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枯草芽孢杆菌细菌素的分离、表达及稳定性分析
1
作者 于秀菊 张敏爱 +4 位作者 胡燕姣 朱芷葳 王海东 杨丽华 范阔海 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期323-333,共11页
旨在分离枯草芽孢杆菌及其所产细菌素,并分析重组表达后的细菌素的抑菌活性和稳定性。通过牛津杯扩散法筛选羊驼粪便中高产细菌素的芽孢杆菌;借助16S rRNA鉴定分离菌;采用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、SDS-PAGE、质谱分析等技术获得细菌素的... 旨在分离枯草芽孢杆菌及其所产细菌素,并分析重组表达后的细菌素的抑菌活性和稳定性。通过牛津杯扩散法筛选羊驼粪便中高产细菌素的芽孢杆菌;借助16S rRNA鉴定分离菌;采用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、SDS-PAGE、质谱分析等技术获得细菌素的氨基酸序列;利用大肠杆菌表达系统对细菌素进行体外表达,并利用牛津杯扩散法测定其抑菌活性和稳定性。结果显示,分离菌是一种枯草芽孢杆菌,命名为枯草芽孢杆菌SXAU18,其可产生抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌生长的细菌素;枯草芽孢杆菌SXAU18所产细菌素可能是分子量为10~20 ku的DarA蛋白和两种未知蛋白,属于类细菌素的范畴,将未知蛋白分别命名为BLIS SXAU181和182;经原核表达的BLIS SXAU181和182主要以可溶性上清蛋白形式表达,纯化后为单一条带;重组BLIS SXAU181蛋白没有抑菌活性,重组BLIS SXAU182蛋白具有良好的抑菌活性,且具有耐高温、耐酸碱、耐人工胃液和肠液的的特性。综上,本研究从枯草芽孢杆菌SXAU18分离到具有抑制革兰阳性菌生长活性的细菌素,且重组表达后的BLIS SXAU182具有良好的抑菌活性和和稳定性。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 细菌素 分离 表达 稳定性
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全基因组重测序探究晋南牛优势性状的分子基础
2
作者 贾雪纯 戎艳花 +1 位作者 朱芷葳 李鹏飞 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期1-10,共10页
【目的】探究晋南牛优势性状所基于的遗传基础,为后续晋南牛种质资源利用以及分子育种提供参考。【方法】采集12头健康的纯种晋南牛耳缘组织,提取基因组DNA进行全基因组重测序,将测序数据以及NCBI数据库12头红安格斯牛基因组数据比对到... 【目的】探究晋南牛优势性状所基于的遗传基础,为后续晋南牛种质资源利用以及分子育种提供参考。【方法】采集12头健康的纯种晋南牛耳缘组织,提取基因组DNA进行全基因组重测序,将测序数据以及NCBI数据库12头红安格斯牛基因组数据比对到牛参考基因组(ARS-UCD1.2),检测群体SNPs位点,采用ANNOVAR软件对变异位点进行注释;对晋南牛与红安格斯牛变异基因进行韦恩分析,筛选晋南牛特异性变异基因并进行GO功能和KEGG通路富集分析,采用Cytoscape软件将显著富集的变异基因进行功能互作分析。【结果】晋南牛基因组DNA测序共获取clean reads 2 621 153 222条,Q30平均值达93.5%,碱基分布均匀且无明显偏向性,平均测序深度11.19×,覆盖率(≥4×)平均值为92.64%;检测到SNPs位点117 773 201个,注释外显子区域获得nonsynonymous、stopgain/stoploss SNPs共405 506个,覆盖于16 690个基因,筛选出晋南牛特异性变异基因5 289个。GO功能和KEGG通路分析表明,基因广泛富集于线粒体、核糖体、细胞器膜相关生物过程以及氧化磷酸化、细胞色素P450(CYP)代谢通路中;线粒体呼吸链蛋白(NDU)、细胞色素C氧化酶(COX)、葡萄糖醛酸基转移酶(UGT)广泛富集于氧化磷酸化途径;CYP1A1、CYP2E1、UGT1A6、UGT1A1基因富集于细胞色素P450相关的多条代谢通路;GSTM2、GSTT1、GSTT2、GSTK1基因富集于谷胱甘肽(GST)代谢途径与细胞色素P450相关路径;线粒体核糖体蛋白(MRP)、核糖体蛋白(RP)基因家族子网络富集于核糖体蛋白形成过程。【结论】晋南牛特异性变异基因与细胞能量代谢显著相关,推断其对晋南牛饲料高效转化率具有潜在遗传效应。本研究结果为筛选显著影响育肥性状的SNPs标记,繁育高饲料转化率的晋南牛提供方向。 展开更多
