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黄芩苷体外抗IBV QX株的作用研究 被引量:1
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作者 郭霄慧 李伟欣 +7 位作者 冯婉莹 赵鸿洁 李卫晴 王转转 陈光明 韩振兴 王冬喜 贾青辉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第1期96-102,共7页
为研究黄芩苷体外抗禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)QX株的效果,试验对IBV进行复壮与扩繁,制备原代鸡胚肾(CEK)细胞,并测定IBV对CEK细胞的TCID50和黄芩苷对CEK细胞的最大无毒浓度(MNTC);在MNTC基础上采用... 为研究黄芩苷体外抗禽传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)QX株的效果,试验对IBV进行复壮与扩繁,制备原代鸡胚肾(CEK)细胞,并测定IBV对CEK细胞的TCID50和黄芩苷对CEK细胞的最大无毒浓度(MNTC);在MNTC基础上采用CCK法测定不同浓度黄芩苷对IBV的有效抑制率,观察不同浓度黄芩苷对IBV导致的CEK细胞的细胞病变效应(CPE)的抑制情况,并采用qPCR法测定不同浓度黄芩苷对IBV N基因相对表达量的影响。结果表明:成功复壮并扩繁了IBV,其未被其他病毒污染,对CEK细胞的TCID50为1×10^(-4.75)/0.1 mL;黄芩苷对CEK细胞的MNTC为9.75 mg/L;该浓度黄芩苷对IBV的有效抑制率最高,为64.03%,能有效减轻IBV对CEK细胞的CPE;各浓度黄芩苷均可以极显著降低CEK细胞中IBV N基因相对表达量(P<0.01)。说明黄芩苷对CEK细胞的MNTC为9.75 mg/L,该浓度黄芩苷具有较好的体外抗IBV QX株的作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 禽传染性支气管炎病毒 鸡胚肾(CEK)细胞 最大无毒浓度 有效抑制率
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黄芩苷体外干扰IBV在CEK细胞内复制的转录组分析
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作者 郭霄慧 李卫晴 +6 位作者 王转转 刘一宁 李伟欣 陈光明 冯婉莹 贾青辉 张召兴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1473-1482,共10页
为了解黄芩苷干扰禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染鸡胚肾(CEK)细胞内复制前后细胞基因表达的差异性及表达情况,进一步揭示和分析黄芩苷体外干扰IBV在CEK细胞内复制的作用机制,IBV感染CEK细胞2h后,加入9.75mg/L的黄芩苷药液进行干扰,为黄... 为了解黄芩苷干扰禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染鸡胚肾(CEK)细胞内复制前后细胞基因表达的差异性及表达情况,进一步揭示和分析黄芩苷体外干扰IBV在CEK细胞内复制的作用机制,IBV感染CEK细胞2h后,加入9.75mg/L的黄芩苷药液进行干扰,为黄芩苷(H-IBV)组,同时设立细胞对照(Cell)组和IBV感染(IBV)组各3个复孔,培养36h后收集细胞样品进行有参转录组测序。结果H-IBV组与IBV组相比共有102个显著差异表达基因,其中显著上调基因48个,显著下调基因54个;通过基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库中的功能注释和通路富集发现,差异表达基因主要注释在细胞过程、生物调节、代谢等生物过程和病毒性传染病、信号转导与相互作用等二级通路中,其中CEK细胞内视黄醇代谢通路、磷脂转移到膜、IL-27介导的信号通路、MDA5/RIG-I和Toll样受体信号通路均显著富集,并且Ⅰ型干扰素及干扰素α的产生、抗病毒感染过程也均得到了正向调节,富集到核酸催化、免疫系统与反应和生物间相互反应的差异基因数较多;通过STRING网络互作图发现大部分免疫相关基因能够组成一个有36个节点且以IRF7、TLR3、STAT1为中心的相互作用网络。故黄芩苷作用后与IBV组对比的差异表达基因主要注释和富集在生物过程中,免疫系统与反应也被加强,通过正向调节MDA5/RIG-I受体信号通路中的IRF7和抑制Toll样受体信号通路中的TLR3信号转导为主,正调IL-27介导的通路和调控JAKSTAT等信号通路为辅,激活IRF7、TLR3、STAT等相关基因并且与对应的下游蛋白相互作用,促进IFN-α和调控细胞因子的表达,再加上对病毒的(防御)反应和病毒过程的负调控,从而起到干扰IBV在CEK细胞内复制的作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 鸡传染性支气管炎病毒 鸡胚肾(CEK)细胞 转录组
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