黏细菌来源硫胺素酶Ⅰ的生理功能探究

1

作者 齐梦祎 夏丞垚 +4 位作者 纪燕玲 黄彦 李周坤 叶现丰 崔中利 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期204-211,共8页

为探究硫胺素酶Ⅰ在黏细菌中的生理功能,选取Corallococcus sp.EGB、Myxococcus xanthus DK1622和Cystobacter sp.1404三种不同种属的黏细菌,研究3种黏细菌基因组中硫胺素合成与菌株生长发育的关系。结果显示,3种黏细菌基因组中均具有... 为探究硫胺素酶Ⅰ在黏细菌中的生理功能,选取Corallococcus sp.EGB、Myxococcus xanthus DK1622和Cystobacter sp.1404三种不同种属的黏细菌,研究3种黏细菌基因组中硫胺素合成与菌株生长发育的关系。结果显示,3种黏细菌基因组中均具有完整的硫胺素合成途径,且具有硫胺素合成前体嘧啶(4-amino-5-hydroxymethyl-2-methylpyrimidine,HMP)回收相关基因,但未发现硫胺素或其前体噻唑回收相关基因;HMP合成酶基因thiC上游存在的焦磷酸硫胺素核糖开关(TPP-riboswitch)可根据环境中硫胺素浓度调控thiC基因的转录水平。菌株DK1622及其硫胺素酶Ⅰ敲除突变株CL1003中分别插入thiC基因,构建突变菌株CL1006和CL1007,发现CL1006在无硫胺素培养基中需要额外添加硫胺素或HMP才能恢复生长,但相比于硫胺素处理组,HMP处理组菌落直径显著增加了9.0%;CL1007只能在添加HMP平板中生长,单独添加完整的硫胺素并不能使其恢复生长,但当硫胺素酶CcThi1和硫胺素共同添加时,CL1007的生长得到恢复。结果表明,黏细菌不直接利用外源硫胺素,但可通过硫胺素酶Ⅰ将其分解成嘧啶前体被利用。 展开更多

关键词 黏细菌 硫胺素 硫胺素酶Ⅰ thiC基因

下载PDF 职称材料

黏细菌捕食生物学研究进展及其在农业领域的应用潜力 被引量：12

2

作者 李周坤 叶现丰 +4 位作者 杨帆 黄彦 范加勤 王辉 崔中利 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期208-216,共9页

黏细菌(myxobacteria)是一类具有多细胞群体行为特征的捕食性微生物类群,能够以活的微生物细胞或者其他生物大分子作为食物获取营养,同时能够形成抗逆性强的子实体和黏孢子,从而使黏细菌具有良好的环境适应性。黏细菌对于植物病原真菌... 黏细菌(myxobacteria)是一类具有多细胞群体行为特征的捕食性微生物类群,能够以活的微生物细胞或者其他生物大分子作为食物获取营养,同时能够形成抗逆性强的子实体和黏孢子,从而使黏细菌具有良好的环境适应性。黏细菌对于植物病原真菌和细菌的捕食特性使其在植物病害防治方面具有重要的应用潜力,被视为是新的生防微生物类型。本文综述黏细菌对于微生物的捕食机制以及捕食行为的生态学功能,概述捕食性黏细菌作为一种新型的生防微生物在病害防治方面的应用潜力。在此基础上,也讨论目前黏细菌捕食生物学研究存在的问题,旨在为黏细菌捕食作用的深入研究及其在农业生产上的实际应用提供参考。 展开更多

关键词 黏细菌 捕食性微生物 生防微生物 植物病害防治

下载PDF 职称材料

根际微生物组组装与植物健康 被引量：7

3

作者 崔中利 叶现丰 +4 位作者 张宇 徐昌盛 李周坤 黄彦 曹慧 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期1-9,共9页

土壤微生物拥有高度多样化的群落结构,其通过与植物发生复杂的相互作用影响植物健康,也被称为植物的第二基因组。最近研究表明植物能通过改变根际分泌物的组成影响根际微生物群落的组装,反之,根际微生物群落组成的改变能够通过影响植物... 土壤微生物拥有高度多样化的群落结构,其通过与植物发生复杂的相互作用影响植物健康,也被称为植物的第二基因组。最近研究表明植物能通过改变根际分泌物的组成影响根际微生物群落的组装,反之,根际微生物群落组成的改变能够通过影响植物营养吸收和抵御生物及非生物胁迫的能力影响植物健康。除此之外,农艺管理也是影响土壤微生物群落组装方式的重要因素。但到目前为止,根际微生物与宿主植物及土壤微生物之间互作机制的研究尚不清楚。本文将从农艺管理和宿主植物对微生物群落组装的影响及根际微生物组对植物健康的影响进行总结,为增加作物产量提供机会。 展开更多

