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小白链霉菌全细胞转化L-赖氨酸合成ε-聚赖氨酸的体系构建与优化
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作者 朱道君 刁文娇 +4 位作者 张佳微 王靓 张宏建 张建华 陈旭升 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2024年第1期29-36,共8页
小白链霉菌(Streptomyces albulus)是天然抗菌肽ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)的主要生产菌株。为了提高小白链霉菌生产ε-PL效率,该文构建并优化了全细胞转化L-赖氨酸合成ε-PL体系:葡萄糖质量浓度80 g/L,菌龄12 h,反应温度30℃... 小白链霉菌(Streptomyces albulus)是天然抗菌肽ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)的主要生产菌株。为了提高小白链霉菌生产ε-PL效率,该文构建并优化了全细胞转化L-赖氨酸合成ε-PL体系:葡萄糖质量浓度80 g/L,菌龄12 h,反应温度30℃,L-赖氨酸质量浓度15 g/L,柠檬酸浓度15 g/L,初始反应p H 4.0,硫酸铵质量浓度6 g/L,湿菌体量为1900 g/L。基于该转化体系,实现小白链霉菌在96 h合成ε-PL产量和底物转化率达到13.80 g/L和38.9%,分别是常规摇瓶发酵的4.1、3.2倍。最后,在小白链霉菌中异源表达来自大肠杆菌的L-赖氨酸特异性通透蛋白基因lysp,获得的重组菌S.albulus OE-lysp实现L-赖氨酸利用能力和底物转化率较出发菌株分别提升26%和33%,ε-PL产量增加至17.21 g/L,约为常规摇瓶发酵ε-PL产量的6.4倍,这是文献报道的最高摇瓶规模ε-PL产量。该研究结果一方面说明了通过全细胞转化L-赖氨酸生产ε-PL的可行性,另一方面为S.albulus转化大宗氨基酸L-赖氨酸生产高值ε-PL奠定了坚实的技术基础,具有重要的理论意义和经济价值。 展开更多
关键词 小白链霉菌 Ε-聚赖氨酸 全细胞转化 异源表达 L-赖氨酸通透蛋白
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过表达L-赖氨酸合成途径关键基因和ε-聚赖氨酸合成酶基因对ε-聚赖氨酸合成的影响 被引量:3
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作者 张重阳 杨昊 +5 位作者 朱道君 柳天一 王靓 张宏建 张建华 陈旭升 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1-9,共9页
ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)是小白链霉菌(Streptomyces albulus)产生的一种具有广谱抑菌活性的次级代谢产物,作为一种新型天然食品防腐剂在食品工业领域获得了广泛应用。通过代谢工程手段提高ε-PL生产菌的产物合成能力是降低... ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)是小白链霉菌(Streptomyces albulus)产生的一种具有广谱抑菌活性的次级代谢产物,作为一种新型天然食品防腐剂在食品工业领域获得了广泛应用。通过代谢工程手段提高ε-PL生产菌的产物合成能力是降低ε-PL生产成本的有效手段,但目前关于ε-PL生物合成的关键代谢节点和调控机制还不清晰,因此还缺乏有效的靶基因。该研究基于文献挖掘了5个L-赖氨酸合成途径关键基因pyc(丙酮酸羧化酶基因)、ppc(磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因)、zwf(6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因)、dapA(二氢吡啶二羧酸合成酶基因)、lysA(二氨基庚二酸脱羧酶基因)和1个ε-PL合成酶基因(pls),并借助基因过表达手段,寻找影响ε-PL生物合成的关键靶基因。研究结果发现,过表达ppc、pyc和pls能够有效促进S.albulus WG608合成ε-PL。在补料分批发酵方式下,过表达菌株OE-ppc、OE-pyc和OE-pls的ε-PL产量较出发菌株S.albulus WG608分别提高2.8%、9.9%和16.3%,单位菌体合成能力分别提高12.7%、21.8%和56.4%,葡萄糖转化率分别提升了12.3%、10.2%和24.1%。同时,还发现过表达pls结合流加L-赖氨酸是一种有效提高S.albulus发酵生产ε-PL的策略。该策略在5 L罐上补料分批发酵192 h后的ε-PL产量达到61.3 g/L。该研究结果可为后续利用代谢工程手段改造S.albulus提高ε-PL产量提供靶基因。 展开更多
