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团头鲂促性腺激素β亚基cDNA的克隆和序列分析 被引量:6
1
作者 曲宪成 刘颖 +2 位作者 杨艳红 崔严慧 周正峰 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期377-385,共9页
本研究利用RT-PCR和RACE克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中两种促性腺激素β亚基(GtHIβ和GtHIIβ)cDNA序列,并对其进行了结构和系统进化分析。团头鲂GtHIβ亚基cDNA全长567碱基对(bp),5’端非翻译区26bp;3’端非翻译区... 本研究利用RT-PCR和RACE克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中两种促性腺激素β亚基(GtHIβ和GtHIIβ)cDNA序列,并对其进行了结构和系统进化分析。团头鲂GtHIβ亚基cDNA全长567碱基对(bp),5’端非翻译区26bp;3’端非翻译区148bp;开放阅读框(ORF)393bp,其编码含有130个氨基酸的蛋白质,包括由108个氨基酸组成的成熟肽以及22个氨基酸组成的信号肽。GtHII亚基cDNA全长564bp,5’端非翻译区43bp;3’端非翻译区95bp;ORF426bp,其编码含有141个氨基酸的蛋白质,包括由117个氨基酸组成的成熟肽以及24个氨基酸组成的信号肽。团头鲂GtHIβ亚基氨基酸序列与青鱼(Mylopharyngodon piceus)等15种鱼类相比较,相似性为90%—31%,与湖蛙(RanaRidibunda)等5种四足类的相似性为38%—21%;GtHII亚基与青鱼等15种鱼类相比较,其相似性为95%—41%,与湖蛙等5种四足类的相似性为49%—36%,团头鲂GtHIβ和GtHII亚基与鲤科鱼类的相似性最高,显示出较为亲近的进化关系。另外,团头鲂GtHIβ和GtHIIβ亚基含有12个保守的半胱氨酸残基和1个N糖基化位点。 展开更多
关键词 RT-PCR RACE 克隆 团头鲂 促性腺激素β亚基cDNA
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黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析 被引量:5
2
作者 曲宪成 尚晓莉 +4 位作者 程翠 曲学伟 张勇 张开岳 蒋骄云 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期23-28,共6页
应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝(Monopterus albus)IV期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库。正向差减杂交以间期性腺为试验方,IV期卵巢为驱动方;反向差减杂交以IV期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方。将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,... 应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝(Monopterus albus)IV期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库。正向差减杂交以间期性腺为试验方,IV期卵巢为驱动方;反向差减杂交以IV期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方。将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子。经PCR扩增鉴定插入片段范围为200-2 000 bp。随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对。进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证。结果表明,所建文库能够达到富集这两期性腺差异表达基因的目的。黄鳝性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础。 展开更多
关键词 黄鳝 性腺 抑制性差减杂交 差减CDNA文库
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团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列克隆及其表达载体的构建 被引量:3
3
作者 曲宪成 周正峰 +4 位作者 崔严慧 刘颖 胡萍华 金一春 尚婧瑨 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期550-558,共9页