关键词 根际微生物组 植物健康 根际分泌物 植物-微生物相互作用 微生物群落组装

下载PDF 职称材料

Rhodococcus sp.T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶酶学性质及分离纯化 被引量：1

4

作者 董维亮 侯颖 +3 位作者 王飞 李周坤 黄彦 崔中利 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期78-84,共7页

[目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供... [目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供更多的理论依据。[方法]以酯酶的通用底物乙酸-1-萘酯作为定量测定胞内酯酶活力的底物,分析温度和p H值对酯酶活力和稳定性的影响,同时探讨金属离子对酯酶活力的影响;通过硫酸铵沉淀、疏水层析、DEAE离子交换层析和Superdex-200凝胶层析柱组合技术对精恶唑禾草灵酯酶进行分离纯化,计算了纯化过程中酯酶的比活力、纯化倍数和回收率。[结果]胞内酯酶最适反应p H值为8.0,在p H 4.0-10.0内处理24 h活性稳定;最适反应温度为42℃,在温度50℃以下处理30 min活性稳定;1.0 mmol·L^-1Ag^＋对酯酶活力有强烈的抑制作用。纯化后的酯酶比活力从0.058 U·mg^-1提高到21.5 U·mg^-1,纯化倍数为369.5倍,回收率为3%。纯化后的粗酶经SDS-PAGE电泳后至少有4条明显的蛋白条带,通过酶谱确定精恶唑禾草灵酯酶条带的相对分子质量为42.3×10^3。[结论]精恶唑禾草灵酯酶具有较好的酸碱稳定性和热稳定性,在精恶唑禾草灵污染土壤修复中可能具有较好的应用潜力。 展开更多

关键词 RHODOCOCCUS sp.T1 精恶唑禾草灵 分离纯化 酶学性质 酯酶酶谱

下载PDF 职称材料

一种检测2'-甲基-6'-乙基-2-氯乙酰苯胺水解酶活性的方法

5

作者 王飞 李周坤 +1 位作者 董维亮 崔中利 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期682-686,共5页

建立了一种快速测定Delftia acidovorans T3-6菌株2'-甲基-6'-乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)水解酶活性的方法。在20 mmol·L^(-1)Tris-HCl(p H值为7.0)缓冲液中,10~50μmol·L^(-1)的CMEPA水解产物2-甲基-6-乙基苯胺(MEA)... 建立了一种快速测定Delftia acidovorans T3-6菌株2'-甲基-6'-乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)水解酶活性的方法。在20 mmol·L^(-1)Tris-HCl(p H值为7.0)缓冲液中,10~50μmol·L^(-1)的CMEPA水解产物2-甲基-6-乙基苯胺(MEA)在铁氰化钾催化下与4-氨基安替比林反应生成紫红色物质,该物质在535 nm处的吸光度(y)与MEA浓度(x)呈正相关(y=0.014 6x-0.005 4,R2=0.998 8)。底物CMEPA、十二烷基硫酸钠(SDS)、甲醇等有机试剂以及1 mmol·L^(-1)金属离子对显色反应无显著影响,温度和p H值对显色反应影响显著。4-氨基安替比林显色法对菌株T3-6粗酶液酶活性的测定结果与二氯甲烷萃取-紫外分光光度法无显著差异。该方法也适用于其他苯胺苯酚类衍生物的测定。 展开更多

