传染性单核细胞增多症患儿miRNA-146a和IRF-3的表达及临床意义

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作者 朱亮华 庄丽丽 金蕊 《海南医学院学报》 CAS 2021年第20期1541-1546,共6页

目的:探讨传染性单核细胞增多症患儿外周血中干扰素调节因子3(IRF-3)及miRNA-146a的表达水平及miRNA-146a对IRF-3表达的影响。方法:体内实验通过选取传染性单核细胞增多症患儿45例和健康对照者34例,运用Real-timePCR法检测外周血IRF-3和... 目的:探讨传染性单核细胞增多症患儿外周血中干扰素调节因子3(IRF-3)及miRNA-146a的表达水平及miRNA-146a对IRF-3表达的影响。方法:体内实验通过选取传染性单核细胞增多症患儿45例和健康对照者34例,运用Real-timePCR法检测外周血IRF-3和miRNA-146a的表达水平。体外实验通过转染miRNA-146a模拟物及其抑制剂检测miRNA-146a对IRF-3表达水平的影响。结果:与健康对照组相比,传染性单核细胞增多症患儿外周血IRF-3基因表达显著降低,差异有统计学意义(t=30.340,P<0.001),而且传染性单核细胞增多症患儿外周血miRNA-146a表达较健康对照组明显升高(t=34.659,P<0.001)。传染性单核细胞增多症患儿外周血IRF-3和miRNA-146a两者存在负相关性(r=-0.960,P<0.05)。在HeLa细胞中,转染miRNA-146a模拟物明显降低IRF-3 mRNA(t=8.270,P<0.001)及蛋白(t=46.170,P<0.001)表达,而miRNA-146a抑制剂明显上调IRF-3 mRNA(t=8.582,P<0.001)及蛋白(t=25.891,P<0.001)表达。结论:miRNA-146a可能参与EB病毒下调传染性单核细胞增多症患儿IRF-3基因的表达,而且参与传染性单核细胞增多症的发病。 展开更多

关键词 传染性单核细胞增多症 干扰素调节因子3 miRNA-146a

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ORMDL3剪接异构体的鉴定及在反复喘息患儿中的表达水平分析

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作者 朱亮华 袁文霄 金蕊 《临床肺科杂志》 2021年第6期877-880,共4页

目的对反复喘息儿童外周血中血清类粘蛋白1样蛋白3(ORMDL3)的剪接异构体ORMDL3-v1进行鉴定并对其表达水平进行分析。方法反复喘息儿童外周血提取RNA,根据ORMDL3-v1的mRNA序列,设计引物行5′-RACE实验,鉴定其是否存在。随后选择48名患有... 目的对反复喘息儿童外周血中血清类粘蛋白1样蛋白3(ORMDL3)的剪接异构体ORMDL3-v1进行鉴定并对其表达水平进行分析。方法反复喘息儿童外周血提取RNA,根据ORMDL3-v1的mRNA序列,设计引物行5′-RACE实验,鉴定其是否存在。随后选择48名患有反复喘息的5岁以下儿童,分为喘息A组28例和喘息B组20例;正常对照组选取的是32例正常体检的儿童,检测外周血ORMDL3-v1及其野生型ORMDL3基因的表达水平。同时计算ORMDL3-v1/ORMDL3的比值,并分析各组病例的临床特点。结果5′-RACE实验证实反复喘息儿童外周血中存在ORMDL3-v1的表达。正常对照组ORMDL3-v1及ORMDL3基因表达水平都显著低于喘息A组和B组(P<0.01),喘息B组ORMDL3的表达水平显著低于A组(P<0.01),喘息A组和B组ORMDL3-v1的表达水平在统计学上差异不明显(P>0.05)。喘息A组ORMDL3-v1/ORMDL3的比值与喘息B组无差异(P>0.05),二者均低于正常对照组(P<0.01)。结论ORMDL3-v1及ORMDL3的表达水平与5岁以下儿童的反复喘息密切相关。 展开更多

关键词 血清类粘蛋白1样蛋白3 剪接异构体 反复喘息 特应性

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CREB在反复喘息患儿中的表达及对ORMDL3基因表达的影响 被引量：1

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作者 金蕊 张振兴 +2 位作者 朱亮华 庄丽丽 陈筱青 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期980-983,共4页