关键词 晋南牛 重测序 SNP 线粒体 细胞能量代谢 饲料转化率
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晋南牛遗传结构特征及选择信号分析
3
作者 戎艳花 贾雪纯 +2 位作者 李鹏飞 田国富 朱芷葳 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期160-171,共12页
【目的】阐明晋南牛的遗传结构特征,通过选择信号检测挖掘与晋南牛经济性状相关的候选基因,探究其在进化过程中的受选择情况。【方法】对晋南牛和红安格斯牛全基因组测序数据进行分析,鉴定2个群体的单核苷酸多态性(single nucleotide po... 【目的】阐明晋南牛的遗传结构特征,通过选择信号检测挖掘与晋南牛经济性状相关的候选基因,探究其在进化过程中的受选择情况。【方法】对晋南牛和红安格斯牛全基因组测序数据进行分析,鉴定2个群体的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)标记,分析其在基因组的位置及其结构特征,基于SNP信息进行主成分分析(PCA)、构建状态同源矩阵(IBS);采用群体遗传分化指数(Fst)和核苷酸多样性比值(θπ)方法联合筛选晋南牛基因组受到强烈选择的区域,并对筛选到的受选择基因进行数量性状基因座(QTL)定位、GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】晋南牛群体SNPs位点主要分布于基因间区域,其次位于内含子区域。PCA和IBS分析结果表明,晋南牛和红安格斯牛2个群体间不存在杂交现象,且晋南牛群体中个体间遗传距离较远。通过Fst和θπ联合分析共筛选到188个潜在受选择区域。QTL分析结果表明晋南牛的选择信号多与生长、肉质及抗病性状相关。GO功能和KEGG通路富集分析显示,筛选到晋南牛强受选择的与经济性状相关的候选基因11个,包括组织蛋白酶1(CATHL1)、CATHL3、组织蛋白酶抗菌肽(CAMP)、CATHL4、RAS1激酶抑制因子(KSR1)、梅氏同源框1(MEIS1)、不规则片段极性蛋白1(DVL1)、多梳组无名指1(PCGF1)、RB转录辅助抑制因子1(RB1)、再生家族成员4(REG4)和卷曲类受体7(FZD7),在其外显子区域均检测到了SNP位点;除MEIS1、PCGF1、PZD7基因外,其他基因均存在非同义突变位点,且KSR1基因存在获得终止密码子的突变,CAMP基因存在获得终止密码子的突变和缺失终止密码子的突变;与红安格斯牛相比,晋南牛存在6个特有的受选择基因:CATHL1、CATHL4、CAMP、MEIS1、PCGF1、PZD7,主要与抗病性、生长和骨骼肌发育等相关。【结论】本研究从全基因组水平探究了晋南牛的遗传结构及选择信号特点,筛选出6个可能与晋南牛经济性状相关的候选基因,为后续晋南牛保种选育、特色性状形成的分子机制研究提供理论参考。 展开更多
关键词 全基因组重测序 晋南牛 红安格斯牛 遗传距离 选择信号
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生物技术专业免疫学课程混合式高阶特色教学探索
4
作者 朱芷葳 霍乃蕊 +3 位作者 张利环 唐中伟 王向英 许冬梅 《现代农业科技》 2023年第21期175-177,共3页
生物技术是快速发展的高科技之一,我国对生物技术专业人才的需求不断增加,人才培养模式也需要革新和探索。免疫学课程是生物技术专业的重要课程。本文对生物技术专业免疫学课程进行混合式高阶特色教学的探索,包括调整课程目标、改革教... 生物技术是快速发展的高科技之一,我国对生物技术专业人才的需求不断增加,人才培养模式也需要革新和探索。免疫学课程是生物技术专业的重要课程。本文对生物技术专业免疫学课程进行混合式高阶特色教学的探索,包括调整课程目标、改革教学模式、充实教学内容、完善线上教学资源、优化成绩评定方案等,使整个教学过程以学生为核心,注重培养学生的高阶思维和综合应用能力,将专业知识与能力有机地融为一体,从而有利于实现学生自主学习和实践能力提升的培养目标。 展开更多
关键词 生物技术专业 免疫学课程 教学改革 高阶思维 学习能力 实践能力
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营养转运相关基因调控区多态性与黄羽肉鸡饲料转化率关联分析 被引量：1
5