关键词 2-甲基-6-乙基苯胺(MEA) 4-氨基安替比林显色法 分光光度法 Delftia acidovorans T3-6

下载PDF 职称材料

聚氨酯塑料生物降解的研究现状 被引量：3

6

作者 江志通 陈雪 +3 位作者 闫新 李周坤 曹慧 崔中利 《生物加工过程》 CAS 2022年第4期439-449,共11页

目前,聚氨酯(PUR)塑料占据全球塑料市场的6%左右,然而,由于处置不合理,大量聚氨酯塑料被丢弃到环境当中,造成了严重的资源浪费和环境污染等问题。废弃塑料的资源再利用已成为各个国家关注的重要问题。废弃塑料处理主要包括掩埋、焚烧以... 目前,聚氨酯(PUR)塑料占据全球塑料市场的6%左右,然而,由于处置不合理,大量聚氨酯塑料被丢弃到环境当中,造成了严重的资源浪费和环境污染等问题。废弃塑料的资源再利用已成为各个国家关注的重要问题。废弃塑料处理主要包括掩埋、焚烧以及机械回收、物理化学和生物利用等。与传统物理和化学法的降级利用相比,生物法因其绿色安全和潜在的高值化利用而成为研究者关注的热点。然而,塑料高分子特殊的分子结构使得目前塑料生物处理依然存在诸多问题,难以实现规模化应用。本文综述了PUR的化学结构和PUR降解性微生物的筛选方法,并总结了PUR降解微生物和降解酶的研究现状以及评价其降解效果的方法,为推进PUR生物降解研究提供了一定参考。 展开更多

关键词 聚氨酯塑料 污染物资源回收 碳中和 生物降解 降解酶

下载PDF 职称材料

新疆农田土壤中粘细菌的分离鉴定及其捕食特性 被引量：4

7

作者 白欣禾 韩剑 +4 位作者 窦新玉 罗明 崔中利 李周坤 吕文 《新疆农业大学学报》 CAS 2022年第6期462-473,共12页

为探究新疆农田土壤中可培养粘细菌的多样性,从中筛选出具有高效捕食能力的粘细菌菌株。以新疆不同地区农田土壤为分离材料,采用兔粪诱导法和大肠杆菌诱导法从中分离纯化粘细菌,将形态鉴定与多位点序列分析相结合进行分类鉴定,确定其分... 为探究新疆农田土壤中可培养粘细菌的多样性,从中筛选出具有高效捕食能力的粘细菌菌株。以新疆不同地区农田土壤为分离材料,采用兔粪诱导法和大肠杆菌诱导法从中分离纯化粘细菌,将形态鉴定与多位点序列分析相结合进行分类鉴定,确定其分类地位,并以4种植物病原细菌:丁香假单胞菌丁香致病变种(Pseudomonas syringae pv.syringae)、西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)、梨锈水病菌(Dickeya fangzhongda)、胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)为靶标菌,通过平板捕食法测定粘细菌的捕食特性。结果表明,从采集到的134份土样中共分离到126株菌,经纯化后获得46株粘细菌纯培养物。这些菌株分属于4个属,粘球菌属(Myxococcus)34株,原囊菌属(Archangium)7株,孢囊杆菌属(Cystobacter)3株,珊瑚球菌属(Corallococcus)2株。捕食活性分析显示,本研究获得的粘细菌菌株具有广谱的捕食活性,但同一株粘细菌对不同种病原菌的捕食能力存在差异。初步筛选出3株粘细菌菌株WCH05、WCH03和HM02兼具广谱和高效捕食特性。研究表明,粘细菌在新疆农田土壤中分布广泛,粘球菌属(Myxococcus)是该地区可培养粘细菌菌群中的优势菌。 展开更多

关键词 新疆 农田土 粘细菌 分离鉴定 捕食特性

下载PDF 职称材料

以黏细菌为基础的微生物生理学教学内容革新及教学模式探索

8

作者 李周坤 纪燕玲 +3 位作者 叶现丰 刘园园 黄彦 崔中利 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3761-3771,共11页

微生物生理学是重要的微生物学专业基础课程。随着科学技术的不断进步,微生物生理学的研究领域不断拓展,“微生物生理学”课程教学内容与教学模式必须更新,以体现学科前沿最新成果,适应高等农业院校人才培养目标。作者通过2年的课程建设... 微生物生理学是重要的微生物学专业基础课程。随着科学技术的不断进步,微生物生理学的研究领域不断拓展,“微生物生理学”课程教学内容与教学模式必须更新,以体现学科前沿最新成果,适应高等农业院校人才培养目标。作者通过2年的课程建设,构建了以黏细菌为载体的“兴趣引导—理论传授—社会实践—综合考评”课程教学与评价体系;组织开展了以“黏细菌与农业应用”为话题的实践调查与互动讨论会。本文将课程教学基础理论与农业实践相结合,通过“微生物生理学”课程内容革新与教学模式探索,提高本科生独立思考与学以致用的能力,为培养高质量农业科技人才提供支撑。 展开更多

