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鉴别感染羊驼4种病毒多重PCR检测方法的建立
1
作者 于远光 岳涛 +9 位作者 马晓宁 张永兴 王萌 曾巧英 刘艳红 高闪电 独军政 吴锦艳 李坤 许小红 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1102-1107,共6页
为了建立一种用于羊驼易感的羊口疮病毒(ORFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV-1)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝舌病病毒(BTV)鉴别的多重PCR检测方法,根据GenBank中公布的ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV参考株基因序列分别设计特异性引物,优化引物、dNTP、T... 为了建立一种用于羊驼易感的羊口疮病毒(ORFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV-1)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝舌病病毒(BTV)鉴别的多重PCR检测方法,根据GenBank中公布的ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV参考株基因序列分别设计特异性引物,优化引物、dNTP、Taq DNA聚合酶浓度及退火温度,通过敏感性和重复性检验,并对60份羊驼粪便样品和35份羊驼咽拭子样品进行验证。结果显示,所建立的多重PCR方法能够有效区分ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV,最低检测限分别为3.18×10^(4)copies/μL、3.13×10^(1)copies/μL、3.06×10^(1)copies/μL、2.95×10^(2)copies/μL。结论:所建立的多重PCR方法能够同时快速鉴别羊驼感染的ORFV、BVDV-1、FMDV和BTV,具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 羊驼 口蹄疫病毒 羊口疮病毒 蓝舌病病毒 牛病毒性腹泻病毒 多重PCR
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猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白诱导上皮细胞融合和凋亡 被引量：36
2
作者 曾巧英 陆承平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期407-412,共6页
猪链球菌 2型 (SS2 )溶菌酶释放蛋白 (MRP)的致病作用迄今不明 ,为此 ,以HEp 2细胞为上皮细胞体外模型 ,将纯化的MRP溶液和细胞共孵育 ,光镜观察 ,发现MRP可诱导细胞发生两种典型形态学变化 :一是诱导细胞融合形成多核巨细胞 ,随后巨细... 猪链球菌 2型 (SS2 )溶菌酶释放蛋白 (MRP)的致病作用迄今不明 ,为此 ,以HEp 2细胞为上皮细胞体外模型 ,将纯化的MRP溶液和细胞共孵育 ,光镜观察 ,发现MRP可诱导细胞发生两种典型形态学变化 :一是诱导细胞融合形成多核巨细胞 ,随后巨细胞发生凋亡 ;二是诱导单个细胞凋亡。透射电镜观察和流式细胞分析确证MRP具有诱导上皮细胞凋亡的功能 ,凋亡率达 1 8%。证明MRP可单独作为SS2的毒力因子。 展开更多
关键词 猪链球菌 溶菌酶释放蛋白 诱导 上皮细胞融合 细胞凋亡
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施肥水平对甘蔗/大豆间作体系中植株生长及养分积累的影响 被引量：5
3
作者 曾巧英 黄莹 +4 位作者 敖俊华 陈迪文 周文灵 李奇伟 江永 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期54-57,共4页