作者 王政 郭文婕 +6 位作者 程瑾 原一桐 罗榕 薛毅 张利环 朱芷葳 李慧锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2343-2352,共10页
旨在探讨多个营养转运相关基因调控区的多态性,并筛选影响肉鸡饲料转化率的关键变异位点。本研究采集了439只雄性黄羽肉鸡的血液DNA样本,利用PCR直接测序的方法在鸡群高、低饲料转化率的两尾样本组中(高FCR组>3.40,低FCR组<2.35,... 旨在探讨多个营养转运相关基因调控区的多态性,并筛选影响肉鸡饲料转化率的关键变异位点。本研究采集了439只雄性黄羽肉鸡的血液DNA样本,利用PCR直接测序的方法在鸡群高、低饲料转化率的两尾样本组中(高FCR组>3.40,低FCR组<2.35,样本数均为12个)对3个单糖转运基因(GLUT2、GLUT 5和SGLT 1)、8个氨基酸转运基因(B^(0)AT1、B^(0+)AT、CAT1、CAT2、LAT1、y^(+)LAT1、y^(+)LAT 2和rBAT)和1个营养调控基因(FGF 1)上游1 kb内的多态性位点进行检测。依据两尾样本组中基因型频率的差异,筛选潜在影响饲料转化率的变异位点。采用PCR-RFLP技术在全群样本中对变异位点进行基因分型,并分析这些多态性位点与饲料转化率等性状的关联性。结果显示,本研究在12个基因的上游1 kb范围内共寻找到111个SNPs位点,其中有8个SNPs位点在两尾样本组中的基因型频率存在差异,分别为GLUT 2基因的-379A>G,SGLT 1基因的-490G>A,B 0AT 1基因的-639T>C,rBAT基因的-46G>A、-90G>T、-180T>C、-235G>A和FGF 1基因的-884T>C位点。在全群样本中对GLUT 2基因的-379A>G、B 0AT 1基因的-639T>C和FGF 1基因的-884T>C位点的基因分型和关联分析发现,B 0AT 1基因的-639T>C位点与饲料转化率存在显著相关(P<0.05),TC基因型个体的饲料转化率显著低于TT和CC基因型个体(P<0.05),表现出杂合子优势。FGF 1基因的-884T>C位点也与饲料转化率显著相关(P<0.05),CC和TT基因型个体的饲料转化率显著低于TC基因型个体(P<0.05),此外,GLUT 2基因的-379A>G与饲料转化率或生长性状均无显著相关。本研究分析了多个营养转运相关基因调控区的遗传变异,为将这些变异位点作为遗传标记用于提高黄羽肉鸡饲料转化率的分子选育提供了依据。 展开更多
关键词 黄羽肉鸡 饲料转化率 关联分析 营养转运
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牛卵泡颗粒细胞CART与候选受体的分子对接及其功能
6
作者 郝琴琴 任静 +4 位作者 成俊丽 朱芷葳 许冬梅 贾雪纯 李鹏飞 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期461-467,共7页
通过同源建模预测牛卵泡颗粒细胞(GCs)可卡因-苯丙胺转录肽(CART)与候选受体ZMPSTE24的三维结构,运用分子对接技术分析二者的结合模式,探究其分子互作关系;选取3头健康成年母牛,分离GCs,转染TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24沉默序列,... 通过同源建模预测牛卵泡颗粒细胞(GCs)可卡因-苯丙胺转录肽(CART)与候选受体ZMPSTE24的三维结构,运用分子对接技术分析二者的结合模式,探究其分子互作关系;选取3头健康成年母牛,分离GCs,转染TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24沉默序列,提取总RNA,并采用q RT-PCR检测TEDDM1、AGTR2、CMKLR1、ZMPSTE24等4个候选受体沉默后m RNA的相对表达量;采用CCK-8法测定各试验组和对照组GCs增殖情况;采用ELISA法检测各组培养液中雌激素(E2)的质量浓度,研究此4个候选受体在牛卵泡GCs中的功能。结果表明:ZMPSTE24与CART存在1个结合位点、9个盐桥、17个氢键;4个候选受体试验组的m RNA相对表达量均极显著(P<0.01)低于si NC组和空白组的,表明TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24在GCs中沉默效果良好;TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24沉默后,各试验组的细胞增殖率和培养液中E2质量浓度均极显著(P<0.01)低于阳性对照组(不加CART)的。可见,4个候选受体基因沉默后,CART对GCs增殖和E2分泌仍具有抑制作用。 展开更多