首先运用PCR-末端加尾法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体糖蛋白激素α亚基(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)基因5’端侧翼序列;然后利用生物信息学理论对该序列进行了序列分析;最后在序列分析... 首先运用PCR-末端加尾法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体糖蛋白激素α亚基(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)基因5’端侧翼序列;然后利用生物信息学理论对该序列进行了序列分析;最后在序列分析结果的基础上,构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示,克隆所得到的团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列长1399bp;其序列中包含潜在的TATA盒、GC盒,以及ERE、TRE、CRE、PGBE等对PGPH α亚基基因转录调控起重要作用的转录因子结合位点;启动子区域位于-40-10bp处。利用PCR方法扩增得到了全长1439bp以及1120bp、532bp、173bp均包含转录起始位点下游40bp序列的缺失片段,并将其连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。 展开更多
关键词 团头鲂 垂体糖蛋白激素α亚基 5’侧翼序列 启动子 表达载体
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团头鲂促性腺激素GtH Iβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建 被引量:2
4
作者 曲宪成 崔严慧 +5 位作者 周正峰 刘颖 金一春 胡萍华 薛婷君 王琼 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期558-567,共10页
本研究利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Iβ(GtH Iβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHIβ亚基基因5′端侧... 本研究利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Iβ(GtH Iβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHIβ亚基基因5′端侧翼序列长度为479bp,其中包括TATA盒、ARE、PRE、ERE、SF-1、Ptx1等可能对GtH Iβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点。利用PCR方法在基因组中扩增得到了3个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtH Iβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。 展开更多
关键词 团头鲂 促性腺激素Iβ亚基 5’侧翼序列 启动子 表达载体
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异育银鲫促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析 被引量:4
5
作者 曲宪成 杨艳红 刘颖 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2006年第2期129-135,共7页
利用RT-PCR、RACE及克隆等方法获得了异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因全长cDNA序列。该cDNA全长926 bp,5’端非编码区68 bp;3’端非编码区372 bp;开放阅读框(ORF)486 bp,编码161个氨基酸。经序列分析显示,其编码的氨基酸序列与金... 利用RT-PCR、RACE及克隆等方法获得了异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因全长cDNA序列。该cDNA全长926 bp,5’端非编码区68 bp;3’端非编码区372 bp;开放阅读框(ORF)486 bp,编码161个氨基酸。经序列分析显示,其编码的氨基酸序列与金鱼[Carassius auratus(goldfish)]、鲤(Cyprinus carpio)、鳙(Aristichthysnobilis)、斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Salmo gaidnerii)、鲑(Salmo salar)、鳗鲡(Anguilla anguilla)具有较高的相似性,其相似性分别为91.3%、87.6%、83.2%、77%、58.6%、56.1%、43.55%,同源性较高,这说明TSHβ亚基在长期的进化中具有较高保守性。而且在比较中还发现:异育银鲫和其它7种鱼类相比在5’端多11个氨基酸序列,并且都含有定位保守的12个半胱氨酸残基和一个N糖基化位点。 展开更多
关键词 异育银鲫 促甲状腺激素β亚基 5’-RACE 3’.RACE
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团头鲂促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析 被引量:1
6