采用盆栽方法研究了不同施肥水平下间作对甘蔗和大豆生长的影响以及间作优势。结果显示:间作大豆的各项植株指标与单作大豆差异不显著,不施肥可以刺激单作和间作大豆根系的生长,增加大豆根瘤数和根瘤重,而间作甘蔗各项指标大多数显著低... 采用盆栽方法研究了不同施肥水平下间作对甘蔗和大豆生长的影响以及间作优势。结果显示:间作大豆的各项植株指标与单作大豆差异不显著,不施肥可以刺激单作和间作大豆根系的生长,增加大豆根瘤数和根瘤重,而间作甘蔗各项指标大多数显著低于单作甘蔗,在不施肥的情况下下降幅度加大,但总根长两者间差异不显著;间作甘蔗的氮、磷、钾积累量均小于单作的甘蔗,以钾的降低幅度最大,而间作大豆仅在不施肥的情况下磷、钾的积累量显著低于单作大豆,氮素在四种处理间差异不显著;两种施肥水平下间作的土地当量比(LER)均大于1,说明间作有明显的优势,并且间作的氮、磷、钾总养分累积量高于单作,由此可见甘蔗与大豆间作优势不是表现在个体上,而是表现在提高土地利用率上。 展开更多
关键词 甘蔗 大豆 间作 植株生长 养分累积量
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镉胁迫对不同品种甘蔗生长及各器官镉积累的影响 被引量：6
4
作者 曾巧英 凌秋平 +3 位作者 樊丽娜 胡斐 杨湛端 齐永文 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第11期2071-2076,共6页
为了研究土壤镉胁迫对甘蔗生长及镉积累、转移的影响,以4个不同品种甘蔗为材料,通过土壤盆栽的方法,分析镉胁迫下不同甘蔗株高、茎径、生物量、镉含量、积累量、转移系数及分配系数的变化。结果显示:镉胁迫下甘蔗的株高,茎径显著下降,... 为了研究土壤镉胁迫对甘蔗生长及镉积累、转移的影响,以4个不同品种甘蔗为材料,通过土壤盆栽的方法,分析镉胁迫下不同甘蔗株高、茎径、生物量、镉含量、积累量、转移系数及分配系数的变化。结果显示:镉胁迫下甘蔗的株高,茎径显著下降,耐镉性品种YT666根系和茎的生物量分别是镉敏感品种ROC22的3.23和2.92倍;在正常土壤生长的甘蔗植株各器官的镉含量与积累量均没有显著差异,但在镉胁迫下,各器官镉含量和积累量显著增加,其中各器官镉含量表现为根>老叶>茎>新叶,而镉积累量为根>茎>老叶>新叶;耐镉性品种YT666总镉积累量最高,镉在根系中的分配系数最高,而敏感品种ROC22总镉积累量较低,但在根系中的分配系数低。由此可见,镉胁迫下耐镉的甘蔗品种保持较高的生长量可能是通过降低镉向地上部分转移来降低镉对甘蔗生长的影响。 展开更多
关键词 甘蔗 镉胁迫 镉含量 镉积累量 分配系数
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不同甘蔗品系对养分胁迫响应的差异研究 被引量：6
5
作者 曾巧英 江永 +4 位作者 黄莹 符成 敖俊华 齐永文 李奇伟 《广东农业科学》 CAS 2015年第12期38-43,共6页
为了评价割手密、斑茅与甘蔗杂交后的后代材料在养分缺乏情况下的养分利用特性,在砂培条件下,以斑茅、割手密和甘蔗杂交后代品系及甘蔗栽培种为材料,研究了低氮、低磷和低钾胁迫对甘蔗各品系的植株生长及甘蔗养分含量、积累量的影响。... 为了评价割手密、斑茅与甘蔗杂交后的后代材料在养分缺乏情况下的养分利用特性,在砂培条件下,以斑茅、割手密和甘蔗杂交后代品系及甘蔗栽培种为材料,研究了低氮、低磷和低钾胁迫对甘蔗各品系的植株生长及甘蔗养分含量、积累量的影响。结果表明:低氮、低磷和低钾胁迫均显著影响甘蔗植株生长,表现出植株株高、茎粗、地上部分干重及根系干重下降,以YC10-29在低钾胁迫下、YC06-92在低磷胁迫下降幅较小;在养分胁迫下,甘蔗植株的根冠比增加,低磷和低钾胁迫降低了根茎粗,而总根长增加,以YC06-92在低钾胁迫下总根长增加最多,约为对照的2.67倍;3种养分胁迫均影响植株对其他两种养分的吸收利用,表现出低钾胁迫下植株的磷含量增加,而低氮胁迫下植株钾含量和磷含量增加、且低氮胁迫下磷和钾的累积量分别高于在低磷和低钾胁迫下的磷和钾的积累量,其中以ROC22最为明显。含有割手密和斑茅血缘的品系YC10-29和YC06-92具有较高的耐低钾和低磷胁迫特性,而ROC22具有较高的耐低氮胁迫特性。 展开更多
关键词 甘蔗 养分胁迫 植株生长 养分含量
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猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白的黏附作用 被引量：17
6
作者 曾巧英 陆承平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期67-71,共5页