关键词 牛 卵泡颗粒细胞 CART候选受体 分子对接
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西门塔尔牛无角性状的分子鉴定及应用
7
作者 郝琴琴 任静 +4 位作者 成俊丽 朱芷葳 许冬梅 贾雪纯 李鹏飞 《山西农业科学》 2023年第2期206-210,共5页
为鉴定西门塔尔牛有角和无角性状的相应基因型,为西门塔尔牛无角品系的培育提供数据基础,试验采集了103头无角西门塔尔牛、5头有角西门塔尔牛和5头无角安格斯牛颈静脉血,提取全血DNA后,通过PCR-测序法检测牛PC基因中P202ID突变位点的基... 为鉴定西门塔尔牛有角和无角性状的相应基因型,为西门塔尔牛无角品系的培育提供数据基础,试验采集了103头无角西门塔尔牛、5头有角西门塔尔牛和5头无角安格斯牛颈静脉血,提取全血DNA后,通过PCR-测序法检测牛PC基因中P202ID突变位点的基因型。分型与测序结果显示,108头西门塔尔牛P202ID位点的基因型与角型完全一致,其中,103头无角西门塔尔牛中4头为纯合子,基因型与无角安格斯牛一致,均为PC/PC,PC的基因频率为0.0370;82头为无角杂合子,基因型为PC/prs,其中,PC的基因频率为0.7593;剩余17头去角西门塔尔牛与5头有角西门塔尔牛基因型一致,均为prs/prs,prs的基因频率为0.2037。鉴定群体中PC的基因频率为0.4166,prs的基因频率为0.5834。卡方检验结果显示,P202ID基因型与检测群体中有无角性状具有极显著关联,可以利用P202ID位点对西门塔尔牛角型进行鉴定。 展开更多
关键词 西门塔尔牛 无角性状 P202ID位点 分子鉴定 卡方检验
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Mitf-M在羊驼皮肤组织的表达与序列分析及免疫组织化学定位 被引量：7
8
作者 朱芷葳 贺俊平 +2 位作者 于秀菊 程志学 董常生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期794-800,共7页
【目的】克隆羊驼皮肤组织表达的Mitf-M CDS序列,比较分析羊驼皮肤组织Mitf-M的特征,进一步定位分析Mitf-M蛋白表达的位置,为深入研究羊驼毛色基因表达机制奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增方法分段扩增Mitf-M CDS区,分别利用Clustal X... 【目的】克隆羊驼皮肤组织表达的Mitf-M CDS序列,比较分析羊驼皮肤组织Mitf-M的特征,进一步定位分析Mitf-M蛋白表达的位置,为深入研究羊驼毛色基因表达机制奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增方法分段扩增Mitf-M CDS区,分别利用Clustal X和BioEdit生物学软件对氨基酸序列进行多重序列比较分析,免疫组织化学技术对Mitf-M蛋白定位分析。【结果】羊驼皮肤组织表达的Mitf-M的CDS区由419个氨基酸组成,具有bHLH-zip转录家族的保守结构域,该基因与牛和犬亲缘关系最近,Mitf-M蛋白主要分布于羊驼皮肤组织毛球基底层细胞之间与毛乳头周围的黑色素细胞中。【结论】与其它物种相比较,羊驼皮肤组织表达的Mitf-M蛋白保守性很强,在进化过程中的变异不大,可见Mitf-M为毛发的色素沉积提供重要的物质基础。 展开更多
关键词 羊驼 皮肤 毛囊 Mitf-M PCR 免疫组织化学
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microRNAs在成年羊驼皮肤组织中的表达 被引量：10
9
作者 朱芷葳 贺俊平 +4 位作者 程志学 王海东 李鹏飞 乔德瑞 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1342-1345,共4页
本研究旨在分析成年羊驼皮肤中miRNAs的表达,探讨miRNAs在皮肤和毛囊中的调控作用。利用多物种miRNA芯片与成年羊驼皮肤组织miRNAs杂交,来分析成年羊驼皮肤组织中miRNAs的表达。结果显示有20个miRNAs信号在4个样本中表达量高,microRNAs... 本研究旨在分析成年羊驼皮肤中miRNAs的表达,探讨miRNAs在皮肤和毛囊中的调控作用。利用多物种miRNA芯片与成年羊驼皮肤组织miRNAs杂交,来分析成年羊驼皮肤组织中miRNAs的表达。结果显示有20个miRNAs信号在4个样本中表达量高,microRNAs在羊驼皮肤表达,提示它们可能参与了皮肤和毛囊的更新、生长和发育。 展开更多
