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产气荚膜梭菌α-毒素基因数字PCR方法的建立及其在标准物质研制方面的应用
1
作者 张铭洋 张喜悦 +7 位作者 赵格 曲志娜 高宏伟 孙敏 程慧敏 徐佳微 王君玮 邹明 《山东农业科学》 北大核心 2024年第1期156-163,共8页
产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种重要的人兽共患病原菌,α-毒素是其分子生物学检测的主要靶标。试验选取Clper引物及探针建立微滴式数字PCR(droplet digtial PCR,ddPCR)方法,最佳引物浓度0.85μmol/L,探针浓度为0.3μmol/L... 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种重要的人兽共患病原菌,α-毒素是其分子生物学检测的主要靶标。试验选取Clper引物及探针建立微滴式数字PCR(droplet digtial PCR,ddPCR)方法,最佳引物浓度0.85μmol/L,探针浓度为0.3μmol/L,退火温度为60℃。利用建立的ddPCR方法检测单核细胞增生李斯特菌、沙门氏菌、大肠杆菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌、弯曲杆菌的DNA,结果均为阴性,表明该方法具有较好的特异性。合成产气荚膜梭菌α-毒素基因,制成DNA标准品,选取3个稀释梯度的标准品进行重复试验,组内和组间变异系数均小于5%,证明该方法具有较好的重复性。采用7个稀释梯度的标准品进行重复检测,计算出该方法的检测限为12.39 copies/μL,定量限为33.97 copies/μL。通过对68份临床样品进行检测,证实该方法可用于临床,且用于检测质粒DNA时无明显的基质效应。应用ddPCR方法对标准品进行均匀性和稳定性检验,并联合9家实验室进行定值,最终获得了国家市场监督管理总局颁发的标准物质证书(GBW(E)091237)。α-毒素基因ddPCR方法的建立和DNA标准物的研制,为产气荚膜梭菌分子生物学检测试剂的标准化奠定了基础。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 ddPCR α-毒素基因 标准物质 特异性 灵敏度 可重复性 定值
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弯曲杆菌16S rRNA基因质粒DNA标准物质的研制 被引量：1
2
作者 张喜悦 张铭洋 +11 位作者 赵格 曲志娜 刘俊辉 王娟 赵建梅 高玉斌 黄秀梅 刘娜 程慧敏 徐佳微 邹明 王君玮 《中国动物检疫》 CAS 2023年第7期103-109,共7页
弯曲杆菌引起的食源性胃肠道疾病是21世纪人类面临的一项严重经济和公共卫生负担。当前国内外进行的弯曲杆菌属分子生物学检测方法研究的靶基因均为16S rRNA基因。为满足检测试剂标准化需求,制备了候选弯曲杆菌16S rRNA基因质粒DNA标准... 弯曲杆菌引起的食源性胃肠道疾病是21世纪人类面临的一项严重经济和公共卫生负担。当前国内外进行的弯曲杆菌属分子生物学检测方法研究的靶基因均为16S rRNA基因。为满足检测试剂标准化需求,制备了候选弯曲杆菌16S rRNA基因质粒DNA标准物质,经均匀性和稳定性检验,证实其于-20℃保存12个月,4℃短期保存8 d,反复冻融30次后依然稳定。对候选标准物质采用微滴式数字PCR(ddPCR)方法,联合8家实验室进行联合定值,对不确定度进行量化、合成,确定了标准物质的扩展不确定度。最终确定弯曲杆菌16S rRNA质粒DNA标准物质标准值为4.95×10^(3)copies/μL,扩展不确定度(k=2)为0.47×10^(3)copies/μL。临床试用结果表明,该产品具有良好的均匀性和稳定性。该标准物质的研制,为我国弯曲杆菌分子生物学检测试剂的标准化奠定了基础。 展开更多
关键词 弯曲杆菌 16S rRNA基因 标准物质 均匀性 稳定性 可重复性
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胶东地区不同家禽弯曲菌流行分布及耐药特征分析
3
作者 王娟 黄秀梅 +9 位作者 刘俊辉 李彦 刘娜 赵建梅 段笑笑 高玉斌 王琳 赵格 曲志娜 王君玮 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1087-1094,1111,共9页