为研究猪链球菌 2型 (SS2 )的毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)的黏附作用 ,进行了如下试验 :1 用黏附计数法比较菌株HA980 1(MRP+ )和SH0 0 6 4 4 4 (MRP-)的黏附动力学 ,两菌株均能黏附于HEp 2细胞 ,MRP+ 株的最大黏附菌数显著高于MRP+ ... 为研究猪链球菌 2型 (SS2 )的毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)的黏附作用 ,进行了如下试验 :1 用黏附计数法比较菌株HA980 1(MRP+ )和SH0 0 6 4 4 4 (MRP-)的黏附动力学 ,两菌株均能黏附于HEp 2细胞 ,MRP+ 株的最大黏附菌数显著高于MRP+ 株 (P <0 0 5 ) 。 2 菌体置 5 6℃ 1h ,或用胰酶或半乳糖预处理 ,细菌黏附力完全丧失 ;分别用高碘酸、溶菌酶、秋水仙素和DNaseⅠ处理HEp 2细胞 ,前者可完全阻断HA980 1对它的黏附 ,后三者使黏附菌数显著下降。3 用纯化的MRP处理HEp 2细胞 ,或用抗MRP兔血清或MRP的单克隆抗体处理菌体 ,MRP+ 株的黏附菌数显著降低(P <0 0 5 ) ,但不能被完全抑制 ;用抗MRP-株全菌兔血清处理菌体 ,也能降低MRP+ 株的黏附菌数。 4 半乳糖或 5 6℃预处理MRP ,使其完全丧失对HA980 1的黏附抑制功能 ,但胰酶、过氧化氢和巯基乙醇的预处理没有明显的影响。结论 :MRP是SS2的一种黏附素 。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶菌酶 释放蛋白 黏附作用
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猪链球菌2型对扁桃腺上皮细胞的黏附和侵袭作用 被引量：11
7
作者 曾巧英 陆承平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期523-525,共3页
猪链球菌 2型 (SS2 )是重要的人畜共患病病原体 ,溶菌酶释放蛋白 (MRP)是SS2的主要毒力因子之一。用天然表达MRP的江苏分离株HA980 1和不表达MRP的上海分离株SH0 0 6 4 4 4 ,研究SS2对仔兔扁桃腺上皮细胞的黏附和侵袭作用。黏附计数结... 猪链球菌 2型 (SS2 )是重要的人畜共患病病原体 ,溶菌酶释放蛋白 (MRP)是SS2的主要毒力因子之一。用天然表达MRP的江苏分离株HA980 1和不表达MRP的上海分离株SH0 0 6 4 4 4 ,研究SS2对仔兔扁桃腺上皮细胞的黏附和侵袭作用。黏附计数结果表明 ,HA980 1 (MRP+ )和SH0 0 6 4 4 4 (MRP- )均能对扁桃腺上皮细胞高水平黏附。扫描和透射电镜均观察到HA980 1的高水平黏附现象 ,黏附部位是细胞膜和细胞微绒毛 ,并观察到细胞膜上有链球菌正处于内化过程中。裂解记数结果表明 ,HA980 1有低度侵袭力 ,SH0 0 6 4 4 4未检测到侵袭力。结果提示 ,扁桃腺是SS2的定殖器官和感染门户 ;MRP+ 菌株黏附后直接侵入细胞内是其穿过扁桃腺上皮细胞屏障的机制之一。 展开更多
关键词 细胞侵袭 细胞黏附 扁桃腺上皮细胞 猪链球菌 细菌培养
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猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白诱导血管内皮细胞融合 被引量：6
8
作者 曾巧英 陆承平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期821-825,共5页
猪链球菌2型(SS2)主要引起人和猪的脑膜炎,但其毒力因子溶菌酶释放蛋白(MRP)对构成血脑屏障的微血管内皮细胞有何致病作用迄今不明。为此分离仔兔脾微血管内皮细胞(SMEC),纯化后用SV40-T 抗原转化后用作试验的细胞模型。将单层SMEC 和... 猪链球菌2型(SS2)主要引起人和猪的脑膜炎,但其毒力因子溶菌酶释放蛋白(MRP)对构成血脑屏障的微血管内皮细胞有何致病作用迄今不明。为此分离仔兔脾微血管内皮细胞(SMEC),纯化后用SV40-T 抗原转化后用作试验的细胞模型。将单层SMEC 和电泳纯MRP 溶液共孵育,染色后,光镜观察,发现MRP 可诱导SMEC发生两种典型形态学变化:致密细胞单层中出现巨大空洞而呈网状;空洞内有细胞融合,形成多核巨细胞,随后巨细胞核极度浓缩释出,巨细胞消失。研究结果表明, MRP 单独足以破坏大脑的血管内皮细胞屏障。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶菌酶释放蛋白 血管内皮细胞 细胞融合 细胞凋亡 脑膜炎