关键词 MIRNA 皮肤 毛囊
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牛卵泡TEDDM1表达特点及其功能分析 被引量：4
10
作者 朱芷葳 郝庆玲 +4 位作者 侯淑宁 景炅婕 赵成萍 吕丽华 李鹏飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1189-1197,共9页
旨在研究牛卵泡跨膜附睾蛋白1(transmembrane epididymal protein 1,TEDDM1)的分子特征和立体结构,并结合TEDDM1在不同生理状态牛卵泡的表达特性分析其功能。本研究采集牛发情期第一卵泡波优势卵泡(dominant follicle,DF)和从属卵泡(sub... 旨在研究牛卵泡跨膜附睾蛋白1(transmembrane epididymal protein 1,TEDDM1)的分子特征和立体结构,并结合TEDDM1在不同生理状态牛卵泡的表达特性分析其功能。本研究采集牛发情期第一卵泡波优势卵泡(dominant follicle,DF)和从属卵泡(subordinate follicle,SF),分别分离颗粒细胞(granulosa cells,GCs),提取总RNA后反转录,设计牛 TEDDM 1特异性引物进行PCR扩增、克隆、测序,获得全CDS区后运用生物信息学方法对序列结构进行分析;以牛 RPLP 0作为内参基因,在DF和SF中使用qRT-PCR对 TEDDM 1的表达量进行检测;兔抗TEDDM1一抗检测TEDDM1在牛卵泡中的表达和定位。结果表明, TEDDM 1基因CDS区全长903 bp,编码300个氨基酸,有7次跨膜的α螺旋结构,属于典型的G蛋白偶联受体,该基因氨基酸序列与非洲野牛( Bison bison bison )序列相似性最高,为99.4%;功能域分析表明,TEDDM1分子中存在未知功能结构域,蛋白家族716(domains of unknown function protein families 716,DUF716)结构域。qRT-PCR分析表明, TEDDM 1 mRNA在SF的表达量显著高于DF( P <0.05);免疫组化分析表明,TEDDM1在DF和SF的颗粒层和膜层细胞均有表达,特异性显色强度表明TEDDM1在SF颗粒层和膜层细胞表达量均高于DF。本研究为进一步探讨TEDDM1在牛卵泡发育过程中的调控作用及其在信号转导和激素调节中的功能提供了依据,为后期深入研究牛卵泡发育机理奠定基础。 展开更多
关键词 牛 卵泡 TEDDM1 G蛋白偶联受体 结构
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牛卵泡AGTR2序列结构及表达特性分析 被引量：5
11
作者 朱芷葳 侯淑宁 +3 位作者 郝庆玲 景炅婕 吕丽华 李鹏飞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1482-1490,共9页
【目的】研究牛卵泡发育过程中关键调控蛋白CART的候选受体AGTR2的分子特征和立体结构,并结合AGTR2在不同生理状态牛卵泡的表达特性分析其功能。【方法】同期发情处理后,经B超声波连续监测(每12 h一次)采集牛双侧卵巢,分离优势卵泡(domi... 【目的】研究牛卵泡发育过程中关键调控蛋白CART的候选受体AGTR2的分子特征和立体结构,并结合AGTR2在不同生理状态牛卵泡的表达特性分析其功能。【方法】同期发情处理后,经B超声波连续监测(每12 h一次)采集牛双侧卵巢,分离优势卵泡(dominant follicles,DF)和从属卵泡(subordinate follicles,SF);其中3头牛DF和SF分别分离颗粒细胞(granulosa cells,GCs),抽提总RNA后,经反转录、引物特异性扩增、胶回收及测序,获得AGTR2基因全CDS区;生物信息学方法对其序列结构、亲缘关系及立体结构进行分析;设计AGTR2和内参基因RPLP0 qRT-PCR引物,分析AGTR2在牛DF和SF的差异表达情况;另1头牛DF和SF经4%多聚甲醛固定后,设定阳性、阴性对照组和试验组,应用免疫组织化学技术对AGTR2进行表达和定位分析。