目的探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在3岁以下反复喘息患儿中的表达水平及其对血清类黏蛋白1样蛋白3基因(ORMDL3)表达水平的影响。方法选取2017年6月至2019年6月就诊的3岁以下反复喘息儿童36例为病例组,另选取行健康体检的24例儿... 目的探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在3岁以下反复喘息患儿中的表达水平及其对血清类黏蛋白1样蛋白3基因(ORMDL3)表达水平的影响。方法选取2017年6月至2019年6月就诊的3岁以下反复喘息儿童36例为病例组,另选取行健康体检的24例儿童为健康对照组,使用荧光定量PCR法检测外周血CREB的表达水平。培养人支气管上皮细胞(BEAS-2B),使用双荧光素酶报告基因和荧光定量PCR法检测过表达和siRNA干扰CREB对BEAS-2B细胞ORMDL3基因启动子活性及m RNA表达水平的影响。结果病例组CREB表达水平高于健康对照组(P<0.001)。在BEAS-2B细胞中,过表达CREB能上调ORMDL3基因的启动子活性及m RNA表达水平(P<0.05);siRNA干扰CREB的表达后ORMDL3基因的启动子活性及m RNA表达水平均降低(P<0.05)。结论反复喘息患儿CREB表达增加,其可能通过调控ORMDL3基因的表达参与了反复喘息的发病。 展开更多

关键词 环磷腺苷效应元件结合蛋白 ORMDL3 反复喘息 儿童

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miRNA146a通过TRAF6下调IFNβ的表达 被引量：1

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作者 卜欣欣 朱亮华 《智慧健康》 2023年第19期27-30,共4页

目的探讨miRNA146a通过TRAF6下调IFNβ的表达情况。方法设计TRAF6基因3’UTR区miRNA146a结合位点的野生型引物,随后预测IRF-3及TRAF6基因3’UTR区域可能的miRNA结合位点,以人cDNA为模板,进行PCR目的片段扩增,将HeLa细胞在含10%胎牛血清... 目的探讨miRNA146a通过TRAF6下调IFNβ的表达情况。方法设计TRAF6基因3’UTR区miRNA146a结合位点的野生型引物,随后预测IRF-3及TRAF6基因3’UTR区域可能的miRNA结合位点,以人cDNA为模板,进行PCR目的片段扩增,将HeLa细胞在含10%胎牛血清的DMEM高糖培养液进行传代培养,并进行细胞RNA提取,逆转录,进行实时定量RT-PCR、免疫印迹实验。结果miRNA146a、miRNA23a、miRNA24k可上调IRF-3启动子活性,通过表达miRNA146a转染细胞检测IFNβ通路上游分子TRAF6、IRAK1、NF-κB,提示miRNA146a、TRAF6、IRAK1、NF-κB均明显下降,表达miRNA146a降低pGL3c-TRAF6-3UTR萤光素酶活性,干扰miRNA146a可上调萤光素酶活性,miRNA146a下调TRAF6表达,TRAF6 siRNA下调PolyI:C激活的IFNβ启动子活性,TRAF6 siRNA较对照能够显著增加miRNA146a对IFNβ启动子下调作用。结论IRF-3及IFNβ可能是EB病毒诱导宿主miRNA的调控靶点,为防治EB病毒相关疾病提供新的思路。 展开更多

关键词 miRNA146a TRAF6 IFNβ表达

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黑鱾消化系统的形态学及组织学研究 被引量：6

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作者 曹潇 孙敏 +2 位作者 朱亮华 张鼎元 徐善良 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期20-26,共7页

鱼类消化系统的组织结构特点与食性密切相关。为了探究岛礁性鱼类黑魢的消化生理特点,文章以黑鱾(Girella leonina)为研究对象,采用苏木精-伊红(H.E)染色法研究其消化系统的组织结构特点,探讨其组织结构特点与食性、环境适应性之间的相... 鱼类消化系统的组织结构特点与食性密切相关。为了探究岛礁性鱼类黑魢的消化生理特点,文章以黑鱾(Girella leonina)为研究对象,采用苏木精-伊红(H.E)染色法研究其消化系统的组织结构特点,探讨其组织结构特点与食性、环境适应性之间的相关性。结果显示:1)食道向腔内形成纵向6个粗大皱褶,该皱褶具明显横纹肌,扩张性较强,黏膜上皮间分布着黏液细胞,呈锥形;2)黑鱾为"V"形胃,可分为贲门部、胃体部和幽门部3个部分,胃腺横切面为圆形,管腔由数个腺细胞围成,胃肌层平滑肌层极厚,为内环肌层外纵肌层结构,其中胃体部固有层处胃腺最为发达,胃黏膜形成许多皱襞,幽门胃具多级分枝皱褶;3)幽门处分布有150多条分枝状盲囊,盲囊腔内充满黏膜褶,黏膜上皮由单层柱状上皮细胞组成,不具有杯状细胞;4)肝脏分为左右两叶,组织结构呈现出一般硬骨鱼类的共性,肝细胞体积较大,呈多边形,大小约为30μm;5)肠道具有4个肠曲,比肠长值约为1.52±0.06,介于植食性和肉食性鱼类之间,整个肠道均有大量杯状细胞分布,肠道内具发达的小肠绒毛凸起,绒毛基部上皮向固有层内陷形成肠腺,腺体开口于相邻绒毛基部之间,前中肠作为主要消化吸收场所,其绒毛数量和高度要大于后肠。文章研究了黑鱾消化系统组织学特征与其消化、吸收的关系,认为黑鱾消化系统具备典型杂食性鱼类消化系统的特征。 展开更多