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用单克隆抗体展示猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白在菌体表面的形态和分布 被引量：5
9
作者 曾巧英 陆承平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期143-147,共5页
用猪链球菌 2型江苏分离株HA980 1全菌免疫Balb/c小鼠 ,取其脾细胞和Sp2 / 0细胞融合 ,以电泳纯溶菌酶释放蛋白 (MRP)为抗原 ,间接ELISA筛选MRP抗体阳性孔并用有限稀释法单克隆化 ,剔除与胞壁杂蛋白交叉反应阳性的克隆 ,获得 3株特异针... 用猪链球菌 2型江苏分离株HA980 1全菌免疫Balb/c小鼠 ,取其脾细胞和Sp2 / 0细胞融合 ,以电泳纯溶菌酶释放蛋白 (MRP)为抗原 ,间接ELISA筛选MRP抗体阳性孔并用有限稀释法单克隆化 ,剔除与胞壁杂蛋白交叉反应阳性的克隆 ,获得 3株特异针对MRP的单克隆抗体细胞株 3A3、4D5和 6B4。将HA980 1和HEp 2细胞共孵育 ,使细菌粘附于细胞表面 ,用 3株MRP单克隆抗体联合介导FITC标记HA980 1菌体表面的MRP ,激光共聚焦显微观察 ,代表MRP的荧光图像显示 ,MRP是一线形表面大分子 ,一端锚定在细胞壁 ,另一端向空中伸展 ,其分布状态有单在和丛集 展开更多
关键词 单克隆抗体 猪 链球菌2型 溶菌酶 释放蛋白 菌体表面 形态分布
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不同浓度铝胁迫对甜玉米幼苗生长的影响研究 被引量：8
10
作者 曾巧英 王蕴波 +1 位作者 杨泉女 陈文胜 《佛山科学技术学院学报（自然科学版）》 CAS 2009年第2期5-8,共4页
以粤甜3号为材料研究了在不同浓度铝胁迫下甜玉米幼苗生长的变化及SOD酶的反应。结果表明:在铝胁迫下3 h甜玉米胚根伸长就受到抑制,胚根的相对伸长率随处理时间和处理浓度的增加而降低;株高、茎粗、单株生物量等在21 d表现出受到抑制,... 以粤甜3号为材料研究了在不同浓度铝胁迫下甜玉米幼苗生长的变化及SOD酶的反应。结果表明:在铝胁迫下3 h甜玉米胚根伸长就受到抑制,胚根的相对伸长率随处理时间和处理浓度的增加而降低;株高、茎粗、单株生物量等在21 d表现出受到抑制,并且随铝处理浓度和时间的增加抑制程度加深;在第7 d和14 d,各处理SOD酶活性先增加后下降,而到21 d和28 d则SOD酶活性呈下降的趋势。 展开更多
关键词 铝胁迫 胚根相对伸长率 SOD酶
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溶菌酶释放蛋白介导猪链球菌2型的血凝活性 被引量：2
11
作者 曾巧英 陆承平 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第7期24-26,共3页
比较了猪链球菌 2型 (SS2 )MRP+ 菌株HA980 1和MRP-菌株 0 0 64 44的血凝特性及溶菌酶释放蛋白 (MRP)在血凝过程中的作用。 2株菌均能凝集人A、B、O型及猪、兔、BALB/c小鼠、豚鼠、绵羊、山羊、水牛的红细胞 ,不凝集鸡、鲫鱼、鲤鱼、金... 比较了猪链球菌 2型 (SS2 )MRP+ 菌株HA980 1和MRP-菌株 0 0 64 44的血凝特性及溶菌酶释放蛋白 (MRP)在血凝过程中的作用。 2株菌均能凝集人A、B、O型及猪、兔、BALB/c小鼠、豚鼠、绵羊、山羊、水牛的红细胞 ,不凝集鸡、鲫鱼、鲤鱼、金鱼的红细胞 ,且对人、猪、兔、BALB/c小鼠、豚鼠红细胞的凝集价极显著高于绵羊、山羊和水牛 (P <0 .0 1) ;MRP+ 菌株对人、猪、兔、BALB/c小鼠和豚鼠红细胞的凝集价均极显著高于MRP-株 (P <0 .0 1)。MRP+ 株的血凝活性对热处理极其敏感 ,且凝集速度和反应温度呈负相关。半乳糖、胰酶预处理MRP+ 株菌体能完全阻断其血凝 ,葡萄糖、甘露糖、乳糖、蔗糖、过氧化氢、巯基乙醇对其则无明显影响。用纯化的MRP处理红细胞、抗MRP兔血清和MRP的单克隆抗体处理菌体 ,均能显著降低MRP+ 菌株的凝集价 (P <0 .0 5 ) ,但不能完全抑制 ;用抗MRP-菌株兔血清处理菌体 ,也能显著降低MRP+ 株凝集价。试验证明 :MRP是SS2的黏附素 ,具有半乳糖特异性受体 。 展开更多
关键词 溶菌酶释放蛋白 猪 链球菌2型 血凝活性 黏附素 细胞黏附
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不同甜玉米品种对铝胁迫反应的差异性研究 被引量：1