关键词 微生物生理学 教学模式 黏细菌 农业实践

原文传递

2种杉木人工林密度与立木生物量的研究 被引量：21

9

作者 黄贤松 吴承祯 +2 位作者 洪伟 李周坤 程周平 《福建林学院学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期102-105,共4页

以福建省福州白沙国有林场和南屿国有林场杉木人工林为研究对象,在立地条件相似、林分密度分别为1 300-1 500和2 200-2 400株.hm-2的杉木人工林中设置样地,选取样木进行分层取样测定不同器官生物量,分析林分密度与生物量的关系。结果表... 以福建省福州白沙国有林场和南屿国有林场杉木人工林为研究对象,在立地条件相似、林分密度分别为1 300-1 500和2 200-2 400株.hm-2的杉木人工林中设置样地,选取样木进行分层取样测定不同器官生物量,分析林分密度与生物量的关系。结果表明,林分总生物量随密度的增大而增大,高密度林分总的生物量为251.33 t.hm-2,高于低密度林分的生物量,其中树干的生物量最大,为154.46 t.hm-2,占总量的61.87%,超过低密度林分的26%;其次是根的生物量,为57.52t.hm-2,占总量的22.85%,超过低密度林分的22%;枝的生物量最低,为19.80 t.hm-2,仅占总量的7.62%;而叶的生物量最低,为19.55 t.hm-2,仅占总量的7.66%,高于低密度林分的38%,林分各组分生物量的大小顺序为干>根>枝>叶。 展开更多

关键词 杉木人工林 生物量 林分密度

下载PDF 职称材料

福建东南沿海滨海沙地4年生相思类树种生物量分配格局及树种选择 被引量：5

10

作者 李周坤 《福建林业科技》 北大核心 2012年第3期15-18,62,共5页

对福建省长乐市大鹤国有林场的4年生大叶相思、肯氏相思、纹荚相思、厚荚相思、卷荚相思的各构件生物量分配率进行研究,结果表明:厚荚相思的总生物量最大,而卷荚相思的总生物量低于其他相思树种。5个相思树种各构件生物量分配率:肯氏相... 对福建省长乐市大鹤国有林场的4年生大叶相思、肯氏相思、纹荚相思、厚荚相思、卷荚相思的各构件生物量分配率进行研究,结果表明:厚荚相思的总生物量最大,而卷荚相思的总生物量低于其他相思树种。5个相思树种各构件生物量分配率:肯氏相思、纹荚相思和卷荚相思的根部分配率较高,其中纹荚相思的根系生物量分配率最高,达46.69%,其次为肯氏相思,达44.59%;而大叶相思和厚荚相思的枝叶鲜重和生物量分配率较高,其中厚荚相思枝叶生物量最高,达76.71%,大叶相思达75.05%。从构件生物量的角度来看,肯氏相思和纹荚相思更适宜作为滨海沙地造林树种。 展开更多

关键词 相思树种 生物量 分配率 沿海防护林

下载PDF 职称材料

论福州市保护森林资源改善生态环境的策略 被引量：2

11

作者 李周坤 《林业勘察设计》 2007年第1期171-174,共4页

针对福州市森林资源保护与环境建设的关系,提出全面推进核心工程、坚持不懈抓好环绿工程、认真实施海防林工程、扎实抓好“三防”工程、建立完善生物多样性工程、大力发展速丰林工程等发展思路。

关键词 森林资源 生态环境 重点工程 福州市

下载PDF 职称材料

公司劳动合同用工的合法转化形式

12

作者 孙健民 李周坤 《通信企业管理》 北大核心 2004年第10期60-61,共2页

上市公司的用工问题是影响公司、股东、员工、社会多方利益的大问题。如何采取措施减员或不增员而增效,又不影响公司的实际用工需求,是值得探讨的问题。

关键词 电信公司 上市公司 劳动合同用工 用工转化形式 劳务派遣公司

下载PDF 职称材料

甘肃省积极老龄化现况及影响因素分析 被引量：1

13

作者 周永兵 张选弟 +8 位作者 李苗博 吴松霖 李周坤 戚玉佩 卫宁 曾艳玲 蒋娜 张珂 裴泓波 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期180-185,共6页