作者 曲宪成 杨艳红 +1 位作者 刘其根 刘颖 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期128-133,共6页
利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因,并对其基因结构和系统进化进行分析。该基因cDNA序列全长614 bp;5’端非翻译区100 bp;3’端非翻译区61 bp;开放阅... 利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体中促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因,并对其基因结构和系统进化进行分析。该基因cDNA序列全长614 bp;5’端非翻译区100 bp;3’端非翻译区61 bp;开放阅读框架(ORF)453 bp,共编码150个氨基酸。其编码的氨基酸序列与鳙鱼(Aristichthys no-bilis)、鲤鱼(Cyprinus carpio)、金鱼(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)、鲑鱼(Salmo salar)、虹鳟(Oncorhynchusmysiss)、欧洲鳗鲡(A.anguilla)的相似性分别为:99.3%、92%、92%、82%、62.6%、62.6%和56%。核苷酸序列分析显示,团头鲂与鳙鱼相似性最高,为98.23%;与欧洲鳗鲡相似性最低,为48.7%。说明TSHβ亚基在长期的进化中相当保守。在所比较的9种鱼类该基因ORF氨基酸序列中都含有定位相同的12个半胱氨酸残基,它们在成熟肽中形成6个二硫键,这对保证促甲状腺激素的空间结构,维持促甲状腺激素的生理功能起着重要的作用。该基因的成功克隆不仅为TSHβ的分子进化和相似性比较研究提供了新的资料,而且对进一步研究该基因的功能、表达具有重要的意义。[中国水产科学,2006,13(1):128-133] 展开更多
关键词 团头鲂 促甲状腺激素β亚基 CDNA末端快速扩增 克隆 序列分析
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外源性雌二醇对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响 被引量:1
7
作者 曲宪成 杨艳红 +2 位作者 刘颖 周正峰 崔严慧 《南方水产》 2007年第1期31-36,共6页
运用SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性雌二醇(estradiol-17β,E2)对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响。实验设计时间为10周,实验组每2周注射一次0.5mg.kg-1体重的E2(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%... 运用SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性雌二醇(estradiol-17β,E2)对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响。实验设计时间为10周,实验组每2周注射一次0.5mg.kg-1体重的E2(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在实验条件下,SYBR Green I荧光定量RT-PCR分析结果显示,注射3和5次外源性E2后,促甲状腺激素β亚基mRNA的表达水平与对照组相比均未有显著变化,但随着注射次数的增加,总体呈现升高的趋势。另一方面,RIA结果显示,注射3次外源性E2后,血清中甲状腺激素T3和T4含量水平与对照组相比均显著升高(P<0.05);注射5次后,与对照群相比差异极显著(P<0.01)。以上结果提示,外源性E2影响异育银鲫的正常生理状态。 展开更多
关键词 异育银鲫 促甲状腺激素β亚基 SYBR Green I荧光定量RT-PCR 雌二醇 放射免疫方法 T3 T4
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千岛湖细鳞鲴种群线粒体COⅠ基因变异及遗传分化研究 被引量:7
8
作者 曲宪成 张勇 +3 位作者 刘其根 张开岳 蒋骄云 冯龙 《湖南农业科学》 2011年第8期150-153,共4页
首先利用鱼类线粒体COⅠ基因两端的保守序列设计简并引物,扩增测序获得了细鳞鲴COⅠ基因1 551 bp序列全长。然后利用COⅠ基因部分序列标记对千岛湖汾口(FK)、姜家镇(JJZ)、富文(FW)以及临岐(LQ)4个细鳞鲴群体84个样本的遗传多样性和遗... 首先利用鱼类线粒体COⅠ基因两端的保守序列设计简并引物,扩增测序获得了细鳞鲴COⅠ基因1 551 bp序列全长。然后利用COⅠ基因部分序列标记对千岛湖汾口(FK)、姜家镇(JJZ)、富文(FW)以及临岐(LQ)4个细鳞鲴群体84个样本的遗传多样性和遗传结构进行了分析,结果表明:在4个群体中共检测到4种不同单倍型。四群体的单倍型多样性(h)分别为0.500 0、0、0.142 5和0.128 7,核苷酸多样性(π)分别为0.001 9、0、0.000 2和0.000 2,其中FK群体的单倍型多样性(h)和核苷酸多样性(π)水平最高,另外3个群体单倍型多样性(h)和核苷酸多样性(π)水平都较低。AMOVA分析显示,群体间遗传变异占总变异的23.56%,群体内的遗传变异占总变异的76.44%,表明群体内变异是总变异的主要来源。研究结果表明千岛湖4个群体间没有明显的遗传分化。 展开更多