目的通过了解胶东地区不同禽源弯曲菌的耐药现状及分子流行分布情况,为有效防控禽源弯曲菌对家禽产品和人类健康带来的风险提供依据。方法采用细菌常规分离培养、质谱鉴定、微量肉汤稀释法和多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,... 目的通过了解胶东地区不同禽源弯曲菌的耐药现状及分子流行分布情况,为有效防控禽源弯曲菌对家禽产品和人类健康带来的风险提供依据。方法采用细菌常规分离培养、质谱鉴定、微量肉汤稀释法和多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)技术,对2021年8月至10月期间,在胶东地区采集的565份泄殖腔样品进行弯曲菌分离鉴定,并别对131株代表性菌株(67株空肠弯曲菌、64株结肠弯曲菌)进行了耐药性及分子分型研究。结果分离菌株对环丙沙星、萘啶酸、四环素显示出高水平耐药,耐药率分别为96.18%、96.18%、94.66%,除2株结肠弯曲菌外,其余62株结肠弯曲菌对这3种药物均为完全耐药(100%);131株菌株中共65株多重耐药,总体多重耐药率为49.62%,其中11株空肠弯曲菌(16.42%)分布在3~5耐,54株结肠弯曲菌(84.38%)分布在3~6耐;在不同禽源分离菌株中,水禽分离菌株耐药程度最严重,其次是肉鸡。MLST分型结果表明,67株空肠弯曲菌共得到72个等位基因、35个序列型,分布较分散,无优势ST型和同源复合体;64株结肠弯曲菌共得到27个等位基因、19个序列型,59.38%(38/64)的菌株为同源复合体CC-828,其中ST-1586序列型最多,其次是ST-825;肉鸡源结肠弯曲菌主要以ST-1586、ST-9944、ST-3735为主,水禽以ST-825、ST-1586居多。结论胶东地区不同家禽中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的携带存在差异,蛋鸡携带两种菌的现象较肉鸡、水禽较为普遍;胶东地区禽源空肠弯曲菌对环丙沙星、萘啶酸、四环素耐药严重,对其它药物敏感性好,结肠弯曲菌对多种抗菌药物耐药严重,且多重耐药普遍;空肠弯曲菌ST型分散,该菌具有较高的遗传多样性,结肠弯曲菌在肉鸡和水禽以ST-1586为主的克隆传播;家禽携带能引起人类严重疾病的空肠弯曲菌,应加强禽源弯曲菌的动态监测。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 结肠弯曲菌 家禽 耐药性 多位点序列分型
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三类禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌流行病学调查及全基因组测序分析 被引量：4
4
作者 李翠函 曲志娜 +12 位作者 高玉斌 李彦 王娟 段笑笑 王琳 张喜悦 赵格 黄秀梅 赵建梅 张青青 王君玮 黄保续 刘俊辉 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1653-1662,共10页
【目的】研究不同禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC)的群间分布、耐药特征及菌株间亲缘关系,为阻断CREC的潜在危害提供技术支持。【方法】在胶东地区采集肉鸡、蛋鸡、水禽三类家禽泄殖腔拭子1131... 【目的】研究不同禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC)的群间分布、耐药特征及菌株间亲缘关系,为阻断CREC的潜在危害提供技术支持。【方法】在胶东地区采集肉鸡、蛋鸡、水禽三类家禽泄殖腔拭子1131份,利用选择性分离培养、质谱鉴定、PCR、微量肉汤稀释法、多位点序列分型(MLST)及全基因组测序(WGS)等方法进行CREC菌株鉴定与分析。【结果】共分离出364株bla NDM基因阳性的CREC菌株,分离率为32.18%,阳性场总体占比为76.32%,肉鸡场和个体阳性率均最高,分别为93.33%和55.56%。三类禽源菌株均多重耐药,83.65%菌株对8类及以上药物同时耐药,对多数测试药物耐药率在80%以上。肉鸡多重耐药问题最严重,水禽次之,蛋鸡相对较轻。45株全基因组测序的CREC菌株携带12类52种耐药基因,4种bla NDM变异体,以bla NDM-5(77.78%)为主,三类家禽对同类耐药基因的检出率存在差异。共检出46种ST型,多样性比为44.23%。三类家禽CREC菌株间单核苷酸多态性(SNPs)差异位点为82~71307个,且携带的优势型不同。【结论】携带bla NDM的CREC在不同家禽养殖场尤其是肉鸡场广泛存在,以bla NDM-5亚型最为常见,对多种抗菌药普遍耐药,且携带大量耐药基因,以质粒传播为主。CREC菌株在三类家禽中呈多样化分布,且多数菌株间亲缘关系相差较远。提示应针对不同动物群体,加强监测和影响因素研究,以降低CREC的潜在风险。 展开更多