12
作者 曾巧英 王蕴波 +1 位作者 杨泉女 年海 《佛山科学技术学院学报（自然科学版）》 CAS 2009年第5期64-67,共4页
以18个甜玉米品种为材料研究了对铝胁迫反应的差异性。结果表明:在铝胁迫下,不同甜玉米品种根的相对伸长率下降,根尖铝含量增加,株高、茎粗及生物量下降,不同品种间差异显著。耐性品种保持较高根的相对伸长率、相对株高、相对茎粗及相... 以18个甜玉米品种为材料研究了对铝胁迫反应的差异性。结果表明:在铝胁迫下,不同甜玉米品种根的相对伸长率下降,根尖铝含量增加,株高、茎粗及生物量下降,不同品种间差异显著。耐性品种保持较高根的相对伸长率、相对株高、相对茎粗及相对生物量,根尖铝含量较少。而敏感品种则相反。 展开更多
关键词 甜玉米 铝胁迫 根的相对伸长率 根尖铝含量 株高 茎粗 生物量
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肉毒神经毒素:一个老毒素的新密码 被引量：2
13
作者 曾巧英 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1-9,共9页
肉毒梭菌长期进化形成了独特的旱地(草地)和湿地两套自然循环机制,厌氧和产芽胞是成就其自然循环最合理的进化选择.肉毒梭菌本身无侵袭力,致病性全取决于毒素,即肉毒神经毒素(肉毒素)(botulinum neurotoxins,BoNTs,botulin),致野生及家... 肉毒梭菌长期进化形成了独特的旱地(草地)和湿地两套自然循环机制,厌氧和产芽胞是成就其自然循环最合理的进化选择.肉毒梭菌本身无侵袭力,致病性全取决于毒素,即肉毒神经毒素(肉毒素)(botulinum neurotoxins,BoNTs,botulin),致野生及家养脊椎动物肉毒中毒(botulism).据肉毒素抗原性将其分为不同的血清型(毒素型),目前已鉴定的毒素血清型已超过40个,产生肉毒素的细菌按遗传关系可分为7个种.毒素抗原性虽不同,但空间结构均相似,均含3个功能域:HC受体结合域、HN穿膜域和LC活性域.BoNTs-LC具Zn^(2+)依赖蛋白酶活性,降解外周运动神经元的突触融合复合体蛋白,从而阻断神经递质释放,致肌肉麻痹. 展开更多
关键词 肉毒神经毒素 肉毒梭菌 血清型 致病机理
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两株不同血清型禽源多杀性巴氏杆菌的理化特性研究
14
作者 曾巧英 《中国兽医科技》 CSCD 1999年第11期31-33,共3页
禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（８∶Ａ 型） 和Ｃ４８１（５∶Ａ 型） 对营养的需要较高，在一般培养基上生长不良，相比之下，Ｃ４８１比Ｐ１０５９ 生长更差，但在胰蛋白胨肉汤和加５ ｍ Ｌ／Ｌ 血清的普通培养基中两株菌均生长... 禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（８∶Ａ 型） 和Ｃ４８１（５∶Ａ 型） 对营养的需要较高，在一般培养基上生长不良，相比之下，Ｃ４８１比Ｐ１０５９ 生长更差，但在胰蛋白胨肉汤和加５ ｍ Ｌ／Ｌ 血清的普通培养基中两株菌均生长丰盛；两株菌的生长曲线显示，Ｃ４８１在对数生长期的繁殖速度较快，最高菌数略低，但衰落期细菌死亡速度较慢；对培养基中ＮａＣｌ 含量的要求，Ｃ４８１ 为０ ～２ ．７ ％ ，Ｐ１０５９ 为０ ．９ ％ ～２ ．１ ％ ；对ｐＨ 的要求，Ｃ４８１ 为７ ．４ ～７ ．８ ，Ｐ１０５９ 为７ ．０ ～７ ．４ ；两株细菌用小白鼠连续传５ 代复壮后，对小白鼠的最小致死量（ ＭＬＤ） ，Ｃ４８１为６ 个菌，Ｐ１０５９ 为９ 个菌。 展开更多
关键词 禽霍乱 巴氏杆菌 理化特性 白清型 禽源多杀性
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钾水平对甘蔗氮、磷、钾养分吸收利用的影响 被引量：10
15
作者 黄莹 曾巧英 +6 位作者 敖俊华 陈迪文 周文灵 卢颖林 江永 黄振瑞 李奇伟 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期50-53,61,共5页