关键词 细鳞鲴 线粒体COⅠ基因 遗传结构
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黄鳝性腺差异表达基因的筛选和克隆 被引量:1
9
作者 曲宪成 程翠 +3 位作者 尚晓莉 曲学伟 张开岳 张勇 《湖南农业科学》 2010年第2期112-115,136,共5页
运用ACP-DDRT-PCR技术筛选和克隆了黄鳝不同发育时期性腺组织的差异表达基因。结果显示:利用2个随机ACP引物筛选到2个表达差异显著的基因,并对这2条差异表达片段进行克隆、测序分析,获得这2个基因的部分cDNA序列,长度分别为408 bp和421... 运用ACP-DDRT-PCR技术筛选和克隆了黄鳝不同发育时期性腺组织的差异表达基因。结果显示:利用2个随机ACP引物筛选到2个表达差异显著的基因,并对这2条差异表达片段进行克隆、测序分析,获得这2个基因的部分cDNA序列,长度分别为408 bp和421 bp。同源性分析结果显示其中一个基因与黄鲈卵巢cDNA文库中的一个基因(GeneBank No.GO657149.1)高度同源;而另一个基因无同源性序列,视为新报道的基因。进一步半定量RT-PCR检测,结果显示:这两个基因在黄鳝卵巢和间期性腺中的表达差异显著,因此推测其在黄鳝性腺发育以及性逆转过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 黄鳝 性腺 差异表达基因 ACP—DDRT—PCR
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团头鲂促性腺激素GtHⅡβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建
10
作者 曲宪成 崔严慧 +8 位作者 周正峰 曲学伟 金一春 胡萍华 尚晓莉 程翠 张开岳 张勇 蒋骄云 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期649-658,共10页
利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序... 利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40~10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771~+40bp)、601bp(-561~+40bp)、386bp(-346~+40bp)、239bp(-199~+40bp)和98bp(-58~+40bp)的5个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础依据。 展开更多
关键词 团头鲂 促性腺激素Ⅱβ亚基 5′侧翼序列 启动子 表达载体
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外源性皮质醇对异育银鲫TSH-βmRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响
11
作者 曲宪成 杨艳红 +2 位作者 刘颖 周正峰 崔严慧 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期305-309,共5页
运用Sybr Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性皮质醇(cortisol)对异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSH-β)mRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响。实验设计为10周,实验组每两周注射一次0.2 mg/kg体重的cortisol(用57... 运用Sybr Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性皮质醇(cortisol)对异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSH-β)mRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响。实验设计为10周,实验组每两周注射一次0.2 mg/kg体重的cortisol(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在本实验条件下,研究结果显示:注射3次外源性cortisol后,异育银鲫TSH-βmRNA表达量与对照组相比略有下降;注射5次后,与对照组相比显著降低(P<0.05)。另一方面,RIA结果显示:注射3次外源性cortisol后,实验组与对照组相比,血清甲状腺激素T3和T4含量虽略有升高,但无显著差异;而注射5次后显著升高(P<0.05)。以上结果提示:外源性cortisol能够影响异育银鲫脑下垂体-甲状腺轴。 展开更多
关键词 异育银鲫 皮质醇 SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR 促甲状腺激素β亚基 放射免疫方法 T3 T4
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浙江千岛湖深水区大型底栖动物时空变化格局 被引量:26