关键词 家禽 碳青霉烯类耐药大肠杆菌(CREC) 群间分布 多位点序列分型(MLST) 全基因组测序(WGS)
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从“One Health”视角应对抗微生物药物耐药性
5
作者 王浩然 王琳 +6 位作者 刘俊辉 王娟 赵格 刘娜 张喜悦 王君玮 曲志娜 《中国动物检疫》 CAS 2023年第10期61-66,94,共7页
作为一场席卷全球的卫生危机,抗生素长期使用所带来的抗微生物药物耐药性(antimicrobial resistance,AMR)日趋严重,耐药病原菌、多重耐药菌、“超级细菌”等问题逐步成为公共卫生、畜牧兽医、环境卫生等领域共同面对的严峻挑战。近年来... 作为一场席卷全球的卫生危机,抗生素长期使用所带来的抗微生物药物耐药性(antimicrobial resistance,AMR)日趋严重,耐药病原菌、多重耐药菌、“超级细菌”等问题逐步成为公共卫生、畜牧兽医、环境卫生等领域共同面对的严峻挑战。近年来,随着“One Health”理念的兴起和探索实践,该理念逐步成为应对AMR挑战、实现人-动物-环境共同健康的共识。本文从“One Health”视角看待AMR问题,综述了“One Health”及AMR的发展历程,总结了国内外应用“One Health”理念遏制AMR问题的方法策略,提出了应对AMR问题的未来发展方向,为共同应对AMR挑战提供了参考。 展开更多
关键词 One Health 细菌 耐药性 应对策略
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胶东地区不同家禽MSSA和MRSA的流行分布与耐药性分析
6
作者 肖震 刘娜 +13 位作者 赵建梅 李彦 隋明华 王娟 段笑笑 韩云 刘俊辉 王琳 张青青 黄秀梅 高玉斌 王君玮 曲志娜 刘焕奇 《中国兽药杂志》 2023年第1期1-11,共11页
通过了解胶东地区肉鸡、蛋鸡和水禽(鸭、鹅)中甲氧西林敏感/耐药金黄色葡萄球菌(MSSA/MRSA)的流行情况及耐药现状,为临床合理用药、有效控制耐药菌株的流行传播提供依据。采用细菌常规分离培养、质谱/PCR鉴定、微量肉汤稀释法和spa分型... 通过了解胶东地区肉鸡、蛋鸡和水禽(鸭、鹅)中甲氧西林敏感/耐药金黄色葡萄球菌(MSSA/MRSA)的流行情况及耐药现状,为临床合理用药、有效控制耐药菌株的流行传播提供依据。采用细菌常规分离培养、质谱/PCR鉴定、微量肉汤稀释法和spa分型等方法,对2021年8月至10月在青岛地区采集的2730份禽源咽拭子进行MSSA及MRSA分离鉴定、spa分型及药敏试验,利用SPSS26.0软件和BioNumericsv7.6软件进行数据处理分析。2730份禽源咽拭子中共获得金黄色葡萄球菌742株(27.18%),其中MSSA 528株(19.34%),MRSA 214株(7.84%)。三种家禽菌株分离率依次为水禽(38.33%)、蛋鸡(28.45%)、肉鸡(20.33%)。351株代表性金黄色葡萄球菌共获得16种spa型别,MSSA(70.80%)和MRSA(95.30%)均是以t899为主。部分型别仅在蛋鸡(t010、t002、t3155)或肉鸡(t571、t011)或水禽(t1793、t5268、t267)中分离到。MSSA和MRSA对青霉素类、喹诺酮类等多种药物显示出高水平耐药,分别对8种和13种抗菌药的耐药率在62.89%以上,MRSA对7种药物完全耐药(100%)。除磺胺异噁唑、万古霉素、复方新诺明、多西环素、利奈唑胺5种药物外(0.24<P<0.97),MRSA对其余13种药物耐药率均极显著高于MSSA(P<0.01)。199株代表性菌株中共191株多重耐药,总体多重耐药率高达95.98%。其中,89株(91.75%)MSSA多重耐药菌株主要分布在6~8耐,102株MRSA(100%)主要分布在9~10耐。综上结果表明:金黄色葡萄球菌及MRSA在胶东地区家禽中分布较为广泛,且MRSA是以t899为主的克隆传播;胶东地区不同家禽中金黄色葡萄球菌的携带存在差异,水禽携带MSSA和MRSA的现象较其它两种家禽更为普遍;胶东地区禽源金黄色葡萄球菌对多种抗菌药普遍耐药,且MRSA较MSSA耐药更为严重,均为多重耐药菌株。实际临床用药中应尽量减少大环内酯类、喹诺酮类、青霉素类等高度耐药抗生素的使用频率,有针对性地选用敏感抗生素,以缓解严重的耐药现状。 展开更多
