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实时荧光定量聚合酶链反应对乙型肝炎病毒DNA的检验效果
被引量:
1
1
作者
李书轻
刘丹
+1 位作者
王亚
何俊美
《实用检验医师杂志》
2023年第2期159-162,共4页
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对乙型肝炎(乙肝)患者进行乙肝病毒(HBV)DNA检验的效果。方法选择2020年9月—2022年10月在菏泽市第三人民医院进行健康体检的1000名受检者作为研究对象,其中500名纳入对照组,依托酶联免疫吸附法(E...
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对乙型肝炎(乙肝)患者进行乙肝病毒(HBV)DNA检验的效果。方法选择2020年9月—2022年10月在菏泽市第三人民医院进行健康体检的1000名受检者作为研究对象,其中500名纳入对照组,依托酶联免疫吸附法(ELISA)法对HBV-DNA开展检测操作;其余500名纳入观察组,运用实时荧光定量PCR法对HBV-DNA开展检测操作,比较两组HBV标志物[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝炎e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检出率,分析不同阳性组合分布情况。结果观察组的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均明显高于对照组(HBsAg:1.40%比0.20%,HBsAb:1.80%比0.40%,HBeAg:1.80%比0.20%,HBeAb:1.20%比0.00%,HBcAb:1.40%比0.00%,均P<0.05)。观察组的大三阳(HBsAg、HbeAg、HbcAb均阳性)、小三阳(HBsAg、HbeAb、HbcAb均阳性)检出率均明显高于对照组(大三阳:1.60%比0.20%,小三阳1.40%比0.20,均P<0.05)。对照组和观察组HBsAg及HBcAb均阳性、HBsAg及HBeAg均阳性、五项均阳性的检出率比较差异均无统计学意义(HBsAg及HBcAb均阳性:0.20%比0.20%,HBsAg及HBeAg均阳性:0.00%比0.20%,五项均阳性:0.20%比0.40%,均P>0.05)。结论应用实时荧光定量PCR法开展对HBV-DNA的检测效果较为突出,有较高的准确度,与ELISA相比应用价值理想。
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关键词
乙型肝炎
酶联免疫吸附试验
实时荧光定量聚合酶链反应
乙型肝炎表面抗原
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职称材料
结核分枝杆菌抗毒素higA的原核表达及多克隆抗体制备
被引量:
1
2
作者
刘丹
伊正君
+2 位作者
付玉荣
李书轻
杨珊珊
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期972-976,981,共6页
目的克隆编码结核分枝杆菌抗毒素基因hig A并在大肠杆菌中表达,纯化hig A蛋白后,制备兔抗hig A的多克隆抗体。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增hig A基因;构建重组表达质粒p ET-32a(+)-hig A;筛选出阳性重组质粒后,转化大肠...
目的克隆编码结核分枝杆菌抗毒素基因hig A并在大肠杆菌中表达,纯化hig A蛋白后,制备兔抗hig A的多克隆抗体。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增hig A基因;构建重组表达质粒p ET-32a(+)-hig A;筛选出阳性重组质粒后,转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western blot法鉴定目的蛋白的表达;以纯化的hig A蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗hig A的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果成功扩增出了hig A基因,克隆于载体p ET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后能成功诱导hig A蛋白[相对分子质量(Mr)36 630]的表达;利用纯化的hig A蛋白免疫新西兰大白兔后,能有效地刺激特异性hig A抗体的产生,抗体的效价达到1∶3200以上。结论成功在大肠杆菌中表达出hig A蛋白,并制备出效价及特异性良好的兔抗hig A多克隆抗体。
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关键词
结核分枝杆菌
毒素抗毒素系统
higA
多克隆抗体
原文传递
结核分枝杆菌毒素蛋白higB的原核表达及分析
3
作者
刘丹
伊正君
+2 位作者
付玉荣
李书轻
杨珊珊
《潍坊医学院学报》
2015年第4期246-249,共4页
目的克隆编码结核分枝杆菌毒素基因higB并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增higB基因;构建重组表达质粒pET-32a(+)-higB;筛选出阳性重组质粒后转化大肠杆菌,诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western-blot...