12
作者 胡忠军 孙月娟 +6 位作者 刘其根 何光喜 陈来生 曲宪成 余员龙 史文 刘国栋 《湖泊科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期265-271,共7页
2007-2008年对浙江千岛湖深水区底栖动物群落进行了研究.共调查到8种底栖动物,其中寡毛类7种,线形动物门1种.群落类型不存在季节差异,优势种为霍甫水丝蚓和正颤蚓.群落年均密度和生物量分别为594.6ind./m^2和0.54g/m^2.双因素方差分析表... 2007-2008年对浙江千岛湖深水区底栖动物群落进行了研究.共调查到8种底栖动物,其中寡毛类7种,线形动物门1种.群落类型不存在季节差异,优势种为霍甫水丝蚓和正颤蚓.群落年均密度和生物量分别为594.6ind./m^2和0.54g/m^2.双因素方差分析表明,密度和生物量无季节变化,但存在显著的空间差异,两者均是上游>中游>下游.密度和生物量与水深、透明度显著负相关,前者与水柱混合水样的TN和TP、与底部局部水样的TP显著正相关,后者与水柱混合水样的TP显著正相关.逐步回归分析表明,水深是密度和生物量的唯一最优解释因子,随水深增加密度和生物量均呈指数式下降. 展开更多
关键词 千岛湖 底栖动物 群落组成 密度 生物量 垂直分布 水平空间分布 季节动态
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来自大黄鱼(Pseudosciaena crocea)肠道的弧菌拮抗菌的筛选与鉴定 被引量:30
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作者 王娟 封永辉 +3 位作者 蔡立胜 王建 曲宪成 张庆华 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期707-713,共7页
采用点种法并以副溶血弧菌(Vp1.2164)和溶藻弧菌(Va-Y)为弧菌指示菌,对从健康的大黄鱼肠道内分离的115株细菌进行体外拮抗试验。并对筛选出的拮抗菌进行抗菌谱测定,最后利用VITEK-32细菌快速鉴定系统和16SrRNA基因序列对拮抗菌进行鉴定... 采用点种法并以副溶血弧菌(Vp1.2164)和溶藻弧菌(Va-Y)为弧菌指示菌,对从健康的大黄鱼肠道内分离的115株细菌进行体外拮抗试验。并对筛选出的拮抗菌进行抗菌谱测定,最后利用VITEK-32细菌快速鉴定系统和16SrRNA基因序列对拮抗菌进行鉴定。结果表明,从中筛选到3株有较强拮抗作用的菌株,编号分别为X1402-1、X1108和X3914,且菌株X1402-1的抗菌作用最强,抗菌谱最广,21株病原指示菌中,对16株均能产生较强的抑制作用,其中对Vp-1.2164的抑菌直径最大,达到28.5mm,对Va-Y的抑菌直径为8.7mm;其次为菌株X1108和X3914,对两种指示弧菌的抑菌直径分别为:12.0mm、9.0mm和0mm、7.2mm。经VITEK-32细菌快速鉴定系统鉴定,3株拮抗菌分别与铜绿假单胞菌,恶臭假单胞菌,地衣芽孢杆菌的相似性均为99%。通过16SrRNA基因序列分析表明,3株拮抗菌分别与类产碱假单胞菌Pseudomonas pseudoalcaligenes(EU419918)、恶臭假单胞菌Pseudomon asputida(FJ440105)和地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis(DQ988136)的16SrRNA基因同源性最高,分别为100.0%、97.5%、99.0%。综合分析试验结果,X1402-1、X1108和X3914分别被确定为类产碱假单胞菌、恶臭假单胞菌和地衣芽孢杆菌。 展开更多
关键词 点种法 拮抗作用 抗菌谱 筛选 细菌鉴定
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温度对白斑狗鱼耗氧率、窒息点及主要生化指标的影响 被引量:9
14
作者 金一春 曲学伟 +4 位作者 尚晓莉 程翠 张开岳 张勇 曲宪成 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2010年第6期15-21,共7页
在不同温度下,测定了平均体重为(597.2±96.3)g的白斑狗鱼(Esox lucius)的呼吸耗氧率、窒息点及主要生化指标。结果显示:在水温为3℃、8℃、13℃和18℃下,白斑狗鱼的耗氧率随着温度的升高而显著上升(P<0.05)。3℃时耗氧率最低;为... 在不同温度下,测定了平均体重为(597.2±96.3)g的白斑狗鱼(Esox lucius)的呼吸耗氧率、窒息点及主要生化指标。结果显示:在水温为3℃、8℃、13℃和18℃下,白斑狗鱼的耗氧率随着温度的升高而显著上升(P<0.05)。3℃时耗氧率最低;为(0.0047±0.000017)mg/g.h,18℃时耗氧率最高;为(0.029±0.0011)mg/g.h。当水温在13℃时,白斑狗鱼的昼夜平均耗氧率在(0.020±0.0031)mg/g.h,15:00耗氧率最低,11:00耗氧率出现最高值。Q10值的变化显示白斑狗鱼的耗氧率对温度具有敏感性,13~18℃时,Q10最小,此温度为白斑狗鱼的较适生长温度。在高温下(18℃),白斑狗鱼呼吸急促,呼吸频率达到(68.50±3.58)次/min;在低温下(3℃),白斑狗鱼呼吸缓慢,呼吸频率下降到(29.00±4.31)次/min。白斑狗鱼的窒息点随着水温的升高而增大,水温为13℃,其窒息点最高为1.68 mg/L,水温为3℃时,其窒息点最低为0.82 mg/L。随着水温的不断上升,白斑狗鱼的肝糖元含量、肝胰脏中的乳酸含量显著减少(P<0.05)。肝糖元含量由(67.70±6.66)mg/g降至(41.83±3.72)mg/g。乳酸含量由(0.36±0.0041)mmol/gprot降至(0.15±0.0034)mmol/gprot。肝胰脏中的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的酶活力随着水温的升高而小幅缓慢下降,分别由(21.51±0.69)U/gprot和(22.34±0.43)U/gprot降至(19.04±0.62)U/gprot和(18.10±0.41)U/gprot。 展开更多