关键词 MRSA MSSA 家禽 spa分型 流行分布 耐药性
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青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析 被引量：22
7
作者 曲志娜 刘红玉 +5 位作者 王娟 赵思俊 李玉清 黄秀梅 盖文燕 王君玮 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2058-2066,共9页
【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBL... 【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%(207/249)的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著(P<0.05),而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%(P=0.035);CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。 展开更多
关键词 鸡源大肠杆菌 耐药性 ESBLS 基因型 基因亚型
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孔雀石绿及其代谢物在大菱鲆肌肉中的消除规律 被引量：24
8
作者 曲志娜 李存金 +5 位作者 赵思俊 路平 王玉东 谭维泉 孙晓亮 郑增忍 《中国农学通报》 CSCD 2008年第6期491-496,共6页
研究孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在大菱鲆肌肉组织内的残留消除规律。采用超高效液相色谱-串联质谱法,对用浓度为800ng/ml的孔雀石绿溶液药浴1h的大菱鲆进行连续采样监测。结果表明,孔雀石绿在大菱鲆的肌肉中代谢较快,其含量降至检... 研究孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在大菱鲆肌肉组织内的残留消除规律。采用超高效液相色谱-串联质谱法,对用浓度为800ng/ml的孔雀石绿溶液药浴1h的大菱鲆进行连续采样监测。结果表明,孔雀石绿在大菱鲆的肌肉中代谢较快,其含量降至检测限以下需要20.3d,而其代谢物隐色孔雀石绿存留时间长,消除过程缓慢,需长达281.9～356.7d。 展开更多
关键词 孔雀石绿 隐色孔雀石绿 大菱鲆 消除 超高效液相色谱-串联质谱法
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鸡、猪大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析 被引量：20
9
作者 曲志娜 张颖 +4 位作者 李玉清 李梁梁 王娟 黄秀梅 刘焕奇 《中国农学通报》 CSCD 2013年第8期50-54,共5页
为检测不同动物源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,探究ESBLs对大肠杆菌耐药性的影响,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病。采用NCCLS标准方法和双纸片协同法,对102株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定和和ESBLs检测,设计合... 为检测不同动物源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,探究ESBLs对大肠杆菌耐药性的影响,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病。