关键词 Ε-聚赖氨酸 过表达 链霉菌 天然食品防腐剂 补料分批发酵
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论科技革命冲击下的建筑师 被引量:1
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作者 朱道君 《山西建筑》 2005年第9期144-145,共2页
阐述了当代建筑师正在意识到技术革命给自身的职业带来的危机,建筑师和技术发展之间的矛盾,从建筑理论发展史的角度分析二者的关系,并努力探求建筑师真正的责任和存在的意义。
关键词 建筑师 建构 科技革命
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斗笠为帆扇作舟,五湖四海任遨游——浅谈《粉段泥斗笠杯》的文化创意
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作者 朱道君 《陶瓷科学与艺术》 CAS 2023年第1期127-127,共1页
中国茶文化源远流长、博大精深,相较于其他国家喜欢使用金属器皿作为茶具,中国自宋朝以来便有了使用陶瓷器具来作为茶具的历史,其中斗笠杯是主要代表之一,它以合适的比例、完美的设计极大程度地满足了使用者的需求,虽然只是众多茶具中... 中国茶文化源远流长、博大精深,相较于其他国家喜欢使用金属器皿作为茶具,中国自宋朝以来便有了使用陶瓷器具来作为茶具的历史,其中斗笠杯是主要代表之一,它以合适的比例、完美的设计极大程度地满足了使用者的需求,虽然只是众多茶具中的一种,但是斗笠杯却被许多茶客奉为茶具尚品,大大满足了茶客对茶具的要求。 展开更多
关键词 斗笠杯 造型特征 文化创意
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肺癌日间手术操作流程与临床应用效果分析 被引量:25
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作者 董映显 朱道君 +4 位作者 车国卫 刘伦旭 周坤 马洪升 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期77-83,共7页
背景与目的日间手术的种类和数量在不断扩大,部分经过选择的肺癌患者进行日间手术,临床效果如何?基于加速康复外科(enhanced recovery after surgery, ERAS)理念和外科微创技术,探索肺癌患者日间手术的操作流程及其临床应用效果。方法选... 背景与目的日间手术的种类和数量在不断扩大,部分经过选择的肺癌患者进行日间手术,临床效果如何?基于加速康复外科(enhanced recovery after surgery, ERAS)理念和外科微创技术,探索肺癌患者日间手术的操作流程及其临床应用效果。方法选取2019年6月-2019年11月四川大学华西胸外科单个医疗组连续收治行肺手术患者150例,最终纳入研究患者48例,其中住院手术(inpatient surgery group, ISG)患者28例和日间手术患者(day surgery group,DSG)20例。分析两组患者平均住院日、住院费用及并发症等。结果平均住院日在日间手术组(1 d)显著低于住院手术组(7.7±2.8)d(P=0.000);平均住院费用在日间手术组(38,297.3±3408.7)$显著低于住院手术组(47,831.1±7376.1)$(P=0.000)。术后总体并发症发生率在日间手术组(5.0%)与住院手术组(3.6%)无统计学差异(P=0.812)。术后总体不良反应发生率日间手术组(10.0%)与住院手术组(17.9%)无统计学差异(P=0.729)。结论经过选择的肺癌患者行日间手术是可行的且能够加速康复。 展开更多
关键词 日间手术 住院手术 加速康复 肺癌
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隧道暗挖通过不良地质段施工技术
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作者 朱道君 《中文科技期刊数据库(全文版)工程技术》 2020年第6期0181-0182,共2页
在不良地段施工过程中,采取有效的方法提高整体施工水平是非常重要的,尤其是处于不良地段的隧道工程,通过暗挖施工技术的应用能够大大提高整体工程项目的施工进度以及施工质量。基于此本文结合实际以浅埋深挖法施工技术为研究背景,在探... 在不良地段施工过程中,采取有效的方法提高整体施工水平是非常重要的,尤其是处于不良地段的隧道工程,通过暗挖施工技术的应用能够大大提高整体工程项目的施工进度以及施工质量。基于此本文结合实际以浅埋深挖法施工技术为研究背景,在探讨该技术施工原则以及施工特点的同时,详细的对浅埋暗挖施工技术在不良地段隧道工程中的应用要点进行了深入研究,希望探讨之后可以给此类工程项目提供借鉴。 展开更多
