法制定产品质量参数控制限的分析

13

作者 李黎 施金荣 +2 位作者 凃晶 杨爽 郭靖 《质量安全与检验检测》 2020年第4期144-146,共3页

质量控制图是统计质量控制的基本工具,监控与评估生产过程的稳定性或变异是质量控制图的主要功能。本文利用2种方法计算短期变异和长期变异的标准差并由此制定控制限,对比分析2个控制限的差异。收集20个不同批次的同一产品总蛋白含量测... 质量控制图是统计质量控制的基本工具,监控与评估生产过程的稳定性或变异是质量控制图的主要功能。本文利用2种方法计算短期变异和长期变异的标准差并由此制定控制限,对比分析2个控制限的差异。收集20个不同批次的同一产品总蛋白含量测定数据,对2个控制限进行实例对比分析。基于长期变异计算标准差制定的控制限宽于短期变异,基于短期变异的评估制定的控制限较精确,2种变异的计算方式具有不同的适用范围。 展开更多

关键词 统计质量控制 变异 控制限 质量质控图

下载PDF 职称材料

张家港市文化中心大剧院工程大台阶施工技术研究

14

作者 胡凌 施金荣 《江苏建筑》 2010年第B12期16-17,共2页

文章结合张家港市文化中心大剧院工程介绍了大台阶内设排水沟的施工方法以及施工注意事项,通过工程实践证明采用此施工技术可以有效地解决大台阶石材泛碱等问题。

关键词 大台阶石材 泛碱 排水沟

下载PDF 职称材料

H5N1亚型禽流感病毒样颗粒的构建及鉴定 被引量：2

15

作者 施金荣 杨晓明 +3 位作者 杜慧 邱阿明 王妮丹 黄晓媛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期145-148,154,共5页

目的构建同时含有禽流感H5N1疫苗株NIBRG-14的血凝素(Hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(Neurami-nidase,NA)及基质蛋白(Matrix protein,M1)3种基因的重组杆状病毒,并研究其表达产物的生物学特性。方法利用RT-PCR法从禽流感H5N1疫苗株NIBRG... 目的构建同时含有禽流感H5N1疫苗株NIBRG-14的血凝素(Hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(Neurami-nidase,NA)及基质蛋白(Matrix protein,M1)3种基因的重组杆状病毒,并研究其表达产物的生物学特性。方法利用RT-PCR法从禽流感H5N1疫苗株NIBRG-14中扩增HA、NA及M1基因片段,并同时亚克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBacDual中,构建重组杆状病毒穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒Bacmid-HA-NA-M1a。Westernblot法和血凝试验检测HA、NA及M1蛋白在Sf9细胞中的表达;表达的重组蛋白经超速离心浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化后,透射电镜观察病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)的形态结构,并通过单向免疫扩散(Single radialimmunodiffusion,SRID)试验检测HA的含量。结果已成功构建了重组杆状病毒,该病毒可同时表达HA、NA及M1蛋白,3种蛋白可自行组装成VLPs,并分泌至细胞培养上清中,血凝效价可达1∶64;重组杆状病毒表达的蛋白形成的VLPs与NIBRG-14标准抗血清形成沉淀环,浓缩及纯化后的重组蛋白HA含量分别为36和27μg/ml;透射电镜观察可见直径约100 nm的典型流感VLPs。结论构建的重组杆状病毒可表达VLPs,为禽流感新型疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 流感病毒A型 H5N1亚型 病毒样颗粒 杆状病毒表达系统

原文传递

SARS-CoV-2抗原快速检测卡对不同病毒株的灵敏度评价

16

作者 施金荣 周志军 +6 位作者 冯璐 岳胜兰 程小玲 张雪婷 胡勇 段凯 李策生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期680-686,共7页