【结果】AGTR2 CDS区全长1089 bp,编码362个氨基酸;牛卵泡AGTR2氨基酸序列与NCBI数据库获得的其他24种动物对应的氨基酸序列BLAST分析表明,该序列与印度水牛序列相似性最高(99.4%),与其他动物序列相似性为92.0%—98.9%;立体结构和功能域分析表明,AGTR2立体结构中包含有7个横跨细胞膜的平行的α螺旋结构,符合G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)的典型特征;qRT-PCR分析结果表明AGTR2 mRNA在DF的表达量极显著高于SF(P<0.01),且差异表达倍数达7.47倍;免疫组织化学分析结果表明AGTR2在牛DF和SF颗粒层、膜层细胞均有表达,特异性显色强度表明AGTR2在SF膜层细胞表达量高于DF。【结论】AGTR2属于G蛋白偶联受体,符合神经肽CART受体的基本特征;本试验为进一步研究AGTR2在牛卵泡发育过程中调控信号通路和激素分泌的机理奠定基础,同时,对后期鉴定CART的受体、深入阐明CART调控牛卵泡发育的作用机理具有重要意义。 展开更多
关键词 牛 卵泡发育 CART G蛋白偶联受体 AGTR2
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持家基因作为相对定量内标物的稳定性比较 被引量：24
12
作者 朱芷葳 董常生 《生物技术通讯》 CAS 2006年第5期807-809,共3页
定量PCR是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术,定量检测时常用编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶、β-肌动蛋白、28S和18SrRNA等的持家基因作为内部参照,这些基因被认为在某些类型细胞中的表达是恒定的。近年来,很多研究者发现上述持家... 定量PCR是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术,定量检测时常用编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶、β-肌动蛋白、28S和18SrRNA等的持家基因作为内部参照,这些基因被认为在某些类型细胞中的表达是恒定的。近年来,很多研究者发现上述持家基因的表达水平并不稳定,利用它们作为内标来定量并不准确。因此,在进行定量实验时应选择适当的2种或2种以上的内参基因,以减少检测标本间的差异。 展开更多
关键词 实时荧光定量反转录PCR 持家基因 定量检测
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miRNA在皮肤组织中的作用研究进展 被引量：2
13
作者 朱芷葳 李拴英 +2 位作者 李慧锋 李鹏飞 许冬梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期77-79,共3页
miRNA参与生命过程中的一系列重要进程,包括发育进程,造血过程,器官形成,凋亡,细胞增殖,甚至是肿瘤发生。近期的研究发现,miRNA在毛囊的形成及毛发的生长中起着重要的作用,这类小RNA作为一类新型的转录后调控小分子,所调控的靶向基因众... miRNA参与生命过程中的一系列重要进程,包括发育进程,造血过程,器官形成,凋亡,细胞增殖,甚至是肿瘤发生。近期的研究发现,miRNA在毛囊的形成及毛发的生长中起着重要的作用,这类小RNA作为一类新型的转录后调控小分子,所调控的靶向基因众多,为研究动物毛发形成提供了新的方向。 展开更多
关键词 MIRNA 皮肤组织 毛发
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PAX3转录因子在羊驼皮肤组织中的表达和定位分析 被引量：1
14
作者 朱芷葳 贺俊平 +3 位作者 于秀菊 李鹏飞 程志学 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期729-734,共6页
本研究旨在研究PAX3在羊驼皮肤组织中的表达和分布。利用免疫组织化学和Western blot技术研究PAX3转录因子在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达与分布。结果表明PAX3在毛球基底层细胞之间,毛乳头周围和毛根部都存在阳性表达,并在不同被... 本研究旨在研究PAX3在羊驼皮肤组织中的表达和分布。利用免疫组织化学和Western blot技术研究PAX3转录因子在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达与分布。结果表明PAX3在毛球基底层细胞之间,毛乳头周围和毛根部都存在阳性表达,并在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达存在显著差异(P<0.05)。结果提示PAX3参与了黑色素细胞的增殖、分化和迁移,PAX3与色素的形成相关。 展开更多