关键词 黑鱾 消化系统 藻食性 组织学

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黑鱾卵巢发育的组织学研究 被引量：6

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作者 朱亮华 孙敏 +2 位作者 张鼎元 杨佳喆 徐善良 《应用海洋学学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期255-262,共8页

采用形态解剖学和石蜡组织切片方法,对黑鱾(Girella leonina)卵巢发育周期中各个时期卵母细胞的形态及组织学特征进行了研究.在此期间共采集到雌性黑鱾样本165尾,按照各个时相形态特征和卵巢周年变化情况,黑鱾卵子发生分为6个时相,卵巢... 采用形态解剖学和石蜡组织切片方法,对黑鱾(Girella leonina)卵巢发育周期中各个时期卵母细胞的形态及组织学特征进行了研究.在此期间共采集到雌性黑鱾样本165尾,按照各个时相形态特征和卵巢周年变化情况,黑鱾卵子发生分为6个时相,卵巢发育分为6个时期.周年观察发现,8~10月大部分鱼卵巢处于Ⅱ期;9月至翌年3月进入Ⅲ期,从1月份开始,卵母细胞内出现卵黄颗粒;翌年3~4月黑鱾卵巢进入Ⅳ期,并在4月发育至V期并开始排卵,排卵后一直到当年7月,卵巢退化吸收进入Ⅵ期,随后又回复至Ⅱ期.黑鱾在3周龄达到性成熟,性腺指数低,V期卵巢时平均为2.61%,每尾雌鱼绝对怀卵量仅有5×104~10×104粒,相对怀卵量为4 026粒/克(体重).黑鱾属于分批产卵类型鱼类,一年一次性成熟. 展开更多

关键词 海洋生物学 黑鱾 卵巢 组织学 怀卵量 产卵类型

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全站仪在检定立式金属罐容量中的应用 被引量：4

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作者 朱亮华 《地理空间信息》 2011年第3期173-174,177,共3页

介绍了全站仪在立式金属罐容量测量的应用,结合实际情况对测量前准备工作、测量过程、后期数据处理、注意事项等进行简单阐述。

关键词 全站仪 立式金属罐 容量检定

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81例小儿肺炎支原体肺炎临床分析 被引量：6

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作者 朱亮华 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1096-1097,共2页

关键词 小儿肺炎支原体肺炎 临床分析 小儿支原体肺炎 儿科住院患儿 严重并发症 常见疾病 临床资料 发病率

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重组蛋白酶抑制蛋白拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用

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作者 胡毓华 朱亮华 陆超 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期760-762,共3页

目的克隆分泌型白细胞蛋白酶抑制(SLPI)蛋白基因并表达人SLPI重组蛋白,探讨其拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用。方法抽提人外周血中性粒细胞mRNA,克隆SLPI基因,构建质粒,转染后抽提纯化蛋白,实验分组后,分别进行不同剂量的SLPI和内毒... 目的克隆分泌型白细胞蛋白酶抑制(SLPI)蛋白基因并表达人SLPI重组蛋白,探讨其拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用。方法抽提人外周血中性粒细胞mRNA,克隆SLPI基因,构建质粒,转染后抽提纯化蛋白,实验分组后,分别进行不同剂量的SLPI和内毒素(LPS)共处理中性粒细胞。A组:正常对照组(不予LPS和重组SLPI蛋白处理);B组:LPS处理组(加终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);C组:低剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.010 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);D组:中剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.050 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);E组:高剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.100 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS)。然后进行中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性实验、炎性介质释放实验以及转录因子STAT3活性实验,分别测定NE活性、炎性介质IL-6/IL-8表达量及转录因子STAT3的DNA结合活性。结果成功构建SLPI基因全长cDNA的真核表达载体,发现重组SLPI蛋白呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的NE活性[(17.78±0.54)nmol·L-1vs(5.46±0.12)nmol·L-1,P<0.05]。重组SLPI蛋白也显著抑制LPS诱导的炎性介质IL-6[(179.51±6.61)ng·L-1vs(63.13±4.55)ng·L-1,P<0.05]和IL-8[(192.98±7.65)ng·L-1 vs(103.42±4.76)ng·L-1,P<0.05]的释放及转录因子STAT3的DNA结合力升高。结论 SLPI可有效抑制NE活性,减轻炎性损伤。 展开更多