关键词 白斑狗鱼(Esox lucius) 耗氧率 窒息点 生化指标
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黄鳝性逆转相关基因的克隆和表达 被引量:6
15
作者 蒋骄云 冯龙 +2 位作者 许世杰 李园园 曲宪成 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期106-109,共4页
运用cDNA末端快速扩增(Rapid-Amplification of cDNA Ends,RACE)技术和半定量RT-PCR技术,克隆了黄鳝(Monopterus albus)性腺差异表达基因(F64)的cDNA全长序列,分析了该基因于各期性腺组织的表达情况。结果表明,F64基因cDNA全长1 721 bp... 运用cDNA末端快速扩增(Rapid-Amplification of cDNA Ends,RACE)技术和半定量RT-PCR技术,克隆了黄鳝(Monopterus albus)性腺差异表达基因(F64)的cDNA全长序列,分析了该基因于各期性腺组织的表达情况。结果表明,F64基因cDNA全长1 721 bp,含有142 bp的5’-UTR、268 bp的3’-UTR、1 311 bp的开放阅读框(ORF),共编码436个氨基酸;在线SignalP分析表明,F64亚基肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白;同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因;F64在卵巢发育早期不表达,从排卵的Ⅴ期卵巢开始表达,随着卵巢的败育和精巢的发育,表达量明显升高。 展开更多
关键词 黄鳝 性腺 差异表达基因 RT-PCR RACE
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刀鲚染色体核型分析 被引量:6
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作者 许世杰 李园园 +4 位作者 付官宝 吴昊伟 王倩 刘其根 曲宪成 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期155-157,共3页
以刀鲚的鳃和头肾组织为材料,采用腹腔注射植物血细胞凝集素(PHA)、秋水仙素法制备染色体标本,进行染色体核型分析;同时,采用石蜡组织切片以确定每尾刀鲚的性别。结果显示,刀鲚雌雄染色体存在差异,雌性染色体数目为2n=47,雄性染色体数目... 以刀鲚的鳃和头肾组织为材料,采用腹腔注射植物血细胞凝集素(PHA)、秋水仙素法制备染色体标本,进行染色体核型分析;同时,采用石蜡组织切片以确定每尾刀鲚的性别。结果显示,刀鲚雌雄染色体存在差异,雌性染色体数目为2n=47,雄性染色体数目为2n=48,核型公式为2n(♀)=2X=47t(SAT)、2n(♂)=2X=48t(SAT);最长的一对染色体上存在随体,次缢痕;且刀鲚存在性染色体,其性染色体型为ZZ-ZO型。 展开更多
关键词 刀鲚 染色体 石蜡组织切片 核型
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塔玛亚历山大藻对文蛤呼吸和排泄的影响 被引量:4
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作者 冉福 曲宪成 +2 位作者 沈和定 陈宇昕 徐伟 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期30-33,共4页
水温20℃下,设置(0、0.1、0.5、1.0、2.0、4.0)×103/mL六个藻类浓度组,以静水方法研究了塔玛亚历山大藻对文蛤呼吸和排泄的影响。结果表明:当塔玛亚历山大藻浓度为1.0×103/mL时,文蛤的耗氧率和排磷率最大,其最大值分别为2.76&... 水温20℃下,设置(0、0.1、0.5、1.0、2.0、4.0)×103/mL六个藻类浓度组,以静水方法研究了塔玛亚历山大藻对文蛤呼吸和排泄的影响。结果表明:当塔玛亚历山大藻浓度为1.0×103/mL时,文蛤的耗氧率和排磷率最大,其最大值分别为2.76×10-3/h和0.339μmol/(g.h);其排氨率在藻浓度为0.5×103/mL时达到最大值5.71μmol/(g.h)。耗氧率与排氨率的比值(O/N)显示在较低塔玛亚历山大藻浓度(≤0.5×103/mL)时,文蛤由蛋白质和脂肪提供机体能量,较高藻浓度(≥1.0×103/mL)时则由脂肪和碳水化合物提供机体代谢所需能量。 展开更多
关键词 塔玛亚历山大藻 文蛤 耗氧率 排氨率 排磷率