目的分析甘肃省老年人积极老龄化现状及影响因素,为推进欠发达地区积极老龄化提供依据。方法依据世界卫生组织定义的积极老龄化“健康、参与、保障”测量框架自行设计定量问卷,本研究于2021年12月—2022年9月多阶段分层随机抽取甘肃省... 目的分析甘肃省老年人积极老龄化现状及影响因素,为推进欠发达地区积极老龄化提供依据。方法依据世界卫生组织定义的积极老龄化“健康、参与、保障”测量框架自行设计定量问卷,本研究于2021年12月—2022年9月多阶段分层随机抽取甘肃省东、中、西部60~80岁老年人进行面对面问卷调查,测评积极老龄化现状并分析个体因素与社会因素对积极老龄化的交互影响。结果2458例调查对象在积极老龄化“健康、参与、保障”三个维度的百分制得分分别为(79.12±11.19)分、(63.43±16.23)分、(71.82±12.52)分。甘肃省东部区域老年人积极老龄化总得分(77.49±7.61)分,高于中部区域(69.44±10.51)分和西部区域(71.22±10.76)分,差异有统计学意义(F=155.320,P<0.001)。个体因素性别、既往职业、婚姻、居住状态分别与社会因素所在区域对积极老龄化影响有交互效应;个体因素中年龄60~<70岁(OR=0.53,95%CI:0.36~0.77)、收入>2000元(OR=1.93,95%CI:1.34~2.78)是积极老龄化的独立保护因素。结论甘肃省老年人积极老龄化的构成维度中,“健康”和“保障”水平高于“参与”水平,甘肃省内不同区域间积极老龄化发展不平衡,影响因素作用复杂。 展开更多

关键词 积极老龄化 交互作用 现况调查 欠发达地区

原文传递

一株聚酯型聚氨酯降解菌高地芽孢杆菌YX8-1的分离及鉴定 被引量：2

14

作者 曾彩婷 纪俊宾 +4 位作者 丁方慧 李周坤 曹慧 崔中利 闫新 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1976-1986,共11页

聚氨酯(polyurethane,PUR)塑料在日常生活中发挥着重要作用,但同时PUR废弃物也带来严重的环境污染问题。生物(酶)降解是一种环境友好、成本低廉的PUR废弃物回收方法,其关键在于获得高效的降解菌株或酶。本研究从垃圾填埋场的聚氨酯废弃... 聚氨酯(polyurethane,PUR)塑料在日常生活中发挥着重要作用,但同时PUR废弃物也带来严重的环境污染问题。生物(酶)降解是一种环境友好、成本低廉的PUR废弃物回收方法,其关键在于获得高效的降解菌株或酶。本研究从垃圾填埋场的聚氨酯废弃物表面分离出了一株聚酯型PUR降解菌株YX8-1。基于菌落和显微形态观察、16S rDNA和DNA旋转酶(DNA gyrase)基因gyrA系统发育分析及基因组序列比对,将该菌鉴定为高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)。高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)及液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)结果显示菌株YX8-1能降解自行合成的聚酯型PUR寡聚物(PBA-PU),并产生单体化合物4,4′-亚甲基二苯胺。此外,菌株YX8-1能在30 d内使商品化的聚酯型PUR海绵失重32%。本研究为PUR废弃物的生物降解提供了菌株资源,也为挖掘相关降解酶打下了基础。 展开更多

关键词 聚氨酯塑料 生物降解 塑料废弃物回收 高地芽孢杆菌

原文传递

聚氨酯塑料降解菌G-11的筛选鉴定及其塑料降解特性 被引量：1

15

作者 江志通 陈雪 +9 位作者 雷金晖 薛慧珍 张博 徐晓凡 耿惠京 李周坤 闫新 董维亮 曹慧 崔中利 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1963-1975,共13页

聚氨酯(polyurethane,PUR)塑料因其特殊的理化性质而被广泛应用。然而,大量废弃PUR塑料的不合理处置造成了严重的资源浪费和环境污染。利用微生物的手段实现废弃PUR塑料的高效降解和循环利用成为目前的研究热点之一,而高效降解菌是PUR... 聚氨酯(polyurethane,PUR)塑料因其特殊的理化性质而被广泛应用。然而,大量废弃PUR塑料的不合理处置造成了严重的资源浪费和环境污染。利用微生物的手段实现废弃PUR塑料的高效降解和循环利用成为目前的研究热点之一,而高效降解菌是PUR塑料生物法处理的关键。本研究以垃圾填埋场PUR类废塑料样品为来源,分离到一株能够降解PUR类似物Impranil DLN的微生物,并对其PUR降解特性开展了研究。通过16S rRNA基因序列比对将该菌初步鉴定为拟无枝杆菌属(Amycolatopsis sp.),命名为G-11。PUR塑料降解实验结果表明,菌株G-11对商业化PUR塑料的减重率达到4.67%,扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)发现塑料结构被破坏,表面出现侵蚀。接触角分析和热重分析(thermogravimetric analysis,TGA)结果发现,菌株G-11处理后的PUR塑料的亲水性增强,热稳定性下降,该结果与减重和扫描电镜结果相一致。结果表明,分离自垃圾填埋场的菌株G-11在废弃PUR类塑料生物降解方面具有一定的应用潜力。 展开更多