目的比较国内外严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗原快速检测卡检测不同病毒株的灵敏度(稀释度)。方法以武汉生物制品研究所有限责任公司(以下简称武汉所)提供的4种SARS-CoV-... 目的比较国内外严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗原快速检测卡检测不同病毒株的灵敏度(稀释度)。方法以武汉生物制品研究所有限责任公司(以下简称武汉所)提供的4种SARS-CoV-2病毒株[原始株、贝塔(Beta)变异株、德尔塔(Delta)变异株和奥米克戎(Omicron)变异株]疫苗原液作为灵敏度评估用样品盘,用国内外17个厂家的21批次SARS-CoV-2抗原快速检测卡及上海捷诺生物科技有限公司生产的SARS-CoV-2核酸检测卡分别检测4种疫苗原液的系列稀释样本,根据稀释度评价抗原快速检测卡和核酸检测试剂的灵敏度。并将抗原快速检测卡与核酸检测卡检测结果进行比较,判断稀释度最大即灵敏度最高1组抗原快速检测卡对应的核酸检测Ct值。结果检测原始株、Beta株、Delta株和Omicron株疫苗原液,抗原检测卡的灵敏度分别为1∶10~1∶8×10^(4)、1∶10^(3)~1∶2×10^(5)、1∶10^(2)~1∶4×10^(4)和1∶10~1∶4×10^(5);核酸检测试剂的灵敏度分别为10^(-6)、10^(-5)、10^(-4)和10^(-7)。高灵敏度的抗原快速检测卡能达到核酸检测的N基因的Ct值分别为原始株(10^(-4))>31、Beta株(10^(-5))>36、Delta株(10^(-4))>34、Omicron株(10^(-5))>33,达到国内与欧盟对SARS-CoV-2抗原快速检测试剂的要求。结论所有抗原快速检测卡均能检出4种病毒株,但不同试剂检测不同病毒株的灵敏度存在一定差异,其中对Omicron株的灵敏度相对差异最大。 展开更多

关键词 抗原快速检测卡 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 病毒株 灵敏度

原文传递

乙型脑炎病毒SA14-14-2株和P3株单克隆抗体的制备及应用

17

作者 周志军 施金荣 +2 位作者 朱华松 王平 余模松 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期462-468,共7页

目的制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2株(简称SA)和P3株单克隆抗体,并进行初步应用。方法分别用JEV SA株减毒活疫苗和P3抗原免疫BALB/c小鼠,交叉加强免疫1次,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,间... 目的制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2株(简称SA)和P3株单克隆抗体,并进行初步应用。方法分别用JEV SA株减毒活疫苗和P3抗原免疫BALB/c小鼠,交叉加强免疫1次,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,选择人血清白蛋白(HSA)抗体阴性、JEV抗体阳性的克隆进行2次亚克隆,制备腹水并纯化,对单抗及杂交瘤细胞进行鉴定。用SA单抗建立捕获ELISA法检测JEV抗体,竞争抑制ELISA法和双抗体夹心ELISA法检测JEV抗原含量。结果经3次融合,共获得4株分泌抗JEV SA株单抗和3株分泌抗JEV P3株单抗的杂交瘤细胞株,未获得SA株和P3株共同决定簇的单抗;7株单抗均为IgG1型,特异性良好,但均无中和活性;SA株单抗的相对亲和力大小为:3D1>5E3>6H3>4F12,均能识别SA相同的抗原表位;P3株单抗的相对亲和力大小为:1C7>5H12>3C4,均能识别P3相同的抗原表位;7株杂交瘤细胞于液氮中放置6个月及体外连续培养3个月后,制备的腹水抗体效价保持稳定;用5E3株SA单抗建立了检测JEV抗体的捕获ELISA法及检测JEV抗原的竞争抑制ELISA法和双抗体夹心ELISA法。结论已制备了JEV SA株和P3株单克隆抗体;以SA株单抗建立的捕获ELISA法检测JEV抗体比间接ELISA法更简便,且敏感性更高,对于抗原浓度高的样品,双抗体夹心ELISA法检测比竞争抑制ELISA法更有优势。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定

原文传递

SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法的建立及验证

18

作者 程小玲 施金荣 +4 位作者 张雪婷 申瑷琳 何婧雯 程尧 段凯 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期839-843,共5页

目的 建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法,并进行验证,以期更好地控制产品安全性。方法 通过磁珠法对SARS-CoV-2... 目的 建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法,并进行验证,以期更好地控制产品安全性。方法 通过磁珠法对SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)原液进行DNA提取,采用探针型PCR对宿主细胞DNA残留量进行定量分析。对建立的方法进行线性范围、重复性、中间精密度、定量限、专属性、耐用性、准确度验证,并使用该方法对5批SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)进行宿主细胞DNA残留量检测。结果 DNA标准曲线在300~0.003 pg/μL范围内线性良好(R~2均≥0.99);重复性和中间精密度验证相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均<20%;定量限为0.001 pg/μL;样品稀释液与纯化液稀释液对检测无干扰;样品于53、55、57℃条件下孵育60 min及55℃条件下孵育56、60、64 min的检测结果无明显差异;准确度验证回收率在79%~83%,RSD <5%。用该方法检测SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)原液中DNA残留量适应性良好。结论 成功建立了SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法,该方法线性范围、重复性、中间精密度、定量限、专属性、耐用性和准确度均符合可接受标准,适用于SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量的检测及质量控制。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞) 宿主细胞DNA残留 荧光定量PCR