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革胡子鲶出血性败血症病原菌的分离鉴定 被引量:6
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作者 王玉娟 王秀华 +2 位作者 曲宪成 朱岩松 黄倢 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2012年第3期32-37,共6页
从暴发性死亡的革胡子鲶(Clarias gariepinus)中分离出可疑病原菌株2010111403(简称1403),分别采用细菌全细胞脂肪酸鉴定系统、Biolog微生物自动鉴定系统及细菌16 S rDNA序列分析三种方法对其鉴定,结果表明菌株1403为嗜水气单胞菌(Aerom... 从暴发性死亡的革胡子鲶(Clarias gariepinus)中分离出可疑病原菌株2010111403(简称1403),分别采用细菌全细胞脂肪酸鉴定系统、Biolog微生物自动鉴定系统及细菌16 S rDNA序列分析三种方法对其鉴定,结果表明菌株1403为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。分离菌株对健康革胡子鲶致病性测试表明其对革胡子鲶的半数致死剂量(LD50)为6.32×106菌落形成单位(CFU);实验感染革胡子鲶出现与自然发病相似症状,表明菌株1403是引起革胡子鲶发生暴发性死亡的主要致病病原。药敏试验表明,庆大霉素、四环素、阿奇霉素、氟哌酸、先锋霉素等9种抗生素对分离菌株有较强的抑制作用,但分离菌株对复方新诺明、克林霉素、罗红霉素等4种药物表现出耐药性。 展开更多
关键词 革胡子鲶(Clarias gariepinus) 出血性败血症 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 分离鉴定 药敏测试
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两种“吉富”罗非鱼耗氧率、窒息点的初步研究 被引量:10
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作者 金一春 胡萍华 +5 位作者 曲学伟 周正峰 崔严慧 尚晓莉 程翠 曲宪成 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第13期6009-6011,共3页
[目的]为两种"吉富"罗非鱼的养殖结构优化及其运输提供理论依据。[方法]在恒温20±0.5℃条件下,用呼吸室法对"JNM"和"GTC"两种吉富罗非鱼的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。[结果]①平均体重为381.90&... [目的]为两种"吉富"罗非鱼的养殖结构优化及其运输提供理论依据。[方法]在恒温20±0.5℃条件下,用呼吸室法对"JNM"和"GTC"两种吉富罗非鱼的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。[结果]①平均体重为381.90±19.25 g的"JNM"昼夜平均耗氧率为0.069±0.022 mg/(g.h);平均体重为302.00±7.76 g的"GTC"昼夜平均耗氧率为0.033±0.017 mg/(g.h)。②两种试验鱼的耗氧率与饥饿时间呈负相关,代谢率随着饥饿程度的加深而降低。③"JNM"和"GTC"的窒息点分别是:1.54±0.17、1.70±0.23 mg/L。[结论]当温度在20±0.5℃时,"GTC"与"TNM"相比,需氧量大,窒息点低。 展开更多
关键词 耗氧率 窒息点 尼罗罗非鱼
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金鱼对低温、振动胁迫应激反应的试验研究 被引量:13
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作者 张饮江 黎臻 +3 位作者 谢文博 杜佳沐 孙宏超 曲宪成 《水产科技情报》 北大核心 2012年第3期116-122,共7页
通过分析降温和振动对金鱼的呼吸频率、活力状况以及鱼体血清中皮质醇(Cortisol)浓度等的影响,研究金鱼在低温、振动胁迫下的应激反应。结果表明:(1)水温由25℃降到15℃、4℃,分别经过6、12、24 h后,金鱼活力明显下降,其呼吸频率和血清... 通过分析降温和振动对金鱼的呼吸频率、活力状况以及鱼体血清中皮质醇(Cortisol)浓度等的影响,研究金鱼在低温、振动胁迫下的应激反应。结果表明:(1)水温由25℃降到15℃、4℃,分别经过6、12、24 h后,金鱼活力明显下降,其呼吸频率和血清中皮质醇的浓度呈梯度下降,而通过采取适宜的低温胁迫措施,可在一定程度上缓解金鱼的应激反应。(2)在低温和饥饿状态时,金鱼血清中皮质醇浓度的变化与肥满度具有相关性,肥满度小的金鱼,其血清中皮质醇的变化较明显,对低温的耐受力较弱;而金鱼在受到振动胁迫后,未见二者有线性关系。(3)在振动频率为50 Hz的状况下,经过一定时间,呼吸频率降低了30%~49%,血清中皮质醇的浓度上升了35%~129%。据此认为,低温、振动胁迫是影响金鱼活体运输存活率的主要外界因素。 展开更多
关键词 金鱼 低温胁迫 振动胁迫 应激反应 皮质醇 活体运输 存活率
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