关键词 聚氨酯 塑料污染 生物降解 拟无枝杆菌

原文传递

定点突变对酰胺水解酶DamH可溶性表达和酶活的影响 被引量：4

16

作者 王飞 李周坤 +1 位作者 周杰 崔中利 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1584-1592,共9页

【目的】Dam H是一种具有酯酶活性的酰胺水解酶,其非活性中心氨基酸残基的突变对重组酶可溶性表达和比酶活产生一定的影响。拟探索Dam H的活性中心氨基酸残基构成,并对其非活性中心氨基酸残基突变对可溶性表达和比酶活的影响进行研究。... 【目的】Dam H是一种具有酯酶活性的酰胺水解酶,其非活性中心氨基酸残基的突变对重组酶可溶性表达和比酶活产生一定的影响。拟探索Dam H的活性中心氨基酸残基构成,并对其非活性中心氨基酸残基突变对可溶性表达和比酶活的影响进行研究。【方法】通过重叠延伸的方法对Dam H可能的活性中心氨基酸S149、E244和H274以及非活性中心氨基酸D165及N192进行定点突变,通过静息细胞测活验证了S149、E244和H274在催化2-氯-N-(2’-甲基-6’-乙基苯基)乙酰胺(CMEPA)水解反应中的作用,通过Ni2+-NTA亲和层析对D165及N192突变子进行纯化,对突变株和野生型比酶活进行比较。【结果】研究表明S149A使Dam H的CMEPA水解酶活性下降为野生型的5%,E244A和H274A突变导致其失去活性;D165P和N192P突变影响到Dam H的可溶性表达,表达量分别为野生型的28.2%和20.8%,突变子N192P、D165P比酶活分别为野生型比酶活的55.5%和49.7%。【结论】Dam H催化酯类底物和芳基酰胺类底物可能共用同一活性中心S149、E244和H274,其两个α螺旋的转角处氨基酸侧链极性和刚性结构的改变对可溶性表达以及活性有很大的影响。 展开更多

关键词 DamH 定点突变 催化三联体 可溶性表达 比酶活

原文传递

粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其培养发酵液的安全性评估 被引量：3

17

作者 乔燕 夏丞垚 +6 位作者 李永凯 李周坤 叶现丰 罗雪 黄彦 曹慧 崔中利 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期227-241,共15页

【目的】研究粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其细胞培养发酵液的毒理安全性,为菌株EGB作为新型生防微生物菌剂的开发和环境施用安全性提供一定的科学基础。【方法】通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠睾丸染色体... 【目的】研究粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其细胞培养发酵液的毒理安全性,为菌株EGB作为新型生防微生物菌剂的开发和环境施用安全性提供一定的科学基础。【方法】通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验测定粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液的遗传毒性;通过经口灌胃的方式测定粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液对ICR小鼠的急性毒性和28 d亚急性毒性。【结果】Ames试验、微核试验和精母细胞染色体畸变试验结果表明,与对照组相比,EGB菌体及其细胞培养发酵液无基因突变能力,对ICR小鼠无明显的遗传毒性。EGB菌体及其细胞培养发酵液对ICR小鼠的急性经口半致死剂量(LD50)>10 g/kg BW(body weight);连续灌胃28 d后,处理组ICR小鼠的体重变化、采食饮水、血液生化指标、血常规、主要脏器指数和主要器官病理切片与对照组相比无显著差异(P<0.05)。【结论】粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液的毒理安全性属于无毒类别,粘细菌的生物安全性使其在工农业领域的植物病害控制和生物转化等方面具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 粘细菌EGB 发酵液 安全评估 遗传毒理 亚长期毒理

原文传递