目的克隆编码结核分枝杆菌毒素基因higB并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增higB基因;构建重组表达质粒pET-32a(+)-higB;筛选出阳性重组质粒后转化大肠杆菌,诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果成功扩增出了higB基因,克隆于载体pET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后higB蛋白没有发生表达。结论已成功构建结核分枝杆菌毒素基因higB的原核表达栽体,但大肠杆菌BL21不能表达出higB蛋白。
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关键词
结核分枝杆菌
毒素抗毒素系统
蛋白表达
下载PDF
职称材料
题名
实时荧光定量聚合酶链反应对乙型肝炎病毒DNA的检验效果
被引量:
1
1
作者
李书轻
刘丹
王亚
何俊美
机构
菏泽市第三人民医院检验科
出处
《实用检验医师杂志》
2023年第2期159-162,共4页
文摘
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对乙型肝炎(乙肝)患者进行乙肝病毒(HBV)DNA检验的效果。方法选择2020年9月—2022年10月在菏泽市第三人民医院进行健康体检的1000名受检者作为研究对象,其中500名纳入对照组,依托酶联免疫吸附法(ELISA)法对HBV-DNA开展检测操作;其余500名纳入观察组,运用实时荧光定量PCR法对HBV-DNA开展检测操作,比较两组HBV标志物[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝炎e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检出率,分析不同阳性组合分布情况。结果观察组的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均明显高于对照组(HBsAg:1.40%比0.20%,HBsAb:1.80%比0.40%,HBeAg:1.80%比0.20%,HBeAb:1.20%比0.00%,HBcAb:1.40%比0.00%,均P<0.05)。观察组的大三阳(HBsAg、HbeAg、HbcAb均阳性)、小三阳(HBsAg、HbeAb、HbcAb均阳性)检出率均明显高于对照组(大三阳:1.60%比0.20%,小三阳1.40%比0.20,均P<0.05)。对照组和观察组HBsAg及HBcAb均阳性、HBsAg及HBeAg均阳性、五项均阳性的检出率比较差异均无统计学意义(HBsAg及HBcAb均阳性:0.20%比0.20%,HBsAg及HBeAg均阳性:0.00%比0.20%,五项均阳性:0.20%比0.40%,均P>0.05)。结论应用实时荧光定量PCR法开展对HBV-DNA的检测效果较为突出,有较高的准确度,与ELISA相比应用价值理想。
关键词
乙型肝炎
酶联免疫吸附试验
实时荧光定量聚合酶链反应
乙型肝炎表面抗原
Keywords
Hepatitis B
Enzyme linked immunosorbent assay
Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction
Hepatitis B surface antigen
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
下载PDF
职称材料
题名
结核分枝杆菌抗毒素higA的原核表达及多克隆抗体制备
被引量:
1
2
作者
刘丹
伊正君
付玉荣
李书轻
杨珊珊
机构
潍坊医学院临床检验诊断学教研室
潍坊医学院附属医院检验科山东省临床检验诊断学高校重点实验室
潍坊医学院基础医学院病原生物学教研室
菏泽市第三人民医院检验科
中国人民解放军第
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期972-976,981,共6页
基金
国家自然科学基金(30972639
81170080)
文摘
目的克隆编码结核分枝杆菌抗毒素基因hig A并在大肠杆菌中表达,纯化hig A蛋白后,制备兔抗hig A的多克隆抗体。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增hig A基因;构建重组表达质粒p ET-32a(+)-hig A;筛选出阳性重组质粒后,转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western blot法鉴定目的蛋白的表达;以纯化的hig A蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗hig A的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果成功扩增出了hig A基因,克隆于载体p ET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后能成功诱导hig A蛋白[相对分子质量(Mr)36 630]的表达;利用纯化的hig A蛋白免疫新西兰大白兔后,能有效地刺激特异性hig A抗体的产生,抗体的效价达到1∶3200以上。结论成功在大肠杆菌中表达出hig A蛋白,并制备出效价及特异性良好的兔抗hig A多克隆抗体。
关键词
结核分枝杆菌
毒素抗毒素系统
higA
多克隆抗体
Keywords
Mycobaeterium tubercu/osis
toxin-antitoxin system
higA
polyclonal antibody
分类号
R378.9 [医药卫生—病原生物学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
结核分枝杆菌毒素蛋白higB的原核表达及分析
3
作者
刘丹
伊正君
付玉荣
李书轻
杨珊珊
机构
潍坊医学院临床检验诊断学教研室
潍坊医学院附属医院检验科
潍坊医学院病原生物学教研室
菏泽市第三人民医院检验科
中国人民解放军第
出处
《潍坊医学院学报》
2015年第4期246-249,共4页
基金
国家自然科学基金联合资助(课题编号:30972639
课题编号:81170080)
文摘
目的克隆编码结核分枝杆菌毒素基因higB并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增higB基因;构建重组表达质粒pET-32a(+)-higB;筛选出阳性重组质粒后转化大肠杆菌,诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果成功扩增出了higB基因,克隆于载体pET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后higB蛋白没有发生表达。结论已成功构建结核分枝杆菌毒素基因higB的原核表达栽体,但大肠杆菌BL21不能表达出higB蛋白。
关键词
结核分枝杆菌
毒素抗毒素系统
蛋白表达
Keywords
higB
Mycobaeterium tuberculosis
toxin-antitoxin system
higB
Protein expression
分类号
R378.9 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光定量聚合酶链反应对乙型肝炎病毒DNA的检验效果
李书轻
刘丹
王亚
何俊美
《实用检验医师杂志》
2023
1
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌抗毒素higA的原核表达及多克隆抗体制备
刘丹
伊正君
付玉荣
李书轻
杨珊珊
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
原文传递
3
结核分枝杆菌毒素蛋白higB的原核表达及分析
刘丹
伊正君
付玉荣
李书轻
杨珊珊
《潍坊医学院学报》
2015
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