原文传递

ELISA试剂盒检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量的验证

19

作者 程小玲 罗敏 +6 位作者 程尧 申瑷琳 郭依依 张娟 李娟娟 施金荣 段凯 《微生物学免疫学进展》 CAS 2023年第5期33-38,共6页

目的验证ELISA试剂盒检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)中Vero细胞宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)残留量的适用性。方法用同一批ELISA试剂盒检测sIPV中Vero细胞HCP残留量,验证其... 目的验证ELISA试剂盒检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)中Vero细胞宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)残留量的适用性。方法用同一批ELISA试剂盒检测sIPV中Vero细胞HCP残留量,验证其专属性、重复性、中间精密度、准确度、线性、范围、定量限和耐用性等指标。结果将样品用2种不同稀释液(样品稀释液和疫苗稀释液)稀释后,检测Vero细胞HCP残留量结果均<12.5 ng/mL,表明该方法专属性强;同一检验人员检测同一样品6次,Vero细胞HCP残留量结果均<12.5 ng/mL;不同检验人员检测同一样品6次,Vero细胞HCP残留量结果均<12.5 ng/mL,表明具有良好的重复性和中间精密度;准确度试验中回收率均在99%~106%,CV为2%;在12.5~400.0 ng/mL的线性范围内,标准曲线线性良好(R^(2)>0.98);定量限为50.0 ng/mL;显色时间在25~35 min内对实验无影响,显色温度在36~37℃内对实验无影响,耐用性良好。结论ELISA试剂盒检测sIPV中Vero细胞HCP残留量具有较好的专属性、重复性、中间精密度、准确度、线性和耐用性,可用于sIPV中Vero细胞HCP残留量的检测。 展开更多

关键词 Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗 VERO细胞 宿主细胞蛋白残留量 酶联免疫吸附试验 验证

原文传递

SARS-Co V-2抗原检测用样品盘的建立及其在胶体金测试卡研发和质量评估中的应用

20

作者 施金荣 周志军 +6 位作者 程小玲 杨爽 李茜 罗敏 石艳红 李策生 李陶敬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期293-298,303,共7页

目的建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗原检测用样品盘,并应用于SARS-CoV-2抗原胶体金测试卡的研发及质量评估。方法以12种非SARS-CoV-2灭活疫苗原液及黏蛋白作为阴性样品... 目的建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗原检测用样品盘,并应用于SARS-CoV-2抗原胶体金测试卡的研发及质量评估。方法以12种非SARS-CoV-2灭活疫苗原液及黏蛋白作为阴性样品盘,重组SARS-CoV-2 N蛋白、2批SARS-CoV-2灭活疫苗原液(B1、B2)及1批灭活SARS-CoV-2培养液(S1)作为阳性样品盘,二者结合建立SARS-CoV-2抗原检测用样品盘。采用B1对4个厂家(A、B、C、D)的胶体金测试卡进行阳性评估,并对厂家A胶体金测试卡的研发进行全程检测。通过阴性样品盘评价5个厂家(A、C、E、F、G)胶体金测试卡的特异性,阳性样品盘(B2、S1和重组N蛋白)评价其灵敏度。采用市售SARS-CoV-2核酸检测试剂盒检测灭活SARS-CoV-2培养物S1,并与厂家A的胶体金测试卡进行对比。结果通过阳性评估,确定N蛋白为检测SARS-CoV-2抗原的主要位点。厂家A研发的胶体金测试卡对B1的灵敏度达1:2×10^(3)。5个厂家的胶体金测试卡对非SARS-CoV-2灭活疫苗原液无交叉反应,表明特异性均良好。厂家A的胶体金测试卡对B2的灵敏达1:10^(6),对S1的灵敏度达1:2×10^(7);厂家E、F、G的胶体金测试卡对B2的灵敏度达1:10^(3)以上,对S1的灵敏度达1:10^(4)~1:10^(5);厂家C的胶体金测试卡对B2的灵敏度达1:10^(4),对S1的灵敏度达1:10^(6)。厂家A的胶体金测试卡对重组N蛋白的灵敏度为100 pg/mL,其他4家均为10 pg/mL。市售核酸检测试剂盒对S1的灵敏度为1:10^(7),与厂家A的胶体金测试卡(1:2×10^(7))相当。结论成功建立了SARS-CoV-2抗原检测用样本盘,其具有良好的特异性及灵敏性,可用于SARS-CoV-2抗原胶体金测试卡的研发及质量评估。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 胶体金测试卡 抗原检测样品盘 质量评估

原文传递