关键词 PAX3 黑色素细胞 羊驼
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大蒜素对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外增殖和迁移能力的影响 被引量：1
15
作者 朱芷葳 蓝吴涛 +5 位作者 马悦悦 李鹏飞 李宏 张磊 司文睿 冯江浩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期831-838,共8页
旨在研究不同浓度的大蒜素对色素形成关键基因小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)表达的影响,以及对B16F10细胞增殖和迁移的作用,为家养宠物及畜牧行业中的动物黑色素瘤治疗提供一个新思路。... 旨在研究不同浓度的大蒜素对色素形成关键基因小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)表达的影响,以及对B16F10细胞增殖和迁移的作用,为家养宠物及畜牧行业中的动物黑色素瘤治疗提供一个新思路。将添加不同浓度大蒜素的黑色素瘤B16F10细胞分为对照组(0μg·mL^(-1))和试验组(5、10、15、20μg·mL^(-1))。采用qRT-PCR检测B16F10细胞中MITF mRNA的表达水平;Western blot检测MITF蛋白质的表达水平。通过吸光度值计算细胞的增殖率,进而确定不同浓度大蒜素对细胞增殖的抑制情况。不同浓度大蒜素处理B16F10细胞42 h后,采用细胞划痕评价细胞迁移能力。结果显示,随大蒜素浓度升高,B16F10细胞中色素形成关键基因MITF mRNA的表达量逐渐降低;Western blot结果显示,MITF蛋白表达量呈浓度依赖性降低。在细胞增殖检测中,发现5、10、15、20μg·mL^(-1)大蒜素对B16F10细胞的增殖能力具有显著的抑制效果(P<0.001),且抑制率随浓度升高而加强。细胞划痕结果显示,大蒜素浓度在10、15、20μg·mL^(-1)时对细胞的迁移抑制较大。综上表明,大蒜素能够影响黑色素瘤B16F10细胞特异性标记基因MITF的表达,并抑制了黑色素瘤B16F10细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 B16F10细胞 MITF 大蒜素 增殖 迁移
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农林高等院校校企联合培养模式的探索与研究 被引量：2
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作者 朱芷葳 李慧锋 +3 位作者 张利环 许冬梅 李宏 牛颜冰 《轻工科技》 2015年第5期187-188,共2页
农林高等院校校企联合培养需要加强建设农林高等院校校企联合培养模式,加强对于教师的实践培养和对于学生的实践培养,从而形成有效的、互利共赢的长效合作机制,才能真正培养出适应农业发展的新型人才。
关键词 农林高等院校 校企合作 实践能力培养
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哺乳动物卵母细胞孤雌激活研究进展
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作者 朱芷葳 贺俊平 董常生 《草食家畜》 2006年第1期27-29,共3页
卵母细胞激活是核移植的关键技术,也是研究哺乳动物受精机制及发育机理的有效方法。本文主要阐述了卵母细胞孤雌激活的机制及不同哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展。
关键词 卵母细胞 孤雌激活
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real-time PCR将成为分子生物学研究的重要检测技术
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作者 朱芷葳 赫晓燕 +2 位作者 姜俊兵 范瑞文 董常生 《畜牧兽医科技信息》 2006年第3期25-26,共2页
关键词 real—timePCR技术 TAQMAN探针 分子生物学 检测技术