关键词 分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白 弹性蛋白酶 炎性介质 转录因子

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新生儿窒息血清NSE水平变化的临床研究

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作者 蒋惠娟 周艳 +1 位作者 邵小松 朱亮华 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1440-1441,共2页

目的探讨新生儿窒息血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的变化及临床意义。方法 31例窒息新生儿中,轻度窒息20例,重度窒息11例,胎龄37～41周,取生后24～48h内(治疗前)和第7～10天(治疗后)静脉血2ml,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测血清NSE。... 目的探讨新生儿窒息血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的变化及临床意义。方法 31例窒息新生儿中,轻度窒息20例,重度窒息11例,胎龄37～41周,取生后24～48h内(治疗前)和第7～10天(治疗后)静脉血2ml,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测血清NSE。结果治疗前重度窒息组和轻度窒息组血清NSE分别为(62.53±18.03)μg/L和(41.40±13.12)μg/L,均显著高于对照组(25.72±8.79)μg/L(P<0.01),重度组NSE较轻度组显著增高(P<0.01);治疗后轻度、重度组NSE均显著下降(P<0.01),轻度组恢复正常,重度组较治疗前有显著下降(P<0.01),但仍高于对照组和轻度组(P<0.01)。结论血清NSE可作为判断窒息后缺氧性脑损伤的有效指标。 展开更多

关键词 新生儿窒息 神经元特异性烯醇化酶

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锅炉补给水除盐系统制水量降低原因分析及处理

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作者 朱亮华 何红超 王立 《河南电力》 2013年第4期52-54,共3页

分析了两套除盐系列制水量降低的原因,通过对两套除盐系列阴、阳离子交换树脂的处理,消除了铁、有机物污染,以及可能的其它污染,提高了两列除盐的周期制水量。

关键词 树脂 污染 交换容量 周期制水量

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E2F1基因真核表达载体的构建及其对CD2AP启动子的影响

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作者 邹黎 金蕊 +4 位作者 任伟 王怡 朱亮华 李悦 周国平 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期129-131,共3页

目的构建E2F1基因真核表达质粒,并初步探讨E2F1对CD2相关蛋白(CD2AP)启动子的作用。方法 RT-PCR扩增E2F1基因,构建含E2F1基因的重组真核表达质粒,重组质粒转染人胚肾HEK-293细胞。Western blot检测E2F1蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测E... 目的构建E2F1基因真核表达质粒,并初步探讨E2F1对CD2相关蛋白(CD2AP)启动子的作用。方法 RT-PCR扩增E2F1基因,构建含E2F1基因的重组真核表达质粒,重组质粒转染人胚肾HEK-293细胞。Western blot检测E2F1蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测E2F1过表达后人CD2AP启动子的活性。结果核酸序列分析及Western blot结果证实,成功构建含E2F1基因的重组真核表达质粒;过表达E2F1能增强CD2AP启动子的活性。结论 E2F1编码基因在HEK-293细胞中获得正确表达,且E2F1蛋白可促进人CD2AP启动子的转录活性。 展开更多

关键词 E2F1 CD2相关蛋白 肾小球硬化

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传染性单核细胞增多症患儿外周血IRF-3和Rta表达水平及其相关性分析 被引量：2

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作者 朱亮华 金蕊 +1 位作者 周国平 蒋莉 《江苏医药》 CAS 2015年第17期2023-2024,共2页