关键词 隧道暗挖技术 不良地质段 施工要点分析
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关于大数据环境下工程造价信息化建设的思考
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作者 朱道君 《中文科技期刊数据库(全文版)工程技术》 2020年第10期0150-0151,共2页
近年来,我国加快提升发展科学技术水平的速度,加快推广信息化技术在各行业内的应用,工程造价领域对其应用范围也逐步扩大,在当今大数据环境下提升工程造价信息化建设进程,能使我国工程造价水平大幅提升,优化工程造价的传统模式,全面提... 近年来,我国加快提升发展科学技术水平的速度,加快推广信息化技术在各行业内的应用,工程造价领域对其应用范围也逐步扩大,在当今大数据环境下提升工程造价信息化建设进程,能使我国工程造价水平大幅提升,优化工程造价的传统模式,全面提升工程造价整体效率。但是在信息化建设普及的过程中凸显出许多问题,本文主要论述大数据环境下发展工程造价信息化建设的重要意义、发展中显现的问题、应用大数据技术的重要性和对凸显问题的应对举措进行论述,旨在为行业发展奉献力量。 展开更多
关键词 工程造价 大数据环境 信息化建设
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旅团党委班子履行新使命应着重把握的几个问题
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作者 朱道君 《基层政治工作研究》 2006年第3期7-7,共1页
胡主席关于我军“三个提供、一个发挥”的历史使命论述,是加强新世纪新阶段军队建设的科学指南。旅团党委班子作为基层建设的“一线指挥部”,必须切实强化忠实履行新使命的政治责任感,牢固确立新使命在部队建设中的指导地位,自觉按... 胡主席关于我军“三个提供、一个发挥”的历史使命论述,是加强新世纪新阶段军队建设的科学指南。旅团党委班子作为基层建设的“一线指挥部”,必须切实强化忠实履行新使命的政治责任感,牢固确立新使命在部队建设中的指导地位,自觉按照新使命要求谋划部队建设、提高能力索质、狠抓工作落实,推动部队全面建设的创新发展。 展开更多
关键词 党委班子 部队全面建设 部队建设 政治责任感 军队建设 基层建设 指挥部 论述
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小白链霉菌ε-聚赖氨酸降解酶生理功能分析 被引量:3
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作者 刁文娇 朱道君 +1 位作者 潘龙 陈旭升 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期3542-3556,共15页
【目的】研究小白链霉菌(Streptomyces albulus)中ε-聚赖氨酸降解酶(Pld)的分布特征和生理功能。【方法】利用生物信息学手段对已报道的ε-聚赖氨酸(ε-PL)产生菌的Pld进行挖掘和分析,再通过遗传学方法对小白链霉菌M-Z18基因组中存在... 【目的】研究小白链霉菌(Streptomyces albulus)中ε-聚赖氨酸降解酶(Pld)的分布特征和生理功能。【方法】利用生物信息学手段对已报道的ε-聚赖氨酸(ε-PL)产生菌的Pld进行挖掘和分析,再通过遗传学方法对小白链霉菌M-Z18基因组中存在的两种pld进行敲除、回补和过表达,最后研究重组菌降解ε-PL能力、最小ε-PL抑制浓度(MIC)及其合成ε-PL情况。【结果】PldⅠ和PldⅡ广泛且同时分布于小白链霉菌中,蛋白序列高度保守;PldⅠ、PldⅡ在小白链霉菌M-Z18中均能行使降解ε-PL的功能,但PldⅡ降解活性占主导地位且PldⅠ和PldⅡ对降解ε-PL具有协同作用;pldⅠ、pldⅡ过表达重组菌对ε-PL的MIC值显著提高,其中双过表达pldⅠ和pldⅡ菌株对ε-PL的MIC值是出发菌株的2.19倍。构建的pld重组菌与出发菌株相比,在考察pH值范围内(pH 3.0–5.5)的ε-PL产量未表现出显著差异。【结论】小白链霉菌中广泛分布PldⅠ和PldⅡ且序列高度保守,主要生理功能是保护小白链霉菌在中性环境中免受自身产物ε-PL的抑制。 展开更多
关键词 小白链霉菌 Ε-聚赖氨酸 ε-聚赖氨酸降解酶 基因敲除
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