采用NCCLS标准方法和双纸片协同法,对102株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定和和ESBLs检测,设计合成4对引物,用PCR方法进行了ESBLs耐药质粒的DNA扩增和基因型分析。结果表明:以产ESBLs细菌的耐药质粒为模板扩增出了与预期片段大小相符的TEM、CTX-M型ESBLs产物,但均未扩增出SHV、OVA型ESBLs产物。鸡源、猪源产ESBLs菌株检出率分别为81%、6%。CTX-M、TEM型为山东莱西地区动物源产ESBLs大肠杆菌菌株的流行基因型,且鸡源产ESBLs大肠杆菌菌株分布广泛,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,以有效防治此类细菌引发的疾病。 展开更多
关键词 大肠杆菌 ESBLS 耐药性 基因型
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猪源大肠杆菌耐药性与Ⅰ型整合子关系研究 被引量：8
10
作者 曲志娜 李伟臣 +3 位作者 王娟 赵思俊 黄秀梅 郑增忍 《中国动物检疫》 CAS 2010年第12期51-54,共4页
目的为了解猪源大肠杆菌中Ⅰ型整合子的流行情况,探讨Ⅰ型整合子与大肠杆菌耐药表型的相关性。方法采用微量肉汤稀释法测定119株猪源大肠杆菌对8类14种抗菌药物的耐药性,并采用PCR法检测猪源大肠杆菌Ⅰ型整合酶基因(int I1)并扩增其可变... 目的为了解猪源大肠杆菌中Ⅰ型整合子的流行情况,探讨Ⅰ型整合子与大肠杆菌耐药表型的相关性。方法采用微量肉汤稀释法测定119株猪源大肠杆菌对8类14种抗菌药物的耐药性,并采用PCR法检测猪源大肠杆菌Ⅰ型整合酶基因(int I1)并扩增其可变区,对PCR产物进行酶切分析,测序分析整合子可变区携带的耐药基因盒。结果 119株大肠杆菌耐药现象十分严重,对四环素、磺胺异恶唑、新诺明全部耐药,所有菌株均呈多重耐药。119株猪源大肠杆菌中有92株含Ⅰ型整合子,检出率77.31%。扩增出7类大小不同的基因盒插入区片段,范围为1008bp～3149bp。7类Ⅰ型整合子在119株猪源大肠杆菌中存在13种流行组合。78.15%大肠杆菌菌株的Ⅰ型整合子携带2种或2种以上的基因盒,其中以携带编码氨基糖苷类药物耐药基因(aadA1、aadA2、aadA5、aadA22、aadB)最多,其次为编码磺胺类药物耐药基因(dfrA1、dfrA12、dfrA17、dfrA27),此外还携带编码利福平、林可霉素和氯霉素的基因lnuF、cmlA6、aar-3、orf。结论Ⅰ型整合子普遍存在于大肠杆菌中,且呈流行上升趋势;Ⅰ型整合子参与耐药及多重耐药,但单株细菌携带的耐药基因盒与其耐药表型无对应关系。 展开更多
关键词 大肠杆菌 Ⅰ型整合子 基因盒 耐药性 多重耐药
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磺胺甲噁唑在大菱鲆体内药代动力学及残留消除规律的研究 被引量：8
11
作者 曲志娜 赵思俊 +5 位作者 王玉东 路平 李存金 谭维泉 孙晓亮 郑增忍 《中国兽药杂志》 2009年第2期28-31,共4页
采用高效液相色谱法,对以80 mg/kg b.w.单剂量口灌磺胺甲噁唑的大菱鲆进行连续采样监测,研究大菱鲆口服磺胺甲噁唑的药代动力学特征及残留消除规律。结果表明,磺胺甲噁唑在大菱鲆血液、肌肉中药代动力学特征分别符合带时滞的一级吸收二... 采用高效液相色谱法,对以80 mg/kg b.w.单剂量口灌磺胺甲噁唑的大菱鲆进行连续采样监测,研究大菱鲆口服磺胺甲噁唑的药代动力学特征及残留消除规律。结果表明,磺胺甲噁唑在大菱鲆血液、肌肉中药代动力学特征分别符合带时滞的一级吸收二室开放模型、一级吸收一室开放模型。磺胺甲噁唑在大菱鲆体内消除速度较慢,16℃水温的实验条件下,在大菱鲆肌肉中的休药期为27天。 展开更多
关键词 磺胺甲噁唑 大菱鲆 药代动力学 消除 高效液相色谱法
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不同省区鸡源大肠杆菌耐药性调查与系统进化群分析 被引量：7
12
作者 曲志娜 胡学远 +5 位作者 王娟 赵思俊 李玉清 黄秀梅 刘焕奇 王君玮 《中国兽药杂志》 2014年第9期4-8,共5页