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羊驼MC1R基因克隆及其在不同毛色个体中表达水平研究 被引量：23
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作者 任玉红 任彬 +4 位作者 范瑞文 朱芷葳 杨勇 李辉 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期841-845,共5页
为了获取羊驼MC1R基因序列,探索MC1R基因表达水平与羊驼毛色之间的相关性,根据GenBank已发表序列(EU1358800)设计1对引物,以羊驼皮肤总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增并成功获得了中华白色羊驼MC1R基因cDNA序列,长度为1081 bp,编码317个... 为了获取羊驼MC1R基因序列,探索MC1R基因表达水平与羊驼毛色之间的相关性,根据GenBank已发表序列(EU1358800)设计1对引物,以羊驼皮肤总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增并成功获得了中华白色羊驼MC1R基因cDNA序列,长度为1081 bp,编码317个氨基酸,与已发表序列进行对比,同源性为99%,发现7处突变。根据所克隆序列设计引物,采用实时荧光定量PCR技术(QRT-PCR),分析MC1R基因在白色和棕色羊驼皮肤中的基因表达量,并对结果进行统计分析。结果表明:经过内参基因校正后,棕色羊驼皮肤中MC1R基因的相对表达量是白色羊驼相对表达量的4.32倍(P<0.01)。MC1R基因表达量的差异与羊驼毛色表型之间可能存在一定的相关性。 展开更多
关键词 羊驼 MC1R基因 克隆 QRT-PCR 基因表达水平
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β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位 被引量：17
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作者 于秀菊 董常生 +4 位作者 范阔海 贺俊平 姜俊兵 朱芷葳 董彦君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期335-340,共6页
旨在研究β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色的关系。以成年白色和棕色羊驼为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术、Western blot和免疫组织化学技术,对β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤中mRNA、蛋白表达水平和定位... 旨在研究β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色的关系。以成年白色和棕色羊驼为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术、Western blot和免疫组织化学技术,对β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤中mRNA、蛋白表达水平和定位进行研究。实时荧光定量PCR结果显示,β-catenin在棕色羊驼皮肤组织中的相对基因表达量是白色羊驼皮肤组织的1.662倍;Western blot结果显示,羊驼皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约85 ku与兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼;免疫组织化学结果显示,β-catenin在羊驼皮肤的表皮、毛乳头、毛根鞘和皮脂腺中表达,根据光密度值得出,除皮脂腺之外,在表皮、毛乳头和毛根鞘的表达差异极显著(P<0.01)。结果提示β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤组织中定位以及表达的差异,表明β-catenin参与毛色形成。 展开更多
关键词 Β-CATENIN 羊驼 实时荧光定量PCR WESTERN BLOT 免疫组织化学
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