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龙头鱼ISSR-PCR反应体系的建立与优化
1
作者
褚梦洁
王铮
+2 位作者
林彦均
朱兰倩
胡静雯
《科技风》
2020年第32期145-147,共3页
以Tris平衡酚-氯仿法提取的龙头鱼基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板,采用单因素试验法,对影响PCR扩增体系的d NTPs、模板DNA、引物浓度和Taq DNA聚合酶4种试剂的用量作为独立因素进行优化,创建了最适合龙头鱼的ISSRPCR反应体系。结果表明:20...
以Tris平衡酚-氯仿法提取的龙头鱼基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板,采用单因素试验法,对影响PCR扩增体系的d NTPs、模板DNA、引物浓度和Taq DNA聚合酶4种试剂的用量作为独立因素进行优化,创建了最适合龙头鱼的ISSRPCR反应体系。结果表明:20μL的PCR反应液的组分和用量为含Mg2+的10×PCR Buffer 2.0μL,d NTPs2.5μL,Taq DNA聚合酶0.2μL,引物1.0μL,DNA模板1.4μL,双蒸水12.9μL时扩增条带最清晰。这一实验结果为龙头鱼后续开展ISSR遗传多样性分析奠定了基础。
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关键词
龙头鱼
ISSR-PCR
反应条件优化
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职称材料
题名
龙头鱼ISSR-PCR反应体系的建立与优化
1
作者
褚梦洁
王铮
林彦均
朱兰倩
胡静雯
机构
浙江海洋大学水产学院
出处
《科技风》
2020年第32期145-147,共3页
基金
浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划项目(2019R411013)
浙江海洋大学本科生发展性资助项目
浙江海洋大学“水产”省一流学科大学生创新性科研项目(11034060216)。
文摘
以Tris平衡酚-氯仿法提取的龙头鱼基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板,采用单因素试验法,对影响PCR扩增体系的d NTPs、模板DNA、引物浓度和Taq DNA聚合酶4种试剂的用量作为独立因素进行优化,创建了最适合龙头鱼的ISSRPCR反应体系。结果表明:20μL的PCR反应液的组分和用量为含Mg2+的10×PCR Buffer 2.0μL,d NTPs2.5μL,Taq DNA聚合酶0.2μL,引物1.0μL,DNA模板1.4μL,双蒸水12.9μL时扩增条带最清晰。这一实验结果为龙头鱼后续开展ISSR遗传多样性分析奠定了基础。
关键词
龙头鱼
ISSR-PCR
反应条件优化
分类号
S917 [农业科学—水产科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
龙头鱼ISSR-PCR反应体系的建立与优化
褚梦洁
王铮
林彦均
朱兰倩
胡静雯
《科技风》
2020
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