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题名莱芜猪心脏cDNA文库的构建与鉴定
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作者
李付美
闫顺
曲志才
徐来祥
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机构
曲阜师范大学生命科学学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期139-142,共4页
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基金
国家科技基础条件平台建设项目(2005DKA21101-07)
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文摘
以莱芜猪心脏为供试材料,采用改进的异硫氰酸胍法提取心脏总RNA。通过SMART技术反转录合成全长cD-NA,经LD-PCR扩增后与pMD18-T载体连接并转化细菌DH5α,测定滴度和重组率,构建成莱芜猪心脏全长cDNA文库。经初步检测,原始文库的滴度为1.8×105CFU/mL,重组率约为94.4%。从原始文库随机挑取13个单菌落过夜培养,提取质粒,经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切,凝胶电泳显示插入片段大小在0.3-2.0kb之间。
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关键词
莱芜猪
心脏
CDNA文库
SMART技术
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Keywords
Laiwu pig Heart tissue eDNA library SMART technique
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分类号
S828
[农业科学—畜牧学]
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名莱芜猪肝脏组织全长cDNA文库的构建和鉴定
被引量：4
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作者
闫顺
李付美
曲志才
徐来祥
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机构
曲阜师范大学生命科学学院
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出处
《生物技术通讯》
CAS
2010年第3期397-400,共4页
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基金
国家科技基础条件平台建设项目(2005DKA21101-07)
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文摘
目的:构建莱芜猪肝脏组织全长cDNA文库,以便研究与莱芜猪优良性状相关的基因。方法:采用改良的异硫氰酸酸胍一步法制备总RNA;利用SMART技术,以PrimeScript反转录酶逆转录合成第一链cDNA,通过LD-PCR扩增获得cDNA双链;经蛋白酶K消化和CHROMA SPIN-400柱分级分离后,收集500 bp以上的cDNA片段,并与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,建成原始文库;随机挑取单菌落,用HindⅢ和EcoRⅠ进行双酶切鉴定重组子插入片段大小。结果:经鉴定,原始文库的滴度为2.8×105 cfu/mL,重组率约为98%,插入片段大小为0.5～2 kb,平均插入片段长度大于1 kb。结论:建立的cDNA文库质量良好,可以用于目的基因的筛选。
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关键词
莱芜猪
肝脏
CDNA文库
SMART技术
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Keywords
Laiwu pig
liver
cDNA library
switching mechanism at 5′ end of RNA transcript technique
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名基于信息熵的装配式建筑项目关键链缓冲区设置研究
被引量：3
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作者
彭军龙
李付美
刘泽鹏
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机构
长沙理工大学交通运输工程学院
岳阳市交通建设投资集团有限公司
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出处
《长沙理工大学学报（自然科学版）》
CAS
2021年第4期52-60,共9页
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基金
国家自然科学基金资助项目(51578080)
湖南省自然科学基金资助项目(2021JJ30746)。
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文摘
为解决经典关键链缓冲区设置方法中,因不确定性因素量化得不合理而造成的装配式建筑施工工期的延误问题,主要考虑影响装配式建筑施工进度的3类因素,利用信息熵理论提出一种基于复杂熵、多资源熵和项目团队熵的缓冲区设置方法;重点引入偏最小二乘法结构方程模型解决项目团队熵难以度量的问题,并给出缓冲区设置及修正的熵模型;通过算例仿真,验证了本研究缓冲区设置方法的可行性。该方法可有效地缩短装配式建筑项目的完工工期。
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关键词
装配式建筑
信息熵
关键链
缓冲区设置
PLS-SEM
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Keywords
prefabricated building
information entropy
critical chain
buffer setting
PLS-SEM
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分类号
TU712.1
[建筑科学—建筑技术科学]
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