为有效控制鸡大肠杆菌病,对不同省区鸡源大肠杆菌致病菌株的分布情况及耐药特征进行了调查分析,分别采用PCR法和MIC法进行了系统进化群分群检测和药敏试验,采用皮下注射进行了动物致病性试验,并采用SPSS17.0软件进行差异显著性分析。结... 为有效控制鸡大肠杆菌病,对不同省区鸡源大肠杆菌致病菌株的分布情况及耐药特征进行了调查分析,分别采用PCR法和MIC法进行了系统进化群分群检测和药敏试验,采用皮下注射进行了动物致病性试验,并采用SPSS17.0软件进行差异显著性分析。结果显示:低致病群B1(38.13%)和非致病群A(34.02%)菌株分布相对较多,其次是高致病群D(21.23%)和B2(6.16%);鸡源大肠杆菌耐药严重,12种药物的耐药率在50%以上,多重耐药问题突出,多重耐药率高达98.86%;不同省区鸡源大肠杆菌菌株的耐药程度存在差异,个别药物(如奥格门丁、头孢噻呋等)差异显著;高致病群B2和D群菌株的耐药程度较B1和A群菌株严重,其中氧氟沙星、庆大霉素、大观霉素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、复方新诺明、奥格门丁等7种药物差异显著(P<0.05)。试验表明,我国鸡源大肠杆菌高致病菌株检出率高,且耐药程度相对严重,在适宜条件下更易导致鸡群发病且较难控制。 展开更多
关键词 鸡大肠杆菌 系统进化群 致病性 耐药性
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OIE食品安全工作的概况及应对措施研究 被引量：1
13
作者 曲志娜 赵思俊 +3 位作者 路平 王娟 李存金 郑增忍 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第7期34-36,共3页
近年来．世界各地由于动物源性食品安全问题引发的食品污染事件呈逐年上升的趋势，如疯牛病、二噁英事件、口蹄疫、O157事件以及瘦肉精中毒事件等都对人类健康有直接威胁．加剧了人们对食品安全的担忧．引起了各界的广泛关注．也引起了... 近年来．世界各地由于动物源性食品安全问题引发的食品污染事件呈逐年上升的趋势，如疯牛病、二噁英事件、口蹄疫、O157事件以及瘦肉精中毒事件等都对人类健康有直接威胁．加剧了人们对食品安全的担忧．引起了各界的广泛关注．也引起了OIE等国际组织的高度重视。2002年OIE成立了食品安全工作组．正式启动了在动物源性食品安全领域的工作。 展开更多
关键词 食品安全工作 OIE 动物源性食品安全 污染事件 食品安全问题 国际组织 人类健康 中毒事件
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己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备 被引量：3
14
作者 曲志娜 刘爽 +8 位作者 路平 雷利辉 陈德坤 李葳 孙淑芳 张衍海 郑增忍 郭福生 蒋正军 《中国兽药杂志》 2005年第1期6-11,共6页
采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制... 采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制备出多克隆抗体 ,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定 ,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定 ,抗血清效价均超过了 1∶1 0 0 0 0。 展开更多
关键词 己烯雌酚 完全抗原 合成 多克隆抗体 制备 混合酸酐法 酶联免疫吸附测定法 雌激素
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应用荧光法测定硒含量的实验研究 被引量：2
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作者 曲志娜 锁守丽 +2 位作者 王振隆 康世良 李中利 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1998年第3期2-4,共3页
采用荧光分光光度计法对检测器及样品的精密度和回收率进行了测定。结果表明，本法的平均变异系数为２．０６７％±１．０７３％，生物样本的精密度均大于标准品的精密度，硒的回收率均在８５％以上。
关键词 硒 荧光光度法 回收率 鸡病 亚硒酸钠
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欧盟等国家和地区对动物源性食品中药残的若干规定 被引量：2