采用水培试验方法,研究不同钾水平对两个甘蔗品种(BC2-32和YT55)氮、磷、钾养分吸收利用的影响。结果表明:施钾使两品种的总干重显著增加,根冠比降低;不同钾处理下,BC2-32的根干重,根冠比均比YT55高,地上部则相反;随着钾浓度的升高,BC2... 采用水培试验方法,研究不同钾水平对两个甘蔗品种(BC2-32和YT55)氮、磷、钾养分吸收利用的影响。结果表明:施钾使两品种的总干重显著增加,根冠比降低;不同钾处理下,BC2-32的根干重,根冠比均比YT55高,地上部则相反;随着钾浓度的升高,BC2-32的总干重增长幅度比YT55大;施钾显著提高了两品种的各器官氮、磷含量以及全株氮、磷积累量和利用效率,BC2-32的地上部氮、磷积累量分别占全株氮、磷积累量的比例以及氮利用效率在各钾处理下均比YT55低,而磷利用效率在较低钾处理下低于YT55,在较高钾处理下则相反;施钾显著提高了两品种的全株钾积累量,降低了钾利用效率,在不同钾处理下,BC2-32的钾素利用效率都高于YT55。 展开更多
关键词 钾水平 甘蔗 干物质 养分吸收利用
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钾水平对不同基因型斑茅生长和钾营养特性的影响 被引量：5
16
作者 卢颖林 曾巧英 +6 位作者 陈迪文 周文灵 黄莹 敖俊华 黄振瑞 江永 李奇伟 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期439-445,共7页
[目的]探讨不同钾水平下3个基因型斑茅根系形态和钾营养特性的差异,为培育钾高效甘蔗品种提供优异种质和理论依据。[方法]以钾钝感斑茅材料云南82-85和钾敏感斑茅材料海南92-109、广西87-3为供试材料,采用高钾(3 mmol·L-1,HK)和低... [目的]探讨不同钾水平下3个基因型斑茅根系形态和钾营养特性的差异,为培育钾高效甘蔗品种提供优异种质和理论依据。[方法]以钾钝感斑茅材料云南82-85和钾敏感斑茅材料海南92-109、广西87-3为供试材料,采用高钾(3 mmol·L-1,HK)和低钾(0.1 mmol·L-1,LK)2个营养液培养方法,研究钾素对不同基因型斑茅生长、根系形态、钾素累积和利用效率的影响。[结果]在低钾处理下,云南82-85地上部和根系干质量均低于高钾处理;海南92-109和广西87-3则不同,地上部干质量均低于高钾处理,分别为高钾处理的69.20%和76.76%,而根系干质量则高于高钾处理,分别为高钾处理的1.22和1.06倍。云南82-85在低钾和高钾处理下根系形态参数和根冠比均无显著差异,而海南92-109和广西87-3在低钾处理下根系总长、表面积、体积和根冠比均显著高于高钾处理。表明低钾胁迫促进了钾敏感材料海南92-109和广西87-3根系生长,增大了吸收面积。此外,广西87-3和海南92-109在低钾和高钾处理下,其根系钾含量均低于云南82-85,而地上部钾含量在高钾处理下显著高于云南82-85,分别高出1.2和1.3倍,达显著水平;在高钾和低钾处理下,这两个材料地上部和植株钾累积量均显著高于云南82-85。与钾敏感斑茅材料海南92-109和广西87-3相比,钾钝感斑茅材料云南82-85的钾素吸收、转运和利用效率均较低。[结论]在低钾胁迫条件下,钾敏感斑茅材料以较为发达的根系和更高效的钾素转运能力适应低钾胁迫。 展开更多
关键词 斑茅 基因型 钾 根系形态 营养效率
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新霉素阻断ELISA试剂盒的研制与应用 被引量：5
17
作者 王爱萍 李发弟 +6 位作者 胡骁飞 曾巧英 李金录 郭艳丽 赵启法 陈玉梅 范璐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期857-864,共8页
本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒。以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合... 本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒。以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 3;检测范围为1.0～64.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.59μg.L-1,灵敏度为0.75μg.L-1,检测限为1.0μg.L-1。试剂盒除了和NEO阳性样品反应呈阳性外,与庆大霉素、链霉素、土霉素、沙丁胺醇、环丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他药物均无交叉反应性。奶样、饲料样及肉样的平均添加回收率为89.50%、89.58%和87.92%;平均批内和批间变异系数均小于15%,而且批间变异系数小于批内变异系数;基质对NEO-Kit的检测结果影响比较小;NEO-Kit在4℃可保存6个月以上。试剂盒和HPLC-MS-MS对牛奶中新霉素回收率没有显著差异(P≥0.05)。试剂盒和HPLC-MS-MS对饲料样检测结果也无显著差异(P≥0.05)。本研究成功研制出敏感、特异、准确的NEO检测试剂盒。 展开更多