目的探讨传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血干扰素调节因子3(IRF-3)和EB病毒复制转录激活子(Rta)表达水平及其相关性。方法采用RT-PCR法检测IM患儿(A组,12例)和健康对照儿童(C组,12例)外周血IRF-3和Rta mRNA表达水平,分析A组IRF-3和Rt... 目的探讨传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血干扰素调节因子3(IRF-3)和EB病毒复制转录激活子(Rta)表达水平及其相关性。方法采用RT-PCR法检测IM患儿(A组,12例)和健康对照儿童(C组,12例)外周血IRF-3和Rta mRNA表达水平,分析A组IRF-3和Rta mRNA表达的相关性。结果 A组患儿外周血IRF-3mRNA表达水平低于C组,而Rta mRNA表达水平高于C组(P<0.01)。A组IRF-3与Rta mRNA表达呈负相关(r=-0.60,P<0.05)。结论 Rta mRNA可能参与EB病毒下调IM患儿IRF-3基因表达的过程。 展开更多

关键词 干扰素调节因子3 复制转录激活子 传染性单核细胞增多症

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SLPI基因真核表达质粒的构建和鉴定

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作者 朱亮华 金蕊 +2 位作者 陆超 周国平 胡毓华 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1247-1249,共3页

目的构建并鉴定含分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白(SLPI)基因的重组真核表达质粒。方法以HeLa细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出SLPI基因cDNA,将产物克隆进真核载体pcDNA3.1(+)内,构建含SLPI基因的重组真核表达质粒。将pcDNA-SLPI重组... 目的构建并鉴定含分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白(SLPI)基因的重组真核表达质粒。方法以HeLa细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出SLPI基因cDNA,将产物克隆进真核载体pcDNA3.1(+)内,构建含SLPI基因的重组真核表达质粒。将pcDNA-SLPI重组质粒和空载体pcDNA分别转染HeLa细胞,Western blot检测SLPI蛋白表达。结果核酸序列分析及双酶切鉴定SLPI已成功插入pcDNA3.1(+)载体中,转染pcDNA-SLPI的HeLa细胞中检测到高表达的SLPI蛋白。结论成功构建了含SLPI基因的重组真核表达质粒。 展开更多

关键词 分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白 真核表达载体

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循环水加酸实现高浓缩倍率技术运行的可行性研究

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作者 朱亮华 《水处理信息报导》 2011年第2期21-24,共4页

提高循环冷却水浓缩倍率的技术途径大致归纳为如下几种：①对补充水进行水质软化、脱盐 对补充水进行石灰处理和离子交换处理可对高硬度水进行软化，反渗透膜对高含盐水进行脱盐，可以从源头上软化水质，有利于循环水实现高浓缩倍率运... 提高循环冷却水浓缩倍率的技术途径大致归纳为如下几种：①对补充水进行水质软化、脱盐 对补充水进行石灰处理和离子交换处理可对高硬度水进行软化，反渗透膜对高含盐水进行脱盐，可以从源头上软化水质，有利于循环水实现高浓缩倍率运行。对严重缺水地区，采用中水、海水和苦咸水的企业可以考虑采用此技术。 展开更多

关键词 高浓缩倍率 循环水 技术 运行 水质软化 加酸 离子交换处理 循环冷却水

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婴儿巨细胞病毒性肝炎36例临床分析 被引量：7

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作者 封洁 庄丽丽 +2 位作者 朱亮华 邱灵芝 周国平 《江苏医药》 CAS 2015年第14期1646-1648,共3页

目的观察婴儿巨细胞病毒(CMV)性肝炎的临床特点及更昔洛韦的治疗效果。方法回顾性分析36例住院CMV肝炎婴儿的临床特点,评价28例应用更昔洛韦治疗疗效及其不良反应。结果 CMV肝炎婴儿均有肝功能异常,表现为血清谷丙转氨酶(94.4%)、谷草... 目的观察婴儿巨细胞病毒(CMV)性肝炎的临床特点及更昔洛韦的治疗效果。方法回顾性分析36例住院CMV肝炎婴儿的临床特点,评价28例应用更昔洛韦治疗疗效及其不良反应。结果 CMV肝炎婴儿均有肝功能异常,表现为血清谷丙转氨酶(94.4%)、谷草转氨酶(91.7%)及γ-谷氨酰转肽酶(52.8%)不同程度的升高,总胆红素多为轻中度升高(30.6%)。部分患儿出现黄疸(25.0%)、肝脏肿大(25.0%)和脾脏肿大(8.3%)。易合并心肌损害(83.3%)、肺炎或支气管炎(38.9%)。更昔洛韦治疗后患儿症状缓解,肝功能指标均有不同程度的下降,不良反应轻。结论婴儿CMV肝炎大部分预后良好;更昔洛韦治疗婴儿CMV肝炎疗效肯定,安全性好。 展开更多

