目的:探讨黄芪注射液对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响及机制。方法:将大鼠随机分成正常对照组、模型组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组及黄芪低剂量组。采用CLP致脓毒症模型,应用TUNEL法...目的:探讨黄芪注射液对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响及机制。方法:将大鼠随机分成正常对照组、模型组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组及黄芪低剂量组。采用CLP致脓毒症模型,应用TUNEL法及光镜、透射电镜观察CLP致脓毒症后36 h大鼠胸腺细胞的凋亡情况,并应用免疫组化法检测胸腺细胞Caspase-3和Bcl-2蛋白表达的变化。结果:CLP致脓毒症可导致大鼠胸腺细胞凋亡增多,电镜和光镜均显示其典型的形态学特征。CLP致腹腔感染后胸腺细胞Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达下降。黄芪注射液可减轻CLP致大鼠脓毒症后出现的胸腺细胞凋亡,减少胸腺细胞Caspase-3蛋白表达,同时提高胸腺细胞Bcl-2蛋白表达。结论:黄芪注射液可以减轻CLP致脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡,其机制与减少胸腺细胞Caspase-3表达、提高Bcl-2蛋白表达有关。展开更多
文摘目的:探讨黄芪注射液对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响及机制。方法:将大鼠随机分成正常对照组、模型组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组及黄芪低剂量组。采用CLP致脓毒症模型,应用TUNEL法及光镜、透射电镜观察CLP致脓毒症后36 h大鼠胸腺细胞的凋亡情况,并应用免疫组化法检测胸腺细胞Caspase-3和Bcl-2蛋白表达的变化。结果:CLP致脓毒症可导致大鼠胸腺细胞凋亡增多,电镜和光镜均显示其典型的形态学特征。CLP致腹腔感染后胸腺细胞Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达下降。黄芪注射液可减轻CLP致大鼠脓毒症后出现的胸腺细胞凋亡,减少胸腺细胞Caspase-3蛋白表达,同时提高胸腺细胞Bcl-2蛋白表达。结论:黄芪注射液可以减轻CLP致脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡,其机制与减少胸腺细胞Caspase-3表达、提高Bcl-2蛋白表达有关。
文摘目的探讨在缺氧缺血清环境下,脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)促进骨髓间充质干细胞(MSCs)血管新生的作用及其机制。方法 MSCs从大鼠骨髓中分离得到,分为:常氧条件下溶剂对照组(N-DMSO)、缺氧条件下溶剂对照组(H-DMSO)、20μM DMOG加药组(D-20μM)、100μM DMOG加药组(D-100μM)及500μM DMOG加药组(D-500μM),观察以下指标:(1)通过缺氧条件下CCK-8检测DMOG在20μM、100μM及500μM剂量下对MSCs的保护作用,确定DMOG的最佳剂量;(2)通过Matrigel实验观察DMOG促进MSCs血管新生的作用;(3)通过Western blot法检测血管新生通路相关蛋白表达。结果 (1)不同浓度组DMOG对缺氧损伤MSCs的影响:N-DMSO组OD值3.25±0.05,H-DMSO组2.23±0.14,D-20μM组2.68±0.43,D-100μM组3.11±0.25,D-500μM组3.23±0.04。与N-DMSO组比较,H-DMSO组OD值降低(P<0.01),与H-DMSO组比较,D-20μM组、D-100μM组、D-500μM OD值均升高(P<0.05或0.01)。(2)不同浓度组DMOG对正常MSCs的影响:D-20μM组3.19±0.02,D-100μM组3.15±0.06,D-500μM组2.51±0.08。与N-DMSO组比较,D-500μM组OD值降低(P<0.01),D-20μM组、D-100μM组与N-DMSO组比较差异均无统计学意义(均P>0.05),提示DMOG在20μM及100μM对细胞无毒性。(3)血管新生相关蛋白的表达:与H-DMSO组相比,D-100μM组缺氧3、6及24h HIF-1α均增加(1.44±0.32 vs 7.79±0.23,2.4±0.28 vs 3.51±0.79,0.93±0.37 vs2.46±0.07,P<0.05或0.01),p AKT则在缺氧6h增加(0.47±0.15 vs 0.71±0.03,P<0.05),VEGF在缺氧6、24h均增加(0.63±0.10 vs 0.87±0.14,0.42±0.06 vs 0.70±0.06,P<0.05或0.01),以缺氧24h最为显著。pm TOR/m TOR及p ERK/ERK蛋白两组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 DMOG通过抑制HIF-1α降解及促进AKT磷酸化提高缺氧环境下MSCs的血管新生能力。