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作者 曲志娜 郭福生 +3 位作者 郑增忍 路平 刘爽 张丽丽 《山东畜牧兽医》 2005年第5期35-36,共2页
关键词 动物源性食品 药残 欧盟 潜在危害 公众健康 残留问题 畜牧业 中兽药
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育成鸡开产前的钙、磷、维生素D营养需求 被引量：2
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作者 曲志娜 尹凤歧 +1 位作者 李红卫 王春华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1998年第5期40-40,共1页
育成鸡开产前的钙、磷、维生素Ｄ营养需求曲志娜尹凤歧李红卫王春华（农业部动物检疫所·青岛·２６６０３２）（哈尔滨铁路兽医卫生段不同日龄和不同产蛋水平的鸡对Ｃａ需要量不同。在育成阶段雏鸡对Ｃａ的需要量一般占饲料的... 育成鸡开产前的钙、磷、维生素Ｄ营养需求曲志娜尹凤歧李红卫王春华（农业部动物检疫所·青岛·２６６０３２）（哈尔滨铁路兽医卫生段不同日龄和不同产蛋水平的鸡对Ｃａ需要量不同。在育成阶段雏鸡对Ｃａ的需要量一般占饲料的０．９％～１％，而在产蛋阶段则需３．３％以... 展开更多
关键词 鸡 育成鸡 开产前 钙 磷 维生素D
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养殖场动物源细菌耐药性监测与风险控制 被引量：4
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作者 曲志娜 《兽医导刊》 2017年第13期10-12,共3页
一、监测概况20世纪90年代中期，欧美地区的发达国家意识到细菌耐药性监测系统，先后建立了国家耐药性监测系统。2008年，我国农业部兽医局组建动物源细菌耐药性监测系统，由6家单位的实验室组成。2013-2015年，增加4家单位。1.承担单... 一、监测概况20世纪90年代中期，欧美地区的发达国家意识到细菌耐药性监测系统，先后建立了国家耐药性监测系统。2008年，我国农业部兽医局组建动物源细菌耐药性监测系统，由6家单位的实验室组成。2013-2015年，增加4家单位。1.承担单位。我国全国动物源细菌耐药性监测系统由：中国动卫中心、中国动物疫控中心、中监所及其他7家省级兽药监察所，共同完成监测任务。2.监测地区。2017年，监测地区新增了新疆、宁夏、贵州等地，目前还未纳入监测系统的地区有：拉萨、甘肃和海南。 展开更多
关键词 细菌耐药性 耐药性监测 动物源 风险控制 养殖场 监测系统 农业部兽医局 实验室组成
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亚硒酸钠在雏鸡体内的血药动力学研究 被引量：1
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作者 曲志娜 李庆路 《山东畜牧兽医》 1998年第1期1-2,共2页
本实验采用荧光法，研究了亚硒酸钠在正常硒水平蛋用雏鸡体内全血中的动力学过程。
关键词 硒 雏鸡 药代动力学 亚硒酸钠
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病毒性呼吸道传染病的研究进展 被引量：1
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作者 曲志娜 吴延功 《山东家禽》 1998年第5期35-37,共3页
１．世界现状１．１对鸡致病力弱的病毒在第四届国际禽流感研讨会上，Ａｌｅｘａｎｄｅｒ和Ｐｅａｒｓｏｎ对现有的家禽及其他鸟类禽流感的发生现状的有关报告做了综述，并与十年前的文献资料进行了比较。大量事实证明流感病毒最早存在... １．世界现状１．１对鸡致病力弱的病毒在第四届国际禽流感研讨会上，Ａｌｅｘａｎｄｅｒ和Ｐｅａｒｓｏｎ对现有的家禽及其他鸟类禽流感的发生现状的有关报告做了综述，并与十年前的文献资料进行了比较。大量事实证明流感病毒最早存在于野鸟（特别是水禽），家禽感染则是... 展开更多
关键词 呼吸通传染病 家禽 禽流感 病毒性
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