关键词 新霉素 单克隆抗体 阻断ELISA 试剂盒
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小亚璃眼蜱4D8基因的克隆与原核表达 被引量：5
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作者 赵金国 曾巧英 +3 位作者 殷宏 刘爱红 李有全 罗建勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期461-464,共4页
根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8。测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边... 根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8。测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边缘革蜱4D8基因的核苷酸序列的同源性为89.2%。将此片段定向亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Hyaa4D8,表达并纯化重组蛋白,通过免疫印迹试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示,该重组蛋白是分子质量为45ku的融合蛋白,且表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 4D8基因 克隆 原核表达
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牛朊蛋白在CHO/dhfr-细胞中的稳定表达 被引量：4
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作者 丁耀忠 张杰 +6 位作者 刘永生 陈豪泰 曾巧英 马丽娜 马艳平 杨生海 殷宏 《江西农业学报》 CAS 2009年第4期101-103,共3页
从T载体上得到的目的基因和dhfr共扩增基因真核表达载体构建了pCI-PrP102。纯化后的重组质粒通过脂质体转染CHO/dhfr-细胞,经MTX加压筛选获得稳定表达的细胞株,间接免疫荧光试验检测到目的蛋白的表达。
关键词 牛朊蛋白 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO细胞 稳定表达
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奶牛肺外结核病的综合诊断与病原分离鉴定 被引量：4
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作者 许芳 田莉莉 +5 位作者 齐亚银 孙世雄 孙翔翔 剡根强 曾巧英 范伟兴 《中国动物检疫》 CAS 2017年第12期1-4,19,共5页
为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断... 为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断,然后对锁定的后期感染牛进行扑杀、剖检,采集病料进行病理学和病原学诊断。结果显示:用5种方法综合检测确诊的95头后期感染牛中,有84头(88.42%)剖检可见明显结核病变,其中12头(14.29%)的病变发生在肺和肺门淋巴结,72头(85.71%)的病变发生在肝、脾、肠系膜淋巴结等肺外组织器官;95头后期感染牛中,有54头病料培养阳性;阳性菌经Xpert MTB/RIF和Enigma鉴定,均为牛分枝杆菌。该研究结果表明:我国牛结核病存在肺结核和肺外结核两种,因而增加了牛结核病的诊治难度;牛结核病确诊仅靠单一检测方法十分困难,需运用多种免疫学方法进行综合诊断;该结果可以解释目前出现的检测阳性与肺部剖检病变结果不一致的困惑。 展开更多
关键词 牛结核病 综合诊断 病原学诊断 肺外结核
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