关键词 婴儿 巨细胞病毒肝炎 更昔洛韦

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Ets-1基因真核表达载体的构建及其对人ORMDL3启动子的影响

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作者 邱灵芝 金蕊 +3 位作者 朱亮华 庄丽丽 封洁 周国平 《江苏医药》 CAS 北大核心 2014年第7期748-751,共4页

目的探讨Ets-1基因对人血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)启动子的影响。方法 RT-PCR扩增Ets-1基因,将产物克隆至真核载体pcDNA3.1(+)内,构建含Ets-1基因的重组真核表达质粒pcDNA-Ets-1。重组质粒转染人胚肾HEK-293细胞,Western blot检测Et... 目的探讨Ets-1基因对人血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)启动子的影响。方法 RT-PCR扩增Ets-1基因,将产物克隆至真核载体pcDNA3.1(+)内,构建含Ets-1基因的重组真核表达质粒pcDNA-Ets-1。重组质粒转染人胚肾HEK-293细胞,Western blot检测Ets-1蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测Ets-1过表达后人ORMDL3启动子的活性。结果核酸序列分析及Western blot结果证实,构建含Ets-1基因的重组真核表达质粒pcDNA-Ets-1成功;过表达Ets-1基因能增强人ORMDL3启动子的活性。结论成功构建了含Ets-1基因的重组真核表达质粒。Ets-1基因可促进人ORMDL3启动子的转录活性。 展开更多

关键词 ETS-1 血清类黏蛋白1样蛋白3 支气管哮喘

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全反式维甲酸通过Sp1/Sp3位点调节HEK-293细胞中CD2AP基因的表达

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作者 高珊 徐华国 +5 位作者 金蕊 邱灵芝 朱亮华 蒋莉 庄丽丽 周国平 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第9期999-1002,共4页

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚胎肾HEK-293细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达的影响。方法 ATRA作用HEK-293细胞后,采用RT-PCR和Western blot分别检测CD2AP mRNA及其蛋白的表达。将构建的不同Sp1/Sp3位点的定点突变、巢式缺失突变的... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚胎肾HEK-293细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达的影响。方法 ATRA作用HEK-293细胞后,采用RT-PCR和Western blot分别检测CD2AP mRNA及其蛋白的表达。将构建的不同Sp1/Sp3位点的定点突变、巢式缺失突变的CD2AP启动子质粒转染HEK-293细胞,检测报告质粒的荧光素酶活性。结果 ATRA明显上调HEK-293细胞中CD2AP mRNA和蛋白水平(P<0.05)。缺失突变及点突变研究显示,Sp1/Sp3-A、C位点在介导ATRA上调CD2AP过程中发挥重要作用。结论 ATRA通过Sp1/Sp3结合位点诱导HEK-293细胞中CD2AP的表达;ATRA对CD2AP基因缺陷肾病患者可能有治疗作用。 展开更多

关键词 全反式维甲酸 HEK-293细胞 CD2相关蛋白

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小鼠ORMDL3表达质粒的构建

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作者 封洁 庄丽丽 +2 位作者 朱亮华 邱灵芝 周国平 《江苏医药》 CAS 2015年第2期125-128,共4页

目的构建小鼠血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因的表达质粒,并在小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3细胞)中检测其过表达效果。方法根据小鼠ORMDL3蛋白的编码序列设计引物,以NIH3T3细胞cDNA为模板,PCR扩增ORMDL3的编码序列,亚克隆入真核表达载体... 目的构建小鼠血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因的表达质粒,并在小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3细胞)中检测其过表达效果。方法根据小鼠ORMDL3蛋白的编码序列设计引物,以NIH3T3细胞cDNA为模板,PCR扩增ORMDL3的编码序列,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ酶切位点之间,并测序鉴定。由脂质体介导将pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1-ORMDL3质粒分别瞬时转染NIH3T3细胞中,24h后收取细胞,抽取细胞全蛋白,Western blot检测ORMDL3蛋白的相对表达量。结果成功构建小鼠ORMDL3表达质粒pcDNA3.1-ORMDL3,该质粒瞬时转染至NIH3T3细胞内可有效增加ORMDL3蛋白表达2倍左右(P<0.05)。结论成功构建小鼠ORMDL3表达质粒,为后续小鼠动物模型研究ORMDL3基因的功能及致病机制提供依据。 展开更多

关键词 血清类黏蛋白1样蛋白3 哮喘

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